地黃加工過程中梓醇含量穩(wěn)定性分析

邢立志　暴春艷

（黑龍江省格潤(rùn)藥業(yè)有限責(zé)任公司,黑龍江,伊春,153100）

【摘要】 目的：研究地黃加工過程中不同溫度對(duì)梓醇含量的影響。方法：采用高效液相對(duì)地黃加工過程中不同溫度，不同時(shí)間梓醇含量進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：干燥40h后，60℃組地黃中梓醇含量高于其他組。結(jié)論：在地黃加工過程中，60℃干燥有利于梓醇含量的維持。

【關(guān)鍵詞】 地黃；梓醇；HPLC

【中圖分類號(hào)】 R285.5【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A【文章編號(hào)】 1005-1074(2009)04-0004-01

地黃為玄參科植物地黃Rehmannia glutinosaLibosch.的塊根，地黃所含有效成分之一梓醇，具有降血糖、利尿及緩和瀉下等活性^[1]。本文應(yīng)用HPLC法對(duì)地黃炮制過程中梓醇含量的穩(wěn)定性與溫度的關(guān)系進(jìn)行了分析，報(bào)告如下。

1 儀器與試藥

1.1 藥材與試劑 地黃購自安徽亳州本草國藥飲片廠，經(jīng)鑒定為玄參科植物地黃R. glutinosaLibosch.的塊根；梓醇對(duì)照品(供含量測(cè)定用，中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110808-200508)；磷酸，乙腈(色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心)；其余試劑為分析純。

1.2 儀器 島津SPD—20A高效液相色譜，SPD-20A紫外-可見光檢測(cè)器；色譜柱VP-ODS,粒子徑5um,色譜柱尺寸4.6mm×150mm;流動(dòng)相：乙睛-0.1%磷酸(1：99)；流速lml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)210nm，柱溫23℃。理論塔板數(shù)按梓醇峰計(jì)為9000。

2 方法

2.1 供試品制備各取鮮地黃約1.5kg，分別置于電熱鼓風(fēng)箱中，溫度分別為60℃、70℃、80℃、90℃四組，在不同時(shí)間點(diǎn)切取每塊地黃上的一部分作為待測(cè)樣品。各組樣品研成粗粉，各取5份，約0.4g/份，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，加熱回流1.5h，放冷，再稱定重量.用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過^[2]。精密量取續(xù)濾液10ml，濃縮至近干，殘?jiān)昧鲃?dòng)相溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，并用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，過0.22μm濾膜，取續(xù)濾液作為供試品溶液，15μl進(jìn)樣，HPLC測(cè)定^[3]。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密稱量梓醇對(duì)照品5.0mg，置于25ml容量瓶中，用流動(dòng)相定容至刻度，搖勻。精密吸取0.5、1.0、2.0、2.5、5.0ml分別置于25ml容量瓶中，用流動(dòng)相定容至刻度，搖勻，制得濃度分別為4、8、16、20、40μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別吸取5μl進(jìn)樣，濃度與峰面積回歸方程為：Y=8365X-1010，r=0.9998。

2.3 精密度實(shí)驗(yàn) 取4、16、40μg/ml三個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，分別重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)峰面積，計(jì)算RSD分別為1.17%、1.08%、1.11%。結(jié)果表明精密度高，測(cè)定可靠。

2.4 回收率實(shí)驗(yàn) 在已知含量的樣品中加入梓醇對(duì)照品，按供試液制備方法處理。重復(fù)5次進(jìn)樣測(cè)定，平均回收率為99%。

2.5 統(tǒng)計(jì)方法計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

經(jīng)過在鼓風(fēng)干燥箱中40小時(shí)后，各組地黃的梓醇含量均較干燥前顯著下降，同時(shí)60℃組梓醇含量顯著高于其他溫度組（P<0.01）；各組梓醇含量隨時(shí)間延長(zhǎng)都呈下降趨勢(shì)，且于10h后除60℃組外，其余各組含量與加工前相比均有顯著性差異(見表1,P<0.01)。結(jié)果顯示：地黃于60℃干燥10～20小時(shí)，對(duì)梓醇含量影響較小。

4 討論

地黃經(jīng)過加工炮制，隨著有效成分的改變其性味也發(fā)生改變，可作為不同的藥材入藥^[4]。梓醇屬環(huán)烯醚菇葡萄糖苷類，有良好的藥理活性，是地黃的有效成分之一，為2005版《中國藥典》規(guī)定的生地黃的質(zhì)量控制指標(biāo)。本文對(duì)鮮地黃焙干過程中梓醇含量的變化進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示于60度烘焙10～20小時(shí)，對(duì)地黃中的梓醇含量影響較小。有研究顯示，地黃中含有β-葡萄糖苷酶，是加工過程中影響梓醇含量的重要原因^[5]。由本研究的結(jié)果分析，可能是溫度的升高導(dǎo)致了地黃中細(xì)胞核核膜和液泡膜的破裂從而使β-葡萄糖苷酶和梓醇相遇引起梓醇降解。

參考文獻(xiàn)

[1] 林啟壽.中草藥成分化學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,1977:602

[2] 杜紅光.地黃不同炮制品中梓醇的含量測(cè)定研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2004,15(9):582-583.

[3] 李計(jì)萍,馬 華,王躍生,等.鮮地黃與干地黃中梓醇、糖類成分含量的比較[J].中國藥學(xué)雜志,2001,36(5):300-302

[4] 邊寶林,楊 健,王宏潔,等.不同干燥條件對(duì)鮮地黃中梓醇含量的影響[J].中國中藥雜志,1996,21(6):346-347.

[5] 劉長(zhǎng)河,張留記,李更生,等.不同產(chǎn)地的地黃中梓醇含量比較[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2002,22(5):259-260.

(收稿日期：2009.01.15)