王彩霞 邵棟梁
摘要隨著國內(nèi)外對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題和無公害食品的日益重視,農(nóng)產(chǎn)品快速檢測技術(shù)的研究已經(jīng)成為當前中國生物技術(shù)研究領(lǐng)域的的一大熱點。介紹了膠體金快速檢測在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測領(lǐng)域應(yīng)用和技術(shù)特點。
關(guān)鍵詞農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全;膠體金;快速診斷
中圖分類號TS201.6文獻標識碼B文章編號 1007-5739(2009)19-0338-01
膠體金快速診斷試劑是近年來的生物產(chǎn)業(yè)化最成功的產(chǎn)品之一,近年來,隨著國內(nèi)外對食品安全問題和無公害食品的日益重視,食品的快速檢測技術(shù)的研究已經(jīng)成為當前中國生物技術(shù)研究領(lǐng)域的的一大熱點??焖倌z測需求廣泛,可以應(yīng)用于臨床醫(yī)用、食品安全、動植物疾病和環(huán)境污染等諸多領(lǐng)域。目前,有禽流感、家畜疫病、農(nóng)藥殘留、食品藥物殘留等多個方向,市場也比較空白,因此發(fā)展前景非常好。
1農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全快速檢測
目前,“食品安全關(guān)鍵技術(shù)”課題專項已列入我國“十五”國家重大科技項目,“農(nóng)藥、獸藥殘留檢測技術(shù)”作為其關(guān)鍵課題之一,以提高食品質(zhì)量水平,保障人民身體健康,提高我國農(nóng)業(yè)和食品工業(yè)的市場競爭力及我國食品安全科技工作在國際上的影響力。其中氯霉素等農(nóng)獸藥殘留快速檢測方法、試劑盒及相關(guān)設(shè)備已作為其重要研究內(nèi)容,受到廣泛關(guān)注。目前免疫膠體金快速檢測已經(jīng)占據(jù)整個檢測市場20%,預(yù)計在2010年將達到40%~50%。
快速檢測,顧名思義是在短時間內(nèi)提供結(jié)果,準確的說是在幾分鐘內(nèi)。這種檢測法是一種廉價的、一次性的基于膜的檢測方法,它能提供分析物存在于液體樣品的視覺證據(jù),這種檢測可以是獨立的試紙條,也可以以裝在塑料盒中的形式進行??偟膩碚f,做此項檢測至少需要200μL的液體標本,可在5~10min內(nèi)完成。在臨床檢測中,樣品可能有尿、血液、血清、唾液或其他體液。在非臨床檢測中,樣本可能是由土壤、粉塵、植物或者食品制備的微量溶液。
2膠體金快速診斷技術(shù)特點
目前,隨著現(xiàn)代單克隆抗體技術(shù)、膠體金免疫層析技術(shù)和新材料技術(shù)的發(fā)展,新興了一種新型檢測技術(shù)——膠體金免疫層析法(Colloidal Gold Immunochromatographic Strip Assay,GICA),該方法具有操作簡單、特異性強、不需要添加額外設(shè)備、快速(5~10min即可得到檢測結(jié)果)等特點,其反應(yīng)所需要的原料的全部或大部分均已整合到試劑中,當待測樣品(尿液、血清或組織樣處理液)加入到樣品膜上后,由于微孔濾膜的毛細管作用,使抗原抗體反應(yīng)在固相膜上快速進行,反應(yīng)通常只需數(shù)分鐘,測試結(jié)果以肉眼可見的顯色條帶來判斷。其顯色反應(yīng)是由于所標記的有顏色的顆粒在反應(yīng)區(qū)域聚集而形成的。目前在臨床診斷中得到了廣泛應(yīng)用,如傳染病、早孕、癌癥等檢測。近年來,膠體金檢測技術(shù)已開始應(yīng)用于小分子物質(zhì)的檢測,如毒素、藥殘留、環(huán)境監(jiān)測等非臨床檢測領(lǐng)域,目前國外已經(jīng)開發(fā)出用于鏈霉素、磺胺嘧啶等獸藥殘留檢測的試劑條。
膠體金快速檢測試劑采用了免疫膠體金技術(shù),將特異性抗原結(jié)合物和抗體分別固定于硝酸纖維膜上,并與膠體金標記的抗單克隆抗體及其他試劑組裝成膠體金快速檢測試劑板,應(yīng)用層析式免疫競爭原理,特異性檢測牛奶、水產(chǎn)品、動物性肌肉組織等樣品中的農(nóng)獸藥殘留。根據(jù)靈敏度的質(zhì)量要求,基層檢測單位、水產(chǎn)和禽畜養(yǎng)殖企業(yè)及牛奶、蜂制品加工企業(yè)大規(guī)模樣本篩選的實際情況,將試劑盒的靈敏度定為1~5ng/g(ng/mL),作為樣品定性或半定量檢測之用。
3膠體金快速檢測試劑特點
相比目前其他檢測試劑,包括:ELISA檢測試劑盒、乳膠凝集法、放免法(RIA)、HPLC、質(zhì)譜法等,膠體金快速檢測試劑具有以下優(yōu)點。一是價格低。產(chǎn)品生產(chǎn)流程簡單,生產(chǎn)成本低。二是質(zhì)量高。膠體金方法制備而成的試劑特異性強、靈敏度高、重復(fù)性好。三是靈活可靠。大量多樣化的測試片或試劑盒檢測的產(chǎn)生,適用的環(huán)境范圍較寬松,其能提供變異系數(shù)在5%或更小范圍的可靠結(jié)果。四是操作簡便。膠體金方法制備而成的試劑以膠體金作為指示標記,定性結(jié)果準確、快速,操作簡便,可分批或單個樣品及時檢測。五是易于推廣使用。試劑易保存,操作人員無需專業(yè)培訓(xùn),不需要配備專門的儀器設(shè)備,按說明書即可完成操作。
4結(jié)語
總之,由于精良的膠體金試劑有更大的敏感性和特異性的需求,對膠體金的生產(chǎn)和使用嚴格的操作才可能取得成功,在大量快速檢測設(shè)計中對更高敏感性、可靠性及重現(xiàn)性要求的增加使得膠體金作為農(nóng)副產(chǎn)品中農(nóng)藥、獸藥殘留量的檢測首選。
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