王榕生
【摘要】 目的 探討血漿D-二聚體定量檢測在肺栓塞診斷的應用價值。 方法 回顧性分析78例經(jīng)臨床確診為肺栓塞患者D二聚體檢測結果,其中40例采用CA1500全自動血凝儀免疫比濁法定量檢測,38例采用半定量膠乳凝集法定性檢測,結合相關文獻報道對其進行評價。結果 采用半定量膠乳凝集法敏感性為57.9%,使用全自動血凝儀檢測敏感性為100%,兩種方法敏感性有顯著性差異。結論 采用CA1500全自動血凝儀對血漿D-二聚體定量檢測敏感性較高,可作為急性肺栓塞排除診斷的首先篩選試驗,更適合于急診檢測,值得推廣使用。
【關鍵詞】肺栓塞;D-二聚體; 免疫比濁法; 敏感性
肺栓塞(PE)是內(nèi)源性或外源性栓子堵塞肺動脈引起肺循環(huán)障礙的臨床和病理生理綜合征。其發(fā)病率及誤診率均較高。早期診斷是臨床醫(yī)生極為關注的問題,血漿D-二聚體是特異性交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物,其水平增高反映凝血酶增多或繼發(fā)性纖溶活性增強,是血管內(nèi)纖溶的最常用血清學標記物,采用測定D-二聚體作為肺動脈血栓栓塞的第一步篩查手段目前已得到國際公認。本研究旨在評價不同方法對D-二聚體檢測的敏感性,探討其在肺栓塞診斷的地位和作用,為肺栓塞診斷提供更為方便快捷、準確可靠的指標。
1 資料與方法
1.1 材料
1.1.1 對象 2004年10月至2008年5月揭陽市人民醫(yī)院收治有完整病史資料的肺栓塞患者78例,男48例,女30例;年齡25~85歲,病例均經(jīng)心電圖,動脈血氣分析,X線胸片,增強CT掃描結合臨床病史、癥狀及體征確診的住院患者。
1.1.2 儀器 日本SysmexCA1500全自動凝血儀。
1.1.3 試劑 儀器法試劑為原裝配套試劑,校正物、質(zhì)控物均為德國DADE公司提供。膠乳凝集法試劑為太陽公司產(chǎn)品。
1.2 方法
1.2.1 原理 D-二聚體定量檢測(儀器法)原理 每個乳膠微粒直徑(0.1±0.02)μm吸附2個D-二聚體特異性抗體,此顆粒的直徑小于檢測光束波長(540 nm),因而當光束穿過乳膠顆粒懸液時僅有微量的光波被吸收。溶液中的待測抗原(D-二聚體)與乳膠顆粒吸附抗體結合形成聚合體,此聚合體的直徑遠大于入射光波長,因而入射光被吸收的量大大增加,增加的吸光度可反映待測抗原在受檢樣品中的含量。手工半定量法原理:普通乳膠顆粒吸附D-二聚體特異性抗體,與血漿中D-二聚體結合后形成肉眼可見的凝集塊時判定為陽性結果(0.5 μg/ml),將標本倍比稀釋,結果為陽性的最大稀釋度乘以0.5即為檢測結果。
1.2.2 標本采集 于應用抗凝及溶栓藥物治療前采集患者枸椽酸鈉抗凝靜脈血,2500 r/min離心10 min,采血后2 h內(nèi)完成檢測。
1.2.3 統(tǒng)計學方法 統(tǒng)計學分析應用SPSS 10.0統(tǒng)計分析軟件以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2 結果
40例肺栓塞患者在全自動血凝儀檢測結果全部>500 U/L,敏感性100%,另外38例采用半定量膠乳凝集法檢測結果有22例為陽性, 敏感性57.9%,兩種方法差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
3 討論
D-二聚體是凝血酶及因子Ⅻ作用的交聯(lián)纖維蛋白經(jīng)纖溶酶降解作用后的終末產(chǎn)物,血漿中D-二聚體含量增高表明體內(nèi)有血栓形成及溶解發(fā)生,可以作為無創(chuàng)傷性的體內(nèi)血栓形成的指標[1]。臨床上,急性DIC、肺栓死,腦梗死、急性心肌梗死、肝硬化、腫瘤、急性非淋巴細胞白血病、敗血癥等疾病均可有血漿D-二聚體水平的變化,D-二聚體作為體內(nèi)血栓前狀態(tài)及血栓形成的指標之一,在臨床得到廣泛應用。
診斷肺栓塞的金標準是肺動脈造影[2],由于其檢查有一定危險性,在使用中受到一定限制,增強CT掃描、MR在診斷肺栓塞有很好價值,但需要有大型設備的醫(yī)療條件,相關文獻報道D-二聚體對急性肺血栓栓塞的陰性預測價值接近100%[3],也就是D-二聚體不高可以排除急性肺血栓。由于有檢查方便與非創(chuàng)傷性的優(yōu)點,在國內(nèi)外倍受關注。特別是近年來檢驗方法靈敏度的提高,血漿D-二聚體定量檢測被廣泛應用。
檢測D-二聚體的方法建立于1983年,采用免疫學原理檢測抗原的含量[3],檢測法有乳膠凝集法、酶聯(lián)免疫法、免疫比濁法等。半定量的乳膠凝集試驗方法敏感性較差,受人為主觀性影響大,本實驗結果顯示敏感性只有57.9%,已不能滿足臨床發(fā)展需要。酶聯(lián)免疫方法靈敏度較高,在肺栓塞中的診斷價值已得到肯定,國內(nèi)胡云建等報道用全自動免疫分析系統(tǒng)進行酶聯(lián)免疫定量檢測D-二聚體(VIDAS-DD法),以494 ng/ml為陽性界值,其對肺栓塞的敏感性和陰性預測值均為100%[3];普通ELISA方法由于檢測時間較長,不適合于急診檢驗,應用于VIDAS的DD法需特定的進口全自動免疫儀器,儀器昂貴難普及。本研究采用CA1500全自動血凝儀免疫比濁法定量檢測D-二聚體,其敏感性為100%,與VIDAS-DD法相同。與半定量的乳膠凝集法敏感性57.9%比較有顯著性差異,敏感性有大幅度提高,而且檢測時間短,尤其適合于急診檢測,值得推廣使用。
參考文獻
[1] 董懷平,李慶敏.D-二聚體的研究進展.國際檢驗醫(yī)學雜志,2006,27(12):1134-1135.
[2] 白明,張斗霞. 肺栓塞的診斷進展.臨床內(nèi)科雜志,2004,21(7):433-434.
[3] 胡云建,陶鳳榮,王厚東,等. D-二聚體測定在肺栓塞診斷中的應用價值.中華檢驗醫(yī)學雜志, 2002,25(2): 95-97.