西雙版納產(chǎn)兒茶藥材兒茶素含量的測定

　　摘　要：目的：測定云南西雙版納產(chǎn)兒茶藥材中兒茶素的含量。方法：采用反相高效液相色譜法，以兒茶素為對(duì)照品。結(jié)果：按選定的色譜條件，兒茶素在0．6125～9．8μg范圍內(nèi)線性良好，加樣回收率為99．6％，RSD為1．8％(n＝5)；兒茶樣品檢測含量在14．95～15．84％范圍內(nèi)。結(jié)論：云南西雙版納產(chǎn)兒茶藥材兒茶素含量在15．37％左右，有很高的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
　　關(guān)鍵詞：兒茶素；反相高效液相色譜法；西雙版納
　　中圖分類號(hào)：R927．2　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
　　文章編號(hào)：1007—2349(2007)02—0037－02
　　兒茶以豆科植物兒茶樹Acacia catechu(L)Willd去皮后的心材煎汁濃縮而成的干燥浸膏入藥。兒茶為云南特產(chǎn)的“南藥”，是我國民族藥中最早收載《中國藥典》的正品中藥之一。也是我國歷史上有記載的進(jìn)口“南藥”品種之一?！吨袊幍洹?sup>[1]收載兒茶的功能是收濕生肌斂瘡。主治潰瘍不斂，濕疹，口瘡，跌打傷痛，外傷出血。兒茶素類化合物具有明顯的清除體內(nèi)自由基、阻斷N－亞硝基化合物形成、抑制脂氧化酶活性和脂質(zhì)過氧化物作用，并有防突變、防癌等藥理活性。
　　兒茶在國外主產(chǎn)于印度、印尼及緬甸；國內(nèi)主產(chǎn)于云南西雙版納，廣西有少量栽培。兒茶主要含有兒茶鞣酸(Catechutannic acid)20％～50％，兒茶素(d－catechin)2％～20％，表兒茶素(epicatechin)，兒茶紅(Catechred)，槲皮素，樹膠等^[2]。西雙版納傣族稱兒茶為“西謝”(傣語)，有悠久的栽種歷史。為了更好地開發(fā)利用，筆者用反相高效液相色譜法^[3～5]，按選定的色譜條件，對(duì)云南西雙版納產(chǎn)區(qū)兒茶藥材6批市售來源的兒茶膏以及自制的兒茶膏進(jìn)行了兒茶素含量測定。
　　
　　1儀器與試藥
　　
　　島津LC－20AT(二元泵，無柱溫箱，溫度主要靠空調(diào)調(diào)節(jié))；電子分析天平FA2004200g／0．1mg(上海衡平儀器廠)；對(duì)照品(+)－CATECHIN98％(SIGMA)；乙腈(HPLC級(jí)，美國天地)；甲醇(HPLC級(jí)，美國天地)；磷酸(分析純，國產(chǎn))；0．45um微孔過濾膜。自制兒茶樣品于2005年12月18日采自云南省西雙版納州景洪市景哈哈尼族鄉(xiāng)的兒茶樹熬制而成，經(jīng)本所彭朝忠主管技師鑒定為豆科植物兒茶樹Acaciacatechu(L．)Willd。6批市售兒茶購于西雙版納。
　　
　　2方法與結(jié)果
　　
　　2．1色譜條件　色譜柱：Phenomenex Luna 5uC一18，250mm 4．6ram；流動(dòng)相：A：0．1％HPO，B：CAN(85：15)；檢測波長：275nm；流速：1．0ml／min；進(jìn)樣量：20ul，梯度洗脫，時(shí)間24min。理論板數(shù)按兒茶素峰計(jì)算大于4000。
　　2．2兒茶膏的提取　兒茶樹砍伐后，除去邊材，將心材截成段，削切為長約10cm，厚1cm的薄片，放入鋁鍋(忌用鐵鍋)，加8倍量的水煎熬7h，當(dāng)液體由棕紅色變成紫黑色時(shí)，用紗布過濾，過濾液濃縮至稀薄漿狀時(shí)，改用文火蒸干，以免碳化。浸膏用竹片攪拌，挑起能拉絲時(shí)?；?，取出晾干即成兒茶膏。
　　2．3供試品制備　精密稱取兒茶膏樣品粉末80mg，置于100ml容量瓶內(nèi)，加50％甲醇約80ml，超聲20min，放冷至室溫，加50％甲醇至刻度，搖勻即成濃度為800ppm的供試品。取1．5～2．0ml供試品置離心試管內(nèi)，于12，000轉(zhuǎn)／分鐘轉(zhuǎn)速下離心10min，取上清液進(jìn)樣檢測。
　　2．4標(biāo)準(zhǔn)曲線制作　(1)精密稱取catechin標(biāo)準(zhǔn)品25mg放入50ml容量瓶，加50％甲醇約40ml，超聲至全溶。放冷至室溫，加50％甲醇至刻度，充分震蕩搖勻；(2)倍比稀釋，可得一系列對(duì)照品溶液：500ppm、250ppm、125ppm、62．5ppm、31．25ppm分別進(jìn)樣檢測，以濃度為X軸，以標(biāo)準(zhǔn)樣出峰面積積分值為Y軸作圖，得一直線。結(jié)果表明：兒茶素在O．6126～9．8μg范圍內(nèi)線性良好，回歸線方程為Y＝14097X+38106，
　　R²＝0．9999。取同一濃度的樣品反復(fù)進(jìn)樣檢測，兒茶素峰面積積分值的RSD為2．1％；檢測的重現(xiàn)性兒茶素保留時(shí)間和含量的RSD分別為3．5％、0．9％。對(duì)照品與樣品色譜圖見圖1。
　　2．5樣品含量檢測　按選定的檢測方法，對(duì)采集來的云南西雙版納產(chǎn)區(qū)6批市售來源的兒茶藥材兒茶膏以及自制的兒茶膏進(jìn)行了兒茶素含量測定，其檢測結(jié)果見圖2，表1。
　　
　　注：圖譜1B與自制3號(hào)樣品對(duì)應(yīng)，圖2與市售1號(hào)樣品對(duì)應(yīng)
　　
　　3討論
　　
　　從表1中可以看出，實(shí)驗(yàn)室自制的兒茶膏(高溫干燥)的兒茶素含量只有10．08％，而未經(jīng)高溫干燥的兒茶素含量達(dá)16．74％，兩者含量差異很大，可能是因?yàn)閮翰杷卦诟邷刈饔孟掳l(fā)生了某些變化，因此，在制作兒茶膏時(shí)，要防止高溫使兒茶素含量降低。購買的西雙版納的兒茶樣品兒茶素含量在14．95～15．84％范圍內(nèi)，其兒茶素平均含量在15．37％左右，有很高的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，有待于進(jìn)一步開發(fā)利用。
　　當(dāng)?shù)卮鲎迕耖g在熬制兒茶膏的過程中，一是用鐵鍋煎熬，二是溫度控制不好，容易碳化，含量降低，這些都是由于加工不規(guī)范所造成的，因此要不斷加大對(duì)兒茶藥材的開發(fā)研究，規(guī)范化生產(chǎn)。
　　我國兒茶藥材資源日益減少，建議加強(qiáng)栽培推廣。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，過去我國西雙版納勐臘、景洪兩地的海拔500～600m地區(qū)有大面積人工栽培^[1]。近2年經(jīng)實(shí)地調(diào)查了解到，因其它熱帶經(jīng)濟(jì)作物的開發(fā)而將原來種植的兒茶樹砍伐，西雙版納兒茶樹的種植面積大為減少。
　　兒茶是《中國藥典》中較少收入的提煎膏品種之一，在民間防病治病中應(yīng)用較廣，特別是少數(shù)民族地區(qū)，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出《中國藥典》的范疇，是西雙版納特有的民族藥，在傣藥產(chǎn)業(yè)開發(fā)中，應(yīng)充分利用兒茶資源，加強(qiáng)兒茶產(chǎn)品的開發(fā)研究，以推動(dòng)民族醫(yī)藥的發(fā)展。
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