紅細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測在新生兒B族鏈球菌敗血癥診斷中的應(yīng)用價值

孫婷婷，周厚俊

（昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 1. 兒科 2. 神經(jīng)外二科，云南 昆明 650000）

新生兒的免疫系統(tǒng)發(fā)育尚不成熟，免疫力低下，因此易罹患感染性疾病。新生兒敗血癥是一種嚴(yán)重的新生兒感染性疾病。B 族鏈球菌（GBS）是引起新生兒敗血癥的常見菌種。GBS多寄生于孕婦的生殖道和胃腸道內(nèi)，新生兒GBS感染的傳播途徑多為母嬰傳播[1]。相關(guān)的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，我國妊娠期女性GBS 的攜帶率為10.1% ～32.4%，新生兒GBS 敗血癥的發(fā)病率為1.6% ～2.1%，GBS 具有高定植率和低發(fā)病率的特點(diǎn)[2]。新生兒GBS 敗血癥的發(fā)生可導(dǎo)致患兒出現(xiàn)一系列的癥狀，包括休克、肝脾腫大、黃疸、出血等，嚴(yán)重時可致其死亡。因此，對新生兒GBS 敗血癥患兒的病情進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷和及時的治療至關(guān)重要。血培養(yǎng)是臨床上診斷新生兒GBS敗血癥的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但進(jìn)行血培養(yǎng)通常需要2 ～3d的時間，不利于對患兒的病情進(jìn)行早期診斷和治療。研究表明，新生兒GBS 敗血癥患兒病情的嚴(yán)重程度與其紅細(xì)胞免疫指標(biāo)的水平存在相關(guān)性[3]。現(xiàn)階段，關(guān)于用紅細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測診斷新生兒GBS 敗血癥的相關(guān)研究較少?；诖耍狙芯繉⒔陙砦以菏罩蔚?0 例新生兒GBS 敗血癥患兒及孕母定植GBS 但未發(fā)生GBS 感染的60 例新生兒作為研究對象，探究紅細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測在新生兒GBS 敗血癥診斷中的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年1 月至2021 年6 月我院收治的60 例新生兒GBS 敗血癥患兒及孕母定植GBS 但未發(fā)生GBS 感染的60 例新生兒作為研究對象。將其中60 例新生兒GBS 敗血癥患兒設(shè)為觀察組，將其中60 例孕母定植GBS 但未發(fā)生GBS 感染的新生兒設(shè)為對照組。兩組新生兒的一般資料相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。詳見表1。本研究已通過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn)。

表1 兩組新生兒基線資料的比較

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

研究對象納入標(biāo)準(zhǔn)是：1）觀察組患兒的病情符合《新生兒敗血癥診療方案》[4]中關(guān)于新生兒GBS 敗血癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，對其進(jìn)行釋放抗體試驗(yàn)的結(jié)果呈陽性，其血清總膽紅素的水平＞220.6 μmol/L。2）對照組新生兒的母體定植有GBS，但其出生后未發(fā)生GBS 感染。3）觀察組患兒的心率不低于180 次/min，呼吸頻率不低于50次/min。4）各項(xiàng)臨床診療資料完整、真實(shí)、有效。5）其監(jiān)護(hù)人對本研究知情，并簽署了自愿參與本研究的同意書。研究對象的排除標(biāo)準(zhǔn)是：1）有抗感染治療史。2）存在先天畸形或患有遺傳代謝性疾病。3）其母體存在其他生殖道感染。4）存在嚴(yán)重的先天性器官功能障礙。

1.3 方法

采集所有新生兒的足跟血（均由同一名護(hù)理人員取血，以提高檢測的準(zhǔn)確性）1 μL，用2mL 的生理鹽水對血液標(biāo)本進(jìn)行洗滌，洗滌次數(shù)為2 次。完成紅細(xì)胞計(jì)數(shù)后，將標(biāo)本稀釋至1.25×107/mL。取50 μL 補(bǔ)體致敏Ys酵母菌懸液，將其加入到50 μL 的紅細(xì)胞懸液中，經(jīng)30 min、37℃的水浴后，應(yīng)用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.25% 的戊二醛進(jìn)行固定，固定時間為10min。之后采用瑞氏染色法進(jìn)行鏡檢。陽性細(xì)胞評估標(biāo)準(zhǔn)為：紅細(xì)胞與2 ～3 個以上酵母菌結(jié)合，并計(jì)200 紅細(xì)胞。觀察紅細(xì)胞C3b 補(bǔ)體受體花環(huán)（RBC-C3bR）的水平。紅細(xì)胞免疫復(fù)合物受體花環(huán)（RBC-ICR）的檢測方法同上，但檢測時需取50 μL 的補(bǔ)體未致敏Ys酵母菌懸液，將其加入到50 μL 的紅細(xì)胞懸液中進(jìn)行檢測。應(yīng)用郭峰等[5]報道的免疫粘附法測定患兒免疫黏附促進(jìn)因子（FEER）的水平。

1.4 觀察指標(biāo)

比較兩組新生兒紅細(xì)胞免疫指標(biāo)（包括RBC-ICR、RBC-C3bR、FEER） 的 水 平。 采 用受試者工作特征（ROC） 曲線分析RBC-ICR、FEER、RBC-C3bR 檢 測 在 診 斷 新 生 兒GBS 敗 血癥中的應(yīng)用價值

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 22.0 軟件處理本研究中的數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用±s表示，用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用% 表示，用χ2 檢驗(yàn)；采用ROC 曲線分析紅細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測在診斷新生兒GBS 敗血癥中的價值，P ＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組新生兒紅細(xì)胞免疫指標(biāo)水平的比較

對兩組新生兒進(jìn)行紅細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測的結(jié)果顯示，觀察組患兒RBC-ICR 的水平高于對照組新 生 兒， 其RBC-C3bR、FEER 的 水 平 均 低 于 對照組新生兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。詳見表2。

表2 兩組新生兒紅細(xì)胞免疫指標(biāo)水平的比較（%，± s）

表2 兩組新生兒紅細(xì)胞免疫指標(biāo)水平的比較（%，± s）

組別 RBC-C3bR RBC-ICR FEER觀察組（n=60） 14.41±1.39 5.08±1.67 23.13±4.91對照組（n=60） 15.58±1.50 3.78±1.60 26.44±3.30 t 值 4.432 4.354 4.334 P 值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 用紅細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測診斷新生兒GBS 敗血癥的ROC 曲線

對上述紅細(xì)胞免疫指標(biāo)（RBC-ICR、RBCC3bR、FEER）進(jìn)行ROC 曲線分析的結(jié)果顯示，用RBC-ICR 單獨(dú)檢測診斷新生兒GBS 敗血癥的AUC 為0.726（95%CI：0.635 ～0.817，P ＜0.05），用FEER 單獨(dú)檢測診斷新生兒GBS 敗血癥的AUC為0.775（95%CI ：0.690 ～0.860，P ＜0.05），用RBC-C3bR 單獨(dú)檢測診斷新生兒GBS 敗血癥的AUC 為0.711（95%CI：0.621 ～0.802，P ＜0.05）。用RBC-ICR、RBC-C3bR、FEER 聯(lián) 合 檢 測 診 斷新 生 兒GBS 敗 血 癥 的AUC 為0.891（95%CI ：0.834 ～0.947，P ＜0.05）。詳見圖1、表3。

圖1 用紅細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測診斷新生兒GBS 敗血癥的ROC 曲線

表3 以ROC 曲線分析采用紅細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測診斷新生兒GBS 敗血癥的價值

3 討論

新生兒敗血癥是新生兒時期的一種嚴(yán)重感染性疾病。GBS 感染是誘發(fā)新生兒敗血癥的常見因素之一。此病患兒的早發(fā)癥狀主要是呼吸困難，一些患兒可逐漸發(fā)展成化 膿性腦膜炎，其遲發(fā)癥狀主要為高熱，病情嚴(yán)重者可發(fā)生肺功能障礙，嚴(yán)重威脅其生命安全。因此，早期對此病患兒的病情進(jìn)行診斷和治療至關(guān)重要。血培養(yǎng)是臨床上診斷新生兒GBS 敗血癥的“金標(biāo)準(zhǔn)”。但該方法的檢測周期較長，不利于及早對此病患兒展開治療。研究表明，新生兒GBS 敗血癥患兒體內(nèi)RBC-ICR、RBC-C3bR 等紅細(xì)胞免疫指標(biāo)的水平與無GBS 感染的新生兒存在明顯差異，紅細(xì)胞免疫指標(biāo)的水平與新生兒GBS 敗血癥患兒病情的嚴(yán)重程度存在相關(guān)性[6]。本研究的結(jié)果顯示，觀察組患兒RBC-ICR 的水平高于對照組新生 兒， 其RBC-C3bR、FEER 的 水 平 均 低 于 對 照組新生兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。提示新生兒GBS 敗血癥患兒體內(nèi)的RBC-ICR、RBCC3bR、FEER 等紅細(xì)胞免疫指標(biāo)的水平會發(fā)生顯著變化，上述指標(biāo)可在一定程度上反映此病患兒病情的進(jìn)展情況。本研究的結(jié)果顯示，用RBCICR、RBC-C3bR、FEER 單 獨(dú) 檢 測 診 斷 新 生 兒GBS 敗血癥的AUC 分別為0.726、0.711、0.775，用這三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測診斷新生兒GBS 敗血癥的AUC 為0.891。提示紅細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測在新生兒GBS 敗血癥的診斷中具有較高的應(yīng)用價值。既往的研究表明，新生兒的免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善，較低，但其紅細(xì)胞的免疫功能卻顯著高于成年人，因此新生兒體內(nèi)紅細(xì)胞免疫指標(biāo)的水平可反映其感染性疾病的進(jìn)展情況[7]。崔喜紅等[8]研究顯示，新生兒敗血癥患兒體內(nèi)RBC-C3bR、FEER 的水平下降明顯，而RBC-ICR 與紅細(xì)胞免疫黏附抑制因子（RFIR）的水平則會顯著升高。這與本研究的結(jié)果相仿。究其原因可能是，新生兒在發(fā)生GBS 感染后，GBS 表面有大量的抗原- 補(bǔ)體成分，紅細(xì)胞表面的C3b 受體可將抗原- 補(bǔ)體成分識別并捕獲，并被巨噬細(xì)胞清除，進(jìn)而可使患兒體內(nèi)RBC-C3bR 的水平迅速下降；隨著患兒病情的進(jìn)展，大量的GBS 將紅細(xì)胞表面覆蓋，使機(jī)體RBC-ICR 的水平下降，同時GBS 作為循環(huán)免疫復(fù)合物（CIC）將CR1 位點(diǎn)占據(jù)，使C3b 受體的空位數(shù)目減少，進(jìn)而降低了紅細(xì)胞對CIC 的黏附作用，導(dǎo)致RBC-C3bR 的水平進(jìn)一步降低[9]。

綜上所述，紅細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測在新生兒GBS 敗血癥診斷中的應(yīng)用價值較高，RBC-ICR、FEER、RBC-C3bR 等紅細(xì)胞免疫指標(biāo)可作為臨床上診斷新生兒GBS 敗血癥的重要標(biāo)志物。