響應(yīng)面法優(yōu)化鮮切牛蒡射頻鈍酶工藝研究

摘要：目的：降低鮮切牛蒡的相對酶活。方法：以鮮切牛蒡?yàn)樵牧希M(jìn)行射頻滅酶，研究極板間距、樣品高度和電導(dǎo)率對滅酶效果、色澤和微觀結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果：利用響應(yīng)面分析法確定射頻滅酶的最佳工藝參數(shù)為極板間距90 mm、樣品高度74 mm、電導(dǎo)率0.14 s/m，實(shí)際可降低121.24%相對酶活。結(jié)論：電導(dǎo)率在0.1 s/m左右時，極板間距越低，樣品高度越高，升溫速率越快。樣品經(jīng)過射頻處理有效降低了多酚氧化酶活性，抑制了鮮切牛蒡酶促褐變，優(yōu)化工藝能夠表現(xiàn)出較小的細(xì)胞損傷。

關(guān)鍵詞：射頻；多酚氧化酶；鮮切牛蒡；酶促褐變

中圖分類號：TS255.36""""""文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A"""""文章編號：1000-9973（2025）02-0017-08

Optimization of Radio Frequency Blunt Enzyme Process of Fresh-Cut

Burdock by Response Surface Methodology

ZHU Yong-quan^1，2， HU Xin-di²， TENG Cong²， XU Lu-jing²， LIU Jin-ge²，

WANG Zi-yin²， ZHANG Jian³， LI Ying^2*

（1.School of Ocean Food and Biological Engineering， Jiangsu Ocean University， Lianyungang 222023，

China; 2.Institute of Agro-products Processing， Jiangsu Academy of Agricultural Sciences，

Nanjing 210014， China; 3.White Horse Future Food Research Institute，

Nanjing 211225， China）

Abstract： Objective： To reduce the relative enzyme activity of fresh-cut burdock. Method： Fresh-cut burdock is used as the raw material for radio frequency enzyme inactivation. The effects of electrode spacing， sample height and conductivity on enzyme inactivation effect， color and microstructure are studied. Results： The optimal process parameters of radio frequency enzyme inactivation are determined by response surface analysis method as follows： electrode spacing is 90 mm， sample height is 74 mm， and conductivity is 0.14 s/m， which can actually reduce the relative enzyme activity by 121.24%. Conclusion： When the conductivity is around 0.1 s/m， the lower the electrode spacing， the higher the sample height， and the faster the heating rate. The radio frequency treatment of the sample effectively reduces the activity of polyphenol oxidase and inhibits the enzymatic browning of fresh-cut burdock. The optimized process shows less cell damage.

Key words： radio frequency; polyphenol oxidase; fresh-cut burdock; enzymatic browning

近年來，隨著預(yù)制菜產(chǎn)業(yè)的蓬勃發(fā)展，鮮切果蔬產(chǎn)品因品質(zhì)新鮮、食用方便、干凈衛(wèi)生等特點(diǎn)備受消費(fèi)者青睞。江蘇省特色經(jīng)濟(jì)作物牛蒡被國家列為藥食同源食物，并享有“東洋參”的美譽(yù)^[1-2]。其灰白色根部為主要的食用部分，具有極高的營養(yǎng)價值。目前，我國牛蒡種植業(yè)較發(fā)達(dá)，但加工業(yè)相對落后，其主要原因是牛蒡在加工中極易褐變。鮮切牛蒡發(fā)生褐變主要是因?yàn)榕］蚴艿綑C(jī)械損傷后在多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO）的作用下，酚類物質(zhì)會生成鄰苯二醌，繼而發(fā)生褐變，影響其加工品質(zhì)^[3]。

傳統(tǒng)的抑制褐變的方法包括加熱、氣調(diào)、調(diào)節(jié)pH值和浸泡化學(xué)品^[4]。Chung等^[5]研究發(fā)現(xiàn)用檸檬酸、氯化鈉、半胱氨酸和乙酸鈉處理鮮切牛蒡根可以有效抑制褐變。然而，當(dāng)代消費(fèi)者越來越注重營養(yǎng)與健康，擔(dān)心食品中使用化學(xué)添加劑存在潛在的有害影響。Epameinondas等^[6]研究發(fā)現(xiàn)高溫?zé)崴癄C可以有效地滅酶，但是果蔬在焯水過程中也會因細(xì)胞破壞對產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生不利影響，如顏色變化、質(zhì)地軟化和水溶性營養(yǎng)物質(zhì)損失。Gong等^[7]研究發(fā)現(xiàn)，與熱水焯燙相比，射頻燙漂的胡蘿卜具有更好的復(fù)水能力、色澤和質(zhì)地，維生素C含量更高。傳統(tǒng)熱水燙漂是由外向內(nèi)加熱，熱傳遞速度慢，并且物料表面溫度過高，出現(xiàn)食品過熱情況^[8-9]。與傳統(tǒng)加熱相反，射頻處理的樣品內(nèi)部升溫快于外部，可在低溫短時間內(nèi)達(dá)到加熱效果，盡可能地保持食品品質(zhì)^[10]。射頻（radio frequency，RF）是一種易于規(guī)?；瘧?yīng)用的介電加熱方式，在食品加工中的應(yīng)用主要包括病蟲害防治、農(nóng)產(chǎn)品干燥、果蔬燙漂和肉制品解凍^[11-12]。其原理為電磁波誘導(dǎo)帶電離子振蕩遷移，將電能轉(zhuǎn)化為熱能，實(shí)現(xiàn)快速升溫。目前射頻滅酶在蘋果汁^[13]、萵筍^[14]、馬鈴薯^[15]等果蔬保鮮中均有應(yīng)用，通過射頻燙漂的樣品不僅能抑制褐變，而且能更好地保持品質(zhì)。

關(guān)于牛蒡的深加工食品研究，目前主要集中于牛蒡醬、牛蒡泡菜、牛蒡飲料、牛蒡休閑食品等方面。黃和升等^[16]以新鮮牛蒡?yàn)樵涎兄婆］蚺莶?，采用純種濕法發(fā)酵速度快、亞硝酸鹽含量低、感官評分和脆度得到提升。孫連海等^[17]以感官評分為指標(biāo)，對牛蒡丁與豬肉泥的最佳質(zhì)量比進(jìn)行研究，制作出最佳配比的甜辣牛蒡醬。崔東波^[18]以牛蒡、香菇、豬肉為主要原料，通過正交試驗(yàn)確定最佳工藝配方，開發(fā)了一種具有保健功能的調(diào)味醬。

本研究擬以新鮮牛蒡?yàn)檠芯繉ο?，通過射頻滅酶抑制其褐變。采用單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面法優(yōu)化滅酶工藝，根據(jù)相對酶活、色澤、微觀結(jié)構(gòu)等指標(biāo)評價牛蒡質(zhì)量，建立回歸方程，優(yōu)化并得出最優(yōu)的工藝參數(shù)，旨在最大程度地保持牛蒡品質(zhì)，提高鮮切牛蒡產(chǎn)品的商品價值^[12]。

1"材料與方法

1.1"材料與試劑

牛蒡：徐州智科食品有限公司；二水合磷酸二氫鈉、十二水合磷酸氫二鈉、氯化鈉：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；鄰苯二酚：上海麥克林生化科技有限公司；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2"主要儀器與設(shè)備

ASC-30型電子秤"沈陽朝陽衡器廠；S-4800型掃描電子顯微鏡"日本日立公司；RFD-200F射頻儀器"南京蘇曼等離子科技有限公司；JC-UT2000型紫外可見分光光度計(jì)"青島聚創(chuàng)科技有限公司；WT-GL-100F熒光光纖測溫儀"河北微探科技有限公司。

1.3"射頻設(shè)備

試驗(yàn)所使用的射頻設(shè)備由江蘇省農(nóng)科院提供，該設(shè)備由人機(jī)界面、嵌入式系統(tǒng)、射頻發(fā)生器、射頻處理腔和傳動系統(tǒng)構(gòu)成。樣品放入離心管中并包裹聚乙烯泡沫保溫，采用光纖測溫儀實(shí)時監(jiān)測物料內(nèi)部溫度。射頻功率大小以及上下極板間距可根據(jù)樣品做出相應(yīng)調(diào)整。射頻處理示意圖見圖1。

1.4"試驗(yàn)方法

1.4.1"工藝流程

原料篩選→清洗→刨絲→浸泡→射頻處理→提取酶液→測定酶活。

1.4.2"最適pH

參考田一雄^[13]的方法。

1.4.3"最適溫度

參考田一雄^[13]的方法。

1.4.4"酶活計(jì)算

參考周良付等^[9]的方法。將2.9 mL 0.1 mol/L鄰苯二酚溶液與0.1 mL酶液混合搖勻，用紫外可見分光光度計(jì)在410 nm處測定其吸光度值。相對酶活按下式計(jì)算：

S（%）=A_tA×100%。

式中：S為相對酶活，%；A_t為處理后牛蒡PPO酶活；A為處理前牛蒡PPO酶活。

1.4.5"單因素試驗(yàn)條件

1.4.5.1"不同極板間距

固定新鮮牛蒡直徑約為2 cm、厚度為2 mm，裝入50 mL離心管中。將樣品放入設(shè)備下極板中央，輸出功率為35%額定值，處理6 min。調(diào)整極板間距（85，95，105 mm）進(jìn)行射頻處理。將熒光光纖測溫儀插入樣品中心，實(shí)時監(jiān)測溫度變化，考察極板間距對射頻滅酶速率的影響。

1.4.5.2"不同樣品高度

調(diào)整樣品高度（55，65，75 mm）進(jìn)行射頻處理，考察樣品高度對射頻滅酶速率的影響。

1.4.5.3"不同電導(dǎo)率

調(diào)整NaCl溶液電導(dǎo)率（0.03，0.1，0.3 s/m）進(jìn)行射頻處理，考察電導(dǎo)率對射頻滅酶速率的影響。

1.4.6"響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，以極板間距、樣品高度、電導(dǎo)率為影響因素，以多酚氧化酶活性為評價指標(biāo)，進(jìn)行三因素三水平響應(yīng)面試驗(yàn)，具體因素與水平見表1。

2"結(jié)果與分析

2.1"牛蒡PPO的最適pH測定

pH適宜時酶的活性中心處于正常電離狀態(tài)，蛋白分子的構(gòu)象隨pH的變化而發(fā)生改變，導(dǎo)致酶失活^[14]。由圖2可知牛蒡PPO酶液在pH 5.7～8.0下的活性，確定最適pH為6.5。

2.2"牛蒡PPO的最適溫度測定

溫度是影響酶活性的另一關(guān)鍵因素，蛋白分子受熱后，分子結(jié)構(gòu)由α-螺旋、β-折疊轉(zhuǎn)變?yōu)闊o規(guī)則卷曲蛋白分子，從而導(dǎo)致酶失活^[14]。牛蒡PPO在25～75 ℃下酶活變化曲線見圖3，確定最適溫度為35 ℃。

2.3"單因素對牛蒡PPO酶活的影響

2.3.1"極板間距對射頻滅酶的影響

由圖4中a可知，極板間距越大，樣品的升溫速率越慢。當(dāng)極板間距為95 mm時，牛蒡升溫速率最快。由圖4中b可知，極板間距越小，其PPO失活速率越快。隨著時間的增加，所有極板間距下的相對酶活先上升后逐漸下降。不同極板間距下，樣品的升溫速率與PPO失活速率成正比。當(dāng)溫度從50 ℃升至60 ℃時，PPO活性急劇下降。高溫會使酶蛋白發(fā)生變性，PPO加熱至75 ℃后完全失活，這是因?yàn)闃O板間距越小，輸出電流越大，電場強(qiáng)度越強(qiáng)，同時樣品內(nèi)部升溫速率越快^[14]。

2.3.2"樣品高度對射頻滅酶的影響

由圖5中a可知，樣品高度越低，樣品的升溫速率越慢。當(dāng)樣品高度為75 mm時，牛蒡升溫速率最快。由圖5中b可知，樣品高度越高，其PPO失活速率越快。隨著樣品高度的降低，樣品的升溫速率也逐漸減緩。55 mm高度的樣品在射頻結(jié)束后仍有殘余活性，而75 mm高度的樣品在4 min時就已經(jīng)完全失活，65 mm高度的樣品在6 min時完全失活，這是因?yàn)闃悠犯叨鹊脑黾涌s短了樣品與極板的距離。而空氣的介電損耗遠(yuǎn)小于物料的介電損耗，因此，在射頻處理過程中距離上極板越近的樣品能量損耗越小，物料所吸收的功率越大。

2.3.3"電導(dǎo)率對射頻滅酶的影響

由圖6中a可知，當(dāng)電導(dǎo)率為0.3 s/m時，樣品的升溫速率較慢。當(dāng)電導(dǎo)率為0.1 s/m時，牛蒡升溫速率最快。由圖6中b可知，電導(dǎo)率在0.1 s/m左右時，其PPO失活速率最快。電導(dǎo)率上升或者下降，物料的升溫速率均有所降低。0.1 s/m電導(dǎo)率時PPO失活最快，3 min時就已經(jīng)失去大部分活性。0.03 s/m電導(dǎo)率次之，0.3 s/m電導(dǎo)率最慢，兩者都在4 min時失去大部分活性。較低的電導(dǎo)率意味著其離子數(shù)較少，因此帶電離子在射頻波的作用下碰撞概率較低^[15]。較高的電導(dǎo)率意味著其離子數(shù)較多，離子之間相互阻礙移動，同樣會減少碰撞并降低升溫速率。尤其在電導(dǎo)率較高時，離子之間的相互阻礙作用更明顯^[15]。

2.4"響應(yīng)面優(yōu)化對牛蒡射頻滅酶結(jié)果的影響

2.4.1"響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果與分析

基于單因素試驗(yàn)結(jié)果，采用三因素三水平利用Design Expert V8.0.6軟件按照Box-Behnken原理進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)，根據(jù)滅酶效果對試驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，試驗(yàn)方案及結(jié)果見表2。以牛蒡PPO滅酶率為響應(yīng)值，以A（極板間距）、B（樣品高度）、C（電導(dǎo)率）作為響應(yīng)面試驗(yàn)影響因素，方差分析見表3。

通過試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多項(xiàng)回歸擬合，得到二次多項(xiàng)式回歸模型方程：Y=－1 210.2+19.18A+11.74B+265.595C+1.07×10^－6AB+6.23×10^－5AC－2.96×10^－5BC－0.109A²－0.073B²－845.24C²。

由表3可知，該模型極顯著（P＜0.000 1）。R²為0.999 7（gt;0.9），R_Adj²為0.999 4，說明試驗(yàn)值與預(yù)測值之間擬合度良好，可用于射頻滅酶試驗(yàn)的預(yù)測。另外，從方差分析結(jié)果可以看出A、B、C 3個因素對響應(yīng)值滅酶率的影響均極顯著。各因素的F值與試驗(yàn)因素呈正相關(guān)，F(xiàn)值越大，表明對試驗(yàn)因素的影響越大，對試驗(yàn)結(jié)果越重要^[19]。各因素影響程度的順序?yàn)闃悠犯叨龋緲O板間距＞電導(dǎo)率。

2.4.2"響應(yīng)面分析與結(jié)果優(yōu)化

通過響應(yīng)面分析圖和等高線的形狀可以判斷兩個自變量之間交互作用的顯著程度^[20]。圓形表示交互作用不顯著，橢圓形表示交互作用顯著^[21]。

由圖7～圖9可知，極板間距與電導(dǎo)率、樣品高度與電導(dǎo)率的交互作用對射頻滅酶的影響顯著。極板間距和樣品高度的交互作用響應(yīng)面圖較平緩，等高線接近于圓形，因此極板間距和樣品高度的交互作用影響不顯著。

通過對二次多項(xiàng)式模型的解逆矩陣，得出射頻對鮮切牛蒡的最佳滅酶條件為極板間距90.5 mm、樣品高度74.01 mm、電導(dǎo)率0.14 s/m，預(yù)測滅酶率為122.649%。

2.5"驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

為檢驗(yàn)?zāi)Ｐ皖A(yù)測的準(zhǔn)確性，采用響應(yīng)面優(yōu)化的工藝條件對牛蒡進(jìn)行射頻滅酶?？紤]到實(shí)際操作性，將最優(yōu)工藝條件稍作調(diào)整，設(shè)置極板間距為90 mm、樣品高度為74 mm、電導(dǎo)率為0.14 s/m，并進(jìn)行3次驗(yàn)證試驗(yàn)。實(shí)際結(jié)果顯示相對酶活下降了121.24%，與預(yù)測的122.649%非常接近，說明響應(yīng)面法得到的最佳工藝條件比較可靠^[22]。

2.6"射頻處理對牛蒡細(xì)胞微觀結(jié)構(gòu)的影響

掃描電子顯微鏡圖像直觀地顯示了牛蒡組織經(jīng)過射頻處理后薄壁細(xì)胞形態(tài)的變化。

由圖10可知，處理前后的牛蒡細(xì)胞存在顯著性差異。新鮮牛蒡的細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞間層與細(xì)胞壁緊密連接^[23]。射頻處理后，細(xì)胞壁出現(xiàn)皺褶并坍塌。射頻升溫速率越慢，細(xì)胞壁越粗糙且塌陷程度越嚴(yán)重^[23]。當(dāng)樣品高度為55 mm時，可觀察到細(xì)胞幾乎全部塌陷變形。在此條件下的樣品比其他組加熱速率慢，導(dǎo)致其細(xì)胞壁受損更嚴(yán)重^[23]。因此，提高射頻效率有利于維持細(xì)胞的空間結(jié)構(gòu)和細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的完整性。

2.7"射頻處理對牛蒡色澤的影響

由表4可知牛蒡在不同處理時間下的色澤變化，結(jié)果表明，ΔE在33.56～56.03之間，射頻對牛蒡色澤有顯著影響（ΔEgt;3.0）^[24]，ΔE越大，樣品色澤變化越明顯。L^*值在3 min時達(dá)到最小值，這是由于處理時間短導(dǎo)致鈍酶不完全，造成嚴(yán)重褐變，與圖11中D一致。牛蒡的亮度L^*值先降低后升高，這也符合不同處理時間下牛蒡PPO活性的變化規(guī)律^[25]。a^*值先升高后降低，在2 min時達(dá)到峰值。a^*值降低，表明色澤由紅向綠變化，褐變程度降低，PPO鈍化效果好^[25]。b^*值在4 min時達(dá)到峰值，6 min時降到最低，也表明褐變程度降低^[26-27]。射頻處理結(jié)束時牛蒡的L^*值上升，接近射頻1 min的樣品。a^*值和b^*值均有所下降，表明處理6 min能夠有效抑制牛蒡褐變。從外觀和L^*值來看，處理1 min和6 min的樣品相近，但是處理6 min的樣品大大降低了多酚氧化酶活性，長期貯存也能保持色澤穩(wěn)定。

3"結(jié)論

本研究以射頻為鈍化牛蒡多酚氧化酶的方法，結(jié)果表明極板間距、樣品高度、電導(dǎo)率在處理過程中均有顯著影響。應(yīng)用SPSS和Design Expert軟件得出射頻對鮮切牛蒡的最佳滅酶條件為極板間距90 mm、樣品高度74 mm、電導(dǎo)率0.14 s/m，可降低121.24%相對酶活^[28-29]。色澤上，處理6 min可以大幅度提高樣品的L^*值，降低a^*值和b^*值。高溫下由于纖維素組織疏松導(dǎo)致的細(xì)胞膜破裂、細(xì)胞壁坍塌等微觀結(jié)構(gòu)變化造成組織軟化^[30-31]。采用最優(yōu)的試驗(yàn)方案可大大提高射頻滅酶速率，對組織和細(xì)胞的損傷較小，從而最大程度地保持牛蒡品質(zhì)，保證鮮切牛蒡良好的商品價值。使用經(jīng)過處理后的牛蒡制作牛蒡醬，顏色鮮亮，口感微脆，不僅去除了牛蒡的苦澀怪味，而且最大限度地保存了牛蒡的有效成分，是一種具有保健功能的調(diào)味品。牛蒡射頻加工工藝的優(yōu)化不僅提高了牛蒡的經(jīng)濟(jì)價值和食用價值，而且為牛蒡產(chǎn)品的開發(fā)提供了新的途徑。

參考文獻(xiàn)：

[1]鄭曉寧.牛蒡栽培與病蟲害防治技術(shù)[J].新農(nóng)業(yè)，2023（6）：31-32.

[2]ZHENG Z， ZHAO X E， ZHU S， et al.Simultaneous determination of oleanolic acid and ursolic acid by in vivo microdialysis via UHPLC-MS/MS using magnetic dispersive solid phase extraction coupling with microwave-assisted derivatization and its application to a pharmacokinetic study of Arctium lappa L. root extract in rats[J].Agricultural Food Chemistry，2018，66（15）：3975-3982.

[3]馬金晶，李鳳琴，黃敏毅，等.鮮切果蔬中食源性致病菌污染研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2021，12（7）：2591-2599.

[4]張婷.鮮切牛蒡護(hù)色保脆技術(shù)及其軟罐頭開發(fā)[D].南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2014.

[5]CHUNG H S， SEONG J H， MOON K D. Effects of processing temperature and browning inhibitor on quality properties of fresh-cut burdock roots[J].Korean Journal of Food Preservation，2012，19（1）：31-36.

[6]EPAMEINONDAS X， ELENI G， PETROS T， et al. Effect of microwave assisted blanching on the ascorbic acid oxidase inactivation and vitamin C degradation in frozen mangoes[J].Innovative Food Science amp; Emerging Technologies，2018，48：248-257.

[7]GONG C T， ZHAO Y Y， ZHANG H J， et al. Investigation of radio frequency heating as a dry-blanching method for carrot cubes[J].Journal of Food Engineering，2019，245：53-56.

[8]HUANG Z， MARRA F， WANG S J.A novel strategy for improving radio frequency heating uniformity of dry food products using computational modeling[J].Innovative Food Science amp; Emerging Technologies，2016，34：100-111.

[9]周良付，雷玉潔，李宇坤，等.多酚氧化酶的射頻加熱滅活效果及動力學(xué)分析[J].現(xiàn)代食品科技，2016（32）：161-166.

[10]SUWANNACHOT J， KETNAWA S， OGAWA Y. Comparative study of the physico-"and biochemical properties of two types of salted Japanese apricot （Prunus mume） pickles[J].Frontiers in Sustainable Food Systems，2021，5：606688.

[11]BASAK S， CHAKRABORTY S. The potential of nonthermal techniques to achieve enzyme inactivation in fruit products[J].Trends in Food Science amp; Technology，2022，123：114-129.

[12]LYU R， ZOU M， CHANTAPAKUL T，et al.Effect of ultrasonication and thermal and pressure treatments， individually and combined， on inactivation of Bacillus cereus spores[J].Applied Microbiology and Biotechnology，2019，103（5）：2329-2338.

[13]田一雄.基于射頻與脈沖電場的NFC蘋果汁鈍酶殺菌新工藝研究[D].無錫：江南大學(xué)，2018.

[14]姚益順.射頻燙漂滅酶對萵筍理化特性的影響及其細(xì)胞作用機(jī)理研究[D].咸陽：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2021.

[15]張振娜.馬鈴薯射頻燙漂護(hù)色及其作用機(jī)理研究[D].咸陽：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2018.

[16]黃和升，王海平，王慶權(quán).發(fā)酵方式對牛蒡泡菜理化特性及微生物數(shù)量變化的影響[J].食品研究與開發(fā)，2022，43（14）：112-117.

[17]孫連海，郭明月.模糊數(shù)學(xué)評價法優(yōu)化甜辣牛蒡醬[J].中國調(diào)味品，2017，42（12）：75-78，88.

[18]崔東波.牛蒡香菇保健肉醬的研制[J].中國調(diào)味品，2014，39（10）：106-108.

[19]殷登科，陳濤，張世坤，等.響應(yīng)面法優(yōu)化紅甜菜中甜菜紅素提取工藝[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2023，51（4）：117-123.

[20]劉莉，王燕，黃華，等.響應(yīng)面法優(yōu)化紅薯葉中水溶性膳食纖維提取工藝[J].糧食與油脂，2023，36（4）：122-125.

[21]李倩倩，李淑芳，陳貴元.響應(yīng)面分析法優(yōu)化刺梨果多糖的脫色工藝[J].農(nóng)業(yè)科技與信息，2022（13）：99-105.

[22]沈艷霞，張曉虎，雷郁佳.響應(yīng)面法優(yōu)化超聲輔助乙醇浸提黃芩葉多酚工藝研究[J].陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，64（4）：28-32.

[23]ZHOU L F， LEI Y J， LI Y K， et al. Inactivation effect of radio frequency heating on polyphenol oxidase and the analysis of kinetics[J].Modern Food Science and Technology，2016，32（9）：161-166.

[24]YAO Y S， WEI X J， PANG H Y， et al. Effects of radio-frequency energy on peroxidase inactivation and physiochemical properties of stem lettuce and the underlying cell-morphology mechanism[J].Food Chemistry，2020，322：126753.

[25]ADEKUNTE A O， TIWARI B K， CULLEN P J， et al. Effect of sonication on colour， ascorbic acid and yeast inactivation in tomato juice[J].Food Chemistry，2010，1122（3）：500-507.

[26]ZENG S Y， LI M G， LI G H， et al. Innovative applications， limitations and prospects of energy-carrying infrared radiation， microwave and radio frequency in agricultural products processing[J].Trends in Food Science amp; Technology，2022，121（22）：76-92.

[27]XU B G， MIN F， BIMAL C， et al. Multi-frequency power thermosonication treatments of clear strawberry juice： impact on color， bioactive compounds， flavor volatiles， microbial and polyphenol oxidase inactivation[J].Innovative Food Science amp; Emerging Technologies，2023，84：103295.

[28]YUAN J F， HOU Z C， WANG D H， et al. Microwave irradiation： effect on activities and properties of polyphenol oxidase in grape maceration stage[J].Food Bioscience，2021，44：101378.

[29]CAO X M， CAI C F， WANG Y L， et al. The inactivation kinetics of polyphenol oxidase and peroxidase in bayberry juice during thermal and ultrasound treatments[J].Innovative Food Science amp; Emerging Technologies，2018，45：169-178.

[30]SUI X， MENG Z， DONG T T， et al.Enzymatic browning and polyphenol oxidase control strategies[J].Current Opinion in Biotechnology，2023，81：102921.

[31]XU Z J， YANG Z H， JI J F， et al. Polyphenol mediated non-enzymatic browning and its inhibition in apple juice[J].Food Chemistry，2023，404：134504.