桑枝總生物堿片改善2型糖尿病小鼠炎癥反應(yīng)的作用研究

【摘要】目的 研究桑枝總生物堿片對(duì)2型糖尿?。═2DM）小鼠炎癥反應(yīng)的影響，為臨床提供參考。方法 選取無(wú)特定病原體動(dòng)物（SPF）級(jí)別C57BL/6J小鼠36只作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，編號(hào)后隨機(jī)將小鼠分為6組，每組6只，對(duì)照組小鼠行常規(guī)正常喂養(yǎng)，其余5組小鼠采用高脂飲食和腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）的方法建立T2DM的小鼠模型，其中模型組未行特殊干預(yù)，另4組分別為桑枝總生物堿低劑量組（6只，100 mg/kg）、桑枝總生物堿中劑量組（6只，200 mg/kg）、桑枝總生物堿高劑量組（6只，400 mg/kg）及二甲雙胍組（6只，100 mg/kg）。比較各組小鼠體質(zhì)量、空腹血糖（FBG）、血脂四項(xiàng)水平[三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）]與血清炎癥因子[干擾素-γ（IFN-γ）、白細(xì)胞介素（IL）-1β、IL-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）]水平。結(jié)果 干預(yù)后，對(duì)照組、模型組及桑枝總生物堿低劑量組小鼠體質(zhì)量均高于干預(yù)前，模型組、桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠體質(zhì)量均高于對(duì)照組，桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組與二甲雙胍組小鼠體質(zhì)量均低于模型組（均Plt;0.05）。干預(yù)后，模型組、桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠FBG水平均高于對(duì)照組，桑枝總生物堿高劑量組、二甲雙胍組小鼠FBG水平均低于模型組（均Plt;0.05）。干預(yù)后，模型組、桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠TG、TC、HDL-C、LDL-C水平均高于對(duì)照組，桑枝總生物堿中劑量組、高劑量組與二甲雙胍組小鼠TG、TC、HDL-C、LDL-C水平均低于模型組（均Plt;0.05）。干預(yù)后，模型組、桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠IFN-γ、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于對(duì)照組，桑枝總生物堿中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠IFN-γ、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于模型組（均Plt;0.05）。結(jié)論 桑枝總生物堿片能夠降低T2DM小鼠的體質(zhì)量、FBG、血脂四項(xiàng)水平與炎癥因子水平。

【關(guān)鍵詞】桑枝總生物堿片；2型糖尿??；空腹血糖；炎癥因子

【中圖分類(lèi)號(hào)】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2096-2665.2025.03.0025.03

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2025.03.009

2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）是一種內(nèi)分泌代謝性疾病，其主要特征包括血糖升高、血脂異常、胰島細(xì)胞損傷、胰島素抵抗及胰島素敏感性降低[1]。中藥治療以其整體觀念和追求根本病因的治療原則著稱(chēng)，臨床效果顯著，且不良反應(yīng)較少，成為研究焦點(diǎn)[2]。桑枝總生物堿片為中成藥，含黃酮類(lèi)、多糖類(lèi)及氨基酸類(lèi)等多種天然產(chǎn)物，具有調(diào)節(jié)脂質(zhì)紊亂等多種藥理作用，適用于治療T2DM[3]。在臨床應(yīng)用中，該藥物已被證實(shí)能有效改善血糖水平并幫助控制體質(zhì)量[4]。但目前尚缺乏明確的數(shù)據(jù)支持其對(duì)體內(nèi)炎癥反應(yīng)的影響。基于此，本研究探討桑枝總生物堿片對(duì)T2DM模型小鼠炎癥反應(yīng)的作用，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 無(wú)特定病原體動(dòng)物（SPF）級(jí)別C57BL/6J小鼠[杭州子源實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司，許可證號(hào)：SCXK（浙）2019-0004]，雄性，36只，體質(zhì)量20～22 g，5～6周齡。置于恒溫、恒濕動(dòng)物房飼養(yǎng)，自由飲水、進(jìn)食，環(huán)境溫度保持20～26 ℃，濕度40%～70%，晝夜交替分明。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料 高脂飼料（江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限責(zé)任公司，規(guī)格：10 kg/袋）；鏈脲佐菌素（STZ）（sigma，規(guī)格：100 mg/瓶）；桑枝總生物堿片（北京五和博澳藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z20200002，規(guī)格：50 mg/片）；鹽酸二甲雙胍片（蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H32021625，規(guī)格：0.25 g/片）。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 血糖檢測(cè)儀（廣州萬(wàn)孚生物技術(shù)股份有限公司，粵械注準(zhǔn)20172220006，型號(hào)：EC-161）；全自動(dòng)生化分析儀（深圳市盛信康科技有限公司，粵械注準(zhǔn)20182221055，型號(hào)：SK6000）；酶標(biāo)儀（北京宏潤(rùn)達(dá)科技發(fā)展有限公司，京械注準(zhǔn)20162220432，型號(hào)：ZS-2）；高速冷凍離心機(jī)（艾本德歐洲股份公司，國(guó)械備20210475號(hào)，型號(hào)：5910 Ri）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 動(dòng)物造模及分組 本研究經(jīng)鳳陽(yáng)縣人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。將小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后編號(hào)，再隨機(jī)將小鼠分為6組，每組6只。對(duì)照組行常規(guī)正常喂養(yǎng)8周，其余5組采用高脂飲食（60%脂肪能量高脂飼料，連續(xù)喂養(yǎng)8周）和腹腔注射STZ（第8周開(kāi)始注射，劑量30 mg/kg，連續(xù)3 d。若空腹血糖（FBG）≥11.1 mmol/L提示建模成功，建立T2DM的小鼠模型。建模成功后模型組不行特殊干預(yù)，繼續(xù)給予高脂飲食喂養(yǎng)；另4組分別為桑枝總生物堿低劑量組（6只，100 mg/kg）、桑枝總生物堿中劑量組（6只，200 mg/kg）、桑枝總生物堿高劑量組（6只，400 mg/kg）及二甲雙胍組（6只，100 mg/kg），上述4組小鼠均通過(guò)灌胃給藥，1次/d，持續(xù)7周。對(duì)照組和模型組小鼠則以同等體積的生理鹽水進(jìn)行灌胃干預(yù)。分別在建模成功后未行干預(yù)前和干預(yù)后記錄小鼠的體質(zhì)量。

2.2 血糖檢測(cè) 禁食12 h后采集所有小鼠尾尖血，采用血糖檢測(cè)儀檢測(cè)小鼠的FBG水平。

2.3 血脂四項(xiàng)檢測(cè) 采用割尾采血方法取靜脈血0.2 mL，用高速冷凍離心機(jī)離心15 min（轉(zhuǎn)速為3 000 r/min，離心半徑為8.50 cm），留取上清液，備用。采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）。

2.4 炎癥因子檢測(cè) 采用割尾采血方法取靜脈血0.2 mL，離心操作同“2.3”，留取上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)各組小鼠炎癥因子[干擾素-γ（IFN-γ）、白細(xì)胞介素（IL）-1β、IL-6和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）]水平。

3 觀察指標(biāo)

⑴比較各組小鼠體質(zhì)量。⑵比較各組小鼠FBG水平。⑶比較各組小鼠血脂四項(xiàng)水平。⑷比較各組小鼠血清炎癥因子水平。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用Graphpad Prism 10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以（x）表示，多組間比較采用F檢驗(yàn)，其兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

5 結(jié)果

5.1 各組小鼠體質(zhì)量比較 干預(yù)前，模型組、桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠的體質(zhì)量比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05），模型組、桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠的體質(zhì)量均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05）；干預(yù)后，對(duì)照組、模型組及桑枝總生物堿低劑量組小鼠體質(zhì)量均高于干預(yù)前，模型組、桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠體質(zhì)量均高于對(duì)照組，桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組與二甲雙胍組小鼠體質(zhì)量均低于模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05），見(jiàn)表1。

5.2 各組小鼠FBG水平比較 干預(yù)后，模型組、桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠FBG水平均高于對(duì)照組，桑枝總生物堿高劑量組、二甲雙胍組小鼠FBG水平均低于模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05），見(jiàn)表2。

5.3 各組小鼠血脂四項(xiàng)水平比較 干預(yù)后，模型組、桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠TG、TC、HDL-C、LDL-C水平均高于對(duì)照組，桑枝總生物堿中劑量組、高劑量組與二甲雙胍組小鼠TG、TC、HDL-C、LDL-C水平均低于模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05），見(jiàn)表3。

5.4 各組小鼠血清炎癥因子水平比較 干預(yù)后，模型組、桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠IFN-γ、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于對(duì)照組，桑枝總生物堿中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠IFN-γ、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05），見(jiàn)表4。

6 討論

糖尿病已成為威脅人類(lèi)健康的第三大慢性疾病[5]。近年來(lái)，由于中醫(yī)藥療效、性價(jià)比和安全性較好，其在治療T2DM方面越來(lái)越受重視。桑枝總生物堿片是近年來(lái)用于臨床的中藥新藥，既往研究顯示，桑枝總生物堿片有利于保護(hù)患者胰島功能，改善血糖水平[3]。

血糖水平的持續(xù)升高和脂質(zhì)代謝異常是T2DM的主要特點(diǎn)[6]。本研究結(jié)果顯示，桑枝總生物堿低劑量組、中劑量組、高劑量組與二甲雙胍組小鼠體質(zhì)量、FBG、TG、TC、HDL-C及LDL-C均低于模型組，這提示桑枝總生物堿片有利于改善體質(zhì)量和血糖水平，糾正脂質(zhì)代謝紊亂。分析原因?yàn)?，桑枝總生物堿片可抑制小腸α葡萄糖苷酶活性，促進(jìn)胰島素分泌，并加快脂質(zhì)分解，且其作用呈劑量依賴性[7]。

本研究結(jié)果顯示，模型組、桑枝總生物堿低劑量組、桑枝總生物堿中劑量組、桑枝總生物堿高劑量組及二甲雙胍組小鼠IFN-γ、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于對(duì)照組，桑枝總生物堿片中劑量組、高劑量組及二甲雙胍組小鼠均低于模型組，這提示桑枝總生物堿片可改善炎癥反應(yīng)。分析原因?yàn)椋装Y因子的持續(xù)分泌是造成糖脂代謝紊亂、損傷胰島功能的重要原因。在T2DM患者體內(nèi)，炎癥反應(yīng)始終存在，使炎癥因子對(duì)患者其他器官造成持續(xù)刺激。前期研究顯示，桑枝總生物堿片具有雙糖酶抑制活性，還可改善腸-胰島軸功能和機(jī)體炎癥狀態(tài)，能夠降低炎癥因子的分泌，從而緩解炎癥反應(yīng)[8]。

綜上所述，桑枝總生物堿片具有良好的降糖作用，有利于改善血脂水平，抑制炎癥因子表達(dá)。

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