食用植物油中黃曲霉毒素B1檢測質(zhì)量控制方法研究

關(guān)鍵詞：食用油，黃曲霉毒素B1，質(zhì)量控制，質(zhì)控要點(diǎn)

DOI編碼：10.3969/j.issn.1002-5944.2024.013.036

0 引言

黃曲霉毒素B1是一種由黃曲霉等特定菌株產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，被認(rèn)為是毒性最強(qiáng)的黃曲霉毒素。根據(jù)1993年世界衛(wèi)生組織（WHO）癌癥研究機(jī)構(gòu)的分類，黃曲霉毒素B1被歸類為天然存在的一類致癌物質(zhì)[1]。黃曲霉毒素B1主要通過食用被霉菌污染的食物和飼料而進(jìn)入人體，其毒性是砒霜的68倍，是氰化鉀的10倍，長期攝入可能導(dǎo)致肝臟損傷、免疫毒性、異常毒性、腫瘤等嚴(yán)重疾病[2]。有數(shù)據(jù)表示，黃曲霉毒素B1攝入1毫克就可能致癌，一次性攝入20毫克就能致命。日常生活中，農(nóng)副產(chǎn)品較易感染產(chǎn)生黃曲霉毒素的霉菌，如發(fā)霉變質(zhì)的花生、玉米、小麥，變質(zhì)的大米、發(fā)苦的堅(jiān)果、小作坊自榨油、久泡的木耳、未經(jīng)清洗的砧板等都會存在不同程度的接觸黃曲霉毒素。普通的消毒方式高溫（100度沸水5分鐘）是無法消滅黃曲霉素的。歷年抽檢結(jié)果表明，各類食物中黃曲霉毒素B1超標(biāo)情況不容樂觀，尤其是小作坊，每年因黃曲霉毒素B1中毒而引起的疾病和死亡人數(shù)數(shù)量龐大，給社會和經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶來巨大負(fù)擔(dān)[3]。食用植物油是不可或缺的食品添加劑，是人們?nèi)粘Ｉ钪惺秤米顬轭l繁的一種食用油。然而，由于植物油生產(chǎn)的過程中易受到霉菌的感染污染，致使其中的黃曲霉毒素B1含量容易超過國家標(biāo)準(zhǔn)的限量要求[4]。因此，對植物油中黃曲霉毒素B1進(jìn)行檢測和控制具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

習(xí)近平總書記在關(guān)于食品藥品安全工作的重要指示精神中強(qiáng)調(diào)，要認(rèn)真落實(shí)李克強(qiáng)總理批示要求和國務(wù)院有關(guān)會議部署，堅(jiān)持人民至上、生命至上，用最嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)、最嚴(yán)格的監(jiān)管、最嚴(yán)厲的處罰、最嚴(yán)肅的問責(zé)，毫不松懈抓好食品藥品安全工作，保證廣大人民群眾吃得放心、安心，守護(hù)好人民群眾“舌尖上的安全”。確保相關(guān)檢測任務(wù)的準(zhǔn)確性和高效率是檢測機(jī)構(gòu)的首要任務(wù)。盡管當(dāng)前的黃曲霉毒素B1檢測方法標(biāo)準(zhǔn)包含了檢測步驟和質(zhì)量控制要求，但卻存在著缺乏詳細(xì)質(zhì)控要點(diǎn)和相應(yīng)控制方法描述的問題。特別是針對新上崗的檢測人員而言，由于標(biāo)準(zhǔn)中質(zhì)控要點(diǎn)和方法描述不夠詳細(xì)，導(dǎo)致難以在短時間內(nèi)掌握相關(guān)的質(zhì)控方法。這一情況給檢測實(shí)驗(yàn)室在保證質(zhì)量和提高檢測效率方面帶來了額外的困難。因此，完善并細(xì)化質(zhì)控要點(diǎn)以及提供相應(yīng)的控制方法描述，對于提升檢測效率和保證質(zhì)量至關(guān)重要。

本文主要以國家標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)-食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定》（GB 5009.22—2016）為主線進(jìn)行研究，對食用油中黃曲霉毒素B1檢測檢測方法、免疫親和柱、檢測儀器、質(zhì)控樣等的選擇以及色譜柱的選擇和維護(hù)等環(huán)節(jié)的質(zhì)控要點(diǎn)提出質(zhì)量關(guān)鍵控制要點(diǎn)和應(yīng)采取的具體方法進(jìn)行剖析和總結(jié)。此外，為加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制，并確保質(zhì)量控制措施的持續(xù)有效性，本文提出了幾點(diǎn)建議：加強(qiáng)員工培訓(xùn)和監(jiān)督機(jī)制、優(yōu)化崗位設(shè)置，以及重視結(jié)果反饋和改進(jìn)跟蹤等。希望通過這些舉措，可以有效地防止或減少質(zhì)量事故的發(fā)生，保障實(shí)驗(yàn)室工作的質(zhì)量和可靠性。

1 黃曲霉毒素B1檢測過程各環(huán)節(jié)質(zhì)量控制

1.1 方法的選擇

GB 5009.22—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定》共有四個檢測方法，分別是：第一法為同位素稀釋液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法、第二法為高效液相色譜—柱前衍生法、第三法為高效液相色譜—柱后衍生法、第四法為酶聯(lián)免疫吸附篩查法。其中第一法需要昂貴的設(shè)備和專業(yè)技術(shù)支持，操作復(fù)雜，對實(shí)驗(yàn)人員技能要求高，成本較高。第四法靈敏度較低，容易導(dǎo)致誤差，僅能作為初步篩查手段。第二法比第三法前處理步驟多，操作相對復(fù)雜，需要特殊試劑，費(fèi)時且成本較高。此外，第三法樣品準(zhǔn)備簡單，靈敏度高，結(jié)果穩(wěn)定可靠，故推薦第三法高效液相色譜—柱后衍生法作為黃曲霉毒素B1常用的檢測方法。

1.2 儀器的選擇

本實(shí)驗(yàn)室配有符合方法要求D品牌及W品牌液相色譜儀，采用同一品牌免疫親和柱、相同人員、相同試劑、相同標(biāo)準(zhǔn)溶液同時對同一質(zhì)控樣進(jìn)行處理上機(jī)分析。D和W儀器的分析條件及結(jié)果如表1所示。D和W儀器的平均回收率分別為96.9%、94.0%；線性分別為0.9999和0.9991。D品牌儀器回收率、峰形及線性均優(yōu)于W品牌，故選擇D品牌儀器作為該項(xiàng)目日常檢測設(shè)備。此分析結(jié)果表明了即使同一分析條件和統(tǒng)同一檢測樣品，但不同的分析儀器其分析結(jié)果也存在差異。

1.3 免疫親和柱的選擇

標(biāo)準(zhǔn)要求免疫親和柱柱柱回收率≥80%，且對于不同批次的親和柱在使用前需進(jìn)行質(zhì)量驗(yàn)證。本實(shí)驗(yàn)選擇了國內(nèi)知名的A品牌以及進(jìn)口品牌R作比較（3平行試驗(yàn)），實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。A品牌及進(jìn)口品牌R免疫親和柱回收率分別為83.29%、93.21%。R品牌黃曲霉毒素B1免疫親和柱柱效比A品牌黃曲霉毒素B1免疫親和柱高出約10個百分點(diǎn)（相同質(zhì)控樣），故選擇R品牌免疫親和柱。由此可見，對于新采購的免疫親和柱每批都必須抽查一定比例做空白試驗(yàn)及回收率試驗(yàn)，確定它們不含有影響測定的雜質(zhì)及良好的凈化效果。

1.4 色譜柱的選擇、維護(hù)和保養(yǎng)

現(xiàn)今行業(yè)內(nèi)液相色譜儀基本上默認(rèn)通過峰面積進(jìn)行定量，而且峰面積定量更準(zhǔn)確。為定量更加準(zhǔn)確，使得色譜峰的完美對稱，實(shí)驗(yàn)采用全新的色譜柱，并且盡可能采用同一品牌的儀器和色譜柱，如W品牌儀器采用W品牌的色譜柱，D品牌儀器采用D品牌的色譜柱。色譜柱要注意維護(hù)保養(yǎng)，先以甲醇∶水=10∶90（V∶V）沖洗柱子45 min，再換上流動相平衡45 min，待基線穩(wěn)定后進(jìn)行進(jìn)樣，若基線漂移不符合要求時應(yīng)延長平衡時間。不能用純有機(jī)溶劑直接沖洗色譜柱，防止鹽析出，堵塞色譜柱或儀器管路，導(dǎo)致色譜柱報廢。

1.5 質(zhì)控樣的選擇

在化學(xué)分析方法驗(yàn)證中，質(zhì)控樣是常用的一種方法，通過將已知量的待測樣品加入生物介質(zhì)中配制而成，用于質(zhì)量控制。質(zhì)控樣可以幫助驗(yàn)證檢測方法的準(zhǔn)確性和可靠性，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性。選擇質(zhì)控樣需考慮樣本的代表性、穩(wěn)定性以及與實(shí)際樣品的相似程度，以確保質(zhì)控的有效性和可靠性。在檢測不合格樣品時應(yīng)選擇含量接近、基質(zhì)一致的質(zhì)控樣。同時，質(zhì)控樣的制備和處理必須與檢測樣品處理方法一致，并且確保制備過程準(zhǔn)確無誤，避免樣品污染或損壞等情況，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性。此外，確保質(zhì)控樣品的保存條件良好，避免在樣品保存過程中出現(xiàn)變質(zhì)或降解現(xiàn)象。

1.6 標(biāo)準(zhǔn)溶液的選擇及使用

為確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可信度，選擇標(biāo)準(zhǔn)溶液時應(yīng)優(yōu)先考慮具有證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)經(jīng)過溯源程序確定其特性值，能夠追溯到準(zhǔn)確表示該特性值的計(jì)量單位。此外，每個標(biāo)準(zhǔn)值都應(yīng)配有特定置信水平的不確定度，以確保數(shù)據(jù)的可靠性和可比性。通過選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)溶液，可以有效提高實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。標(biāo)準(zhǔn)溶液在臨用前應(yīng)按GB 5009.22—2016附錄A進(jìn)行校準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)要求配制及儲存，如在檢測前對標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行校準(zhǔn)和驗(yàn)證，注意標(biāo)準(zhǔn)溶液的保存，避免其受到光、熱、氧化等因素的影響而導(dǎo)致濃度發(fā)生變化，以此確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

2 其他質(zhì)量控制方法

2.1 加強(qiáng)人員培訓(xùn)及監(jiān)督

為確保實(shí)驗(yàn)室工作的質(zhì)量和可靠性，首先需要建立完善的人員培訓(xùn)制度。通過定期對不同崗位的人員組織理論學(xué)習(xí)和實(shí)驗(yàn)操作培訓(xùn)，以提升其業(yè)務(wù)水平，確保其具備必要的技能和知識。其次，對檢測人員進(jìn)行必要的考核。通過留樣復(fù)測、人員比對等方式進(jìn)行不定期的質(zhì)量監(jiān)督，實(shí)時監(jiān)控和考核實(shí)驗(yàn)人員的檢測水平，確保其符合要求。如果發(fā)現(xiàn)不符合要求的情況，應(yīng)及時采取糾正措施，直到檢驗(yàn)項(xiàng)目考核合格才能繼續(xù)上崗。此外，要加強(qiáng)監(jiān)督和管理。建立嚴(yán)格的質(zhì)量管理制度，設(shè)立專門的監(jiān)督機(jī)構(gòu)或責(zé)任人員，對檢測過程進(jìn)行全程監(jiān)控和管理，并及時發(fā)現(xiàn)和解決問題。最后要嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行檢測。明確工作流程和操作規(guī)范，并要嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)操作程序，確保檢測過程的準(zhǔn)確性和可靠性。

2.2 優(yōu)化崗位設(shè)置

按檢測環(huán)節(jié)分段檢測，定崗定人，流水線作業(yè)。根據(jù)檢測工作的流程及特點(diǎn)，將檢測過程分解為若干個環(huán)節(jié)，然后在每個環(huán)節(jié)設(shè)立專門的崗位和負(fù)責(zé)人，實(shí)現(xiàn)流水線作業(yè)，提高工作效率和質(zhì)量控制水平。一方面可以提高檢驗(yàn)人員對所檢驗(yàn)環(huán)節(jié)的熟練程度，避免工作交叉和責(zé)任模糊，確保每個環(huán)節(jié)的任務(wù)得到專業(yè)、細(xì)致地執(zhí)行，降低檢驗(yàn)錯誤，提高檢測效率；另一方面節(jié)約了檢驗(yàn)人員從一種操作過度到另一實(shí)驗(yàn)操作適應(yīng)的時間，使每個崗位的工作人員充分熟悉工作流程和操作規(guī)范，積累足夠的經(jīng)驗(yàn)和技能，能顯著提高檢測效率，提升實(shí)驗(yàn)室在應(yīng)對大批量檢測任務(wù)時更多更快更準(zhǔn)的提供檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的能力。通過落實(shí)各環(huán)節(jié)的責(zé)任人，環(huán)環(huán)相扣，互相監(jiān)督，能增強(qiáng)各檢驗(yàn)人員的責(zé)任意識，促使檢驗(yàn)人員全員參與到實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理活動中，減少質(zhì)量事故發(fā)生[5]。此外，通過優(yōu)化崗位設(shè)置也可以提升工作人員的專業(yè)水平和團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力，促進(jìn)檢測人員和整個檢測體系的健康發(fā)展。

2.3 重視結(jié)果反饋和跟蹤改進(jìn)

通過及時收集、分析和反饋檢測結(jié)果，不斷改進(jìn)檢測方法和流程，是持續(xù)提高檢測質(zhì)量和準(zhǔn)確性的重要環(huán)節(jié)，也是發(fā)現(xiàn)潛在問題、及時制定改進(jìn)方案和實(shí)現(xiàn)持續(xù)改善的必要手段。為確保各環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制和數(shù)據(jù)可靠性，需要各環(huán)節(jié)負(fù)責(zé)人嚴(yán)格執(zhí)行相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控要求，并接受質(zhì)量管理人員的嚴(yán)格監(jiān)督，以確保各環(huán)節(jié)處于受控狀態(tài)。此外，質(zhì)控及數(shù)據(jù)審核人員應(yīng)及時反饋質(zhì)控結(jié)果，各環(huán)節(jié)負(fù)責(zé)人也要及時跟進(jìn)。對不符合要求的情況，應(yīng)立即查找原因，并采取必要的糾正措施，確保措施得到及時有效的落實(shí)。同時，針對新出現(xiàn)的問題，應(yīng)立即展開研究并制定解決方案，以確保實(shí)驗(yàn)室工作的連續(xù)穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的可靠性。根據(jù)不符合質(zhì)控結(jié)果情況，及時采取糾正措施，對于糾正后的質(zhì)量情況，應(yīng)重新組織質(zhì)量驗(yàn)證，當(dāng)新質(zhì)控結(jié)果符合要求后方可進(jìn)行新的樣品分析[6]。

3 結(jié)語

本文通過研究食用油黃曲霉毒素B1中檢測過程對檢測方法、檢測儀器、免疫親和柱、質(zhì)控樣、標(biāo)準(zhǔn)溶液的選擇等重要環(huán)節(jié)的質(zhì)控要點(diǎn)，提出了質(zhì)量關(guān)鍵控制要點(diǎn)和應(yīng)采取的具體方法，總結(jié)了針對各質(zhì)控要求可采取的質(zhì)量控制方法。同時提出了通過加強(qiáng)人員培訓(xùn)及監(jiān)督、優(yōu)化崗位設(shè)置和重視結(jié)果反饋和跟蹤改進(jìn)三方面提高黃曲霉毒素B1檢測質(zhì)量和效率，以期為在新進(jìn)或新上崗人員的培訓(xùn)、人員監(jiān)督、質(zhì)量監(jiān)控等方面提供了質(zhì)量控制方案。

作者簡介

莫星憂，碩士研究生，助理研究員，研究方向?yàn)槭称芳庸づc安全。

呂柏東，通信作者，碩士研究生，助理研究員，研究方向?yàn)槭称芳庸づc安全。

（責(zé)任編輯：張瑞洋）