八種植物生長調節(jié)劑在桃果實上的殘留及膳食攝入風險評估

收稿日期：2024-04-01

基金項目：國家現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系建設專項基金項目（CARS-30-5-03）；江蘇省農業(yè)科技自主創(chuàng)新基金項目[CX（23）1015]

作者簡介：何 欣（1996-），女，江蘇連云港人，碩士研究生，研究方向為農產品質量與安全。（E-mail）l934641723@qq.com

通訊作者：余向陽，（E-mail）yuxy@jaas.ac.cn；陳小龍，（E-mail）20140008@jaas.ac.cn

摘要： 植物生長調節(jié)劑已廣泛應用于中國桃生產中，但在桃樹上已登記的植物生長調節(jié)劑產品僅多效唑·甲哌鎓，且中國無桃果實中植物生長調節(jié)劑最大殘留限量標準，由于登記的植物生長調節(jié)劑產品少，缺少安全間隔期、用藥間隔期等信息，可能會導致盲目用藥，增加殘留與膳食風險。為明確中國桃主產區(qū)桃果實中植物生長調節(jié)劑殘留現(xiàn)狀，本研究采集中國13個桃主產區(qū)420份樣品，針對8種植物生長調節(jié)劑開展殘留情況調查與慢性膳食攝入風險評估，并對不同產地、不同時間殘留情況進行分析。結果表明，中國桃主產區(qū)果實樣品中植物生長調節(jié)劑殘留檢出率達到71.4%，8種植物生長調節(jié)劑檢出率分別為多效唑60.0%、矮壯素21.7%、胺鮮酯8.1%、復硝酚鈉6.7%、赤霉素5.0%、噻苯隆1.0%、氯吡脲1.0%、烯效唑0.7%。樣品總體殘留檢出率較高，慢性膳食攝入風險為0.001 0%～0.360 8%，對一般人群為“無不可接受風險”。中國桃不同主產區(qū)、不同時間桃果實中植物生長調節(jié)劑殘留種類與殘留量差異較大，南方地區(qū)應重視露地栽培桃樹7月份的多效唑的使用，北方地區(qū)應關注設施栽培桃樹5月份的植物生長調節(jié)劑的使用。建議農業(yè)技術推廣人員根據(jù)地域、栽培模式、環(huán)境氣候的差別，指導種植戶科學使用植物生長調節(jié)劑。為保障中國居民膳食安全，應盡快制定桃果實中植物生長調節(jié)劑最大殘留限量標準。

關鍵詞： 桃；植物生長調節(jié)劑；殘留；風險評估

中圖分類號： TQ452；S662.1"" 文獻標識碼： A"" 文章編號： 1000-4440（2024）10-1962-08

Residues and dietary intake risk assessment of eight plant growth regulators in peach fruits

HE Xin^{1，2，3}， CHEN Jian^2，3， LI Yong^2，3， SONG Lixiao^2，3， WANG Donglan^2，3 YU Xiangyang^1，2，3， CHEN Xiaolong^2，3

（1.School of Ocean Food and Biological Engineering， Jiangsu Ocean University， Lianyungang 222005， China;2.Institute of Food Safety and Nutrition， Jiangsu Academy of Agricultural Sciences， Nanjing 210014， China;3.State Key Laboratory Cultivation Base， Ministry of Science and Technology/Jiangsu Key Laboratory for Food Quality and Safety， Nanjing 210014， China）

Abstract： Plant growth regulators have been widely used in peach production in China， but only one registered plant growth regulator， paclobutrazol·methylpyrazine， has been found on peaches. Additionally， there is no maximum residue limit standard for plant growth regulators on peaches in China. The small number of registered plant growth regulator products and the lack of information such as safety intervals and medication intervals may lead to indiscriminate drug use， increasing the risk of residue and diet. To clarify the current situation of plant growth regulators residue on peach fruits in China’s main peach production areas， we conducted a survey on the residue of eight plant growth regulators in 420 samples from 13 peach production areas， and analyzed the differences in production areas. The results showed that the detection rate of residual plant growth regulators in peach fruits in the main production areas of China reached 71.4%， with pesticide detection rates of 60.0% for paclobutrazol， 21.7% for chlormequat， 8.1% for diethyl aminoethyl hexanoate， 6.7% for sodium nitrophenol， 5.0% for gibberellin， 1.0% for thidiazuron， 1.0% for forchlorfenuron， and 0.7% for uniconazole. The overall residual detection rate was high. The risk of chronic dietary intake was 0.001 0%-0.360 8%， which was no unacceptable risk for the general population. There were great differences in the types and amounts of plant growth regulator residues in peach fruits in different main producing areas and at different times in China. The southern region should pay attention to the use of paclobutrazol in peach trees cultivated in open field in July， and the northern region should pay attention to the use of plant growth regulators in peach trees cultivated in facilities in May. It was suggested that agricultural technology extension workers should guide growers to use plant growth regulators scientifically according to the differences in geography， cultivation modes and environmental climate. In order to ensure the dietary safety of Chinese residents， the maximum residue limit standard of plant growth regulators in peach fruits should be formulated as soon as possible.

Key words： Prunus persica （L.） Batsch;plant growth regulator;residue;risk assessment

植物生長調節(jié)劑（PGR）按功能可分為3大類：生長抑制劑、生長促進劑和生長延緩劑^[1-2]。外源施加PGR可改變桃樹的發(fā)育進程，如抑制新梢生長、打破休眠、促進花芽分化、增加結果母枝、提高種子和新梢的淀粉含量等^[3-6]。與傳統(tǒng)農藥相比，PGR不僅毒性較低，而且可以有效改善作物品質，提高作物抗性等，因此被廣泛應用于桃樹栽培中。據(jù)統(tǒng)計，截至2024年6月28日，中國登記的PGR產品有1 906個，其中原藥238個，制劑1 668個^[7]，涉及54個有效成分，但桃生產中登記的PGR僅多效唑·甲哌鎓。由于登記的產品少，桃種植戶施用其他調節(jié)劑時常參照其已登記作物的用藥方案用藥，可能會導致PGR施用過量甚至濫用，從而影響桃果實品質和食用安全^[8]。相關研究結果表明，PGR會產生生殖毒性、肝腎毒性和免疫毒性等^[9-11]，甚至有些PGR有致癌、致畸、致突等毒性^[12]。為保障居民膳食安全，中國制定了蘋果、葡萄、西瓜、橙等11種水果中PGR最大殘留限量標準（GB 2763-2021）^[13]，但還未制定桃果實中PGR的最大殘留限量標準。由于登記的PGR產品少，缺乏安全用藥指導且無最大殘留限量標準，實際生產中桃農違規(guī)使用的PGR種類多，實際桃生產中PGR殘留狀況不清、風險不明。本研究采集中國13個桃主產區(qū)共420份鮮桃樣品，對8種PGR進行了殘留檢測與膳食攝入風險分析，為保障桃膳食安全與PGR在桃生產上的科學使用提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

8種PGR標準品（純度≥95%，德國Dr.Ehrenstorfer公司產品）、乙腈（德國Merck公司產品）、甲醇（德國Merck公司產品）、甲酸銨（美國Fisher公司產品）均為色譜純，無水硫酸鎂（天津Agela有限公司產品）、C18（天津Agela有限公司產品）、氯化鈉（國藥集團化學試劑有限公司產品）均為分析純，試驗用水均為超純水。

1.2 儀器與設備

6410-1200三重四極桿串聯(lián)質譜（美國Agilent公司產品），TG16-WS離心機（長沙湘智離心機儀器有限公司產品），IKA組織研磨儀（德國IKA公司產品），Direct-Q 5 UV型超純水系統(tǒng)（美國Millipore公司產品）。

1.3 鮮桃樣品采集

按照GB/T 8855^[14]規(guī)定的取樣方法，于2023年分別從江蘇省、遼寧省、河北省、山東省、廣西壯族自治區(qū)、河南省、四川省、福建省、湖北省、浙江省、北京市、甘肅省、陜西省共13個桃主產地采集了420份鮮桃樣品，采樣點覆蓋中國桃栽培主產地面積的90%。桃樣品成熟度為市售桃果實的8成，每個果園按照五點取樣法進行取樣，每份樣品至少3 kg，采集后及時冷鏈運回實驗室。

1.4 樣品前處理

桃果實去核后將整果（包括果肉和果皮）加少許干冰研磨5 min，混勻，于-20 ℃冰箱保存。樣品前處理方法按照文獻[15]與文獻[16]的專利方法改進，稱取10 g桃果實粉碎后樣品，置于50 mL離心管中，加入20 mL乙酸-乙腈溶液（1%），振蕩2 min，超聲波提取15 min，加入3 g無水MgSO4和1 g NaCl，渦旋振蕩1 min，5 000 r/min離心5 min，取1 mL上清液，加入0.15 g無水MgSO4和0.05 g C18，振蕩2 min，5 000 r/min離心5 min，過0.22 μm有機系濾膜，用純水稀釋50倍后待測。

1.5 液相色譜串聯(lián)質譜檢測方法

色譜條件：ACQUITY UPLC HSS T3色譜柱（美國Waters公司產品），流動相A為甲酸銨溶液（2 mmol/L），流動相B為甲醇。色譜柱規(guī)格2.1 mm×100.0 mm，1.8 μm，溫度40 ℃，流速0.4 mL/min，進樣量1.0 μL。梯度洗脫程序^[16]為0～0.5 min，98%流動相A；0.5～6.0 min，98%～10%流動相A；6.0～8.0 min，10%流動相A；8.0～13.0 min，10%～98%流動相A。

質譜條件：ESI離子源，MRM模式，掃描參數(shù)見表1，離子源溫度150 ℃，毛細管電壓0.5 kV，脫溶劑氣溫度600 ℃，脫溶劑氣流速1 000 L/h。

1.6 檢測方法驗證

以空白桃果實樣品提取凈化后溶液作為溶劑，配制基質匹配標準溶液，復硝酚鈉質量濃度分別為2.5 ng/L、10.0 ng/L、25.0 ng/L；赤霉素質量濃度分別為5.0 ng/L、20.0 ng/L、50.0 ng/L；矮壯素、胺鮮酯、多效唑、烯效唑、噻苯隆、氯吡脲質量濃度分別為0.5 ng/L、2.0 ng/L、5.0 ng/L，測定各待測PGR的峰面積，以基質匹配標準溶液質量濃度（x）為橫坐標，峰面積（y）為縱坐標，繪制各PGR的基質匹配標準曲線。通過向待測空白桃果實樣品中添加1倍定量限與4倍定量限2個濃度水平的PGR標準溶液，每個濃度3個重復，確認測定方法的準確度和精密度。

1.7 慢性膳食攝入風險評估

按照以下公式計算桃果實中PGR殘留對慢性膳食攝入風險的貢獻（%ADI）^[17]。

%ADI=STMR×0.022bw×ADI×100%（1）

公式中STMR為抽樣檢測平均殘留值（mg/kg）；0.022為居民日均桃果實消費量（kg）^[15，18]；bw為體重，按63 kg計^[19]；ADI為每日允許攝入量。由于缺少中國居民桃果實消費的大份餐數(shù)據(jù)，因此未進行急性膳食攝入風險評估。

2 結果與分析

2.1 檢測方法驗證

如表2所示，在相應的線性范圍內質量濃度與其峰面積間具有良好的線性關系，相關系數(shù)≥0.998 7。如表3所示，8種PGR的平均回收率在60.0%至100.0%之間，相對標準偏差在0至13.3%之間，均小于15.0%，符合中華人民共和國原農業(yè)部第2386號公告《農藥殘留檢測方法國家標準編制指南》中關于農藥殘留檢測的要求，說明檢測方法可靠。8種PGR提取離子色譜圖見圖1。

2.2 桃果實中8種植物生長調節(jié)劑總體檢出水平

420份樣品中，共有300份樣品檢出1種或多種PGR，總體檢出率達71.4%，單個樣品最多檢出4種PGR。如圖2所示，檢出1種、2種、3種與4種PGR殘留的樣品個數(shù)（檢出率）分別為201個（47.9%）、72個（17.1%）、19個（4.5%）與8個（1.9%）。由表4可知，8種PGR檢出率由高到低排序分別為多效唑（60.0%）、矮壯素（21.7%）、胺鮮酯（8.1%）、復硝酚鈉（6.7%）、赤霉素（5.0%）、噻苯?。?.0%）、氯吡脲（1.0%）、烯效唑（0.7%）。檢出的PGR中 81.7%為植物生長延緩劑（多效唑、矮壯素），主要原因是種植戶為防止桃樹旺長^[20]，應用植物生長延緩劑控制其新梢生長。對比甜瓜中多效唑檢出率（11.48%）^[21]，桃果實中多效唑殘留風險值得關注。另外，桃果實中矮壯素和赤霉素檢出率大于葡萄中矮壯素檢出率（5.3%）和赤霉素檢出率（2.6%）^[22]。復硝酚鈉在冬棗、櫻桃、藍莓和葡萄中的檢出率超過60.0%^[23-24]，氯吡脲在獼猴桃中的檢出率為37.19%^[25]，相對而言，桃果實中復硝酚鈉和氯吡脲的殘留率較低。

2.3 桃果實中8種植物生長調節(jié)劑總體超標水平

由于中國還未制定桃果實中植物生長調節(jié)劑最大殘留限量標準，因此無法判定是否超標。從《食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量》（GB-2763）可知，除赤霉素外中國已在其他作物中制定了相關PGR最大殘留限量值（表4），如多效唑在蘋果、荔枝果實中最大殘留限量值為0.50 mg/kg，杧果中最大殘留限量值為0.05 mg/kg，本研究中桃果實中多效唑殘留最大值為1 342.6 μg/kg，超過了蘋果、荔枝、杧果最大殘留限量值；多效唑殘留平均值為63.4 μg/kg，超過了杧果最大殘留限量值，因此中國亟需制定桃果實上多效唑的最大殘留限量值。復硝酚鈉在桃果實中檢出的殘留量最大值為123.2 μg/kg，檢出率6.7%，參照橙最大殘留限量值0.10 mg/kg（100.00 μg/kg），復硝酚鈉在桃果實中殘留超標。矮壯素、胺鮮酯、氯吡脲、烯效唑的最大檢出值分別為418.1 μg/kg、44.6 μg/kg、2.3 μg/kg、25.9 μg/kg，參照已制定作物的最大殘留限量值，無超標現(xiàn)象。

2.4 桃果實中植物生長調節(jié)劑慢性膳食攝入風險評估

由表5可知，中國13個桃主產區(qū)8種PGR慢性膳食攝入風險值為0.001 0%～0.360 8%，遠低于100%，對一般人群為“無不可接受風險”。復硝酚鈉慢性膳食攝入風險值相對較高，主要原因是復硝酚鈉的每日允許攝入量ADI值相對更低，毒性相對較大，因此需要更加關注復硝酚鈉的慢性膳食攝入風險。

2.5 不同地域桃果實中植物生長調節(jié)劑殘留差異

不同地域植物生長調節(jié)劑檢出差異比較采用χ²檢驗，兩兩比較采用DUNN test檢驗，通過Bonferroni校正法調整顯著性值（P＜0.05）。結果如圖3所示，陜西、河南桃主產區(qū)桃果實中多效唑殘留水平與其他?。ㄊ?、自治區(qū)）之間具有顯著差異，陜西桃主產區(qū)桃果實中檢出多效唑殘留量最大值高達1 342.6 μg/kg，急性膳食攝入風險相對較大；河南桃主產區(qū)桃果實中檢出多效唑殘留量平均值為540.0 μg/kg，應加強河南、陜西兩地桃主產區(qū)多效唑施用指導。甘肅桃主產區(qū)桃果實中噻苯隆殘留水平與其他?。ㄊ?、自治區(qū)）之間具有顯著差異，雖然桃果實中噻苯隆殘留平均值相對其他?。ㄊ?、自治區(qū)）高，但總體檢出量均較低。總體上河北、遼寧、江蘇桃主產區(qū)桃果實中矮壯素殘留量平均值低，與各?。ㄊ小⒆灾螀^(qū)）之間無顯著差異，但個別樣品殘留量高，因此應關注河北、遼寧、江蘇3地桃主產區(qū)桃果實中矮壯素的急性膳食攝入風險，加強矮壯素施用指導。13個?。ㄊ小⒆灾螀^(qū)）桃主產區(qū)桃果實中赤霉素殘留水平無顯著性差異，但遼寧個別樣品赤霉素殘留水平相對較高，應關注遼寧桃主產區(qū)桃果實中赤霉素急性膳食攝入風險。

2.6 不同時間段植物生長調節(jié)劑殘留差異

如圖4所示，采樣時間集中于2023年5-9月，按照8種PGR總體檢出量平均值進行匯總，總體檢出量平均值按月份分布規(guī)律為7月＞5月＞6月，不同產地檢出量平均值時間分布規(guī)律具有差異性，遼寧5月檢出量平均值最高，山東6月檢出量平均值最高，江蘇7月檢出量平均值最高。不同月份檢出的PGR種類不同，總體情況是5月份檢出的殘留植物生長調節(jié)劑以多效唑、赤霉素、復硝酚鈉、矮壯素為主，6月份和8月份以多效唑為主。不同月份PGR檢出量不同與當?shù)卦耘啻胧┫嚓P。遼寧、山東兩省5-6月桃樹以早熟設施栽培為主，桃幼樹營養(yǎng)生長旺盛，枝條年生長量大，樹冠郁閉，通風透光不良^[26]，需要施用多效唑或矮壯素來抑制營養(yǎng)生長促進生殖生長。江蘇省7月份植物生長調節(jié)劑檢出量高，主要是因為該省桃樹以露地栽培為主，夏季高溫高濕，常遇連續(xù)陰雨天氣。連續(xù)陰雨天光照不足，易導致桃樹新梢徒長^[27]，需要施用多效唑來抑制營養(yǎng)生長，提高葉片光合能力^[28]。因此應根據(jù)不同植物生長調節(jié)劑的用途，加強分類施用指導，提高植物生長調節(jié)劑使用效率，減少殘留，保證食品安全。

3 結論與建議

中國主產區(qū)桃果實中PGR殘留檢出率達到71.4%，8種PGR檢出率由高到低排序為多效唑（60.0%）、矮壯素（21.7%）、胺鮮酯（8.1%）、復硝酚鈉（6.7%）、赤霉素（5.0%）、噻苯?。?.0%）、氯吡脲（1.0%）、烯效唑（0.7%），慢性膳食攝入風險值為0.001 0%～0.360 8%，遠低于100%，對一般人群為“無不可接受風險”。但由于缺少中國居民食用桃果實大份餐數(shù)據(jù)，無法進行急性膳食攝入風險分析，但桃果實中檢出植物生長調節(jié)劑殘留量較高，為保障中國居民膳食安全，亟需制定桃果實中PGR最大殘留限量標準。不同地域、不同月份植物生長調節(jié)劑殘留種類與殘留量具有差異，農技推廣人員應根據(jù)地域、栽培模式、環(huán)境氣候的差別，科學指導種植戶使用PGR。如加強河南、陜西桃主產地多效唑的施用指導，加強廣西、河北、遼寧與江蘇桃主產地矮壯素的施用指導。桃樹上已登記的PGR僅多效唑·甲哌鎓，無法滿足桃的生產需求，建議農藥企業(yè)按照需求進行相關登記，明確用藥量、用藥時間與安全間隔期，進而保障桃生產需求。

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（責任編輯：黃克玲）