大蒜素對黃鱔生長和非特異性免疫影響的研究

摘要 為研究大蒜素對黃鱔生長和非特異性免疫的影響，以體重20.25±0.71 g的黃鱔為研究對象，將0（S1）、25（S2）、50（S3）和100（S4） mg/kg不同濃度的大蒜素添加到黃鱔基礎(chǔ)飼料中，網(wǎng)箱飼養(yǎng)60 d，測定其生長性能和血清中的非特異性免疫指標。結(jié)果顯示，隨著大蒜素添加量的增加，試驗組增重率和特定生長率均高于對照組，其中添加量為50和100 mg/kg時效果較好。隨著時間的推移，試驗組相關(guān)免疫酶活性與對照組的差異開始逐漸顯現(xiàn)，飼喂時間越長，差異相對越明顯；第60天，試驗組S3和S4血清中的T-AOC、SOD、CAT和LSZ活性均明顯高于S1組（Plt;0.05）。這表明飼料中添加一定濃度的大蒜素可促進黃鱔生長，提高機體免疫力，以添加量在50～100 mg/kg為宜，為尋求新型、無毒害的黃鱔飼料添加劑提供參考。

關(guān)鍵詞 大蒜素；黃鱔；生長性能；非特異性免疫；藥食同源

中圖分類號 S966.4" " 文獻標識碼 A" " 文章編號 1007-7731（2024）16-0096-05

DOI號 10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2024.16.023

Effects of allicin on the growth and non-specific immunity of Monopterus albus

CHENG Jing1" " LI Feng1" " GU Yonghao2

（1Shanghai Vocationl College of Agriculture and Forestry， Shanghai 201600， China;

2Shanghai Tengda Rabbit Professional Cooperative， Shanghai 201415， China）

Abstract In order to study the effects of allicin on the growth and non-specific immunity of Monopterus albus， with a weight of 20.25±0.71g was used as the research object， and different concentrations of allicin （0， 25， 50， and 100 mg/kg respectivly） were added to the Monopterus albus base feed （grouped as S1， S2， S3 and S4， respectivly）， and fed in cages for 60 days. Growth performance and serum immune indexes were measured. The results showed that with the increase of allicin supplemental level， the weight gain rate and specific growth rate of experimental groups were higher than those of control group， and the supplementation of 50 and 100 mg/kg had the better effects. As time goes on， the difference of related immunoenzyme activity between the experimental groups and the control group began to gradually appear， and the longer the feeding time， the more obvious the difference was. On day 60， the activities of T-AOC， SOD， CAT and LSZ in serum of S3 and S4 of test groups were significantly higher than those of S1 group （Plt;0.05）. These indicated that adding a certain concentration of allicin in the diet could promote the growth of Monopterus albus and improve the body immunity， and the appropriate dosage of 50 to 100 mg/kg. It provided theoretical references for seeking new and non-toxic feed additives for Monopterus albus.

Keywords allicin; Monopterus albus; growth performance; non-specific immunity; homology of medicine and food

大蒜素的有效成分是大蒜油，大蒜油是通過水蒸氣蒸餾、有機溶劑提取等方法從大蒜中獲得或人工合成的物質(zhì)。經(jīng)測定，大蒜油活性成分為多種含硫化合物。因大蒜油為液態(tài)，不宜直接加入飼料中，故常將其吸附于載體當(dāng)中制成固態(tài)的添加劑，即大蒜素。大蒜素是大蒜中的主要活性成分，具有抗氧化、抗菌和抗炎等多種生物學(xué)功能，可作為誘食劑、殺菌劑使用，具有防病、促生長和提高水產(chǎn)品品質(zhì)等作用[1-2]，具有成本低、作用廣泛和無殘留等特點[3]。

大蒜素在水產(chǎn)動物生長及免疫力方面已有研究。李嬋等[4]研究幾種飼料添加劑對虹鱒免疫活性和抗氧化能力的影響，結(jié)果表明，添加不同飼料添加劑，能提高虹鱒的免疫活性和抗氧化能力，從而提高其對疾病的抵抗能力。宋文華等[5]研究了大蒜素、枸杞多糖對草魚血清非特異性免疫指標的影響，結(jié)果表明，添加一定劑量的大蒜素組草魚血清白細胞吞噬活性得到明顯提高，對其生長起到一定促進作用。呂富等[6]研究大蒜渣對異育銀鯽生長、消化酶活性及免疫功能的影響，結(jié)果表明，飼料中添加適量的大蒜渣可明顯促進異育銀鯽生長，降低飼料系數(shù)，提高蛋白酶、淀粉酶、溶菌酶和過氧化氫酶（Catalase，CAT）活性，降低丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量，而大蒜素在黃鱔方面的研究相對較少。本文旨在研究大蒜素在促進黃鱔生長，提高其免疫力中發(fā)揮的作用，為尋求新型、無毒害的黃鱔飼料添加劑提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

鱔苗來源于上海市奉賢區(qū)當(dāng)?shù)夭稉莆铮x取健康無傷、平均體重（20.25±0.71） g的個體用于試驗。

1.2 試驗設(shè)計

以飼料中不添加大蒜素為對照組（S1），在飼料中分別添加25、50和100 mg/kg作為試驗組S2、S3和S4，每組3個平行，每個平行放養(yǎng)50尾，飼養(yǎng)60 d。

1.3 飼養(yǎng)管理

該試驗在上海某合作社循環(huán)水系統(tǒng)內(nèi)進行。鱔苗引進網(wǎng)箱2 d后開始馴化。首次投喂少量的蚯蚓和鮮魚漿混合物，依照攝食情況逐漸調(diào)整投喂量以及鮮魚漿和蚯蚓的比例，直到鱔苗攝食全鮮魚漿；然后開始添加試驗飼料，并逐漸增加試驗飼料與鮮魚漿的比例，直至鱔苗穩(wěn)定攝食全試驗飼料；饑餓24 h，挑選身體健康、規(guī)格均勻的黃鱔隨機分成4組，每組設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)投放鱔苗50尾。養(yǎng)殖試驗在同一水循環(huán)系統(tǒng)的網(wǎng)箱內(nèi)進行，網(wǎng)箱規(guī)格2.0 m×1.5 m×1.0 m，試驗鱔苗初始平均重20.25±0.71 g，投喂量為魚體重的3%～5%，10 min內(nèi)食完為宜，日投喂1次（18：00—19：00），雨天停止投喂，每7 d調(diào)整一次投喂量，養(yǎng)殖試驗持續(xù)60 d。

1.4 樣品采集和指標測定

1.4.1 生長性能指標測定" 試驗初始和結(jié)束時分別對各網(wǎng)箱進行計數(shù)，然后從每個網(wǎng)箱中隨機抽取5尾黃鱔計算增重率、特定生長率和臟體比，并計算每個網(wǎng)箱黃鱔的成活率，如式（1）～（4）。

增重率（%）=（末均重-初均重）/初均重×100 （1）

特定生長率（%）=[In（末均重）-In（初均重）]/試驗天數(shù)×100 （2）

成活率（%）=末魚尾數(shù)/初魚尾數(shù)×100 （3）

臟體比（%）=內(nèi)臟重/體重×100 （4）

1.4.2 免疫指標測定" 分別在試驗第20、40和60天從每個網(wǎng)箱中隨機捕撈5尾黃鱔，尾靜脈取血置于無菌離心管中，4 ℃靜置過夜，以4 000 r/min離心10 min，取上層血清置于-80 ℃冰箱內(nèi)保存?？偪寡趸芰Γ═otal antioxidant capacity，T-AOC）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、CAT、MDA和溶菌酶（lysozyme，LSZ）均采用南京建成生物試劑盒測定。

1.5 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)采用Excel軟件統(tǒng)計整理，采用SPSS 25.0對試驗數(shù)據(jù)做單因素方差分析，用Duncan’s法進行多重檢驗，試驗結(jié)果用“平均值±標準誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 大蒜素對黃鱔生長性能的影響

由表1可知，各試驗組黃鱔成活率稍高于對照組，差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05）；增重率和特定生長率隨著試驗組中大蒜素添加量的增加而逐漸提高，以S3、S4試驗組效果較好，增重率和特定生長率均明顯高于S1組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05）；臟體比呈現(xiàn)逐漸下降趨勢，S3和S4試驗組間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05），但都明顯低于S1組（Plt;0.05）。表明大蒜素對黃鱔生長有一定的促進作用。

2.2 對黃鱔血清非特異性免疫相關(guān)酶活性的影響

由表2可知，在第20天，CAT活性隨著大蒜素添加量的增加而逐漸提高，S3和S4試驗組明顯高于S1組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05）；MDA活性逐漸下降，S3和S4試驗組明顯低于S1組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05）。其余試驗組的酶活性在組間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05）。

由表3可知，在第40天，T-AOC、SOD和CAT活性均隨著大蒜素添加量的增加而逐漸提高，S4試驗組效果最好，明顯高于S1組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05）；MDA活性隨著大蒜素添加量的增加而逐漸下降，S3和S4試驗組明顯低于S1組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05）。

由表4可知，在第60天，T-AOC、SOD、CAT和LSZ活性均隨著大蒜素添加量的增加而逐漸提高，S3和S4試驗組效果較好，明顯高于S1組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05）；MDA活性隨著大蒜素添加量的增加而逐漸下降，S3和S4試驗組明顯低于S1組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（Plt;0.05）。

3 結(jié)論與討論

3.1 大蒜素對黃鱔生長性能的影響

大蒜素的生物活性成分是大蒜油，富含多種含硫化合物，具有獨特的氣味，可作為誘食劑增強動物的食欲，從而提高攝食量[7-8]；可作為殺蟲殺菌劑、品質(zhì)改良劑，應(yīng)用于動物生產(chǎn)和綠色食品中[9]。近年來，許多學(xué)者利用大蒜素作為飼料添加劑在鯉魚[10]、鯽魚[11]、羅非魚[12]、雜交鱘[13-14]、中華絨螯蟹[15]和大菱鲆幼魚[16]等水產(chǎn)動物上做了大量試驗，結(jié)果表明大蒜素對水產(chǎn)動物生長有促進作用。

本次試驗結(jié)果表明，試驗組與對照組成活率的差異不明顯，添加一定量的大蒜素可以明顯提高黃鱔的特定生長率和增重率，以添加50和100 mg/kg效果較佳。這與何磊[14]探究大蒜素對雜交鱘魚幼魚生長影響的試驗結(jié)果相似。原因可能是大蒜素具有誘食性，可引誘黃鱔攝食，進而增加攝食量。陳璟怡等[17]研究表明，大蒜素可以促進動物體內(nèi)有益菌的生長，提高消化道內(nèi)消化酶的活性，進而提高營養(yǎng)物質(zhì)的消化率。此外，大蒜素的抑菌、增強免疫力等作用為黃鱔身體健康、活動性強以及良好的食欲和消化能力起到一定的輔助作用[18]。

3.2 大蒜素對黃鱔非特異性免疫的影響

魚類作為低等脊椎動物，由抗氧化系統(tǒng)、溶菌酶等組成的非特異性免疫在其免疫系統(tǒng)中扮演非常重要的角色[16，19]。SOD、CAT是抗氧化酶系統(tǒng)中的重要酶，能清除體內(nèi)超氧陰離子自由基、羥自由基和過氧化氫等成分，保護動物機體[20]；MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)鏈終止階段產(chǎn)生的小分子物質(zhì)，其變化趨勢可以間接反映動物機體的抗氧化能力強弱[21]；T-AOC是機體抗氧化能力的重要指標，其活性與機體氧自由基代謝情況和對外來刺激的代償能力有關(guān)[22]；LSZ具有抗菌活性，廣泛存在于水產(chǎn)動物的血清、黏液和吞噬細胞的溶酶體顆粒中，能水解革蘭氏陽性菌的細胞壁，進而起到殺菌作用，其活性高低在一定程度上可以反映水產(chǎn)動物非特異性免疫能力的強弱[23-24]。

本次試驗研究發(fā)現(xiàn)，隨著時間的推移以及大蒜素添加量的增加，與對照組相比，各試驗組T-AOC、SOD、CAT和LSZ活性逐漸提高，差異越來越明顯。第60天，添加50和100 mg/kg大蒜素試驗組血清中T-AOC、SOD、CAT和LSZ的活性均明顯高于對照組，MDA活性明顯低于對照組。這表明飼料中添加50和100 mg/kg大蒜素能明顯提高黃鱔非特異性免疫力，這與陳見春[25]、劉英杰[26]和康淑媛[27]的試驗結(jié)果相似。目前，大蒜素已被報道通過多種機制在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮積極作用。相關(guān)研究表明，大蒜素的有效成分二硫醚、三硫醚能夠穿過致病菌細胞膜與含有巰基的酶相互作用，不可逆地抑制巰基蛋白酶的活性，影響細菌正常的生物代謝，降低細菌分泌物生成和黏附能力；大蒜素可以攻擊不同細菌，破壞細菌必要生存結(jié)構(gòu)，抑制細菌代謝途徑，發(fā)揮不同程度的抑菌作用；攝入適量大蒜素可增加內(nèi)源性抗氧化劑合成量，或減少氧化劑的合成量，來增強內(nèi)部抗氧化能力[28-29]。此外，大蒜素還可以上調(diào)有關(guān)抗氧化酶和解毒因子的表達，通過Nrf2-ARE抗氧化反應(yīng)通路緩解氧化應(yīng)激。

本文通過在黃鱔基礎(chǔ)飼料中添加不同含量的大蒜素，研究大蒜素對黃鱔生長和非特異性免疫方面的影響，結(jié)果表明，大蒜素對黃鱔生長和非特異性免疫有正向影響，建議添加量以50～100 mg/kg為宜。

參考文獻

[1] 鄭陶生，蔣艾青. 大蒜素在水產(chǎn)動物中的應(yīng)用[J]. 中國飼料，2004（22）：22-23.

[2] 梅四衛(wèi)，朱涵珍. 大蒜素的研究進展[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報，2009，25（9）：97-101.

[3] 陳杰，趙華彪，馬榮江，等. 大蒜素：水產(chǎn)養(yǎng)殖的綠色添加劑[J]. 貴州畜牧獸醫(yī)，2022，46（6）：23-25.

[4] 李嬋，徐奇友，許紅，等. 幾種飼料添加劑對虹鱒（Oncrhynchus mykiss Walbaum）免疫活性和抗氧化能力的影響[J]. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2008，35（3）：456-461.

[5] 宋文華，張濤，富麗靜，等. 大蒜素、枸杞多糖對草魚血清非特異性免疫指標的影響[J]. 河北漁業(yè)，2011（6）：12-18，21.

[6] 呂富，黃金田，丁研，等. 大蒜渣對異育銀鯽生長·消化酶活性及免疫功能的影響[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（26）：12928-12930.

[7] 胡暉. 新型飼料添加劑大蒜素的應(yīng)用研究[J]. 江西飼料，2009（6）：20-22.

[8] 鄭陶生，蔣艾青. 大蒜素在水產(chǎn)動物中的應(yīng)用[J]. 中國飼料，2004（22）：22-23.

[9] SALEHI B，ZUCCA P，ORHAN I E，et al. Allicin and health：a comprehensive review[J]. Trends in food science amp; technology，2019，86：502-516.

[10] 曾立東，鄭淑藍. 大蒜素對鯉魚生長性能的影響[J]. 黑龍江水產(chǎn)，2022，41（4）：20-22.

[11] 康淑媛，王荻，盧彤巖. 大蒜素對鯽非特異免疫指標影響的研究[J]. 大連海洋大學(xué)學(xué)報，2016，31（2）：168-173.

[12] 楊麗. 大蒜素在羅非魚魚苗培育中的應(yīng)用試驗[J]. 河北漁業(yè)，2009（7）：36-37.

[13] 吳春昊. 大蒜素對鱘魚生長性能、體成分及肌肉品質(zhì)的影響[J]. 中國飼料，2021（10）：62-65.

[14] 何磊. 大蒜素對雜交鱘生長性能的影響[J]. 黑龍江水產(chǎn)，2023，42（3）：182-184.

[15] 程慧慧，蔣廣震，鄭肖川，等. 五種誘食劑對中華絨螯蟹誘食效果的研究[J]. 水生生物學(xué)報，2019，43（2）：395-401.

[16] 李會濤，黃濱，劉寶良，等. 大蒜素對大菱鲆幼魚生長及抗病力的影響[J]. 水產(chǎn)科學(xué)，2020，39（4）：539-544.

[17] 陳璟怡，蘇奕婧，孫弟芬，等. 大蒜素的生物學(xué)活性及在養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 飼料工業(yè)，2023，44（1）：30-36.

[18] 楊坤，姜寧，張愛忠，等. 添加不同甲烷抑制劑對綿羊瘤胃發(fā)酵指標及甲烷產(chǎn)量的影響[J]. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報，2016，28（6）：16-20.

[19] 艾慶輝，麥康森. 魚類營養(yǎng)免疫研究進展[J]. 水生生物學(xué)報，2007，31（3）：425-430.

[20] 魯雙慶，劉少軍，劉紅玉，等. Cu2+對黃鱔肝臟保護酶SOD、CAT、GSHPX活性的影響[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué)，2002，9（2）：138-141.

[21] 車常寶，石勇，胡毅，等. 兩種復(fù)合免疫增強劑對黃鱔生長、免疫及生理生化指標的影響[J]. 飼料工業(yè)，2020（6）：43-48.

[22] 王志平，張士璀，王光鋒. 魚類補體系統(tǒng)成分及補體特異性和功能的研究進展[J]. 水生生物學(xué)報，2008，32（5）：760-769.

[23] 李金龍，胡毅，郇志利，等. 復(fù)方中草藥對黃鱔生長、非特異性免疫及腸道消化酶活性的影響[J]. 飼料工業(yè)，2013（16）：26-30.

[24] GRINDE B，JOLLèS J，JOLLèS P. Purification and characterization of two lysozymes from rainbow trout （Salmo gairdneri）[J]. European journal of biochemistry，1988，173（2）：269-273.

[25] 陳見春. 大蒜素對鯉魚免疫力的影響[J]. 黑龍江水產(chǎn)，2023，42（1）：31-33.

[26] 劉英杰. 大蒜素對鯉魚生長性能和抗氧化能力的影響[J]. 中獸醫(yī)學(xué)雜志，2021（6）：14-16.

[27] 康淑媛. 大蒜素對鯽免疫及消化功能影響的研究[D]. 上海：上海海洋大學(xué)，2016.

[28] ROSHAN N，RILEY T V，HAMMER K A. Antimicrobial activity of natural products against Clostridium difficile invitro[J]. Journal of applied microbiology，2017，123（1）：92-103.

[29] ASDAQ S M，INAMDAR M N. Pharmacodynamic and pharmacokinetic interactions of propranolol with garlic （Allium sativum） in rats[J]. Evidence-based complementary and alternative medicine，2011，2011：824042.

[30] ALBRAKATI A. Aged garlic extract rescues ethephon-induced kidney damage by modulating oxidative stress，apoptosis，inflammation，and histopathological changes in rats[J]. Environmental science and pollution research，2021，28（6）：6818-6829.

（責(zé)任編輯：楊 歡）