比較分析血清學鑒定與全面生化反應(yīng)在沙門氏菌檢驗中的應(yīng)用

【摘要】 目的 比較血清學鑒定與全面生化反應(yīng)在沙門氏菌檢驗中的應(yīng)用效果。方法 選取2022年9月—2023年7月贛州經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)疾病預防控制中心收集的80例疑似沙門氏菌感染患者標本為研究對象，對所有患者均實施血清學鑒定及全面生化反應(yīng)檢測，以細菌培養(yǎng)結(jié)果作為沙門氏菌感染檢測“金標準”，對比2種檢測方式的檢測價值及效能。結(jié)果 全面生化反應(yīng)檢驗出39例真陽性患者，27例真陰性患者；血清學鑒定檢驗出42例真陽性患者，29例真陰性患者；全面生化反應(yīng)+血清學鑒定檢驗出46例真陽性患者，31例真陰性患者。血清學鑒定檢驗靈敏度、特異度及準確度高于全面生化反應(yīng)，全面生化反應(yīng)+血清學鑒定檢驗靈敏度、特異度及準確度高于血清學鑒定、全面生化反應(yīng)檢驗，但差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）。結(jié)論 在沙門氏菌檢驗中實施血清學鑒定與全面生化反應(yīng)方式檢驗，均有一定的價值。與單項全面生化反應(yīng)檢驗或單項血清學鑒定檢驗方式相比，兩者聯(lián)合檢驗的方式準確度及診斷效能高，值得推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 沙門氏菌；血清學鑒定；全面生化反應(yīng)；酶聯(lián)免疫吸附法

文章編號：1672-1721（2024）26-0067-04" " "文獻標志碼：A" " "中國圖書分類號：R378.2+2

沙門氏菌屬于臨床上常見的食源性致病菌，對外界適應(yīng)能力極強，能夠大范圍繁殖，可以在動物與人類的腸道中寄生。患者感染沙門氏菌后常會出現(xiàn)惡心、嘔吐等癥狀，若得不到有效干預，隨著病菌繁殖、進展，可引發(fā)脫水、休克等情況，嚴重威脅患者生命健康[1]。在臨床診療過程中，及早進行診斷、明確病因，根據(jù)病因積極采取相應(yīng)的治療措施，對于臨床治療沙門氏菌感染患者具有十分重要的意義[2]。目前，臨床檢驗沙門氏菌方式較多，通過選擇性富集步驟得出可疑菌落血清學及生化檢驗結(jié)果能較好檢驗病菌，但采用該種傳統(tǒng)檢驗方式所需時間長。若患者存在食物感染、中毒等情況，無法及時取得檢驗結(jié)果，在一定程度上延緩治療過程[3]。需尋找更為高效、簡便、快捷的檢驗方式，以更好、更快地得出檢驗結(jié)果，為臨床診療工作提供必要的依據(jù)[4]?；诖?，本研究比較分析血清學鑒定、全面生化反應(yīng)及二者聯(lián)合檢查在沙門氏菌檢驗中的應(yīng)用價值，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2022年9月—2023年7月贛州經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)疾病預防控制中心收集的80例疑似沙門氏菌感染患者標本，男性47例，女性33例；年齡21～75歲，平均年齡（45.15±4.26）歲；病程1～6 d，平均病程（3.04±1.02）d；體質(zhì)量指數(shù)18.46～26.37 kg/m2，平均體質(zhì)量指數(shù)（21.89±1.31）kg/m2。本次研究經(jīng)過醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審批。

納入標準：存在惡心、嘔吐等臨床癥狀；檢查可見血、黏液；伴有水樣腹瀉等癥狀，發(fā)作3～5次/d；知情本次研究，已簽署研究同意書。

排除標準：惡性腫瘤、自身免疫性疾??；有血液系統(tǒng)疾病或嚴重肝、腎功能異常及凝血功能障礙；存在認知障礙或是患有精神類疾病，無法順利進行交流溝通；近期手術(shù)及外傷史、腦出血史或存在抗凝禁忌；治療依從性差，無法配合相關(guān)檢驗工作開展或中途退出研究。

1.2 方法

全面生化反應(yīng)。根據(jù)患者實際情況，相應(yīng)采集尿液、糞便或嘔吐物等作為標本進行檢驗。在檢驗過程中，將培養(yǎng)箱（上海躍進，型號HDPN-II256）安裝在清潔、平整、通風良好位置并接通電源。將可疑群落挑出接種至三糖鐵瓊脂中，觀察接種后瓊脂所發(fā)生的反應(yīng)。若瓊脂培養(yǎng)基出現(xiàn)斜面產(chǎn)酸同時出現(xiàn)硫化氫陰性菌株，則可排除患者感染沙門氏菌。在培養(yǎng)、接種菌株過程中，應(yīng)選取蛋白陳水再將其接種至尿素瓊脂上，使用拉氨酸脫羧酶等物質(zhì)進行輔助細菌培養(yǎng)。整個培養(yǎng)、檢驗過程溫度盡可能控制在35～37 ℃，連續(xù)培養(yǎng)24 h。

血清學鑒定：于檢驗當日清晨抽取所有患者3 mL空腹靜脈血，3 000 r/min離心處理10 min后得出血清，保存低溫無菌環(huán)境下，待檢測時取出使用。實驗前先連接均質(zhì)器（寧波新芝，型號SCIENTZ-04）電源，讓設(shè)備自動處于待機狀態(tài)，使用左手將門開至最大后，右手將裝有樣品和溶劑的均質(zhì)袋放入儀器中，下沿不低于錘擊板，上沿袋口邊緣露出門蓋，放置完畢后進行關(guān)門使之密封。在控制面板上按下中速按鈕進行樣本均化，均化結(jié)束后將樣品取出進行觀察。使用顯微鏡（江南永新，型號BM2000）進行觀察，接通電源，合理調(diào)節(jié)亮度，將觀察樣本切片放置載物臺，移入管路進行對焦后進行觀察。隨后進行A～F多價O血清凝集，確定群6個O群因子血清，再給予H因子凝集，使得第一相與第二相凝集。以凝集結(jié)果作為本次血清型的判定標準，由相關(guān)檢驗醫(yī)師進行檢驗、判定。

1.3 觀察指標

全面生化反應(yīng)檢驗室液面試劑為紅色，則提示檢驗結(jié)果為陽性；若液面試劑為黃色，則提示檢驗結(jié)果為陰性。血清學鑒定檢驗過程中，0凝集效價在1∶80及以上，H凝集效價在1∶160及以上，或副傷寒沙門菌的H凝集效價在1∶80及以上，則提示檢驗結(jié)果血清呈陽性。以細菌培養(yǎng)結(jié)果作為沙門氏菌感染檢測“金標準”，對比分析不同方式檢驗下的檢驗結(jié)果以及不同檢驗方式的靈敏度、特異度及準確性。準確度=（真陽性病例數(shù)+真陰性病例數(shù)）/總病例數(shù)×100%。特異度=真陰性病例數(shù)/（真陰性病例數(shù)+假陽性病例數(shù)）×100%。靈敏度=真陽性病例數(shù)/（真陽性病例數(shù)+假陰性病例數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計學方法

本研究數(shù)據(jù)采用SPSS 23.0統(tǒng)計學軟件進行分析，符合正態(tài)分布的計量資料以x±s表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗，Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 細菌培養(yǎng)檢測結(jié)果

以細菌培養(yǎng)結(jié)果作為沙門氏菌感染檢測“金標準”，對80例患者進行細菌培養(yǎng)檢驗發(fā)現(xiàn)，存在48例真陽性沙門氏菌感染患者、32例真陰性患者。

2.2 不同檢驗方式的檢驗結(jié)果

全面生化反應(yīng)檢驗出39例真陽性患者、27例真陰性患者，存在5例假陽性、9例假陰性；單項血清學鑒定共檢驗出42例真陽性患者、29例真陰性患者，存在3例假陽性、4例假陰性；全面生化反應(yīng)+血清學鑒定共檢驗出46例真陽性患者、31例真陰性患者，存在1例假陽性、2例假陰性，見表1。

2.3 不同檢驗方式的效能

全面生化反應(yīng)檢驗靈敏度、特異度及準確度分別為81.25 %、84.38 %、82.50 %，血清學鑒定檢驗靈敏度、特異度及準確度分別為87.50%、90.63%、88.75%，全面生化反應(yīng)+血清學鑒定檢驗靈敏度、特異度及準確度分別為95.58%、96.88%、96.25%。單項血清學鑒定檢驗靈敏度、特異度及準確度高于單項全面生化反應(yīng)檢驗，全面生化反應(yīng)+血清學鑒定檢驗靈敏度、特異度及準確度均高于單項血清學鑒定及單項全面生化反應(yīng)檢驗，但差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05），見表2。

3 討論

研究顯示[5]，沙門氏菌是目前在全世界范圍內(nèi)引起食物中毒中最常見的致病菌之一。沙門氏菌屬于革蘭陰性菌，可分為6種亞型，類別、種類繁多，是人畜共患病病原體，可直接影響動物、人類發(fā)生感染，進而引起腸胃炎、血清型腸熱等疾病。相關(guān)研究顯示[6]，在美國每年140萬人以上出現(xiàn)感染沙門氏菌情況，在歐洲每年16萬人以上感染沙門氏菌。隨著人們生活方式、生活習慣的改變，沙門氏菌感染發(fā)病率逐漸升高，給人們的飲食安全及生命健康帶來了極大威脅，已逐漸成為我國較為關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。在臨床中積極做好沙門氏菌檢驗工作，對于預防疾病及救治患者等方面具有十分積極的意義。臨床檢驗沙門氏菌方式較多，包括酶聯(lián)免疫吸附法、全面生化反應(yīng)及血清學鑒定等，各自均有一定的優(yōu)勢，可在一定程度上檢測出沙門氏菌，為臨床診療提供必要的依據(jù)[7]。全面生化反應(yīng)檢驗方式主要通過生物酶催化作用來識別細菌達到檢驗的目的。血清學鑒定主要利用血清分離的方式培養(yǎng)出純種細菌再進行血清檢驗，具有高效、靈敏度高等特點。

相關(guān)研究顯示[8]，全面生化反應(yīng)檢驗能通過催化酶，使酶和反應(yīng)物溶于水發(fā)生反應(yīng)，為檢驗組織物內(nèi)物提供介質(zhì)與載體，讓其發(fā)生生物化學反應(yīng)達到檢測、識別的目的，但該種檢測方式可能受到外界環(huán)境等因素影響，進而出現(xiàn)假陽性和假陰性情況，并且檢測的時間相對較長，存在一定局限性，不適宜病情緊急患者。血清學鑒定主要通過分離方法在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)出相應(yīng)的純種細菌來進行血清檢驗，以確定病原菌種類型，達到檢測、識別的目的，具有高效、準確度較高等優(yōu)勢，可在大量樣品檢測過程中應(yīng)用，以更快地得出檢驗結(jié)果，提升臨床經(jīng)驗效率[9]。受到菌種等因素影響，采用血清學鑒定可能存在假陽性，對檢驗靈敏度產(chǎn)生影響，并且檢驗過程中制備血清時間較長，存在一定的局限性。目前，臨床逐漸將單項檢測轉(zhuǎn)變?yōu)槁?lián)合檢測[10]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[11]，全面生化反應(yīng)、血清學鑒定均有一定的優(yōu)勢，但聯(lián)合起來進行檢測可發(fā)揮出優(yōu)勢互補作用，進一步提升臨床診療效率。在本次研究中，全面生化反應(yīng)檢驗出39例真陽性患者、27例真陰性患者，血清學鑒定檢驗出42例真陽性患者、

29例真陰性患者，全面生化反應(yīng)+血清學鑒定共檢驗出46例真陽性患者、31例真陰性患者，血清學鑒定檢驗靈敏度、特異度及準確度高于全面生化反應(yīng)，全面生化反應(yīng)+血清學鑒定檢驗靈敏度、特異度及準確度高于血清學鑒定、全面生化反應(yīng)。上述組間對比，差異無統(tǒng)計學意義，與本次樣本數(shù)量較少存在相關(guān)性，仍能提示在沙門氏菌檢驗中，實施單項的血清學鑒定與全面生化反應(yīng)均能在一定程度上檢驗出病菌，但存在一定的局限性。而聯(lián)合檢測能夠大幅提升臨床檢驗的準確度及診斷效能，為臨床診療提供必要的價值。沙門氏菌屬于臨床典型的兼性厭氧菌，能在有氧狀態(tài)下生存、繁殖，也能在缺氧狀態(tài)下生存并釋放出大量的毒素，引起體內(nèi)超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、外膜蛋白等物質(zhì)表達，尤其是在缺氧狀態(tài)下，對于人體的造成的影響及損害明顯更大。在臨床檢驗中，全面生化反應(yīng)主要通過培養(yǎng)可疑菌落，對菌落的顏色、狀態(tài)等進行觀察，得出是否存在沙門氏菌感染情況；血清學鑒定通過凝集的方式收集可疑菌落、抗體，觀察顆粒沉淀等情況，得出是否感染沙門氏菌情況。2種檢驗方法均具有經(jīng)濟性高、操作簡單等特點。血清學鑒定所需時間短于全面生化反應(yīng)，故而受到的影響會小于全面生化反應(yīng)，靈敏度也高于全面生化反應(yīng)。聯(lián)合檢驗能夠?qū)?種檢驗方式的優(yōu)勢發(fā)揮出來，形成優(yōu)勢互補，有效減少外界因素帶來的干擾，進一步提升臨床疾病檢驗的準確度，為臨床診療疾病提供更為可靠的依據(jù)，利于臨床根據(jù)檢驗結(jié)果進行治療[12]。

在臨床診療中，通過鑒定沙門氏菌與沙門氏菌的分型可以在一定程度上確定沙門氏菌疾病感染來源，然后給予必要的控制及正確的靶向治療。臨床針對沙門氏菌感染暴發(fā)等情況，在短時間內(nèi)確定病原菌的分型，能夠為臨床治療沙門氏菌感染及控制沙門氏菌感染源提供依據(jù)。就整體而言，在沙門氏菌與沙門氏菌分型鑒定過程中，臨床以血清型分型檢測為主。理想的血清型分型檢驗方式不僅需要具有快速的反應(yīng)能力，還需要具備準確鑒定病原菌、追蹤傳染源等要求，但血清型分型檢驗仍存在一定缺陷。在臨床檢驗過程中，還需要不斷探尋各種新技術(shù)，補充傳統(tǒng)的血清型鑒定方式，提升臨床診療效率，為臨床治療工作提供依據(jù)。鑒于本次樣本研究數(shù)量較少，后續(xù)仍需投入更多樣本進行深入研究。

綜上所述，在沙門氏菌檢驗中積極實施血清學鑒定與全面生化反應(yīng)均有一定的價值。與單項全面生化反應(yīng)檢驗或單項血清學鑒定檢驗方式相比，兩者聯(lián)合檢驗的準確度及診斷效能高，值得在臨床診療中推廣與應(yīng)用。

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（編輯：張興亞）