• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    飼料添加牡丹籽殼對(duì)黃顙魚肝臟組織學(xué)、抗氧化酶活性和非特異性免疫的影響

    2024-11-02 00:00:00劉鹿憶王湛昌朱文歡何彎彎艾桃山張立強(qiáng)
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2024年10期

    摘要:為探究飼料中添加牡丹籽殼對(duì)黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco)抗氧化能力和非特異性免疫的影響,以飼喂商品飼料的黃顙魚為空白對(duì)照組,以飼喂含有1%和5%牡丹籽油的再制商品飼料的黃顙魚為陽(yáng)性對(duì)照組,以飼喂含有1%和5%牡丹籽殼的再制商品飼料的黃顙魚為試驗(yàn)組,養(yǎng)殖時(shí)間21 d。測(cè)定黃顙魚血清和肝臟抗氧化酶活性、血清溶菌酶活性及補(bǔ)體C3含量,并在光學(xué)顯微鏡下觀察黃顙魚肝臟組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,飼料添加1%牡丹籽殼顯著提高黃顙魚血清中超氧化物歧化酶活性(P<0.001)和補(bǔ)體C3(P<0.05)含量,黃顙魚肝臟中超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性顯著升高(P<0.001),指示肝臟氧化損傷程度的丙二醛含量顯著降低(P<0.001),黃顙魚肝臟形態(tài)結(jié)構(gòu)完好,與對(duì)照組無明顯差異。牡丹籽殼提高黃顙魚抗氧化能力和非特異性免疫的效果在5%劑量添加組更加顯著,與空白對(duì)照組相比,血清超氧化物歧化酶、肝臟超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性分別提高了100%(P<0.001)、245%(P<0.001)和176%(P<0.001),血清溶菌酶活性和補(bǔ)體C3含量分別提高了36%(P<0.001)和33%(P<0.01)。與牡丹籽油相比,飼料添加牡丹籽殼能達(dá)到與其相同的保健效果。飼料添加牡丹籽殼能有效提高黃顙魚抗氧化能力和非特異性免疫,適宜添加量為1%~5%。

    關(guān)鍵詞:牡丹籽殼;牡丹籽油;飼料添加劑;抗氧化;非特異性免疫;黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco)

    中圖分類號(hào):S963.73 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

    文章編號(hào):0439-8114(2024)10-0124-07

    DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.10.023 開放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識(shí)碼(OSID):

    Abstract: To investigate the effects of dietary peony seed shell on fish oxidation resistance and nonspecific immunity, yellow catfish were fed with 1% or 5% peony seed shell (commercial feed containing 1% or 5% peony seed shell) for 3 weeks. Meanwhile, fish fed with commercial feed only were used as the blank control group, and fish fed with 1% or 5% peony seed oil were used as positive control group. The results showed that, compared with blank control group, the activity of superoxide dismutase (P<0.001) and the content of complement C3 (P<0.05) in serum of fish fed with 1% peony seed shell increased significantly. Liver superoxide dismutase and catalase activities were higher than those of the blank control group (P<0.001), and liver malondialdehyde content decreased significantly (P<0.001). Liver histomorphology of yellow catfish was normal and intact in both the blank control group and 1% peony seed shell group, and there was no obvious difference between the two groups. Peony seed shell had a dose-dependent positive effect on promoting the antioxidant capacity and nonspecific immunity in yellow catfish, all the test indexes in the 5% peony seed shell group showed a remarkably better change. Compared with blank control group, serum superoxide dismutase, liver superoxide dismutase and catalase activities in 5% peony seed shell group increased by 100% (P<0.001), 245% (P<0.001) and 176% (P<0.001), respectively. Serum lysozyme activity and complement C3 content increased by 36% (P<0.001) and 33% (P<0.01), respectively. In both dose groups, peony seed shell showed similar positive effects on yellow catfish compared to peony seed oil, the suitable addition amount was 1%~5%.

    Key words: peony seed shell; peony seed oil; feed additive; antioxidation; nonspecific immunity; Pelteobagrus fulvidraco

    油用牡丹是一種新興的木本油料作物。牡丹籽油含有豐富的不飽和脂肪酸[1-3],具有抗氧化[4-7]、保護(hù)肝臟[8,9]和增強(qiáng)免疫力[10-15]等功效。牡丹籽殼是牡丹籽榨油前脫殼過程產(chǎn)生的副產(chǎn)物。隨著牡丹籽油產(chǎn)量增加,數(shù)以萬(wàn)噸計(jì)的牡丹籽殼缺乏合理開發(fā)和利用,造成環(huán)境污染,牡丹籽殼的資源化利用刻不容緩。研究表明,牡丹籽殼含有豐富的低聚芪類化合物——白藜蘆醇[16,17],是一種高生物活性的植物抗毒素,具有抗氧化、抗炎性、防止神經(jīng)退化、抗癌及預(yù)防衰老等多種保健功效[18]。在藥物引起動(dòng)物疾病模型中,白藜蘆醇能顯著提高受試動(dòng)物抗氧化酶基因mRNA水平,提高抗氧化酶活性和谷胱甘肽含量,降低活性氧、丙二醛和促炎性細(xì)胞因子水平[19,20]。與哺乳動(dòng)物類似,白藜蘆醇能提高魚類抗氧化能力,抑制促炎性基因表達(dá),同時(shí)促進(jìn)魚類生長(zhǎng),提高魚類天然和適應(yīng)性免疫力[21-23]。以富含白藜蘆醇的牡丹籽殼作為飼料添加劑具有廣闊的市場(chǎng)前景,是提高油用牡丹資源利用率的有效途徑。

    黃顙魚(Pelteobagrus fulvidraco)屬于鲇形目鲿科,是中國(guó)重要的淡水經(jīng)濟(jì)魚類。據(jù)《2023中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒》統(tǒng)計(jì),2022年全國(guó)黃顙魚養(yǎng)殖產(chǎn)量達(dá)60.0萬(wàn)t[24]。隨著黃顙魚養(yǎng)殖規(guī)模日益擴(kuò)大,細(xì)菌性疾病頻繁暴發(fā),傳統(tǒng)的抗生素治療存在殘留和耐藥風(fēng)險(xiǎn),而疫苗預(yù)防存在操作復(fù)雜和特異性強(qiáng)的缺點(diǎn)。2020年中國(guó)推出飼料中全面禁止添加抗生素政策,“綠色無抗養(yǎng)殖”已成為行業(yè)大趨勢(shì),研究和使用有效的“替抗”飼料添加劑是養(yǎng)殖行業(yè)關(guān)注的焦點(diǎn)和熱點(diǎn)。采用營(yíng)養(yǎng)調(diào)控方式,在飼料中添加有利于黃顙魚免疫力的成分,提高魚體抗氧化能力,增強(qiáng)抗病力,是預(yù)防黃顙魚病害發(fā)生的有效措施。例如,飼料添加烏拉爾甘草提取物[25]或其他復(fù)方中藥[26],可以有效提高柱狀黃桿菌和嗜水氣單胞菌感染后黃顙魚的存活率,增加血清抗氧化酶和溶菌酶活性、IgM含量,抑制促炎因子的表達(dá)。飼料添加維生素D3能提高黃顙魚對(duì)鯰愛德華氏菌的抵抗力,改善細(xì)菌感染引起的腎臟損傷,抑制NF-κB激活和促炎性基因的表達(dá)[27,28]。飼料中同時(shí)添加蝦青素和大黃素時(shí),黃顙魚的抗氧化能力和抗逆性顯著增強(qiáng),在奇異變形桿菌感染后死亡率也明顯降低[29]。隨著牡丹籽油產(chǎn)業(yè)興起,牡丹籽殼的產(chǎn)量不斷增加,又因其含有豐富的生物活性物質(zhì)白藜蘆醇,牡丹籽殼作為經(jīng)濟(jì)、綠色、高效的飼料添加劑具有巨大的市場(chǎng)潛力。

    黃顙f04c685b3973ec02c34afa577d458ffb魚肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美,是中國(guó)重要的淡水名特優(yōu)經(jīng)濟(jì)魚類。在養(yǎng)殖過程中,黃顙魚易受多種水產(chǎn)病原細(xì)菌感染,發(fā)病快、死亡率高,給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失,尋找提高黃顙魚免疫力和抗病力的有效方法迫在眉睫。本研究以黃顙魚為對(duì)象,在飼料中添加不同比例的牡丹籽殼超微粉,研究牡丹籽殼對(duì)黃顙魚肝臟組織結(jié)構(gòu),血清、肝臟抗氧化酶活性和非特異性免疫的影響,以期為牡丹籽殼作為“替抗”添加劑在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。同時(shí),牡丹籽油富含不飽和脂肪酸,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高,但牡丹籽油提取和純化步驟復(fù)雜,價(jià)格昂貴,限制了其作為飼料添加劑的可能性。同時(shí)以添加牡丹籽油作為對(duì)照,比較牡丹籽油和牡丹籽殼對(duì)黃顙魚影響的差異,為評(píng)估牡丹籽殼作為飼料添加劑提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    黃顙魚商品飼料購(gòu)自武漢大北農(nóng)飼料科技有限公司。超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、溶菌酶、補(bǔ)體C3和丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

    黃顙魚商品飼料經(jīng)粉碎機(jī)(DF-35,溫嶺市林大機(jī)械有限公司)粉碎后,過20目篩網(wǎng),選取顆粒均勻、無結(jié)塊的粒質(zhì)飼料與不同添加劑逐級(jí)混合,利用雙螺桿制粒機(jī)(SLR-45,中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)院漁業(yè)機(jī)械研究所)擠壓成粒徑2.0 mm的顆粒飼料,60 ℃烘干2 h,冷卻后置于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    牡丹籽油和牡丹籽殼均由武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院林業(yè)果樹研究所王湛昌高級(jí)工程師提供。牡丹籽殼由武漢中博水產(chǎn)生物技術(shù)有限公司粉碎為200目超微粉。牡丹籽油和牡丹籽殼超微粉室溫儲(chǔ)存于陰涼、干燥、通風(fēng)處。

    1.2 試驗(yàn)魚

    黃顙魚來自湖北黃優(yōu)源漁業(yè)發(fā)展有限公司,試驗(yàn)前將魚在1×103 L塑料魚缸里馴養(yǎng)兩周,每日用商品飼料投喂兩次(9:00和17:00定時(shí)投喂),使魚適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境和飼料。試驗(yàn)開始時(shí)將試驗(yàn)魚饑餓處理24 h。隨機(jī)選取100尾規(guī)格均勻、健康活潑的魚,放入各個(gè)魚缸(體積1×102 L),共計(jì)5組,分別為對(duì)照組、1%牡丹籽油組、1%牡丹籽殼組、5%牡丹籽油組和5%牡丹籽殼組,每組20尾魚。

    1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    試驗(yàn)在武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院水產(chǎn)研究所中心實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)殖系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行。周期設(shè)置為21 d,每7 d換水1次,采取自然光照,水溫14~16 ℃。每日投喂兩次飼料(9:00和17:00),采用飽食投喂策略。試驗(yàn)結(jié)束后,試驗(yàn)魚禁食12 h后采樣。

    1.4 血清抗氧化和非特異性免疫指標(biāo)測(cè)定

    每組隨機(jī)選取3尾黃顙魚,采用1 mL注射器進(jìn)行尾靜脈取血。血液在室溫靜置2 h后,4 ℃靜置過夜。第二天,4 ℃下3 500 r/min離心10 min,收集上清作為血清樣品,樣品凍存于-80 ℃。采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定血清總超氧化物酶活性,采用比濁法測(cè)定血清溶菌酶活性,采用免疫濁度法測(cè)定血清補(bǔ)體C3含量。

    1.5 肝臟組織結(jié)構(gòu)觀察

    每組隨機(jī)選取5尾黃顙魚,從體側(cè)線處解剖魚體,取小塊肝臟組織立即置入1.5 mL 4%多聚甲醛溶液,室溫固定24 h以上。在通風(fēng)櫥內(nèi)將固定好的組織修切平整,放于脫水盒內(nèi)。組織塊經(jīng)梯度乙醇-二甲苯脫水、石蠟包埋,切成4 μm薄片,60 ℃烘箱烘干。切片經(jīng)二甲苯-梯度乙醇-水洗滌后,蘇木素染細(xì)胞核、伊紅染細(xì)胞質(zhì),最后將切片經(jīng)梯度乙醇-二甲苯脫水和透明,中性樹膠封片。使用Pannoramic midi型全自動(dòng)數(shù)字切片掃描系統(tǒng)拍攝肝臟組織。

    1.6 肝臟抗氧化指標(biāo)測(cè)定

    肝臟切片樣品取樣結(jié)束后,剩余肝臟組織立即置于1.5 mL離心管液氮中速凍,2 h后轉(zhuǎn)入-80 ℃保存。采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定肝臟總超氧化物酶活性,采用鉬酸銨法測(cè)定肝臟過氧化氫酶活性,采用TBA(硫代巴比妥酸)法測(cè)定肝臟MDA含量。

    1.7 數(shù)據(jù)分析

    采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。所有數(shù)值均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),P<0.05代表具有顯著性差異,P<0.01代表具有極顯著差異。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 飼料添加牡丹籽殼對(duì)黃顙魚血清抗氧化和非特異性免疫指標(biāo)的影響

    含有牡丹籽油或牡丹籽殼的飼料飼喂黃顙魚21 d后,采用尾靜脈取血并收集血清,檢測(cè)血清超氧化物歧化酶和溶菌酶活性及補(bǔ)體C3含量。結(jié)果表明,當(dāng)添加量為1%時(shí),牡丹籽油組和牡丹籽殼組超氧化物歧化酶活性分別為對(duì)照組的1.83倍和1.46倍(圖1A,P<0.001)。牡丹籽油和牡丹籽殼以劑量依賴方式促進(jìn)超氧化物歧化酶活性(圖1A,P<0.01),當(dāng)添加量為5%時(shí),牡丹籽油組和牡丹籽殼組黃顙魚血清超氧化物歧化酶活性分別為對(duì)照組的2.70倍和2.02倍(圖1A,P<0.001)。在1%和5%添加劑量下,牡丹籽油提高血清超氧化物歧化酶活性的效果優(yōu)于牡丹籽殼(圖1A,P<0.01)。

    圖1B展示了飼喂含有牡丹籽油或牡丹籽殼飼料后黃顙魚血清溶菌酶活性的變化趨勢(shì)。1%劑量添加組,牡丹籽油和牡丹籽殼略微提高了溶菌酶活性,但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。當(dāng)添加劑量為5%時(shí),與對(duì)照組相比,牡丹籽油組和牡丹籽殼組的黃顙魚血清溶菌酶活性顯著增加,分別為對(duì)照組的1.24倍(P<0.01)和1.36倍(P<0.001),牡丹籽殼促進(jìn)溶菌酶活性的效果優(yōu)于牡丹籽油(P<0.05)。

    飼料中添加牡丹籽油或牡丹籽殼也能有效提高黃顙魚血清補(bǔ)體C3的含量。如圖1C所示,當(dāng)添加比例為1%時(shí),牡丹籽油組和牡丹籽殼組黃顙魚血清補(bǔ)體C3含量分別為對(duì)照組的1.11倍和1.15倍(P<0.05);當(dāng)添加比例為5%時(shí),牡丹籽油組和牡丹籽殼組補(bǔ)體C3含量分別為對(duì)照組的1.27倍和1.33倍(P<0.01)。牡丹籽油和牡丹籽殼顯著提高血清補(bǔ)體C3含量的效果與添加量呈正比,當(dāng)添加量一致時(shí),兩者提高補(bǔ)體C3含量的效果沒有顯著性差異(P>0.05)。

    2.2 飼料添加牡丹籽殼對(duì)黃顙魚肝臟組織結(jié)構(gòu)的影響

    飼喂對(duì)照組飼料21 d后,光學(xué)顯微鏡下觀察黃顙魚肝臟組織致密緊實(shí),肝細(xì)胞沿肝索排列整齊、結(jié)構(gòu)清晰,偶見肝細(xì)胞空泡化(圖2A,空心箭頭所示)和少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)(圖2A,黑色箭頭所示)。

    與對(duì)照組相比,飼喂各組添加劑的黃顙魚肝臟組織整體情況良好,偶見個(gè)別魚體肝臟的異常變化。1%牡丹籽油組黃顙魚也出現(xiàn)了炎性細(xì)胞浸潤(rùn)(圖2B)和肝細(xì)胞空泡化(圖2C)現(xiàn)象。1%牡丹籽殼組黃顙魚肝臟出現(xiàn)黑色素沉積(圖2D,空心三角所示)和空泡化現(xiàn)象(圖2D,空心箭頭所示),偶見紅細(xì)胞浸潤(rùn)(圖2E,黑色三角所示)。5%牡丹籽油組黃顙魚肝臟組織整體情況與對(duì)照組和1%牡丹籽油組類似,肝細(xì)胞輕度空泡化(圖2F,空心箭頭所示),偶見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)(圖2F和2G,黑色箭頭所示)和黑色素沉積(圖2G,空心三角所示)。5%牡丹籽殼組黃顙魚肝臟組織結(jié)構(gòu)良好,肝細(xì)胞有少量空泡化(圖2H)和蛋白液浸潤(rùn)(圖2I,黑色星形所示)現(xiàn)象。

    本研究中黃顙魚攝食含有1%和5%牡丹籽殼或牡丹籽油的飼料21 d后,其肝臟組織結(jié)構(gòu)完好,未見明顯的異常變化,表明在該范圍內(nèi)牡丹籽殼和牡丹籽油具有安全的可食用性。

    2.3 飼料添加牡丹籽殼對(duì)黃顙魚肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

    由圖3A可知,飼喂含有1%和5%牡丹籽油或牡丹籽殼的飼料21 d,黃顙魚肝臟超氧化物歧化酶活性顯著升高。當(dāng)添加比例為1%時(shí),牡丹籽油組和牡丹籽殼組超氧化物歧化酶活性分別為對(duì)照組的1.86倍和1.77倍(P<0.001),此時(shí)兩者提高酶活的效果相當(dāng)(P>0.05)。當(dāng)添加比例為5%時(shí),牡丹籽油組和牡丹籽殼組超氧化物歧化酶活性分別為對(duì)照組的2.91倍和3.45倍(P<0.001),牡丹籽殼提高超氧化物歧化酶活性的效果顯著優(yōu)于牡丹籽油(P<0.05)。

    與超氧化物歧化酶類似,飼料中添加不同濃度的牡丹籽油或牡丹籽殼亦能顯著提高黃顙魚肝臟過氧化氫酶活性(圖3B,P<0.001),提高效果在高劑量組更加顯著(圖3B,P<0.001)。與對(duì)照組相比,1%牡丹籽油組和1%牡丹籽殼組的過氧化氫酶活性分別提高了96%和85%。5%牡丹籽油組和5%牡丹籽殼組過氧化氫酶活性分別為對(duì)照組的2.96倍和2.76倍。牡丹籽油促進(jìn)溶菌酶活性的效果略優(yōu)于牡丹籽殼。

    超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性增加,指示肝臟細(xì)胞氧化損傷程度的丙二醛含量在牡丹籽油組和牡丹籽殼組顯著降低,表明牡丹籽油和牡丹籽殼能有效增強(qiáng)黃顙魚肝臟抗氧化能力。當(dāng)添加量為1%時(shí),牡丹籽油組和牡丹籽殼組肝臟MDA含量都為對(duì)照組的68%(圖3C,P<0.001),MDA含量在兩個(gè)添加劑組之間沒有差異(圖3C,P>0.05)。當(dāng)添加量為5%時(shí),黃顙魚肝臟MDA含量在兩個(gè)添加劑組進(jìn)一步降低,分別為對(duì)照組的60%和50%,牡丹籽殼改善肝臟氧化水平的效果顯著優(yōu)于牡丹籽油(圖3C,P<0.05)。

    3 討論

    3.1 飼料添加牡丹籽殼顯著提高黃顙魚血清超氧化物歧化酶和溶菌酶活性及補(bǔ)體C3含量

    血清超氧化物歧化酶和過氧化氫酶在機(jī)體抵御活性氧引起的氧化損傷過程中發(fā)揮重要作用[30,31],是衡量機(jī)體健康的重要指標(biāo)之一。溶菌酶和補(bǔ)體系統(tǒng)在魚類識(shí)別病原細(xì)菌和抵抗感染過程中具有重要作用[32,33],其中C3是補(bǔ)體系統(tǒng)的關(guān)鍵核心分子[33]。本研究表明飼料添加1%或5%的牡丹籽殼能有效提高黃顙魚血清超氧化物酶和溶菌酶活性,提高血清補(bǔ)體C3含量,表明牡丹籽殼能增強(qiáng)黃顙魚清除氧自由基和抵抗病原細(xì)菌的能力,維持黃顙魚機(jī)體健康。牡丹籽殼富含白藜蘆醇,研究表明白藜蘆醇能顯著提高大菱鲆超氧化物歧化酶mRNA水平[22],這可能是飼喂牡丹籽殼黃顙魚超氧化物歧化酶活性增加的原因之一。攝食含有螺旋藻的飼料可提高虹鱒溶菌酶和補(bǔ)體C3的轉(zhuǎn)錄水平[34],銅藻提取物[35]和巖藻多糖[36]可增加黃顙魚血清溶酶體活性和補(bǔ)體C3含量。飼料添加牡丹籽殼可同時(shí)增強(qiáng)黃顙魚血清抗氧化能力和非特異性免疫,具有免疫增強(qiáng)劑的功效。牡丹籽油含有豐富的不飽和脂肪酸,能顯著提高齊口裂腹魚血清超氧化物酶和溶菌酶活性,增加血清補(bǔ)體C3含量[11]。

    3.2 飼料添加牡丹籽殼不影響黃顙魚肝臟組織結(jié)構(gòu)

    肝臟是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝的重要器官,肝臟的組織學(xué)變化是評(píng)估動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的可靠指標(biāo)之一[37]。已有研究證實(shí)牡丹籽油不影響大鼠臟器質(zhì)量及臟體比,各臟器未見明顯的病理?yè)p害改變[38,39],表明牡丹籽油具有較高的食用安全性。本研究中飼喂含有牡丹籽油或牡丹籽殼的飼料不影響黃顙魚的存活率和行為能力,也未造成黃顙魚肝臟結(jié)構(gòu)明顯的變化,表明牡丹籽油和牡丹籽殼安全、無毒,可作為飼料添加劑的備選物質(zhì)。研究表明,合理使用添加劑有助于改善受試動(dòng)物肝臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu),例如攝食含有蒲公英[40,41]、銀杏葉[42]或枸杞[43]提取物飼料的雜交石斑魚肝血竇和肝細(xì)胞形態(tài)完好,邊界清晰,油紅染色表明肝臟脂質(zhì)化程度明顯低于對(duì)照組。牡丹籽殼能否改善黃顙魚肝臟組織形態(tài)進(jìn)而促進(jìn)肝臟代謝解毒功能有待進(jìn)一步探索。

    3.3 飼料添加牡丹籽殼顯著提高黃顙魚肝臟抗氧化能力

    肝臟是動(dòng)物體內(nèi)重要的代謝和解毒器官,肝臟的氧化損傷直接影響機(jī)體的健康[44]。研究表明,牡丹籽油能干預(yù)四氯化碳[8]和環(huán)磷酰胺[9]誘導(dǎo)的小鼠肝損傷,顯著提高肝臟超氧化物酶水平,降低丙二醛含量和肝損傷程度,與本研究中牡丹籽油促進(jìn)黃顙魚肝臟抗氧化酶活性是一致的。牡丹籽殼含有豐富的白藜蘆醇,是一種高效的天然抗氧化劑[45],其作為飼料添加劑能顯著提高攝食動(dòng)物抵抗氧化損傷的能力[19-23]。此外,牡丹籽殼還含有黃酮[46,47]、黑色素[48]和多酚化合物[49,50],天然產(chǎn)物也具有清除自由基和抗氧化的功效[51]。本研究中牡丹籽殼飼喂組的黃顙魚肝臟超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性顯著增加,肝臟丙二醛含量顯著降低,表明牡丹籽殼能調(diào)節(jié)黃顙魚肝臟抗氧化狀態(tài),降低脂質(zhì)過氧化反應(yīng)對(duì)肝細(xì)胞的毒害作用,具有促進(jìn)肝臟健康的保健功效。

    4 結(jié)論

    飼料添加1%和5%牡丹籽殼能顯著提高黃顙魚抗氧化酶活性,增強(qiáng)黃顙魚非特異性免疫,對(duì)黃顙魚肝臟組織結(jié)構(gòu)沒有損傷作用。本研究中牡丹籽殼的保健功效與牡丹籽油相當(dāng),具有經(jīng)濟(jì)、安全、高效的優(yōu)點(diǎn),其作為飼料添加劑亦可解決粗獷堆放造成的環(huán)境污染問題,達(dá)到變廢為寶的環(huán)保效果。牡丹籽殼可作為黃顙魚飼料添加劑使用。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 戚軍超,周海梅,馬錦琦,等.牡丹籽油化學(xué)成分GC-MS分析[J].糧食與油脂, 2005(11): 23-24.

    [2] 王昌濤, 張 萍, 董銀卯. 超臨界CO2提取牡丹籽油的工藝以及成分分析[J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào), 2009, 24(8): 96-99,107.

    [3] 鄧瑞雪, 劉 振, 秦琳琳, 等. 超臨界CO2流體提取洛陽(yáng)牡丹籽油工藝研究[J]. 食品科學(xué), 2010, 31(10): 142-145.

    [4] 劉叢彬, 宣自華, 董振興, 等. 牡丹籽油體外及對(duì)脂代謝紊亂大鼠體內(nèi)抗氧化作用的研究[J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào), 2014, 29(6): 53-56.

    [5] 楊曉君, 商雪珂, 買迪娜木·阿布力米提, 等. 不同植物油脂對(duì)D-半乳糖衰老模型小鼠的抗氧化作用[J]. 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2020, 43(6): 453-459.

    [6] 史國(guó)安, 郭香鳳, 金寶磊, 等. 牡丹籽油超臨界CO2萃取工藝優(yōu)化及抗氧化活性的研究[J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào), 2013, 28(4): 47-50,107.

    [7] 翟文婷, 朱獻(xiàn)標(biāo), 李艷麗, 等. 牡丹籽油成分分析及其抗氧化活性研究[J]. 煙臺(tái)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與工程版), 2013, 26(2): 147-150.

    [8] 翟文婷, 朱獻(xiàn)標(biāo), 李艷麗, 等. 牡丹籽油對(duì)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用[J]. 中國(guó)油脂, 2013, 38(11): 43-45.

    [9] 彭安芳,郭慧鵬,馮秀寬,等. 牡丹籽油對(duì)環(huán)磷酰胺致小鼠遺傳毒性和肝損傷的保護(hù)作用[J]. 中國(guó)油脂, 2018, 43(10): 74-76,81.

    [10] 郭 婷. 牡丹籽油抗炎作用的分子機(jī)理研究[D]. 長(zhǎng)沙:中南林業(yè)科技大學(xué),2019.

    [11] 馮莉梅. 牡丹籽油對(duì)齊口裂腹魚免疫及免疫相關(guān)基因表達(dá)的影響[D]. 四川雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2018.

    [12] 孫 燕,李成忠,左偉勇. 牡丹籽油對(duì)小鼠免疫功能的影響[J]. 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2018, 34(6): 65-68.

    [13] 張夢(mèng)蘭, 楊 琴, 張冰潔, 等. 牡丹籽油復(fù)方軟膠囊增強(qiáng)免疫力的功能研究[J]. 中國(guó)油脂, 2019, 44(11): 121-126.

    [14] 李成忠, 張煥新, 李若敏, 等. 牡丹籽油復(fù)方研制及其降血糖和增強(qiáng)免疫活性研究[J]. 揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版), 2020, 41(6): 84-89.

    [15] 朱宗磊. 牡丹籽油軟膠囊穩(wěn)定性及功能研究[D]. 濟(jì)南:山東大學(xué).2014.

    [16] ZHANG L N, LIU P, GAO J Y, et al. Profiling and simultaneous quantitative determination of oligostilbenes in Paeonia ostii seed shell from different geographical areas in China and their comparative evaluation[J]. Phytochemical analysis, 2019, 30(4): 464-473.

    [17] 張紅玉, 王成章, 原姣姣, 等. 牡丹籽殼中白藜蘆醇的分離及結(jié)構(gòu)表征[J]. 中國(guó)油脂, 2017, 42(2): 116-119.

    [18] GALINIAK S,AEBISHER D, BARTUSIK-AEBISHER D. Health benefits of resveratrol administration[J]. The journal of the polish biochemical society and of the polish academy of sciences, 2019, 66(1): 13-21.

    [19] CONG L, LEI M Y, LIU Z Q, et al. Resveratrol attenuates manganese-induced oxidative stress and neuroinflammation through SIRT1 signaling in mice[J]. Food and chemical toxicology, 2021, 153: 112283.

    [20] XUN W J, FU Q Y, SHI L G, et al. Resveratrol protects intestinal integrity, alleviates intestinal inflammation and oxidative stress by modulating AhR/Nrf2 pathways in weaned piglets challenged with diquat[J]. International immunopharmacology,2021,99: 107989.

    [21] ROHMAH M K, SALAHDIN O D, GUPTA R, et al. Modulatory role of dietary curcumin and resveratrol on growth performance, serum immunity responses, mucus enzymes activity, antioxidant capacity and serum and mucus biochemicals in the common carp, Cyprinus carpio exposed to abamectin[J]. Fish & shellfish immunology, 2022, 129: 221-230.

    [22] TAN C, ZHOU H H, WANG X, et al. Resveratrol attenuates oxidative stress and inflammatory response in turbot fed with soybean meal based diet[J]. Fish & shellfish immunology, 2019, 91: 130-135.

    [23] ZHENG Y, ZHAO Z X, WU W, et al. Effects of dietary resveratrol supplementation on hepatic and serum pro-/anti-inflammatory activity in juvenile GIFT tilapia, Oreochromis niloticus[J]. Developmental & comparative immunology, 2017, 73: 220-228.

    [24] 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部漁業(yè)漁政管理局, 全國(guó)水產(chǎn)技術(shù)推廣總站, 中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì). 中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒[M]. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社, 2023.31.

    [25] WANG Q, SHEN J Y, YAN Z T, et al. Dietary Glycyrrhiza uralensis extracts supplementation elevated growth performance, immune responses and disease resistance against Flavobacterium columnare in yellow catfish (Pelteobagrus fulvidraco)[J]. Fish & shellfish immunology, 2020, 97: 153-164.

    [26] HOU T L, LIU H R, LI C T. Traditional Chinese herb formulas in diet enhance the non-specific immune responses of yellow catfish (Pelteobagrus fulvidraco) and resistance against Aeromonas hydrophila[J]. Fish & shellfish immunology, 2022, 131: 631-636.

    [27] CHENG K, TANG Q, HUANG Y Q, et al. Effect of vitamin D3 on the immunomodulation of head kidney after Edwardsiella ictaluri challenge in yellow catfish (Pelteobagrus fulvidraco)[J]. Fish & shellfish immunology, 2020, 99: 353-361.

    [28] CHENG K, TANG Q, GUO X, et al. High dose of dietary vitamin D3 modulated the yellow catfish (Pelteobagrus fulvidraco) splenic innate immune response after Edwardsiella ictaluri infection[J]. Fish & shellfish immunology, 2020, 100: 41-48.

    [29] LIU F, SHI H Z, GUO Q S, et al. Effects of astaxanthin and emodin on the growth, stress resistance and disease resistance of yellow catfish (Pelteobagrus fulvidraco)[J]. Fish & shellfish immunology, 2016, 51: 125-135.

    [30] FRIDOVICH I. Superoxide radical and superoxide dismutases[J]. Annual review of biochemistry, 1995, 64: 97-112.

    [31] SEIFRIED H E,ANDERSON D E,F(xiàn)ISHER E I, et al. A review of the interaction among dietary antioxidants and reactive oxygen species[J]. The journal of nutritional biochemistry, 2007,18(9): 567-579.

    [32] ELLIS A E. Innate host defense mechanisms of fish against viruses and bacteria[J]. Developmental & comparative immunology, 2001, 25(8-9): 827-839.

    [33] MAGNADOTTIR B, LANGE S, GUDMUNDSDOTTIR S, et al. Ontogeny of humoral immune parameters in fish[J]. Fish & shellfish imm1ftYX/iZXwdZU99ZJlkn7g==unology, 2005, 19(5): 429-439.

    [34] SHEIKHZADEH N, MOUSAVI S, HAMIDIAN G, et al. Role of dietary Spirulina platensis in improving mucosal immune responses and disease resistance of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)[J]. Aquaculture, 2019, 510: 1-8.

    [35] SHI Q C, WANG J, QIN C J, et al. Growth performance, serum biochemical parameters, immune parameters and hepatic antioxidant status of yellow catfish Pelteobagrus fulvidraco supplemented with Sargassum horneri hot-water extract[J]. Aquaculture reports, 2021, 21: 100839.

    [36] YANG Q, YANG R, LI M, et al. Effects of dietary fucoidan on the blood constituents, anti-oxidation and innate immunity of juvenile yellow catfish (Pelteobagrus fulvidraco)[J]. Fish & shellfish immunology, 2014, 41(2): 264-270.

    [37] NAJDEGERAMI E H, BAKHSHI F, LAKANI F B. Effects of biofloc on growth performance, digestive enzyme activities and liver histology of common carp (Cyprinus carpio L.) fingerlings in zero-water exchange system[J]. Fish physiology and biochemistry, 2016, 42(2): 457-465.

    [38] 朱文學(xué), 李 欣, 劉少陽(yáng), 等. 牡丹籽油的毒理學(xué)研究[J]. 食品科學(xué), 2010, 31(11): 248-251.

    [39] 周海梅,馬錦琦,楊志勇,等. 牡丹籽油對(duì)大、小鼠的毒性試驗(yàn)[J]. 毒理學(xué)雜志, 2009, 23(3): 256-257.

    [40] SUN Z Z, TAN X H, XU M L, et al. Effects of dietary dandelion extracts on growth performance, liver histology, immune-related gene expression and CCl4 resistance of hybrid grouper (Epinephelus lanceolatusmale♂×Epinephelus fuscoguttatusfemale♀)[J]. Fish & shellfish immunology, 2019, 88: 126-134.

    [41] SUN Z Z, TAN X H, WEI Z L, et al. Effects of dietary dandelion extract on the growth performance, serum biochemical parameters, liver histology, and immune and apoptosis-related genes expression of hybrid grouper (Epinephelus lanceolatusmale♂×Epinephelus fuscoguttatusfemale♀ at different feeding period[J]. Fish & shellfish immunology, 2022, 120: 280-286.

    [42] TAN X H, SUN Z Z, LIU Q Y, et al. Effects of dietary ginkgo biloba leaf extract on growth performance, plasma biochemical parameters, fish composition, immune responses, liver histology, and immune and apoptosis-related genes expression of hybrid grouper (Epinephelus lanceolatusmale♂×Epinephelus fuscoguttatusfemale♀) fed high lipid diets[J]. Fish & shellfish immunology, 2018, 72: 399-409.

    [43] TAN X H, SUN Z Z, YE C X, et al. The effects of dietary Lycium barbarum extract on growth performance, liver health and immune related genes expression in hybrid grouper (Epinephelus lanceolatusmale♂×E. fuscoguttatusfemale♀) fed high lipid diets[J]. Fish & shellfish immunology, 2019, 87: 847-852.

    [44] LI S, TAN H Y, WANG N, et al. The role of oxidative stress09ce2e22b24be8342cabd6a08e870a34 and antioxidants in liver diseases[J]. International journal of molecular sciences, 2015, 16(11): 26087-26124.

    [45] 劉 普, 許藝凡, 李小方, 等. 油用牡丹籽殼低聚茋類化合物富集及對(duì)牡丹籽油抗氧化作用研究[J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào), 2017, 32(6): 84-90.

    [46] 李婉儀, 吉文麗, 李 蕊, 等. 響應(yīng)面優(yōu)化牡丹籽殼總黃酮超聲波提取工藝及抗氧化活性研究[J]. 中國(guó)油脂, 2018, 43(4): 114-118.

    [47] 孟慶煥, 王 化, 王洪政, 等. 牡丹種皮黃酮提取及對(duì)ABTS自由基清除作用[J]. 植物研究, 2013, 33(4): 504-507.

    [48] 丁永霞. 牡丹籽殼中黑色素的提取及化學(xué)成分測(cè)定的方法研究[J]. 現(xiàn)代食品, 2018(24): 159-164.

    [49] 張紅玉, 王成章, 張宇思, 等. 超聲波提取牡丹籽殼多酚工藝響應(yīng)面法優(yōu)化及抗氧化性研究[J]. 中國(guó)油脂, 2015, 40(6): 90-94.

    [50] 張紅玉, 王成章, 原姣姣, 等. 牡丹籽殼提取物及不同極性部位的抗氧化活性研究[J]. 中國(guó)油脂, 2016, 41(7): 64-67.

    [51] HABOTTA O A, DAWOOD M A O, KARI Z A, et al. Antioxidative and immunostimulant potential of fruit derived biomolecules in aquaculture[J]. Fish & shellfish immunology,2022,130: 317-322.

    收稿日期:2023-04-18

    基金項(xiàng)目:武漢知識(shí)創(chuàng)新專項(xiàng)-基礎(chǔ)研究項(xiàng)目(2022020801010414); 武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新項(xiàng)目(XTCX202204)

    作者簡(jiǎn)介:劉鹿憶(1987-),女,黑龍江雞西人,農(nóng)藝師,博士,主要從事水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌病與免疫防控工作,(電話)13657274094(電子信箱)luyi_1009@126.com;通信作者,張立強(qiáng)(1979-),男,江西金溪人,高級(jí)工程師,博士,主要從事水產(chǎn)病害防控工作,(電話)15926219392(電子信箱)zhangliqiang@wuhanagri.com。

    91精品国产九色| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 精品一区二区三区人妻视频| 欧美潮喷喷水| 桃色一区二区三区在线观看| 国产精品精品国产色婷婷| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲欧美精品自产自拍| 中文字幕久久专区| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 高清av免费在线| 久久久亚洲精品成人影院| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 99热全是精品| 久久久久久久午夜电影| 波野结衣二区三区在线| 国产免费又黄又爽又色| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲第一区二区三区不卡| 午夜精品一区二区三区免费看| 午夜福利在线观看吧| 国内揄拍国产精品人妻在线| 九九在线视频观看精品| 99热精品在线国产| 国产在视频线精品| 国产一区二区三区av在线| 久久久久久久久中文| 啦啦啦啦在线视频资源| 精品久久久久久久末码| 精品熟女少妇av免费看| 九九爱精品视频在线观看| 丝袜美腿在线中文| 深夜a级毛片| 波多野结衣巨乳人妻| 午夜激情福利司机影院| 一边亲一边摸免费视频| 一区二区三区高清视频在线| 好男人视频免费观看在线| 久久久午夜欧美精品| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 欧美日韩在线观看h| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 日韩欧美精品免费久久| 热99在线观看视频| 亚洲成av人片在线播放无| 日韩高清综合在线| 亚洲国产精品sss在线观看| 久久亚洲国产成人精品v| 最近的中文字幕免费完整| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产极品精品免费视频能看的| 老司机福利观看| 中国国产av一级| 在线观看一区二区三区| 波多野结衣巨乳人妻| 久久久久网色| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 日本与韩国留学比较| 国产亚洲精品av在线| 又爽又黄无遮挡网站| 一区二区三区四区激情视频| 久久热精品热| av女优亚洲男人天堂| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 直男gayav资源| 男人和女人高潮做爰伦理| 久久久久久久久大av| 身体一侧抽搐| .国产精品久久| 精品少妇黑人巨大在线播放 | ponron亚洲| 成年版毛片免费区| 国产免费男女视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 日韩视频在线欧美| 婷婷色av中文字幕| 久久久欧美国产精品| 九九热线精品视视频播放| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 三级国产精品欧美在线观看| 色综合色国产| 亚洲人成网站在线观看播放| 99久久成人亚洲精品观看| 国产精品国产三级国产专区5o | 国产伦在线观看视频一区| 欧美日本视频| av专区在线播放| 午夜精品一区二区三区免费看| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产美女午夜福利| 一区二区三区免费毛片| 色综合站精品国产| 日韩中字成人| 三级经典国产精品| 午夜久久久久精精品| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产伦精品一区二区三区四那| 午夜福利成人在线免费观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 午夜免费激情av| 日本免费a在线| 日韩av不卡免费在线播放| 我的老师免费观看完整版| 亚洲欧美日韩东京热| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产午夜精品一二区理论片| 成人综合一区亚洲| 天堂网av新在线| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲在线观看片| 日本一本二区三区精品| 观看免费一级毛片| 久久久精品大字幕| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产乱人偷精品视频| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲精品一区蜜桃| 成人性生交大片免费视频hd| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日韩欧美精品免费久久| 99久国产av精品国产电影| 最近手机中文字幕大全| 91精品伊人久久大香线蕉| or卡值多少钱| 国国产精品蜜臀av免费| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 高清日韩中文字幕在线| 欧美bdsm另类| 欧美bdsm另类| www日本黄色视频网| 欧美日本亚洲视频在线播放| 人人妻人人澡欧美一区二区| 寂寞人妻少妇视频99o| 老司机影院毛片| 亚洲最大成人中文| 国产伦理片在线播放av一区| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产 一区 欧美 日韩| 中文字幕制服av| 三级国产精品片| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 久久久久久久国产电影| 超碰97精品在线观看| 麻豆乱淫一区二区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 精品一区二区三区人妻视频| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲经典国产精华液单| 九草在线视频观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲成av人片在线播放无| 可以在线观看毛片的网站| 美女被艹到高潮喷水动态| 成人一区二区视频在线观看| 中文字幕亚洲精品专区| av在线天堂中文字幕| 精品久久久久久久久av| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲av男天堂| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲欧美精品综合久久99| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 波多野结衣巨乳人妻| 免费看光身美女| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲欧美日韩东京热| 不卡视频在线观看欧美| 久久久久国产网址| 日韩国内少妇激情av| 亚洲成色77777| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲av中文av极速乱| 免费看a级黄色片| 久久久久久伊人网av| 久久久久久国产a免费观看| 国产视频首页在线观看| 岛国在线免费视频观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产片特级美女逼逼视频| 在线免费观看不下载黄p国产| 特大巨黑吊av在线直播| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 久久综合国产亚洲精品| 性色avwww在线观看| 日本欧美国产在线视频| 69av精品久久久久久| 久久6这里有精品| 99久久无色码亚洲精品果冻| av女优亚洲男人天堂| 午夜激情福利司机影院| 午夜激情福利司机影院| 精品人妻熟女av久视频| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久久久性生活片| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲国产精品国产精品| 免费人成在线观看视频色| 欧美日韩国产亚洲二区| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲成色77777| 国产熟女欧美一区二区| 日本黄色视频三级网站网址| 国内精品美女久久久久久| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲精品自拍成人| 日本与韩国留学比较| 少妇人妻一区二区三区视频| 日韩中字成人| 七月丁香在线播放| 国产av不卡久久| 久久久精品94久久精品| 欧美一区二区亚洲| 一区二区三区四区激情视频| 午夜福利在线观看吧| 男人和女人高潮做爰伦理| 午夜激情欧美在线| 桃色一区二区三区在线观看| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产精品久久电影中文字幕| 九九爱精品视频在线观看| 观看免费一级毛片| 久久这里有精品视频免费| kizo精华| 精品酒店卫生间| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲精品亚洲一区二区| 在线观看一区二区三区| 亚洲av免费在线观看| 丰满乱子伦码专区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产精品久久视频播放| 日韩欧美 国产精品| 丝袜美腿在线中文| 日韩一区二区三区影片| 国产成人精品一,二区| 亚洲欧美日韩东京热| 成人毛片60女人毛片免费| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产成年人精品一区二区| 久久综合国产亚洲精品| 美女内射精品一级片tv| 亚洲国产精品成人综合色| 成人无遮挡网站| 成人性生交大片免费视频hd| 国产精品久久久久久久久免| 国产日韩欧美在线精品| 中国美白少妇内射xxxbb| 夫妻性生交免费视频一级片| 欧美区成人在线视频| 日本与韩国留学比较| 综合色av麻豆| 国产老妇伦熟女老妇高清| 精品久久久久久成人av| 赤兔流量卡办理| h日本视频在线播放| 亚洲国产高清在线一区二区三| 欧美又色又爽又黄视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲精品色激情综合| 亚洲最大成人av| 91久久精品国产一区二区成人| 老司机影院成人| 免费看av在线观看网站| av黄色大香蕉| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲av二区三区四区| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲乱码一区二区免费版| 美女黄网站色视频| 一级二级三级毛片免费看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产人妻一区二区三区在| 亚洲一区高清亚洲精品| 日韩欧美国产在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 91久久精品电影网| 久久久久久久久久黄片| 国产高清有码在线观看视频| 欧美丝袜亚洲另类| 久久99热6这里只有精品| 直男gayav资源| 欧美人与善性xxx| 精品熟女少妇av免费看| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲国产精品专区欧美| 国产高清有码在线观看视频| 欧美xxxx性猛交bbbb| 久久久a久久爽久久v久久| 国产精品.久久久| 只有这里有精品99| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 在线免费观看不下载黄p国产| 免费黄网站久久成人精品| 人人妻人人看人人澡| 插逼视频在线观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 淫秽高清视频在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲精品一区蜜桃| 国产成人午夜福利电影在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| 国产乱人视频| 欧美精品国产亚洲| 国产精华一区二区三区| 久久人妻av系列| 日本黄色视频三级网站网址| 高清日韩中文字幕在线| 99久久无色码亚洲精品果冻| 麻豆av噜噜一区二区三区| 一级毛片aaaaaa免费看小| 日本免费在线观看一区| 久久这里只有精品中国| or卡值多少钱| 久久精品夜色国产| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 永久网站在线| www.色视频.com| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产成人aa在线观看| 男女那种视频在线观看| 国产精品一区二区在线观看99 | 水蜜桃什么品种好| 色尼玛亚洲综合影院| 国产精品乱码一区二三区的特点| 人妻夜夜爽99麻豆av| 97超视频在线观看视频| 天天躁日日操中文字幕| 久久热精品热| 亚洲成人中文字幕在线播放| 免费大片18禁| 日本黄色片子视频| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| ponron亚洲| 欧美一区二区国产精品久久精品| 简卡轻食公司| 国产免费又黄又爽又色| av福利片在线观看| 精品人妻视频免费看| 精品久久国产蜜桃| 99久久精品国产国产毛片| 国产亚洲一区二区精品| 搞女人的毛片| 亚洲美女视频黄频| 亚洲va在线va天堂va国产| 国产av一区在线观看免费| 伊人久久精品亚洲午夜| av在线观看视频网站免费| 一级毛片电影观看 | 1024手机看黄色片| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 乱系列少妇在线播放| 欧美97在线视频| 高清午夜精品一区二区三区| 精品一区二区免费观看| 91久久精品国产一区二区成人| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产伦在线观看视频一区| 在线观看av片永久免费下载| 国产精品三级大全| 毛片女人毛片| 国产成人a区在线观看| 永久免费av网站大全| 床上黄色一级片| 韩国av在线不卡| 岛国毛片在线播放| 精品国产三级普通话版| 日日摸夜夜添夜夜爱| 欧美成人午夜免费资源| 国产精品乱码一区二三区的特点| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 婷婷色综合大香蕉| 岛国在线免费视频观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 久久鲁丝午夜福利片| 精品久久久久久电影网 | 天天一区二区日本电影三级| 少妇丰满av| 欧美成人a在线观看| 欧美高清性xxxxhd video| 国产毛片a区久久久久| 久久这里只有精品中国| 成人无遮挡网站| 欧美潮喷喷水| 亚洲欧美日韩无卡精品| av卡一久久| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 内射极品少妇av片p| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 一级毛片电影观看 | 亚洲人成网站高清观看| 身体一侧抽搐| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | a级毛色黄片| 亚洲在久久综合| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲综合精品二区| 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲欧美精品专区久久| 亚洲高清免费不卡视频| 99热精品在线国产| 1000部很黄的大片| 一级毛片电影观看 | 在线播放国产精品三级| 午夜福利网站1000一区二区三区| 一级二级三级毛片免费看| 国产精品久久电影中文字幕| www.av在线官网国产| 男女下面进入的视频免费午夜| 成人无遮挡网站| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲av日韩在线播放| 91久久精品国产一区二区三区| 久久久国产成人精品二区| 看十八女毛片水多多多| 国产精品一及| 精品人妻熟女av久视频| 国产在线男女| 日韩中字成人| 午夜免费激情av| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 五月伊人婷婷丁香| 一边摸一边抽搐一进一小说| 免费人成在线观看视频色| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 在线观看美女被高潮喷水网站| 中文字幕免费在线视频6| 成人亚洲欧美一区二区av| 五月玫瑰六月丁香| 热99re8久久精品国产| 国产免费男女视频| 在线观看一区二区三区| 日韩高清综合在线| 国产 一区 欧美 日韩| 国产爱豆传媒在线观看| av在线天堂中文字幕| 午夜精品国产一区二区电影 | 日本与韩国留学比较| 精品久久久久久久末码| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产老妇女一区| 国产精品爽爽va在线观看网站| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 欧美三级亚洲精品| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产午夜精品论理片| 欧美xxxx性猛交bbbb| 看免费成人av毛片| 色吧在线观看| 免费黄色在线免费观看| 桃色一区二区三区在线观看| 三级经典国产精品| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美日本亚洲视频在线播放| 日本一二三区视频观看| 国产午夜精品论理片| 国产高清视频在线观看网站| 免费看日本二区| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 亚洲中文字幕日韩| 最近视频中文字幕2019在线8| 在线播放国产精品三级| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 三级国产精品片| 熟女电影av网| 变态另类丝袜制服| 少妇熟女欧美另类| 免费无遮挡裸体视频| 91久久精品国产一区二区三区| 99久久成人亚洲精品观看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 好男人在线观看高清免费视频| 看免费成人av毛片| 变态另类丝袜制服| 欧美高清性xxxxhd video| 国产高潮美女av| av卡一久久| 久久亚洲国产成人精品v| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 国产v大片淫在线免费观看| 国产精品久久久久久久电影| 久久精品综合一区二区三区| av线在线观看网站| 午夜福利在线在线| 日本欧美国产在线视频| 国产精品一区二区在线观看99 | 亚洲在久久综合| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品久久久久久久久免| av在线蜜桃| 日韩av在线大香蕉| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲美女视频黄频| 99热全是精品| 日本黄色视频三级网站网址| 日韩成人av中文字幕在线观看| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 黄片wwwwww| 热99re8久久精品国产| 国产高清不卡午夜福利| 男女国产视频网站| 国产大屁股一区二区在线视频| 91aial.com中文字幕在线观看| 1024手机看黄色片| 三级经典国产精品| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 欧美变态另类bdsm刘玥| 久久久久久伊人网av| 桃色一区二区三区在线观看| 永久网站在线| 91精品伊人久久大香线蕉| kizo精华| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 内地一区二区视频在线| 久久99精品国语久久久| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲性久久影院| 少妇的逼好多水| 丝袜喷水一区| 最新中文字幕久久久久| 99热这里只有是精品在线观看| 日本黄大片高清| 美女内射精品一级片tv| 日韩国内少妇激情av| 日韩强制内射视频| 亚洲丝袜综合中文字幕| 99久久中文字幕三级久久日本| 欧美丝袜亚洲另类| 身体一侧抽搐| 日韩欧美精品免费久久| 亚洲av二区三区四区| 免费观看性生交大片5| 国产午夜精品论理片| 九九热线精品视视频播放| 美女被艹到高潮喷水动态| 国产精品人妻久久久影院| 级片在线观看| 热99在线观看视频| 国产精品蜜桃在线观看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲av日韩在线播放| 国产精华一区二区三区| 在线观看66精品国产| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 99热这里只有是精品50| 亚洲欧洲国产日韩| 日本黄色片子视频| 蜜臀久久99精品久久宅男| 精品无人区乱码1区二区| 日韩av在线免费看完整版不卡| 熟女人妻精品中文字幕| 日韩欧美 国产精品| 亚洲国产色片| 日本黄大片高清| 久久久久九九精品影院| 黄色一级大片看看| 午夜亚洲福利在线播放| 国产在线一区二区三区精 | 亚洲国产精品sss在线观看| 久久久色成人| 高清视频免费观看一区二区 | 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 淫秽高清视频在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 国产又黄又爽又无遮挡在线| 草草在线视频免费看| 高清毛片免费看| 婷婷六月久久综合丁香| 国产一级毛片在线| av免费观看日本| 久久草成人影院| 欧美日本亚洲视频在线播放| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产免费视频播放在线视频 | 色5月婷婷丁香| 日本免费a在线| 亚洲最大成人中文| 亚洲最大成人av| 欧美日本视频| 最近中文字幕高清免费大全6| 色5月婷婷丁香| 舔av片在线| 看黄色毛片网站| 综合色av麻豆| 日韩成人伦理影院| 欧美性猛交黑人性爽| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产精品精品国产色婷婷| 91狼人影院| 日日干狠狠操夜夜爽| 白带黄色成豆腐渣| 97热精品久久久久久| 国产老妇女一区| 精品欧美国产一区二区三| 久久久久久九九精品二区国产| 中文字幕精品亚洲无线码一区|