基于花粉形態(tài)學(xué)篩選獼猴桃突變體的研究

摘要：花粉形態(tài)特征可作為獼猴桃屬植物的分類(lèi)依據(jù)?，F(xiàn)有的研究方法需要使用掃描電鏡測(cè)量花粉形態(tài)的多項(xiàng)特征，不能滿足獼猴桃遺傳育種工作的需求。為了探究一種基于獼猴桃花粉形態(tài)篩選突變體的新方法，以39份不同獼猴桃花粉為試驗(yàn)材料（包含雌株花粉15份、雄株花粉23份、突變體兩性花花粉1份），運(yùn)用掃描電鏡在較低倍數(shù)（1 000×）下觀察，選取5項(xiàng)特征指標(biāo)進(jìn)行測(cè)量，對(duì)供試樣本進(jìn)行主成分分析和正態(tài)分布分析。結(jié)果表明，39份樣本均為N3C4P5型，赤道面觀均為三裂圓形，具3條萌發(fā)溝；主成分分析中PC1、PC2貢獻(xiàn)的總方差為96.27%；載荷圖表明，在較低倍數(shù)下5個(gè)花粉形態(tài)指標(biāo)具有一定的差異性；得分圖表明，樣本中的雌株花粉和雄株花粉存在明顯分離，它們的形態(tài)學(xué)相似度不大，極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度的比值（P/E）與赤道軸長(zhǎng)度（E）二者夾角最大，具有區(qū)分意義；P/E的正態(tài)分布曲線軸須圖將數(shù)據(jù)結(jié)果可視化，根據(jù)樣本的區(qū)間差異篩選離群的突變體，篩選出突變體材料4份。

關(guān)鍵詞：獼猴桃；花粉形態(tài)；掃描電鏡；突變體

中圖分類(lèi)號(hào)：S663.401 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2024）15-0178-09

收稿日期：2023-09-14

基金項(xiàng)目：四川省科技計(jì)劃（編號(hào)：2021YFYZ0023、2020ZYD042）；四川省省級(jí)科研院所基本科研業(yè)務(wù)項(xiàng)目（編號(hào)：2021JDKY0023）。

作者簡(jiǎn)介：何利欽（1988—），女，四川鹽亭人，碩士，助理研究員，主要從事獼猴桃病蟲(chóng)害及遺傳育種相關(guān)研究。E-mail：heliqin777@163.com。

通信作者：王麗華，碩士，研究員，主要從事獼猴桃遺傳育種相關(guān)研究。E-mail：514935456@qq.com。

獼猴桃屬植物的原生中心和分布中心均在我國(guó)，野生種質(zhì)資源極為豐富［1］。獼猴桃屬（Actinidia Lindl.）共有54個(gè)種和21個(gè)變種，約75個(gè)分類(lèi)群，其中有52個(gè)種原產(chǎn)于我國(guó)［2］。不同來(lái)源的材料種間和種內(nèi)差異較大，在新品種選育和種質(zhì)創(chuàng)新方面的資源開(kāi)發(fā)利用潛力很大?，F(xiàn)有的育種方法有很多，有傳統(tǒng)的實(shí)生選育，還有雜交育種、芽變選擇、輻射誘變、生物技術(shù)育種等［3-7］。新品種的選育主要以從野生資源和它們的實(shí)生子代中篩選材料培育為主［8］，在其生殖與發(fā)育過(guò)程中，花粉產(chǎn)生雄性配子，花粉形態(tài)特征的遺傳保守性很強(qiáng)，不會(huì)因外界條件而受到影響，同時(shí)花粉攜帶了大量信息，在研究獼猴桃屬植物的親緣關(guān)系和突變體上有重要的參考價(jià)值和理論依據(jù)［1］。

獼猴桃植株在個(gè)體遺傳表現(xiàn)上有雌雄株的區(qū)別，花朵是形態(tài)上的二性花，功能上的單性花，在發(fā)育過(guò)程中，雌蕊或雄蕊發(fā)生選擇性敗育，即表現(xiàn)為雄株花粉可育雌株花粉敗育［9］。有關(guān)獼猴桃屬植物孢粉學(xué)的研究表明，獼猴桃花粉攜帶的遺傳信息具有穩(wěn)定性和多樣性。姜正旺等觀察了獼猴桃屬植物 21 個(gè)種、6 個(gè)變種和4個(gè)不同種間雜交F1代植株的花粉形態(tài)，提出獼猴桃屬的花粉形狀主要以長(zhǎng)球形至近球形為主，變異較小，而花粉粒大小及外壁紋飾的種間差異較大［10］。寧允葉等觀察研究了紅陽(yáng)獼猴桃及其變種的花粉形態(tài)，發(fā)現(xiàn)其中存在顯著差異［11］。王柏青觀察了東北3種獼猴桃的花粉形態(tài)，發(fā)現(xiàn)3種花粉的形態(tài)特征對(duì)比可以作為分種的依據(jù)［12］。鐘敏等對(duì)23個(gè)野生毛花獼猴桃雄株花粉粒進(jìn)行觀察分析，發(fā)現(xiàn)不同單株間存在差異，分別呈現(xiàn)毛花獼猴桃的遺傳保守性和多樣性［13］。齊秀娟等對(duì)獼猴桃3個(gè)種30個(gè)品系的花粉粒進(jìn)行形態(tài)觀察，發(fā)現(xiàn)獼猴桃花粉外觀形態(tài)和大小在相同種內(nèi)和相同來(lái)源環(huán)境背景下存在一定的保守性，花粉大小、萌發(fā)溝長(zhǎng)度、萌發(fā)溝脊寬度、極軸長(zhǎng)度、 赤道軸長(zhǎng)度可作為劃分中華獼猴桃和美味獼猴桃的孢粉學(xué)特征依據(jù)［14］。這些學(xué)者先后利用掃描電鏡對(duì)獼猴桃種間、種內(nèi)及變種的不同花粉進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察研究，探討不同獼猴桃間的親緣關(guān)系，結(jié)果表明花粉形態(tài)上的顯著差異可以作為篩選獼猴桃突變體的方式之一，為獼猴桃種質(zhì)資源開(kāi)發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。

但是這些研究存在2個(gè)方面的不足之處。一方面，這些研究需要測(cè)量花粉形態(tài)的多項(xiàng)指標(biāo)，至少包括花粉極軸長(zhǎng)度、赤道軸長(zhǎng)度、萌發(fā)溝長(zhǎng)度、萌發(fā)溝寬度、外壁紋飾等多項(xiàng)特征，根據(jù)多項(xiàng)指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)進(jìn)行平均值與標(biāo)準(zhǔn)差比較，從而研究親緣關(guān)系和變異系數(shù)。該類(lèi)方法的不足之處在于：其一，在實(shí)際育種工作和科學(xué)研究中，基于獼猴桃屬植物種間和種內(nèi)資源的多樣性、花粉種類(lèi)和數(shù)量較多的情況下，需要進(jìn)行大量繁瑣的工作；其二，花粉外壁紋飾的觀察對(duì)上機(jī)樣品和拍攝條件要求高，現(xiàn)有技術(shù)條件下，一般須在掃描電鏡放大10 000倍以上進(jìn)行觀察，如果樣品含水量或者導(dǎo)電性不佳，需要預(yù)先處理樣品，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，同時(shí)由于外壁紋飾的結(jié)構(gòu)復(fù)雜多樣，相關(guān)研究依賴于觀察者的主觀判斷，沒(méi)有定量指標(biāo)，在大量篩選工作中不利于標(biāo)準(zhǔn)化的執(zhí)行和工作效率的提高。另外一方面，現(xiàn)有研究幾乎都是針對(duì)雄株的雄花花粉進(jìn)行相關(guān)研究，但是雌株也會(huì)產(chǎn)生花粉，以往多認(rèn)為雌株花粉沒(méi)有可育性，研究意義不大，而王明忠等從龍門(mén)山南段的野生美味獼猴桃變種的彩色獼猴桃中，篩選出具有生產(chǎn)利用價(jià)值的兩性花（雌雄同花）品種龍山紅［15］。筆者的相關(guān)研究也發(fā)現(xiàn)，雌株的花粉形態(tài)具有穩(wěn)定性和多樣性。因此，對(duì)雌株花粉的研究也有一定的價(jià)值。

本研究通過(guò)掃描電鏡觀察測(cè)量中華獼猴桃、美味獼猴桃、軟棗獼猴桃、毛花獼猴桃、葛棗獼猴桃、四萼獼猴桃、京梨獼猴桃共7種獼猴桃的39份花粉，其中雌株花粉15份，雄株花粉23份，美味獼猴桃突變體兩性花龍山紅花粉1份，供試材料在掃描電鏡的低倍數(shù)下觀察測(cè)量，運(yùn)用主成分分析法探究影響花粉形狀的主要因素，繪制正態(tài)分布曲線軸須圖，探究一種篩選獼猴桃突變體的新方法，以期為獼猴桃的種質(zhì)資源選育和遺傳育種提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

兩性花龍山紅獼猴桃花粉來(lái)自四川省自然資源科學(xué)研究院峨眉山生物試驗(yàn)站，其余供試花粉全部來(lái)源于四川省自然資源科學(xué)研究院什邡市獼猴桃研究基地。于2021—2023年的春季獼猴桃花期，選取不同獼猴桃的雄株和雌株進(jìn)行取樣，在四川省自然資源科學(xué)研究院實(shí)驗(yàn)室中開(kāi)展相關(guān)試驗(yàn)。不同獼猴桃花粉信息詳見(jiàn)表1。

1.2 獼猴桃花粉收集

在獼猴桃初花期，采摘即將開(kāi)放的鈴鐺花，用小鑷子剝落花藥于硫酸紙袋內(nèi)，置于帶蓋的潔凈培養(yǎng)皿中，在25 ℃的恒溫培養(yǎng)箱中放置24 h，待花粉粒散出后，密封保存于棕色玻璃瓶中，放置于 -20 ℃ 冰箱中備用。

1.3 掃描電鏡觀察拍照

用潔凈棉簽將供試花粉輕柔地粘黏在導(dǎo)電膠上，噴金鍍膜后，放置在日立SU3500掃描電子顯微鏡中，在較低倍數(shù)下拍攝觀察。分別在500×、1 000×、3 000×左右倍數(shù)下，選取花粉粒的群體、極面觀、赤面觀等具有代表性的視野拍照。

1.4 數(shù)據(jù)分析

用ImageJ軟件測(cè)量較低倍數(shù)（1 000×）下花粉粒的5個(gè)指標(biāo)：極軸長(zhǎng)度（P）、赤道軸長(zhǎng)度（E）、極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）、萌發(fā)溝長(zhǎng)度、花粉粒大?。≒×E）。每種花粉粒隨機(jī)挑選30粒進(jìn)行測(cè)量。試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用Excel軟件進(jìn)行相關(guān)處理，運(yùn)用IBM SPSS Statistics 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，運(yùn)用軟件Grapad Prism 9.5進(jìn)行主成分分析。

在低倍數(shù)500×下拍照，利用ImageJ軟件測(cè)量花粉粒的極軸長(zhǎng)度（P）、單粒花粉對(duì)應(yīng)的赤道軸長(zhǎng)度（E），計(jì)算極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）。每份樣本測(cè)量花粉粒100粒以上。運(yùn)用軟件Origin 2021制作極軸長(zhǎng)度與赤道長(zhǎng)度比值（P/E）的正態(tài)分布曲線軸須圖，花粉形狀學(xué)相關(guān)分類(lèi)、指標(biāo)的學(xué)術(shù)用語(yǔ)參考《孢粉學(xué)手冊(cè)》［16］、《孢粉學(xué)概論》［17］。

2 結(jié)果與分析

2.1 花粉形態(tài)學(xué)和大小

由圖1可見(jiàn)，全部供試花粉形態(tài)均為單粒、等極、輻射對(duì)稱。供試花粉的赤道面觀均為三裂圓形，具3條萌發(fā)溝，等間距離分布，根據(jù)Erdtman提出的NPC系統(tǒng)分類(lèi)［16］，41份花粉均為N3P4C5型。極面觀為超長(zhǎng)球形、長(zhǎng)球形、近球形或扁球形，其中11份中華獼猴桃中6份雄株花粉為超長(zhǎng)球形或長(zhǎng)球形，5份雌株花粉為近球形、長(zhǎng)球形或扁球形；美味獼猴桃中9份雄株花粉為超長(zhǎng)球形或長(zhǎng)球形，4份雌株花粉為近球形，1份兩性花花粉為近球形；軟棗獼猴桃中3份雄株花粉為超長(zhǎng)球形，2份雌株花粉為長(zhǎng)球形、近球形；毛花獼猴桃中1份雄株花粉為長(zhǎng)球形，1份雌株花粉為扁球形；葛棗獼猴桃中1份雄株花粉為超長(zhǎng)球形，1份雌株花粉為近球形；四萼獼猴桃中1份雄株花粉為超長(zhǎng)球形，1份雌株花粉為近球形； 京梨獼猴桃中2份雄株花粉分別為長(zhǎng)球形和超長(zhǎng)球形，1份雌株花粉為近球形。

表1列出了分析統(tǒng)計(jì)的各項(xiàng)形態(tài)指標(biāo)。雄株花粉極軸長(zhǎng)度為21.15～33.31 μm，最小值為美味獼猴桃，最大值為四萼獼猴桃；雌株花極軸長(zhǎng)度為14.10～21.70 μm，最小值為中華獼猴桃，最大值為四萼獼猴桃。雄株花粉赤道軸長(zhǎng)度為9.96～16.90 μm，最小值為京梨獼猴桃，最大值為美味獼猴桃；雌株花粉赤道軸長(zhǎng)度為14.68～24.05 μm，最小值為中華獼猴桃，最大值為毛花獼猴桃。雄株花粉極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值為1.27～2.26，供試樣品中最小值為美味獼猴桃，最大值為京梨獼猴桃；雌株花粉極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值為0.83～1.36，供試花粉中最小值和最大值均為中華獼猴桃。雄株花粉粒大?。O軸×赤道軸）為223.32～552.42 μm2，最小值為京梨獼猴桃，最大值為四萼獼猴桃；雌株花粉粒大?。O軸×赤道軸）為221.91～559.91 μm2，最小值為中華獼猴桃，最大值為毛花獼猴桃。雄株花粉萌發(fā)溝長(zhǎng)度為17.55～29.04 μm，最小值為美味獼猴桃，最大值為四萼獼猴桃；雌株花粉萌發(fā)溝長(zhǎng)度為9.65～15.68 μm，最小值為京梨獼猴桃，最大值為軟棗獼猴桃。

2.2 花粉指標(biāo)的主成分分析（PCA）

將供試的獼猴桃花粉38份材料（不包括25號(hào)樣本兩性花獼猴桃）的5個(gè)花粉形態(tài)指標(biāo)［包括極軸長(zhǎng)度（P）、赤道軸長(zhǎng)度（E）、萌發(fā)溝長(zhǎng)度、極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）、花粉粒大?。≒×E）］的相關(guān)數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化后進(jìn)行PCA（圖2）。由圖 2-A、圖2-B可知，前2個(gè)主成分的貢獻(xiàn)度幾乎可以涵蓋原始變量的信息，前2個(gè)主成分貢獻(xiàn)的總方差為96.27%。從圖2-D載荷圖上可以看出，5個(gè)花粉形態(tài)指標(biāo)具有一定的差異性，其中極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度的比值（P/E）、極軸長(zhǎng)度（P）、萌發(fā)溝長(zhǎng)度三者分布比較集中，夾角較小，相關(guān)信息相似，區(qū)分意義不大；而P/E與赤道軸長(zhǎng)度（E）夾角最大，冗余信息很少，可以得出二者具有區(qū)分意義。由圖 2-C 可知，樣本間有一定的程度的聚類(lèi)，雌株花粉和雄株花粉存在明顯分離，二者之間相似度不大，花粉形態(tài)特征上發(fā)生了一定程度的變化。

2.3 花粉的P/E分布范圍分析

使用軟件Origin 2021制作正態(tài)分布曲線軸須圖。由圖3可知，中華獼猴桃的雌株花粉中的7、8、9、11號(hào)材料的P/E值分布在0.60～1.25之間，分布范圍較窄且集中，重合度較高；雄株花粉中的1、2、3、5、6號(hào)材料的P/E值分布在1.60～2.60之間，分布范圍同樣較窄且集中，重合度較高。但是，雌株花粉中的10號(hào)材料、雄株花粉中的4號(hào)材料分布趨勢(shì)差異較大。10號(hào)材料的P/E值分布范圍為0.60～1.80，分布范圍很寬，與大部分雌株花粉重合度不高，有部分值卻和雄株花粉重合在一起，比值分布集中在1.25左右，該區(qū)域幾乎不含其他雌株和雄株花粉。雄株花粉中的4號(hào)材料P/E值分布范圍為1.50～2.50，其中有部分與其他雄株花粉不重合，較接近于雌株花粉的分布范圍，與雌株花粉中的10號(hào)材料有部分重合，但是其離群程度又小于10號(hào)材料。從分布軸須圖中可見(jiàn)，4號(hào)、10號(hào)材料不同于其他材料?？梢钥闯?，圖4-A、圖4-B圖和圖4-D、圖4-E圖雌株花粉或雄株花粉的形態(tài)一致，幾乎沒(méi)有變化，而圖4-C、圖4-F圖中的4號(hào)、10號(hào)材料花粉形態(tài)不一，發(fā)生了突變。

圖5為美味獼猴桃的花粉P/E值分布范圍?？偟膩?lái)說(shuō)，雌株花粉21、22、23、24號(hào)材料分布在0.50～1.50之間，雄株花粉12、13、14、15、16、18、19、20號(hào)材料分布在1.50～2.75之間，雌株和雄株花粉幾乎不重合，較為集中地分布在2個(gè)區(qū)域。而雄株花粉中的17號(hào)材料分布范圍為0.60～2.00，分布范圍廣，包含雌株和雄株花粉，且與雌株花粉重合區(qū)域更多。25號(hào)材料為兩性花龍山紅樣本，比值分布在0.50～1.75，分布范圍也較廣，包含雌株和雄株花粉，很大一部分區(qū)域與17號(hào)材料重合在一起。由圖6可知，17、25號(hào)材料在形態(tài)上區(qū)別較大，花粉形態(tài)上發(fā)生了突變。

由圖7可知，軟棗獼猴桃的雌株花粉P/E值分布范圍在0.60～1.50之間，雄株花粉P/E值分布范圍在1.60～2.60之間。由圖8可知，毛花獼猴桃、葛棗獼猴桃、四萼獼猴桃、京梨獼猴桃的雌株花粉P/E值分布范圍在0.50～1.50之間，雄株花粉P/E值分布范圍在1.50～2.75之間?？梢?jiàn)，P/E值分布均表現(xiàn)為分布范圍較為集中且重合區(qū)域較大，雌株和雄株花粉分布在不同區(qū)域 且區(qū)域之間幾乎不重合。由圖9、圖10也可看出，雄株或雌株花粉在形態(tài)上表現(xiàn)一致，幾乎沒(méi)有差異，未發(fā)生突變。

3 討論與結(jié)論

被子植物花粉在生殖與發(fā)育過(guò)程中產(chǎn)生雄性配子，攜帶大量穩(wěn)定的遺傳信息，花粉形態(tài)學(xué)的研究為獼猴桃屬植物的親緣關(guān)系和種質(zhì)資源選育提供重要參考價(jià)值。在相關(guān)研究中，康寧等先后運(yùn)用掃描電鏡對(duì)不同獼猴桃種間和種內(nèi)資源材料的花粉形態(tài)進(jìn)行了觀察，獼猴桃花粉均為N3P4C5型，且都以分散的單粒、等極和輻射對(duì)稱形式存在，萌發(fā)孔為三孔溝，極面觀為三裂圓形，赤道面觀察到1～2條萌發(fā)溝，但是各研究均以雄株花粉為主，幾乎很少見(jiàn)有關(guān)雌株花粉的研究報(bào)道［10，13-14，18-19］。本研究中39份供試材料包括7種獼猴桃花粉，不論雌雄株還是突變體兩性花龍山紅獼猴桃的花粉，均與這些學(xué)者的觀察結(jié)果一致，同時(shí)既補(bǔ)充了雌株花粉形態(tài)學(xué)研究的理論基礎(chǔ)，也進(jìn)一步證實(shí)獼猴桃花粉在形狀上穩(wěn)定遺傳變異較少的結(jié)論［20］。

獼猴桃屬植物花粉還呈現(xiàn)出遺傳多樣性。鐘敏等先后對(duì)23個(gè)野生毛花獼猴桃雄株花粉和3個(gè)種的30個(gè)品系獼猴桃花粉進(jìn)行觀察研究，花粉粒在極軸長(zhǎng)度（P）、赤道軸長(zhǎng)度（E）、萌發(fā)溝長(zhǎng)度、極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）、花粉粒大小（P×E）上都存在差異［13-14］，本研究結(jié)果也與其一致。為了研究供試材料的親緣關(guān)系，這些學(xué)者還在高倍數(shù)掃描電鏡下觀察測(cè)量了花粉的外壁紋飾形狀和萌發(fā)溝寬度，再取極軸長(zhǎng)度（P）、萌發(fā)溝長(zhǎng)度、赤道軸長(zhǎng)度（E）、萌發(fā)溝寬度、極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）、花粉粒大?。≒×E）等指標(biāo)的均值進(jìn)行變異系數(shù)分析或者聚類(lèi)分析。然而，在獼猴桃新品種選育中，有大量的獼猴桃野生資源和實(shí)生子代樣本需要篩選和評(píng)價(jià)；這些方法或是因?yàn)閷?duì)樣品前處理和人員操作經(jīng)驗(yàn)有高要求，或是因?yàn)橛^察測(cè)量各項(xiàng)指標(biāo)較多導(dǎo)致工作量太大，往往不能滿足實(shí)際工作的需要。為此，筆者所在課題組提出一種篩選獼猴桃花粉突變體的方法。

在極軸長(zhǎng)度（P）、赤道軸長(zhǎng)度（E）、萌發(fā)溝長(zhǎng)度、極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）、花粉粒大?。≒×E）、萌發(fā)溝寬度、外壁紋飾7項(xiàng)花粉特征指標(biāo)中，為了提高工作效率，選擇在較低倍數(shù)下（1 000×）拍照觀察，舍去在高倍數(shù)下觀察的萌發(fā)溝寬度和外壁紋飾2項(xiàng)特征 增加觀察群體數(shù)量的同時(shí)減少測(cè)量指標(biāo)數(shù)量。然后為了探究較低倍數(shù)下的極軸長(zhǎng)度（P）、赤道軸長(zhǎng)度（E）、萌發(fā)溝長(zhǎng)度、極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）、花粉粒大?。≒×E） 5項(xiàng)指標(biāo)是否可行以及相關(guān)指標(biāo)的降維，運(yùn)用軟件Grapad Prism 9.5進(jìn)行主成分分析（PCA）。陡坡圖、方差比例圖顯示前2個(gè)主成分的貢獻(xiàn)度為96.27%，幾乎可以涵蓋原始變量的信息；得分圖中樣本間有一定的程度的聚類(lèi)，雌株和雄株花粉存在明顯分離，二者之間相似度不大；載荷圖表明5項(xiàng)指標(biāo)中 極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）與赤道軸長(zhǎng)度（E）夾角最大，冗余信息很少，二者具有區(qū)分意義。筆者結(jié)合實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)，認(rèn)為極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）這項(xiàng)指標(biāo)在花粉形態(tài)學(xué)上起著關(guān)鍵作用，特別是在突變體的花粉形態(tài)上具有重要參考價(jià)值，發(fā)生改變的花粉形態(tài)會(huì)與群體有一定程度上的差異。為此，利用ImageJ軟件快速測(cè)量低倍數(shù)下的掃描電鏡圖片，因?yàn)樵诘捅稊?shù)下電鏡圖片中花粉粒顆粒較多，可快速地得到多組極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）數(shù)據(jù)。采用軟件Origin 2021繪制極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度比值（P/E）的正態(tài)曲線分布軸須圖，將所有數(shù)據(jù)可視化呈現(xiàn)出來(lái)。從不同獼猴桃花粉的P/E值的正態(tài)分布區(qū)間區(qū)域分析得出，4、10、17、25號(hào)材料差異較大，4號(hào)材料為中華獼猴桃雄株花粉；10號(hào)材料為中華獼猴桃雌株花粉，17號(hào)為美味獼猴桃雄株花粉，25號(hào)材料為美味獼猴桃的突變體兩性花龍山紅獼猴桃花粉；再對(duì)照相應(yīng)的掃描電鏡圖片，均可在群體中找到形狀差異較大的突變花粉粒，驗(yàn)證該種方法的可行性。

本研究中的供試花粉材料在形態(tài)上具有穩(wěn)定的遺傳共性特征，同時(shí)也具有多樣性和差異性。在較低倍數(shù)下（1 000×）運(yùn)用掃描電鏡對(duì)群體花粉粒拍照，實(shí)現(xiàn)快速測(cè)量，得到多組極軸長(zhǎng)度與赤道軸長(zhǎng)度的比值（P/E）數(shù)據(jù)，繪制正態(tài)分布曲線軸須圖，所有數(shù)據(jù)實(shí)現(xiàn)可視化，分析正態(tài)分布區(qū)間，篩選出4份差異較大的材料，在相應(yīng)的掃描電鏡圖片中均可找到形狀差異較大的突變花粉粒，該方法可行，且可高效直觀地篩選獼猴桃突變體，期待可為獼猴桃的資源開(kāi)發(fā)利用以及新品種選育提供理論參考依據(jù)。

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