花生莖源茉莉炭疽菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究

摘 要： 旨在探究首次從花生莖中分離出茉莉炭疽菌（Colletotrichum jasminigenum）的生物學(xué)特性。通過三點(diǎn)接種法，經(jīng)馬鈴薯葡萄糖瓊脂（potato dextrose agar， PDA）培養(yǎng)基分離培養(yǎng)，分別用乳酸酚棉藍(lán)染色和掃描電鏡觀察其形態(tài)，提取分離真菌DNA，用PCR方法擴(kuò)增ITS區(qū)并測(cè)序，比對(duì)該基因同源性及遺傳進(jìn)化關(guān)系。將孢子懸液以5×107 CFU·mL-1劑量感染昆明小鼠，并觀察小鼠的臨床癥狀、血清生化指標(biāo)和剖檢病變。用K-B紙片法探究其耐藥表型。結(jié)果顯示，分離株分生孢子長(zhǎng)29.6 μm± 0.87 μm，呈月牙形；菌絲透明無性，有隔和分枝，無剛毛；附著孢呈棍棒狀或者卵球形。PCR擴(kuò)增得到該菌ITS區(qū)序列長(zhǎng)度為586 bp，序列提交GenBank（OR472966）。根據(jù)形態(tài)學(xué)結(jié)合ITS區(qū)序列分析結(jié)果確定分離株為茉莉炭疽菌，命名為SLY01。用SLY01菌株攻毒小鼠14 d后導(dǎo)致血清堿性磷酸酶含量極顯著升高（P＜0.01），肝臟器指數(shù)顯著下降（P＜0.05），并從感染小鼠體內(nèi)再次分離鑒定出茉莉炭疽菌。組織病理學(xué)結(jié)果顯示，試驗(yàn)組小鼠肺泡壁水腫伴有大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)；肝細(xì)胞出現(xiàn)大面積顆粒變性，肝小葉內(nèi)見出血和肝細(xì)胞壞死；腎可見腎小管上皮發(fā)生顆粒變性。藥敏試驗(yàn)顯示，SLY01菌株對(duì)卡泊芬凈和伏立康唑耐藥，對(duì)兩性霉素B敏感，對(duì)伊曲康唑中度敏感。本研究分離鑒定得到茉莉炭疽菌，感染小鼠主要損傷靶器官為肝、肺，并且對(duì)多種藥物耐藥。這為進(jìn)一步研究茉莉炭疽菌的防治提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞： 茉莉炭疽菌；分離鑒定；致病性；耐藥性

中圖分類號(hào)： S852.661

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A""" 文章編號(hào)：0366-6964（2024）05-2206-08

收稿日期：2023-08-15

基金項(xiàng)目：四川省科技廳科研基金項(xiàng)目（2023YFQ0077）；四川省肉羊創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)防疫崗位（sccxtd-2020-14）；西南民族大學(xué)2023年中央高校優(yōu)秀學(xué)生培養(yǎng)工程項(xiàng)目（2023NYXXS116）

作者簡(jiǎn)介：鄭 芮（1999-），女，云南昆明人，碩士生，主要從事動(dòng)物病理學(xué)研究，E-mail：zryjsyx@163.com

*通信作者： 王 利，主要從事動(dòng)物病理學(xué)研究，E-mail：qinxin916@aliyun.com；魏 勇，主要從事動(dòng)物疫病防控，E-mail：veishangyan@163.com

Isolation， Identification and Biological Characterization of Colletotrichum jasminigenum

in Stems of Peanuts

ZHENG" Rui1， LIU" Zishi1， ZHANG" Kangyou2， YAN" Yong2， WEI" Ling2， ZEREN" Wengmu2，

DINGZE" Demi2， HUANG" Jianjun2， WANG" Li1*， WEI" Yong3*

（1.Southwest University for Nationalities， Qinghai Tibet Plateau Animal Genetic

Resources Protection and Utilization Key Laboratory of the Ministry of Education and Sichuan

Province， Chengdu 610041，" China;

2.Agriculture， Animal Husbandry， Rural Affairs and

Science and Technology Bureau of Yajiang County， Ganzi 626700，" China;

3.Sichuan Academy of Animal Husbandry Sciences， Chengdu 610066，" China）

Abstract：" The objective of this study was to investigate the biological properties of Colletotrichum jasminigenum. The fungi were cultivated in PDA using the three-spot inoculation method， followed by observation of their morphology through lactophenol cotton blue staining and scanning electron microscopy. Fungal DNA was extracted via PCR to amplify the ITS region of the gene and sequenced for comparison of gene homology and genetic evolutionary relationships. The concentration of the spore suspension was adjusted to 5×107 CFU·mL-1 for mouse infection， and clinical symptoms， serum biochemical indexes， and anatomical lesions were observed. The Kirby-Bauer method was employed to investigate fungal drug resistance phenotypes. The results showed that the isolated conidia were 29.6 μm± 0.87 μm in length and crescent-shaped. The mycelium was hyaline， asexual， septate， and branched without bristles. Additionally， the adherent spores were clavate or ovoid in shape. The PCR amplification yielded a sequence length of 586 bp for the ITS region of the fungi， which was subsequently submitted to GenBank （OR472966）. Based on both morphology and sequence analysis of the ITS region， it was determined that the isolate belonged to Colletotrichum jasminigenum and was named SLY01. Attacking mice with strain SLY01 for 14 days resulted in a highly significant increase in serum alkaline phosphatase levels （Plt;0.01） and a significant decrease in liver organ index （Plt;0.05）. Colletotrichum jasminigenum was reisolated from the infected mice. Histopathological results showed edema of the alveolar walls with massive lymphocytic infiltration， extensive granular degeneration with hemorrhage and hepatocellular necrosis in the lobules of hepatocytes， and granular degeneration of the renal tubular epithelium in the kidneys. The results of the drug sensitivity test showed that SLY01 was resistant to caspofungin and voriconazole， sensitive to amphotericin B and moderately sensitive to itraconazole. In this study， Colletotrichum jasminigenum was isolated and characterized. The liver and lungs were identified as the main target organs affected in infected mice， and the fungus showed resistance to various drugs. These findings provide a theoretical basis for further research on fungal infections originating from food sources.

Key words： Colletotrichum jasminigenum; isolation and identification; pathogenicity; drug resistance

*Corresponding authors：WANG Li， E-mail：qinxin916@aliyun.com;WEI Yong，E-mail： veishangyan@163.com

茉莉炭疽菌是炭疽菌屬（Colletotrichum Corda）真菌，由Agarwal和Sahni［1］在1965年從茉莉葉斑中第一次分離。在越南，該種炭疽病曾對(duì)人工林造成大面積損失，感染樹葉和花朵，導(dǎo)致落葉和枯死［2］。炭疽菌屬作為一種世界性的真菌屬，現(xiàn)存超過351個(gè)公認(rèn)的真菌種，歸于菌物界（Fungi），真菌門（Eumycota），半知菌亞門（Deuteromycotina），腔孢綱（Coelomycetes），黑盤孢目（Melanconiales），主要分布在全球熱帶和溫帶地區(qū)［3-5］。炭疽菌屬真菌被認(rèn)為是植物致病菌前十位的病原體之一［6］，可引起嚴(yán)重的炭疽病和果腐病［7-8］，殃及多種經(jīng)濟(jì)類作物如花生果腐病，甘蔗紅腐病、咖啡漿果病、草莓和香蕉冠腐病以及豇豆褐斑［3，9-11］。目前，已報(bào)道炭疽菌屬真菌的次生代謝物超過109種，主要包括氮代謝物、甾醇、萜烯、吡喃酮、酚類和脂肪酸［12-13］。并且炭疽菌屬真菌毒素普遍具有熱穩(wěn)定、抗酸堿的特性，因此在草料中難以去除［14-15］。

炭疽菌屬真菌主要通過吸入孢子或接觸皮膚傷口的方式感染動(dòng)物。Winter等［16］報(bào)道炭疽菌屬真菌接觸性感染貓后會(huì)引起皮下腫塊、潰瘍和紅斑，嗜酸性粒細(xì)胞增多癥，肺實(shí)質(zhì)性病變，腹部超聲顯示雙腎結(jié)構(gòu)異常。尖孢炭疽感染的昆蟲體內(nèi)有大量的菌核腫塊［17］，肯普氏海龜感染后肺部和腎發(fā)生了彌散性真菌侵襲［18］。人類炭疽菌屬感染發(fā)生在一些創(chuàng)傷事件后，如自然損傷或白內(nèi)障手術(shù)。Guarro等［19］報(bào)道一例有外傷史的糖尿病患者，由膠孢炭疽菌引起皮下感染，并在膿腫灶中分離鑒定到膠孢炭疽菌。炭疽菌屬真菌引起角膜炎的病原菌通常包括辣椒炭疽病菌、黑線炭疽菌和禾生炭疽菌［20-23］。這些報(bào)道證明炭疽菌屬真菌作為條件致病菌可能引起全身病理?yè)p傷并且可以在機(jī)體定植。目前，國(guó)內(nèi)外鮮有炭疽菌屬真菌對(duì)動(dòng)物致病性的研究，基于此本研究在草料花生莖分離、鑒定得到茉莉炭疽菌，對(duì)分離菌的病原特征、致病性和耐藥性開展研究，為家畜感染炭疽桿菌屬真菌疾病的用藥和進(jìn)一步研究提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 樣品來源和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

真菌分離樣品來源于四川省資陽(yáng)市某羊場(chǎng)草料中的花生莖。試驗(yàn)動(dòng)物為10只健康狀況良好，體況相近的SPF級(jí)雌性KM小鼠，體重21 g±3 g，5周齡，購(gòu)自四川省成都市中醫(yī)藥研究所。

1.2 主要儀器和試劑

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（potato dextrose agar，PDA）和馬鈴薯液體培養(yǎng)基（potato dextrose broth，PDB）均購(gòu)自成都聯(lián)智創(chuàng)思生物技術(shù)有限公司；乳酸酚棉藍(lán)染色液（R20704）購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司；掃描電鏡（JSM-IT700HR）購(gòu)自日本電子株式會(huì)社；CTAB抽提液（NE0011）購(gòu)自北京雷根生物技術(shù)有限公司；PCR儀購(gòu)自Eppendorf Germany公司；谷草轉(zhuǎn)氨酶（glutamic-oxaloacetic transaminase，AST）測(cè)定試劑盒、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（glutamic-pyruvic transaminase，ALT）測(cè)定試劑盒、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）測(cè)定試劑盒購(gòu)自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司；藥敏紙片（antibiotic disc）購(gòu)自意大利Liofilchem公司。

1.3 真菌分離培養(yǎng)和形態(tài)觀察

花生莖加入10 mL無菌生理鹽水震蕩混勻，取200 μL菌液涂布于PDA培養(yǎng)基（28 ℃）培養(yǎng)。待長(zhǎng)出肉眼可見菌落后分三點(diǎn)接種至新的PDA培養(yǎng)基。反復(fù)分離純化三代后得到單一菌落。純化后的真菌在（28 ℃）恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并觀察其形態(tài)。分離株培養(yǎng)7 d后，進(jìn)行乳酸酚棉藍(lán)染色。

1.4 掃描電鏡樣品準(zhǔn)備及觀察

將單菌落置于PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)6 d后，用無菌手術(shù)刮刀取直徑為0.5 cm的菌餅，用無菌生理鹽水清洗雜質(zhì)和表面附著物。加入3%的戊二醛固定（4 ℃，24 h）。隨后將固定好的樣本經(jīng)超純水（ultrapure water，UP）清洗3次，每次10 min。再用1%鋨酸固定（1 h），UP水清洗3次，每次10 min。用30%～100%梯度酒精逐級(jí)脫水，每次15 min。將樣品放入離子濺射儀進(jìn)行噴鍍處理。并置于掃描電鏡下，選擇適當(dāng)?shù)膮^(qū)域進(jìn)行觀察與拍照。

1.5 ITS基因鑒定及進(jìn)化樹構(gòu)建

挑取SLY01菌株單菌落接種于PDA培養(yǎng)基，28 ℃恒溫培養(yǎng)5 d后，參照CTAB說明書提取總DNA。以提取的總DNA為模板，用真菌rDNA通用引物ITS1：5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′和ITS4：5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′為上下游引物［24］。對(duì)核糖體rDNA-ITS基因PCR擴(kuò)增，總體系為50 μL，反應(yīng)條件：98 ℃ 2 min；98 ℃ 10 s，56 ℃ 10 s，72 ℃ 30 s，35個(gè)循環(huán)；72 ℃ 2 min。擴(kuò)增結(jié)果通過1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后，于凝膠成像系統(tǒng)下觀察并拍照。上海生工生物工程股份有限公司對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行雙向測(cè)序并拼接，測(cè)序結(jié)果經(jīng)Blast比對(duì)后，用Mega5.0軟件采用近鄰相接法（Neighbor-joining method）對(duì)SLY01菌株 ITS序列進(jìn)行同源性分析，構(gòu)建進(jìn)化樹。

1.6 小鼠致病性試驗(yàn)

收集SLY01菌株孢子懸液，用血球計(jì)數(shù)法，將孢子懸液濃度調(diào)整為5×107 CFU·mL-1［25-26］。篩選體況相近的10只雌性SPF級(jí)KM小鼠置于西南民族大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，光照/暗循環(huán)12 h，溫度22～26 ℃，濕度40%～70%。小鼠適應(yīng)環(huán)境3 d，可自由飲水和進(jìn)食，然后進(jìn)行下一步試驗(yàn)。小鼠隨機(jī)分組為試驗(yàn)組、對(duì)照組，每組5只。試驗(yàn)組小鼠每隔1 d于上午08：00腹腔注射0.3 mL，濃度為5×107 CFU·mL-1［25-26］的SLY01菌株孢子懸液。對(duì)照組腹腔注射等量滅菌生理鹽水，試驗(yàn)周期為14 d。試驗(yàn)結(jié)束后所有小鼠眼眶采血，血清分離后保存于-20 ℃用于檢測(cè)生化指標(biāo)。處死并剖檢小鼠，取心、肝、脾、肺、腎等組織用吸水紙吸干表面水分后稱重，用于計(jì)算臟器指數(shù)。將組織放置于4%多聚甲醛固定，用于制作病理切片。無菌操作取小鼠各器官，通過形態(tài)學(xué)觀察并分析菌株ITS區(qū)序列，分離鑒定病原。

1.7 血清生化指標(biāo)檢測(cè)

采用獸用生化分析儀檢測(cè)對(duì)照組和試驗(yàn)組小鼠血清生化指標(biāo)，包括AST、ALP和ALT。

1.8 組織切片制作和HE染色

取“1.6”中經(jīng)過4%多聚甲醛固定的小鼠組織進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、包埋、切片和HE染色，置于光學(xué)顯微鏡下觀察各組織病變情況。

1.9 藥敏試驗(yàn)

按照真菌藥敏試驗(yàn)檢測(cè)說明書，收集 SLY01菌株孢子懸液，用血球計(jì)數(shù)法，將孢子懸液濃度調(diào)整為6.5×105 CFU·mL-1。采用K-B紙片法測(cè)定菌株對(duì)兩性霉素B、伊曲康唑、卡泊芬凈和伏立康唑四種藥敏紙片的敏感性。結(jié)果判定參照意大利Liofilchem公司的真菌藥敏紙片判讀標(biāo)準(zhǔn)。

1.10 數(shù)據(jù)處理

用IBM SPSS Statistics 26.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，P＜0.01表示差異極顯著；P＜0.05表示差異顯著；P＞0.05表示差異不顯著。

2 結(jié) 果

2.1 分離株P(guān)DA培養(yǎng)基生長(zhǎng)和掃描電鏡形態(tài)觀察

SLY01菌株在PDA培養(yǎng)基（28 ℃）恒溫培養(yǎng)7 d后生長(zhǎng)情況：菌落表面干燥呈凸起，邊緣向內(nèi)呈灰色至橙色，邊緣有黑色斑點(diǎn)，邊緣形成深裂，反面有褐色斑點(diǎn)，中間有褐色帶，邊緣呈現(xiàn)流蘇狀。乳酸酚棉藍(lán)染色和掃描電鏡結(jié)果顯示：菌株分生孢子長(zhǎng)29.6 μm±0.87 μm，月牙形，中間較寬；透明的無性菌絲，有隔和分枝，無剛毛，未觀察到衣孢子；孢子新月形，單室，壁光滑，中央寬，透明，有溝，附著孢呈棍棒狀或者卵球形，主要由菌絲體形成。初步鑒定為茉莉炭疽菌 （圖1）。

2.2 ITS基因鑒定及進(jìn)化樹分析

提取SLY01菌株的總DNA，PCR擴(kuò)增菌株ITS序列，得到大小約500 bp的目的片段。測(cè)序后，發(fā)現(xiàn)分離株的ITS序列長(zhǎng)度為586 bp，與預(yù)期相符。系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建結(jié)果顯示，SLY01菌株ITS區(qū)序列與茉莉炭疽菌相應(yīng)基因序列相似性達(dá)98%，但與同屬18種其他菌株存在較大差異。ITS區(qū)序列提交到NCBI中的GenBank編號(hào)為OR472966。結(jié)合形態(tài)學(xué)和序列對(duì)比結(jié)果綜合判定，分離株為茉莉炭疽菌（圖2）。

2.3 小鼠致病性試驗(yàn)

小鼠攻毒14 d后，試驗(yàn)組均表現(xiàn)出精神沉郁、少動(dòng)并且伴隨腹式呼吸，采食量下降，但未出現(xiàn)死亡，對(duì)照組未發(fā)病。試驗(yàn)結(jié)束剖檢小鼠，試驗(yàn)組小鼠肝表面出現(xiàn)白色斑塊，肺充血腫脹，腎輕微腫脹，其他臟器與對(duì)照組相比未見明顯變化，之后從感染小鼠體內(nèi)再次分離鑒定到茉莉炭疽菌。稱量各器官濕重計(jì)算臟器指數(shù)，結(jié)果顯示，試驗(yàn)組肝臟器指數(shù)與對(duì)"" 照組相比顯著降低（P＜0.05）（圖3），其余器官臟器指數(shù)均無明顯變化。

2.4 血清生化指標(biāo)檢測(cè)

肝損傷的三個(gè)生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組小鼠血清ALP含量極顯著升高（P＜0.01）（圖4），血清中ALT和AST沒有明顯變化。這提示肝組織發(fā)生炎癥反應(yīng)。

2.5 小鼠病理切片觀察

小鼠各組織切片經(jīng)HE染色后，在顯微鏡下觀察。結(jié)果顯示，試驗(yàn)組小鼠心動(dòng)脈充血；肺支氣管充血并有組織液滲出，肺泡壁水腫伴有大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡輕微出血；肝中央靜脈淤血，肝細(xì)胞有大面積顆粒變性，肝小葉結(jié)構(gòu)不清晰，肝小葉內(nèi)見出血和肝細(xì)胞壞死，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；腎見腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生顆粒變性，腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和系膜細(xì)胞水腫（圖5）。

2.6 耐藥性試驗(yàn)

用K-B紙片法評(píng)價(jià)SLY01菌株對(duì)4種常見抗真菌藥物的敏感性，結(jié)果表明：SLY01菌株對(duì)卡泊芬凈和伏立康唑耐藥；對(duì)兩性霉素B敏感；對(duì)伊曲康唑中度敏感（表1）。

3 討 論

炭疽桿菌屬真菌已是世界公認(rèn)的植物致病菌［27］。其主要分布在全球濕潤(rùn)和半濕潤(rùn)熱帶地區(qū)［10］。關(guān)于炭疽桿菌屬真菌對(duì)動(dòng)物致病的報(bào)道包括感染昆蟲、幼年肯普雷氏海龜和人類［16］。Wikee等［28］在2011年從茉莉花病葉和花中分離鑒定一株茉莉炭疽菌，PDA上觀察到菌落呈火山口狀，氣生菌絲白色，邊緣流蘇狀，反面乳白色；麥芽浸粉瓊脂培養(yǎng)基上形成白色菌落，火山口狀，氣生菌絲白色，邊緣和反面呈乳白色；顯微鏡觀察到透明的無性菌絲，有隔有分枝，寬20～28 μm；分生胞透明，長(zhǎng)23～39 μm［2，28］。與本研究分離得到的SLY01菌株形態(tài)相似。在核糖體密碼子區(qū)域中，內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）成功鑒定真菌的概率最高，種間和種內(nèi)變異之間的條形碼差距最明顯［29］。所以將分離株TIS區(qū)PCR 擴(kuò)增并測(cè)序，測(cè)序結(jié)果用 BLAST進(jìn)行同源性比對(duì)，結(jié)果與表型鑒定結(jié)果相吻合，證實(shí)SLY01菌株為茉莉炭疽菌。

炭疽菌屬真菌感染通常通過皮膚受損的地方進(jìn)入機(jī)體，而且多數(shù)感染是在免疫系統(tǒng)受損的患者中發(fā)生［30］。血清內(nèi)源性酶升高提示肝細(xì)胞損傷到了細(xì)胞器的水平［19-20］。血清中ALP主要來自肝膽管上皮細(xì)胞和骨骼，ALP升高提示膽管阻塞或者肝細(xì)胞受損，其他真菌感染時(shí)該指標(biāo)也顯示異常［31］。Manire等［18］報(bào)道的尖孢炭疽感染海龜后出現(xiàn)AST升高，組織病理學(xué)檢查結(jié)果包括嚴(yán)重的腎炎和肺炎，中度肝炎，并從腎和肺中分離到尖孢炭疽。貓感染炭疽桿菌屬真菌出現(xiàn)真菌定植皮下引起潰瘍和紅斑，嗜酸性粒細(xì)胞增多癥，肺實(shí)質(zhì)病變，腹部超聲顯示雙腎結(jié)構(gòu)異常［16］。在人感染炭疽桿菌屬真菌的致死病例中，尸檢顯示右肺出現(xiàn)混合性炎癥反應(yīng)和大面積壞死灶，并伴有分枝菌絲浸潤(rùn)到血管間隙［30］。本研究血清生化結(jié)果顯示，SLY01菌株感染小鼠后試驗(yàn)組血清ALP極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），提示肝發(fā)生炎癥反應(yīng)。進(jìn)一步通過小鼠的組織病理學(xué)結(jié)果證實(shí)，分離株與同屬真菌的致病性報(bào)告均出現(xiàn)肺部的混合性炎癥反應(yīng)，主要靶器官為肝、肺。但本研究試驗(yàn)組小鼠肺部未出現(xiàn)大面積壞死，可能是炭疽菌屬亞種間的毒力和致病機(jī)制不同所致。

藥敏試驗(yàn)對(duì)指導(dǎo)真菌感染臨床用藥有重要意義，治療抗真菌藥物的唑類藥物有伏立康唑、伊曲康唑；棘白素類藥物有卡伯芬凈；多烯類藥物有兩性霉素B［32］。病例報(bào)道感染炭疽屬真菌的貓用伊曲康唑治療后其癥狀得到改善［16］；而人感染膠孢炭疽菌可用兩性霉素B和伊曲康唑治療［19］；這與SLY01菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果相同。這說明炭疽桿菌屬真菌普遍對(duì)兩性霉素B和伊曲康唑敏感，臨床動(dòng)物感染茉莉炭疽菌可使用多烯類和唑類藥物進(jìn)行治療。

4 結(jié) 論

本研究從花生莖中分離得到SLY01菌株，鑒定為炭疽桿菌屬茉莉炭疽菌。菌株感染小鼠可導(dǎo)致血清ALP升高，肝、肺出現(xiàn)病理?yè)p傷。藥敏試驗(yàn)顯示菌株對(duì)卡泊芬凈和伏立康唑耐藥，對(duì)兩性霉素B敏感，對(duì)伊曲康唑中度敏感。這為進(jìn)一步研究飼草源真菌感染提供理論依據(jù)。

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（編輯 "白永平）