丁香酚對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)的麻醉效果

邱正 張紅 劉超 張志山

摘 要：在水溫24 ℃下進(jìn)行了不同濃度的丁香酚對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)麻醉效果研究。結(jié)果表明，不同濃度的丁香酚對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)都有較好的麻醉以及復(fù)蘇效果，10～70 mg/L的丁香酚都能在6 min中內(nèi)使鳳尾鵝頭紅金魚(yú)進(jìn)入麻醉期，在10 min中內(nèi)完成麻醉魚(yú)的復(fù)蘇，復(fù)蘇率以及72 h成活率均達(dá)到100%。麻醉時(shí)間隨著丁香酚的濃度上升而縮短，與濃度呈負(fù)相關(guān)。麻醉后復(fù)蘇所需要的時(shí)間隨濃度上升依次增加，與濃度呈正相關(guān)。其中30～40 mg/L濃度的丁香酚能達(dá)到3 min麻醉5 min蘇醒，效果最佳。同時(shí)進(jìn)行了20～28 ℃水溫對(duì)（30 mg/L濃度的丁香酚）鳳尾鵝頭紅金魚(yú)麻醉及復(fù)蘇時(shí)間的研究。結(jié)果表明，20～28 ℃水溫都能在5 min中內(nèi)使鳳尾鵝頭紅金魚(yú)進(jìn)入麻醉期，在7 min中內(nèi)完成麻醉魚(yú)的復(fù)蘇，復(fù)蘇率以及72 h成活率均達(dá)到100%。隨著溫度的升高，達(dá)到M3麻醉期及M5完全復(fù)蘇期所需時(shí)間呈縮短趨勢(shì)，與水溫呈負(fù)相關(guān)。其中在30 mg/L濃度的丁香酚濃度下，控制水溫在24～28 ℃，均能使試驗(yàn)魚(yú)3 min麻醉5 min蘇醒，效果最佳。

關(guān)鍵詞：丁香酚；鳳尾鵝頭紅金魚(yú)；麻醉；復(fù)蘇

鳳尾鵝頭紅金魚(yú)屬鯉形目（Cypriniforms），鯉科（Cyprinidae），鯽屬（Carassius）蛋種魚(yú)的一種，具有很高的觀賞價(jià)值[1-2]。鳳尾鵝頭紅金魚(yú)為鵝頭紅與丹鳳金魚(yú)經(jīng)過(guò)多代雜交后選育出的兼具鵝頭紅的紅頂白身和丹鳳的長(zhǎng)薄尾鰭等優(yōu)良性狀于一身的新品系，民間有“極品中的極品”之說(shuō)。鳳尾鵝頭紅金魚(yú)魚(yú)體潔白無(wú)雜色，頭如鵝頭，頭瘤紅彩鮮艷，頭部紅色不過(guò)鰓，背部光滑平整，無(wú)背鰭，無(wú)刺尾，雙尾長(zhǎng)薄鰭（圖1）。由于鳳尾鵝頭紅金魚(yú)極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，在進(jìn)行人工繁殖[3]、運(yùn)輸、測(cè)量時(shí)很容易擦傷，影響其觀賞性，因此選擇一種安全、高效的魚(yú)用麻醉劑，對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)的日常人工操作十分必要。

丁香酚（Eugenol） ，化學(xué)名為2－甲氧－4－丙烯基酚，又稱丁子香酚，是一種無(wú)色或淡黃色的油狀液體，有強(qiáng)烈的丁香的香氣。近幾年來(lái)，丁香酚已經(jīng)被很多國(guó)家和地區(qū)認(rèn)定為沒(méi)有藥物殘留的合法水產(chǎn)麻醉劑[4-6]，并且被廣泛應(yīng)用在親魚(yú)的人工繁殖、活魚(yú)采血、運(yùn)輸?shù)嚷樽碇小?/p>

1 材料與方法

1.1 材料

本試驗(yàn)樣本鳳尾鵝頭紅金魚(yú)取自濟(jì)南馮氏觀賞魚(yú)養(yǎng)殖有限公司。試驗(yàn)所用丁香酚為吉安市萬(wàn)億香料油有限公司產(chǎn)品，含丁香酚99%以上，相對(duì)濃度為1.063～1.068 g/mL，使用前按丁香酚與無(wú)水乙醇1∶10的體積比配制成母液。

1.2 試驗(yàn)用丁香酚溶液的配制

在20 L的水體中一次加入2、4、6、8、10、12、14 mL的母液配制成濃度為10、20、30、40、50、60、70 mg/L的試驗(yàn)用麻醉濃度，設(shè)置編號(hào)為A-G。于4 ℃冰箱中避光保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)前的準(zhǔn)備 試驗(yàn)所用的鳳尾鵝頭紅金魚(yú)暫養(yǎng)于濟(jì)南馮氏觀賞魚(yú)養(yǎng)殖有限公司養(yǎng)殖池中，挑選健康、體表無(wú)傷病的試驗(yàn)用魚(yú)65尾，平均體質(zhì)量（38.74±4.5）g。試驗(yàn)前24 h停止投喂，曝氣保證水體中充足的溶氧量。試驗(yàn)組的麻醉以及復(fù)蘇均在周轉(zhuǎn)箱中進(jìn)行，麻醉及復(fù)蘇水體均為20 L。試驗(yàn)后將鳳尾鵝頭紅金魚(yú)按照不同試驗(yàn)組分別放入4 m3水泥暫養(yǎng)池中靜養(yǎng)，繼續(xù)觀察72 h，統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)用魚(yú)的存活率。

1.3.2 不同濃度丁香酚的麻醉及復(fù)蘇效果試驗(yàn) 將已經(jīng)配好的10、20、30、40、50、60、70 mg/L濃度（編號(hào)A-G）的丁香酚母液從冰箱中取出，倒入試驗(yàn)用麻醉水體中，充分?jǐn)嚢?0 s（水溫24 ℃，總樣本35尾，每組試驗(yàn)樣本5尾）。當(dāng)魚(yú)體麻醉程度達(dá)到M3麻醉期時(shí)，記錄秒表顯示的麻醉時(shí)間（T1）。并立即將試驗(yàn)魚(yú)轉(zhuǎn)移到清水中進(jìn)行復(fù)蘇，記錄秒表顯示的試驗(yàn)魚(yú)達(dá)到M5完全復(fù)蘇期秒表時(shí)間（T2）。

1.3.3 不同溫度對(duì)丁香酚麻醉及復(fù)蘇效果試驗(yàn) 通過(guò)加熱棒加溫和冰塊降溫的方法，將麻醉和復(fù)蘇水體的水溫控制在20、22、24、26、28 ℃（編號(hào)a-e）。將已經(jīng)配好30 mg/L濃度的丁香酚母液倒入的麻醉水體中，充分?jǐn)嚢?0 s（總樣本25尾，每組試驗(yàn)樣本5尾）。當(dāng)魚(yú)體麻醉程度達(dá)到M3麻醉期時(shí)，記錄秒表顯示的時(shí)間（t1），并立即將試驗(yàn)樣本轉(zhuǎn)移到清水中復(fù)蘇，記錄秒表顯示的試驗(yàn)樣本達(dá)到M5完全復(fù)蘇期秒表時(shí)間（t2）。

1.3.4 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示，使用SPSS27.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，當(dāng)顯著性水平P＜0.05，使用LSD多重比較法檢驗(yàn)組間差異，分析各試驗(yàn)組顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 鳳尾鵝頭紅金魚(yú)麻醉程度的分期

參照孟慶磊等[7]的麻醉分期，根據(jù)麻醉過(guò)程中試驗(yàn)樣本表現(xiàn)出的行為特征，將整個(gè)麻醉過(guò)程拆分為M0（正常期）、M1（鎮(zhèn)靜期）、M2（輕度麻醉期）、M3（麻醉期）、M4（部分復(fù)蘇期）、M5（完全復(fù)蘇期）6個(gè)不同時(shí)期。詳情見(jiàn)表1。

2.2 不同濃度丁香酚對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)麻醉效果的影響

不同濃度的丁香酚對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)都有比較好的麻醉效果，10～70 mg/L濃度的丁香酚都能在6 min中內(nèi)使鳳尾鵝頭紅金魚(yú)進(jìn)入麻醉期。其中10 mg/L（編號(hào)A）達(dá)到M3麻醉期的時(shí)間最長(zhǎng)，70 mg/L（編號(hào)G）時(shí)間最短。隨著丁香酚濃度上升，麻醉時(shí)間呈縮短趨勢(shì)。多重比較顯示，不同的濃度組之間鳳尾鵝頭紅金魚(yú)需要的麻醉時(shí)間，C與D組、D與E組、E與F組、F與G組之間差異不顯著（P＞0.05），而其他各組之間差異顯著（P＜0.05）。

2.3 不同濃度的丁香酚對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)復(fù)蘇時(shí)間的影響

10～70 mg/L的丁香酚（編號(hào)A-G）在10 min中內(nèi)都能完成試驗(yàn)組的復(fù)蘇，暫養(yǎng)池靜養(yǎng)72 h后觀察復(fù)蘇率達(dá)到100%。其中10 mg/L（編號(hào)A）試驗(yàn)組所需的復(fù)蘇時(shí)間最短，隨著丁香酚濃度的上升，復(fù)蘇時(shí)間呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。多重比較顯示，A與B組、B與C組、C與D組、E與F組之間差異不顯著（P＞0.05），而其他各組之間差異顯著（P＜0.05）。不同濃度的丁香酚對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)的麻醉及復(fù)蘇時(shí)間影響詳情見(jiàn)表2。

2.4 不同水溫對(duì)丁香酚麻醉效果的影響

在30 mg/L丁香酚母液濃度下，通過(guò)秒表記錄試驗(yàn)組達(dá)到M3麻醉期的秒表時(shí)間t1。隨著水溫的升高，達(dá)到M3麻醉期階段的時(shí)間呈縮短趨勢(shì)，與水溫呈負(fù)相關(guān)。水溫20～28 ℃都能使試驗(yàn)魚(yú)在5 min內(nèi)達(dá)到M3麻醉期。多重比較顯示，c與d組、d與e組之間差異不顯著（P＞0.05），而其他各組之間的差異顯著（P＜0.05）。

2.5 不同水溫對(duì)丁香酚復(fù)蘇時(shí)間的影響

將麻醉的試驗(yàn)組轉(zhuǎn)移到清水中進(jìn)行復(fù)蘇，秒表記錄試驗(yàn)組達(dá)到M5完全復(fù)蘇期秒表時(shí)間（t2）。隨著水溫的升高，試驗(yàn)組復(fù)蘇時(shí)間（t2-t1）呈縮短趨勢(shì)，與水溫呈負(fù)相關(guān)。水溫20～28 ℃都能使試驗(yàn)魚(yú)在7 min內(nèi)復(fù)蘇率達(dá)100%，暫養(yǎng)池中靜養(yǎng)觀察72 h成活率100%。多重比較顯示，b與c組、b與d組、c與d組、c與e組、d與e組之間差異不顯著（P＞0.05），而其他各組之間的差異顯著（P＜0.05）。不同水溫對(duì)試驗(yàn)組麻醉及復(fù)蘇時(shí)間詳情見(jiàn)表3。

2.6 乙醇對(duì)丁香酚麻醉效果的影響

由于丁香酚屬于油性液體，水溶性差，因此考慮到實(shí)際生產(chǎn)操作的方便，需要無(wú)水乙醇作為媒介，制成丁香酚母液使用?？紤]到乙醇本身具有一定的麻醉作用，可能對(duì)試驗(yàn)組麻醉效果有一定程度的影響。因此，本次試驗(yàn)設(shè)立了0.7 mg/L的無(wú)水乙醇溶液（約70 mg/L的丁香酚試驗(yàn)組中的無(wú)水乙醇含量）進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)。結(jié)果顯示，加入0.7 mg/L的無(wú)水乙醇溶液組中的鳳尾鵝頭紅金魚(yú)（試驗(yàn)樣本5尾）均未出現(xiàn)麻醉分期的行為特征，由此可見(jiàn)母液中無(wú)水乙醇的存在對(duì)丁香酚的麻醉效果并無(wú)明顯的影響。

3 討論

3.1 丁香酚對(duì)試驗(yàn)組麻醉效果可行性研究

丁香酚廣泛應(yīng)用在優(yōu)鱸3號(hào)[8]、加州鱸[9]、條紋小鲃[10]、黃尾鲴[11]、松江鱸[12]、花鱸[13]、異齒裂腹魚(yú)[14]、錦鯉[15]、翹嘴鲌[16]等麻醉研究，是一種安全、高效[17]的魚(yú)用麻醉劑，可廣泛應(yīng)用于日常試驗(yàn)生產(chǎn)等操作。

3.2 不同濃度的丁香酚對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)麻醉效果分析

除澳洲長(zhǎng)鰭鰻[18]等個(gè)別魚(yú)類之外，絕大多數(shù)的魚(yú)類麻醉時(shí)間都是隨著麻醉劑濃度上升而逐漸縮短。本研究中，當(dāng)丁香酚的濃度在10 mg/L時(shí)，鳳尾鵝頭紅金魚(yú)的麻醉時(shí)間最長(zhǎng)達(dá)到359 s，當(dāng)丁香酚濃度升至30 mg/L時(shí)，試驗(yàn)魚(yú)所需要的麻醉時(shí)間大幅減少。當(dāng)濃度達(dá)到70 mg/L，最短僅需37 s即可達(dá)到M3麻醉期。由此可見(jiàn)，丁香酚的濃度對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)麻醉時(shí)間影響顯著。但實(shí)際試驗(yàn)生產(chǎn)中，過(guò)高的丁香酚麻醉濃度容易造成魚(yú)體表脫黏，感染細(xì)菌性疾病，應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)組的體長(zhǎng)體重，酌情選擇麻醉濃度。

3.3 不同濃度丁香酚對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)復(fù)蘇所需時(shí)間分析

在已有的魚(yú)類麻醉實(shí)驗(yàn)資料報(bào)道中，絕大多數(shù)魚(yú)類麻醉后復(fù)蘇所需要的時(shí)間隨著麻醉劑濃度的升高而逐漸增長(zhǎng)。本試驗(yàn)中，隨著丁香酚濃度的上升，麻醉后的復(fù)蘇所需要的時(shí)間依次增加，與濃度呈正相關(guān)，當(dāng)丁香酚母液濃度大于50 mg/L時(shí)，復(fù)蘇時(shí)間大幅增加。在實(shí)際生產(chǎn)實(shí)踐中，過(guò)高的復(fù)蘇時(shí)間會(huì)影響工作效率，在5 min內(nèi)復(fù)蘇是比較理想的麻醉濃度。

3.4 不同水溫對(duì)丁香酚麻醉效果分析

水溫是影響麻醉劑作用效果的一個(gè)重要環(huán)境因素。隨著水溫升高，試驗(yàn)魚(yú)新陳代謝加速，心跳和呼吸頻率加快，體內(nèi)血液流動(dòng)加速，使丁香酚有更好的麻醉效果，當(dāng)水溫達(dá)到22 ℃時(shí)，麻醉時(shí)間大幅縮短。水溫24～28 ℃都能使試驗(yàn)組在3 min內(nèi)達(dá)到M3麻醉期，在實(shí)際生產(chǎn)實(shí)踐中可以極大地提升工作效率。

3.5 不同水溫對(duì)丁香酚復(fù)蘇效果分析

與麻醉效果相似，隨著水溫升高，試驗(yàn)魚(yú)新陳代謝加速，心跳和呼吸頻率加快，體內(nèi)血液流動(dòng)加速。當(dāng)水溫達(dá)到22 ℃時(shí)，復(fù)蘇所需時(shí)間大幅減少，22～28 ℃之間復(fù)蘇時(shí)間小幅減少，試驗(yàn)組b—試驗(yàn)組e中水溫對(duì)復(fù)蘇時(shí)間影響不顯著。

3.6 丁香酚麻醉鳳尾鵝頭紅金魚(yú)的最佳濃度

李元等[19]、劉長(zhǎng)琳[20]等認(rèn)為，理想的麻醉濃度需要同時(shí)滿足2個(gè)條件：（1）3 min之內(nèi)麻醉；（2）5 min之內(nèi)蘇醒。本研究結(jié)果表明丁香酚是一種安全、高效的對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)的麻醉劑，10～70? mg/L的丁香酚都可以使鳳尾鵝頭紅金魚(yú)達(dá)到M3麻醉期，并且可以達(dá)到100%復(fù)蘇。其中在水溫24 ℃下，30～40 mg/L濃度的丁香酚滿足3 min內(nèi)麻醉，5 min之內(nèi)蘇醒，是鳳尾鵝頭紅金魚(yú)最佳的麻醉濃度。在30 mg/L濃度的丁香酚母液濃度下，24～28 ℃的水溫對(duì)鳳尾鵝頭紅金魚(yú)都有較好的麻醉及復(fù)蘇效果，可極大地提升生產(chǎn)試驗(yàn)效率。

參考文獻(xiàn)：

[1] 王春元.我國(guó)金魚(yú)品種的分類與命名[J].淡水漁業(yè)，1984（4）：30-33+9.

[2] 周浠.中國(guó)金魚(yú)及其養(yǎng)殖——第三章 金魚(yú)的分類、品種[J].北京水產(chǎn)，2000（2）：33-43.

[3] 張紅，劉超，婁彝春，等.鳳尾鵝頭紅金魚(yú)人工繁殖技術(shù)[J].科學(xué)養(yǎng)魚(yú)，2023（6）：83-84.

[4] 關(guān)于發(fā)布《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑丁香酚》（GB 1886.129—2022）等36項(xiàng)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和3項(xiàng)修改單的公告（2022年第3號(hào)）[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2022，34（4）：692+779.

[5] 潘洪民，蔣樂(lè)霞，張長(zhǎng)峰，等.漁用麻醉劑研究進(jìn)展與安全性評(píng)價(jià)[J].保鮮與加工，2021，21（10）：136-143.

[6] 王安偉，吳禮麗，劉天密，等.水產(chǎn)品中丁香酚檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代食品，2023，29（16）：200-202.

[7] 孟慶磊，張志山，張龍崗，等.丁香酚對(duì)蘇氏圓腹成魚(yú)麻醉效果的研究[J].長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2012，9（4）：33-36+6.

[8] 唐忠林，張佳佳，周國(guó)勤，等.丁香酚對(duì)“優(yōu)鱸3號(hào)”幼魚(yú)運(yùn)輸水質(zhì)及其血液、肌肉生理指標(biāo)的影響[J].水產(chǎn)科技情報(bào)，2023，50（1）：44-52

[9] 王彩霞，白嬋，熊光權(quán)，等.丁香酚麻醉輔助加州鱸無(wú)水活運(yùn)的效果[J].食品科學(xué)，2021，42（5）：228-236.

[10] 宋霖，陳小江，高鵬.常溫下三卡因和丁香酚對(duì)條紋小鲃的麻醉效果研究[J].水產(chǎn)科學(xué)，2024，43（1）：144-151.

[11] 陳軍平，武慧慧，沈方方，等.MS-222與丁香酚對(duì)黃尾鲴麻醉效果的比較[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2023，62（8）：133-139.

[12] 胡望嬌，王翠華，馮廣朋，等.丁香酚和MS-222對(duì)松江鱸的麻醉效果[J].海洋漁業(yè)，2023，45（2）：181-190.

[13] 虞為，吳進(jìn)喜，林黑著，等.丁香酚對(duì)花鱸幼魚(yú)的麻醉效果[J].河北漁業(yè)，2020（4）：4-7+11.

[14] 王萬(wàn)良，王金林，曾本和，等.丁香酚對(duì)異齒裂腹魚(yú)的麻醉效果[J].水產(chǎn)學(xué)雜志，2019，32（5）：60-65.

[15] 楊志強(qiáng)，李瀟軒，李志輝，等.丁香酚對(duì)錦鯉幼魚(yú)的麻醉作用[J].漁業(yè)研究，2019，41（3）：247-251.

[16] 張志山，朱樹(shù)人，安麗，等.丁香酚對(duì)翹嘴鲌的麻醉效果研究[J].長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)（自科版），2016，13（27）：39-43.

[17] 楊潔，朱曉玲.丁香酚在水產(chǎn)品中的殘留及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2020，11（18）：6523-6529.

[18] 孟慶磊，董學(xué)颯，朱永安，等.丁香酚對(duì)澳洲長(zhǎng)鰭鰻麻醉效果的研究[J].農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào)，2011，1（09）：46-50.

[19] 李元，黃寶生，張長(zhǎng)峰.魚(yú)用麻醉劑研究進(jìn)展與安全性評(píng)價(jià)[J].食品工業(yè)，2019，40（12）：251-255.

[20] 劉長(zhǎng)琳，何力，陳四清，等.魚(yú)類麻醉研究綜述[J].漁業(yè)現(xiàn)代化，2007（5）：21-25.

The anesthetic effect of eugenol on red goldfish

QIU Zheng1，ZHANG Hong2，LIU Chao1，ZHANG Zhishan1

（1.Shandong Freshwater Fisheries Research Institute 2. Jinan Agricultural Technology Extension Service Center， Jinan 250013，China）

Abstract：The effects of different concentrations of eugenol on the anesthesia of goldfish were studied at water temperature of 24 °C. The results showed that different concentrations of eugenol had good anesthetic and resuscitation effects on red goose-head with phoenix tail goldfish， and 10～70 mg/L eugenol could induce the goldfish to enter the anesthetic period within 6 minutes， the recovery rate and the survival rate of the anesthetized fish reached 100% within 10 min and 72 h. The anesthesia time was shortened with the increase of eugenol concentration， which was negatively correlated with the concentration. The time needed for resuscitation increased with the increase of concentration， which was positively correlated with the concentration. Among them， eugenol （30～40 mg/L） can achieve 3 min anesthesia and 5 min recovery， and the effect was the best. At the same time， the effects of water temperature （20～28 ℃） on anesthesia and resuscitation time for the eugenol concentration of 70 mg/L were studied. The results showed that the water temperature of 20～28 ℃ could make the goldfish enter the anaesthesia period within 5 minutes， and the resuscitation rate and the survival rate of 72 hours reached 100% within 7 minutes. With the increase of temperature， the time needed to reach M3 anesthesia stage and M5 full recovery stage was shortened， and negatively correlated with water temperature. Under the concentration of eugenol 30 mg/L and the water temperature 24～28 ℃， the experimental fish were anesthetized for 3 min and resuscitated for 5 min.

Key words：eugenol; red goose-head with phoenix tail goldfish; anesthesia; resuscitation

（收稿日期：2024-05-21）