太子參及提取物對(duì)動(dòng)物免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展

張 森,歐 婧,豆曉霞,劉曉東,付本懂

(1.黔東南民族職業(yè)技術(shù)學(xué)院,貴州凱里 556000;2.吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,吉林長春 130062)

隨著我國畜牧業(yè)的快速發(fā)展,國際引種、畜禽貿(mào)易日益頻繁,導(dǎo)致動(dòng)物疫病呈現(xiàn)多樣化、復(fù)雜化、嚴(yán)重化的態(tài)勢,嚴(yán)重阻礙了我國畜牧業(yè)的發(fā)展。隨著國家“減抗”和“限抗”等政策的出臺(tái)和實(shí)施,畜禽疫病防控面臨更大的壓力。中獸藥防治畜禽疾病在我國具有悠久的歷史,近年來中獸藥以其無殘留、不易耐藥、安全范圍廣、資源豐富等特點(diǎn)受到廣泛關(guān)注。

太子參是石竹科植物孩兒參(Pseudostellariaheterophylla)干燥的塊根,始記載于清代《本草從新》,收載于中國藥典,其藥性平和,有生津潤肺、益氣健脾等增強(qiáng)體質(zhì)之功效?，F(xiàn)代藥理研究,太子參富含微量元素、氨基酸、糖類、苷類、環(huán)肽類、脂肪酸類、油脂類、揮發(fā)油類、甾醇類等多種活性成分[1],張炎達(dá)等[2]對(duì)太子參研究數(shù)據(jù)進(jìn)行Meta分析表明,太子參及提取物可顯著提升動(dòng)物機(jī)體免疫力。黃宗銹等[3]給妊娠的SD大鼠長期灌服大劑量的太子參提取濃縮液,發(fā)現(xiàn)其對(duì)孕鼠生殖能力、胚胎形成和胎鼠的生長發(fā)育均無影響,表明太子參毒副作用小,安全范圍廣,具有較好的開發(fā)利用前景。本文綜述了近年來太子參及其提取物對(duì)動(dòng)物免疫調(diào)節(jié)的相關(guān)研究,為太子參的進(jìn)一步研究、開發(fā)和利用提供參考。

1 對(duì)免疫器官的作用

免疫器官分為中樞免疫器官和外周免疫器官,是免疫細(xì)胞產(chǎn)生、分化、成熟、定居和產(chǎn)生免疫應(yīng)答的場所。胸腺/法氏囊(禽類)是T細(xì)胞發(fā)育、分化、成熟的場所,隨著動(dòng)物年齡的增長逐漸萎縮退化[4]。脾臟是機(jī)體最大的外周免疫器官,是免疫細(xì)胞定居的器官,含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,可清除體內(nèi)的病原體、衰亡的體細(xì)胞以及免疫復(fù)合物等[5]。胸腺和脾臟分別是動(dòng)物中樞免疫器官和外周免疫器官的代表,其組織結(jié)構(gòu)的完整性代表著動(dòng)物免疫機(jī)能是否健全。胸腺和脾臟指數(shù)被認(rèn)為是免疫功能的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)[6]。蔡晶等[7]給小鼠灌服太子參多糖粗提物顯示,高劑量組和中劑量組胸腺指數(shù)顯著升高,低劑量組和高劑量組脾臟指數(shù)顯著升高。張炎達(dá)等[8]的研究結(jié)果也顯示,太子參須提取物能提高小鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù),但不同劑量對(duì)脾臟和胸腺的影響不同。郝思鈺[9]給雛雞注射太子參多糖注射劑,發(fā)現(xiàn)雛雞脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)顯著提高,其中以低劑量效果作為顯著,說明太子參多糖能促進(jìn)雛雞免疫器官的發(fā)育,并且和劑量有一定的關(guān)系。

太子參及其提取物除了能促進(jìn)健康動(dòng)物免疫器官的發(fā)育,研究表明其還能保護(hù)或減少有害物質(zhì)對(duì)免疫器官的損害,緩解動(dòng)物免疫抑制或免疫功能低下。衣偉萌等[10]研究顯示,給環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠灌服太子參參須多糖,能顯著的改善由于環(huán)磷酰胺所致的胸腺、脾臟以及肝萎縮,高劑量組小鼠的脾臟指數(shù)和肝指數(shù)極顯著升高,胸腺指數(shù)也有提升的趨勢。馮丹等[11]給環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠灌服太子參多糖,實(shí)驗(yàn)結(jié)果與衣偉萌基本相同。然而,閔思明等[12]試驗(yàn)結(jié)果顯示太子參參須多糖顯著降低環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠脾臟指數(shù),這與其他人的研究結(jié)果截然不同。閔思明試驗(yàn)中病模型組小鼠的脾臟過度腫大,脾臟指數(shù)幾乎是空白對(duì)照的2.5倍。因此推測可能是造模過程中,環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠脾臟損造成過度損傷,脾臟過度炎癥和組織增生,太子參參須多糖修復(fù)了脾臟損傷,讓其向正常水平恢復(fù)。后續(xù)的脾臟淋巴增殖實(shí)驗(yàn)和腹腔巨噬細(xì)胞吞噬試驗(yàn)也證實(shí)了太子參參須多糖的免疫器官保護(hù)作用。付楊等[13]給SD大鼠注射利血平造成脾虛模型,灌服太子參參須多糖后,脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)相對(duì)模型組均有顯著提高。此外,宋玉龍等[14]將太子參多糖進(jìn)行硒化修飾,然后將太子參多糖和硒化太子參多糖分別皮下注射環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠,結(jié)果顯示太子參多糖和硒化太子參多糖均能顯著提高脾指數(shù)和胸腺指數(shù),其中硒化太子參多糖的作用優(yōu)于太子參多糖。

2 對(duì)免疫細(xì)胞的作用

免疫細(xì)胞是指參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答相關(guān)的細(xì)胞,是機(jī)體免疫系統(tǒng)重要的組成部分,主要包括巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、DC細(xì)胞、粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞等。太子參及提取物能有效促進(jìn)機(jī)體免疫細(xì)胞增殖,增強(qiáng)免疫活性。

2.1 巨噬細(xì)胞

巨噬細(xì)胞是固有免疫系統(tǒng)中重要的免疫細(xì)胞之一,通過吞噬作用、分泌炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子殺傷病原體,如NO、ROS、TNF-α和IL-1等,在免疫防御中發(fā)揮著重要的作用[15]。蔡晶等[7]報(bào)道太子參多糖粗提物能提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)。張炎達(dá)等[8]報(bào)道了太子參須提取物可顯著提高健康昆明小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)α值。

RAW264.7細(xì)胞是巨噬細(xì)胞/單核樣細(xì)胞系,易于增殖,DNA轉(zhuǎn)染效率高、對(duì)RNA干擾敏感[16],常用于研究免疫過程中巨噬細(xì)胞的分子機(jī)制[17]。陳小英等[18]研究發(fā)現(xiàn)太子參須多糖粗提物能顯著提高RAW264.7細(xì)胞的相對(duì)增殖率,促進(jìn)巨噬細(xì)胞對(duì)中性紅和隱球菌的吞噬能力;張麗娟等[19]給RAW264.7細(xì)胞添加不同濃度的太子參多糖,結(jié)果顯示NO和TNF-α的釋放顯著增加。吳秀欽等[20]將太子參多糖進(jìn)行硒化,用Griess法測定太子參多糖及其硒化太子參多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞的影響,結(jié)果顯示太子參多糖和硒化太子參多糖在一定濃度促進(jìn)巨噬細(xì)胞對(duì)中性紅吞噬能力,促進(jìn)NO的產(chǎn)量以及IL-6、TNF-α的分泌,并且硒化太子參多糖作用優(yōu)于太子參多糖。

此外,太子參及提取物能提高免疫損傷動(dòng)物巨噬細(xì)胞的吞噬活性和保護(hù)巨噬細(xì)胞成活,進(jìn)而改善免疫抑制或免疫損傷。吳秀欽等[21]通過小鼠碳粒廓清試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),硒化太子參多糖能提高環(huán)磷酰胺免疫損傷小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬能力,降低環(huán)磷酰胺對(duì)免疫器官的損傷,降低由環(huán)磷酰胺造成免疫損傷小鼠IL-6、TNF-α分泌量減少的影響,并且硒化太子參多糖效果優(yōu)于太子參多糖。衣偉萌等[10]也報(bào)道了太子參參須提取物能提高環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬活性,其中低、高劑量組的碳粒廓清指數(shù)K和吞噬指數(shù)α顯著升高。謝美林等[22]研究發(fā)現(xiàn),太子參多糖在一定濃度范圍可以提高LPS誘導(dǎo)損傷下RAW264.7巨噬細(xì)胞的存活率,改善細(xì)胞形態(tài)。

除了太子參多糖,曾麗等[23]研究發(fā)現(xiàn)太子參參須皂苷(RPFRS)也能增強(qiáng)RAW264.7細(xì)胞的吞噬活性,在一定濃度下能提高NO、IL-6、IL-10、IL-1β和TNF-α分泌量。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),太子參參須皂苷能夠上調(diào)TLR2、MyD88、TRIF與胞核NF-κB蛋白,下調(diào)TLR4、IκB-α蛋白的相對(duì)表達(dá)量。推測RPFRS可能是通過 TLR2/4MyD88/TRIF-NF-κB信號(hào)通路活化RAW264.7細(xì)胞,增強(qiáng)其增殖能力、吞噬活性,以及產(chǎn)生NO和分泌細(xì)胞因子的能力。

此外,Yang Q等[24]通過酶水解和凝膠過濾層析技術(shù)在太子參中獲得一種水解產(chǎn)物-太子參肽(PPH),分子質(zhì)量在1 ku以下。將其作用于RAW264.7細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)PPH在100 μg/mL濃度對(duì)RAW264.7細(xì)胞沒有任何的毒性,與對(duì)照組相比,PPH能顯著促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞產(chǎn)生NO,并伴隨著iNOS mRNA的上調(diào)表達(dá),證實(shí)PPH促進(jìn)RAW264.7產(chǎn)生NO是通過iNOS催化產(chǎn)生的。此外,PPH能增強(qiáng)RAW264.7細(xì)胞的吞噬活性,刺激RAW264.7細(xì)胞產(chǎn)生ROS,促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞產(chǎn)生IL-10和TNF-α,并且在體內(nèi)能促進(jìn)環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠T淋巴細(xì)胞增殖,增強(qiáng)NK細(xì)胞活性,能顯著促進(jìn)小鼠腹膜巨噬細(xì)胞吞飲活性和NO的產(chǎn)量。說明該太子參肽具有增強(qiáng)巨噬細(xì)胞活性的作用,提高免疫抑制小鼠的固有免疫應(yīng)答。

Yang Q等[25]采用RP-HPLC技術(shù)進(jìn)一步從PPH中純化到一種特殊肽(RP-5),氨基酸序列為Arg-Gly-Pro-Pro-Pro,分子質(zhì)量為522.29 u。將RP-5與RAW264.7細(xì)胞作用后發(fā)現(xiàn),RP-5能顯著提升RAW264.7細(xì)胞吞飲率,相比對(duì)照組達(dá)到123.81%,提高了ROS產(chǎn)量,顯著提升了TNF-α的分泌,分泌量能達(dá)到827.24 pg/mL。但對(duì)IL-10的分泌沒有影響。通過RT-PCR技術(shù)、基因敲除技術(shù)和Western blot技術(shù)研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),RP-5是通過與RAW264.7細(xì)胞表面表達(dá)的TLR2結(jié)合,激活了NF-κB信號(hào)通路,進(jìn)而調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞免疫功能。

2.2 NK細(xì)胞

NK細(xì)胞是固有免疫系統(tǒng)中的另一重要免疫細(xì)胞,在抗病毒感染和抗腫瘤方面起著重要的作用。NK細(xì)胞能通過ADCC作用清除感染細(xì)胞,通過分泌促炎因子,活化吞噬細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)荔枝多糖[26]、人參多糖[27]、杏鮑菇多糖[28]、白術(shù)多糖[29]等均具有提高NK細(xì)胞殺傷活性作用。喬石等[30]研究發(fā)現(xiàn)環(huán)磷酰胺顯著減低小鼠脾NK細(xì)胞殺傷力,但太子參參須多糖可顯著提高免疫抑制小鼠脾NK細(xì)胞對(duì)YAC-1腫瘤細(xì)胞的殺傷作用,并且在100mg/kg劑量時(shí),效果最強(qiáng)。曾麗等[31]觀察到太子參參須皂苷對(duì)NK細(xì)胞的殺傷能力有明顯的提升作用。

2.3 T、B細(xì)胞

T、B淋巴細(xì)胞在機(jī)體細(xì)胞免疫中具有十分重要的作用,T淋巴細(xì)胞及輔助T淋巴細(xì)胞(Th)可以刺激B淋巴細(xì)胞的生長和分化,同時(shí)還可以分泌細(xì)胞因子激活巨噬細(xì)胞參與細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答,B淋巴細(xì)胞則主要是產(chǎn)生抗體,在體液免疫中發(fā)揮作用。太子參及其提取物具有促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞增殖、分化、產(chǎn)生免疫分子的作用,從而提高機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫。張炎達(dá)等[8]給健康小鼠灌服不同劑量的太子參參須提取物發(fā)現(xiàn),中劑量組小鼠T淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)顯著升高,各劑量對(duì)小鼠B淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)有一定的升高作用,但無顯著性差異。說明太子參參須提取物對(duì)小鼠的T、B淋巴細(xì)胞有一定的正向作用,其中對(duì)T淋巴細(xì)胞的影響更為顯著。Yang等[32]將不同劑量的太子參肽(PPH)作用于小鼠脾淋巴細(xì)胞發(fā)現(xiàn),PPH能促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)Th細(xì)胞產(chǎn)生,并分泌IFN-γ、TNF-α和IL-10,說明PPH促進(jìn)了T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,而非B淋巴細(xì)胞。并且PPH能提升細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度、鈣調(diào)磷酸酶活性和T細(xì)胞活化核因子(NFAT)c1 mRNA的表達(dá),這效應(yīng)能被維拉帕米和環(huán)孢素A阻斷,證明PPH活化脾臟淋巴細(xì)胞是通過Ca2+/CaN/NFATc1/IFN-γ信號(hào)通路。Yang等[25]進(jìn)一步從PPH中分離純化到僅有5個(gè)氨基酸肽的肽鏈(RP-5)作用于小鼠脾臟細(xì)胞發(fā)現(xiàn),RP-5在100 μg/mL時(shí)能協(xié)同ConA顯著提升脾淋巴細(xì)胞增殖分化為T細(xì)胞,但各濃度對(duì)LPS刺激脾淋巴細(xì)胞增殖分化為B淋巴細(xì)胞沒有明顯的作用。曾麗等[33]將太子參參須多糖與OVA注射小鼠,發(fā)現(xiàn)太子參參須多糖能夠顯著提高T細(xì)胞的SI值,而對(duì)B細(xì)胞的SI值影響不顯著。曾麗等[31]將太子參參須皂苷與OVA注射小鼠,發(fā)現(xiàn)太子參參須皂苷各劑量組對(duì)T細(xì)胞的SI均有顯著提高,但只有低劑量組能顯著提升B細(xì)胞SI。由此可見,太子參及提取物雖然能促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞增殖分化為T、B淋巴細(xì)胞,但是更偏向于T淋巴細(xì)胞。然而,喬石[34]研究顯示,當(dāng)濃度在12.5～400 μg/mL時(shí),太子參參須多糖協(xié)同ConA可顯著促進(jìn)T淋巴增殖,當(dāng)濃度在50～400 μg/mL時(shí),協(xié)同LPS可顯著促進(jìn)B淋巴細(xì)胞的增殖。顯示太子參參須多糖在T、B淋巴細(xì)胞增殖上與劑量有密切的關(guān)系。

T細(xì)胞亞群的數(shù)量和比值是評(píng)估機(jī)體免疫平衡最有價(jià)值的參數(shù),細(xì)胞免疫狀態(tài)的評(píng)價(jià)指標(biāo)有CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞亞群含量和CD4+/CD8+比值,CD4+/CD8+比值升高表明免疫反應(yīng)上調(diào),反之則表明免疫反應(yīng)降低[35]。曾麗等[33]給小鼠注射太子參參須多糖加OVA后,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn),太子參參須多糖能提高小鼠脾細(xì)胞中的CD3+、CD4+T細(xì)胞數(shù)量,降低CD8+T細(xì)胞數(shù)量。上調(diào)CD4+/CD8+T細(xì)胞比值,增強(qiáng)T細(xì)胞免疫應(yīng)答。曾麗等[31]將太子參參須皂苷加OVA注射小鼠后發(fā)現(xiàn),太子參參須皂苷組的CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞數(shù)均顯著提升,CD4+/CD8+比值顯著升高。說明太子參及提取物具有平衡機(jī)體,增強(qiáng)T細(xì)胞免疫,提高免疫應(yīng)答的作用。

環(huán)磷酰胺能造成小鼠免疫抑制,CD3+、CD4+T細(xì)胞亞群含量和CD4+/CD8+比值明顯低于正常小鼠[36]。喬石等[30]研究顯示太子參參須多糖可顯著提高環(huán)磷酰胺免疫損傷小鼠脾臟中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞含量和CD4+/CD8+比值,顯著降低因環(huán)磷酰胺所致的小鼠脾淋巴細(xì)胞的凋亡,高劑量組的CD4+/CD8+比值顯著升高,基本接近于正常小鼠。

T-bet是T-box新型轉(zhuǎn)錄因子,經(jīng)IFN-γ誘導(dǎo)表達(dá)于Th1細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,通過激活Th1遺傳程序和抑制Th2程序來啟動(dòng)Th1細(xì)胞表達(dá),介導(dǎo)細(xì)胞免疫。GATA-3是Th2細(xì)胞的特異性表達(dá)因子,能夠改變Th1細(xì)胞表型,促進(jìn)Th2細(xì)胞表達(dá),介導(dǎo)體液免疫。T-bet/GATA-3比值對(duì)維持Th1/Th2免疫反應(yīng)的動(dòng)態(tài)平衡發(fā)揮著重要作用[37-38]。喬石[30]研究顯示,環(huán)磷酰胺可顯著降低小鼠脾淋巴細(xì)胞T-bet/GATA-3比值,而太子參參須多糖可顯著提高免疫損傷小鼠T-bet mRNA 的轉(zhuǎn)錄水平、降低GATA-3 mRNA的轉(zhuǎn)錄水平,當(dāng)太子參參須多糖劑量為200 mg/kg時(shí),小鼠脾淋巴細(xì)胞T-bet/GATA-3的比值接近于正常小鼠,Th1/Th2的比值恢復(fù)到相對(duì)平衡狀態(tài),說明太子參參須多糖可以通過調(diào)節(jié)免疫抑制小鼠脾細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子mRNA的轉(zhuǎn)錄水平來調(diào)節(jié)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的分泌,從而促使免疫抑制小鼠的細(xì)胞免疫水平向正常狀態(tài)恢復(fù)。

3 對(duì)免疫分子的作用

3.1 對(duì)細(xì)胞因子的作用

細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞經(jīng)刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白,一般通過結(jié)合相應(yīng)受體調(diào)控免疫應(yīng)答。太子參及其提取物可以影響細(xì)胞因子的表達(dá)和分泌,從而調(diào)節(jié)動(dòng)物免疫功能。喬石等[30]研究顯示,太子參參須多糖在200～400 mg/kg劑量時(shí),能顯著提高環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞IL-2、IFN-γ mRNA轉(zhuǎn)錄水平,同時(shí)抑制IL-4、IL-6 mRNA轉(zhuǎn)錄水平的升高。嚴(yán)勝澤等[39]研究發(fā)現(xiàn)太子參多糖能顯著提升環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠血清中IL-2、IL-6、IFN-γ含量。付楊等[13]用太子參參須和太子參參須多糖治療利血平所致的SD大鼠脾虛模型,結(jié)果與嚴(yán)勝澤報(bào)道一致。曾麗等[31,33]將太子參參須多糖和皂苷分別與雞卵白蛋白(OVA)聯(lián)合免疫小鼠,與OVA組相比,藥物組除了能提高小鼠特異性抗OVA抗體水平外,還能顯著提升IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ mRNA轉(zhuǎn)錄水平及血清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的含量,說明太子參參須多糖和皂苷對(duì)小鼠的細(xì)胞免疫和體液免疫都有一定的促進(jìn)作用。陳小英等[18]發(fā)現(xiàn)太子參須多糖能恢復(fù)隱球菌感染小鼠的體質(zhì)量,增加IL-10、IL-1β及TNF-α的分泌,降低IL-6的分泌,減少感染小鼠肺部和腦部的隱球菌數(shù)量,并增強(qiáng)肺部TLR4受體、CREB和p-CREB的表達(dá)。因此,推測太子參須多糖能增強(qiáng)感染小鼠肺部免疫細(xì)胞TLR4表達(dá),TLR4活化后,進(jìn)一步激活cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB),進(jìn)而促進(jìn)白介素IL-10和TNF-α的合成。

由此可見,太子參及其提取物能調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的分泌,進(jìn)而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)的作用,但是其對(duì)細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)比較復(fù)雜,各報(bào)道的情況也不盡相同。

3.2 對(duì)抗體分子的作用

抗體是B細(xì)胞受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的糖蛋白,主要存在于血清等體液中,是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子,能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合,發(fā)揮免疫功能,主要有IgA、IgG、IgM、IgD和IgE五大類,分別發(fā)揮不同的免疫功能。曾麗等[33]用太子參參須多糖與OVA同時(shí)免疫小鼠,結(jié)果顯示太子參參須多糖能顯著提高OVA-IgG、OVA-IgG2a、OVA-IgG2b抗體水平,OVA-IgG1抗體水平有所提高,但差異不顯著。曾麗等[31]又將太子參參須皂苷與OVA共同免疫小鼠,發(fā)現(xiàn)太子參參須皂苷能顯著提高小鼠血清中OVA-IgG、OVA-IgG1、OVA-IgG2a、OVA-IgG2b的含量。說明太子參多糖和太子參皂苷都能增強(qiáng)OVA免疫原性,提高小鼠機(jī)體對(duì)OVA的免疫應(yīng)答,促進(jìn)抗體分泌,提高機(jī)體的體液免疫應(yīng)答,加之太子參多糖及皂苷也能促進(jìn)免疫細(xì)胞分泌細(xì)胞因子,提高細(xì)胞免疫應(yīng)答,因此太子參多糖和皂苷具有良好的開發(fā)為疫苗佐劑的潛力。

此外,太子參提取物還具有緩解免疫抑制,提高免疫損傷動(dòng)物抗體水平的作用。衣偉萌等[10]發(fā)現(xiàn)太子參參須提取物能顯著提高環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠血清中IgA、IgM和IgG抗體分子含量,高劑量組 IgA、IgM 及 IgG 水平甚至高于黃芪多糖陽性對(duì)照組。甘思言[40]報(bào)道了太子參參須提取物能提高小鼠血清中IgA、IgG、IgM含量,不同劑量的太子參提取物對(duì)不同類型的抗體分子影響不同,與衣偉萌的研究結(jié)果基本一致。付楊等[13]研究顯示太子參須散和太子參參須多糖能顯著提高利血平所致的脾虛SD大鼠血清抗體水平,其中太子參須散組IgM顯著升高,IgA、IgG水平極顯著升高;太子參多糖組IgA、IgM水平均顯著升高,IgG水平極顯著升高。說明太子參及提取物不但能增強(qiáng)抗原原性,增強(qiáng)體液免疫,同時(shí)也能解除免疫抑制,提高機(jī)體抗體水平,增加保護(hù)力。

3.3 對(duì)補(bǔ)體分子的作用

補(bǔ)體是一種血清蛋白質(zhì),存在于動(dòng)物血清及組織液中,活化后具有酶活性、可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)。補(bǔ)體C3和C4在血清中的含量高于其他補(bǔ)體分子,二者在完成補(bǔ)體系統(tǒng)的多種功能中具有十分重要的作用。杜鎣鎣等[41]給小鼠灌服太子參參須提取物,發(fā)現(xiàn)中劑量組補(bǔ)體C3含量顯著升高。衣偉萌等[10]研究顯示太子參參須提取物能極顯著升高環(huán)磷酰胺所致的小鼠血清C3和C4含量降低。甘思言等[40]等也有類似的試驗(yàn)結(jié)果。說明太子參提取物能提高小鼠血清中C3和C4的含量,但其相關(guān)機(jī)制研究以及對(duì)其他動(dòng)物補(bǔ)體分子的作用尚未見報(bào)道。

4 對(duì)腸道黏膜免疫的作用

腸道黏膜不僅僅是消化和吸收營養(yǎng)物質(zhì)的器官,同時(shí)也是重要的免疫屏障,細(xì)胞因子和SIgA抗體分子在腸道黏膜免疫中起著重要的作用[42],構(gòu)筑了防止病原菌在腸道黏膜中定植的第一道防線。嚴(yán)勝澤等[39]研究表明,太子參多糖能使環(huán)磷酰胺所致的免疫抑制小鼠各腸段腸道絨毛長度增加,V/C比值升高,腸黏膜上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)和杯狀細(xì)胞數(shù)增多,并且十二指腸和回腸中SIgA、IL-2、IL-6含量顯著升高。You S Y等[43]研究顯示,太子參多糖能提高DSS所致的結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸長度,降低IL-1β和TNF-α炎性因子水平,腸道黏膜上皮更完整,杯狀細(xì)胞更多,淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤降低,TLR4表達(dá)升高。進(jìn)一步通過16S序列和OTUs聚類分析,顯示擬桿菌和假單胞菌成為優(yōu)勢腸道菌。說明太子參多糖具有修復(fù)保護(hù)腸道黏膜結(jié)構(gòu)、促進(jìn)SIgA和細(xì)胞因子分泌的作用,并通過TLR4信號(hào)通路抑制炎性因子產(chǎn)生,平衡腸道菌落群等機(jī)制改善腸道炎癥和調(diào)節(jié)腸道黏膜免疫功能。

5 結(jié)語

太子參及提取物能從免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫分子三個(gè)層面發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用,并且具有修復(fù)腸道黏膜,平衡腸道微生物菌群,增強(qiáng)腸道黏膜免疫功能。此外,太子參還具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤等多種生物活性。再者,太子參毒副作用小,安全范圍廣,在獸藥、飼料添加劑及免疫佐劑等方面的開發(fā)具有廣闊市場的前景。