靶向血管生成素/酪氨酸蛋白激酶-2（Ang/Tie2）通路的膿毒癥治療藥物的研究進(jìn)展

姜萌，薛立超，郝淑蘭，仲啟明，馮瑪莉，王晞星*，吉海杰*

1.山西省中醫(yī)院 山西省中醫(yī)藥研究院，山西 太原 030012

2.山西白求恩醫(yī)院 山西醫(yī)學(xué)科學(xué)院，山西 太原 030032

膿毒癥是一種由細(xì)菌等病原微生物侵入機(jī)體引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征，常伴有器官功能障礙、組織灌注不良、低血壓甚至膿毒性休克，全球每年約530 萬人因此死亡[1-2]。膿毒癥的發(fā)病機(jī)制涉及全身炎癥網(wǎng)絡(luò)效應(yīng)、免疫功能障礙、凝血功能異常和宿主對病原微生物及其毒素的異常反應(yīng)多個方面[3]?，F(xiàn)有治療手段主要依賴抗生素、血管活性藥物、糖皮質(zhì)激素、機(jī)械輔助通氣等對癥治療[4]。血管功能障礙與膿毒癥之間存在明確的關(guān)系[5-6]，血管功能和通透性受內(nèi)皮特異性受體酪氨酸激酶及其配體調(diào)節(jié)，包括血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）/血管內(nèi)皮生長因子受體（VEGFR）、血管生成素（Ang）/酪氨酸蛋白激酶（Tie）受體[7]。VEGF 信號通路介導(dǎo)血管發(fā)生和病理血管生成，但抗藥性的產(chǎn)生限制了VEGF 信號通路抑制劑的使用[8]。

血管生成素1（Ang1）是強(qiáng)效的血管穩(wěn)定因子，當(dāng)與Ang 家族受體Tie2 結(jié)合時，可使酪氨酸蛋白激酶-2（Tie2）磷酸化，可激活磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/絲氨酸激酶（Akt）信號通路，同時抑制Rho A，降低血管通透性，維持血管內(nèi)皮動態(tài)屏障功能，并通過核因子（NF）-κB 調(diào)節(jié)細(xì)胞間黏附分子（ICAM-1）、血管細(xì)胞黏附分子-1（VCAM-1）表達(dá)，減少白細(xì)胞的黏附和組織浸潤，發(fā)揮抗炎功效[9-11]。血管生成素2（Ang2）與Ang1 的蛋白結(jié)構(gòu)基本相同，但其生物學(xué)功能完全不同，在受到炎癥、缺氧等觸發(fā)后，Ang2 快速釋放，與Ang1 競爭性結(jié)合Tie2，引發(fā)血管通透性的增加，導(dǎo)致血管穩(wěn)態(tài)失衡[12]。Tie2 的磷酸化在很大程度上取決于激動劑配體Ang1 和抑制劑配體Ang2 兩者存在的比例，同時Tie2 磷酸化可激活 Akt，導(dǎo)致叉頭盒蛋白 O1（FOXO1）轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化，抑制Ang2 的產(chǎn)出，避免形成惡性循環(huán)[13]。在感染引發(fā)的膿毒癥中，炎癥因子、內(nèi)毒素等釋放到血液中，引起Ang/Tie2 軸動態(tài)調(diào)控失衡，導(dǎo)致血管內(nèi)皮緊密連接受損，血管通透性增加，進(jìn)一步引發(fā)微循環(huán)灌注不足，從而導(dǎo)致局部組織缺氧和組織器官損傷。白蛋白、病原微生物等隨血漿外滲至血管外，引起水腫、低蛋白血癥、全身感染甚至休克[14-15]。臨床研究表明，膿毒癥患者血液Ang1 水平下降，Ang2 水平升高，提示Ang1 和Ang2 可作為膿毒癥的標(biāo)志物，輔助診斷、預(yù)后評估和對患者風(fēng)險分層[16]，具有替代序貫器官衰竭評估的潛在臨床應(yīng)用價值[17]。表明Ang/Tie2 信號通路可以作為控制炎癥、防止血管滲漏藥物研發(fā)的重要靶點(diǎn)，為膿毒癥治療提供新的可能性[18-22]。

當(dāng)前，研發(fā)靶向Ang/Tie2 信號通路的藥物成為補(bǔ)充VEGF 抑制療法的主流策略，該通路在控制血管穩(wěn)定性、治療膿毒癥方面具有獨(dú)特作用[23]，目前多處于臨床前和臨床試驗階段，基本策略主要包括補(bǔ)充外源或促進(jìn)內(nèi)源Ang1 表達(dá)、抑制內(nèi)源性Ang2表達(dá)和激活Tie2 以及它們的聯(lián)合作用。靶向Ang/Tie2通路的膿毒癥治療藥物有重組人Ang1腺病毒、Ang1 類似物、Ang2 抑制劑、重組人Ang2 和Tie2激動劑。本文總結(jié)了靶向Ang/Tie2 通路的膿毒癥治療藥物的研究進(jìn)展，以期為膿毒癥治療藥物的開發(fā)提供思路。

1 重組人Ang1 腺病毒

2005 年 Witzenbichler 等[24]證實(shí)靜脈注射1×109空斑形成單位（PFU）的重組人Ang1 腺病毒（AdhAng1）可顯著增加脂多糖誘導(dǎo)膿毒性休克模型小鼠存活率，并認(rèn)為這與其改善模型小鼠血液動力學(xué)、緩解肺損傷、降低肺組織炎性黏附分子表達(dá)有關(guān)，提示重組人Ang1 腺病毒有益于膿毒癥的治療。隨后Ziegler 等[25]發(fā)現(xiàn)iv 5×1012病毒粒子的重組Ang1 腺相關(guān)病毒（AAVAng1）可逆轉(zhuǎn)內(nèi)皮細(xì)胞特異性Ang2 高表達(dá)小鼠的血液動力學(xué)障礙和毛細(xì)血管周細(xì)胞數(shù)量減少，進(jìn)一步還觀察到Ang2 抗體治療可緩解脂多糖誘導(dǎo)膿毒癥小鼠的血液動力學(xué)障礙，并將模型小鼠36 h 死亡率從95%降低到61%。除此之外，iv 1×109PFU 編碼人類Ang1 的腺病毒載體（AdAng1）有效維持了實(shí)驗性腦瘧疾（ECM）中Ang1 缺陷小鼠血腦屏障的完整性，與生理鹽水組相比，14 d 存活率由3.7%提高至61%[26]。這些發(fā)現(xiàn)證實(shí)了構(gòu)建Ang1 過表達(dá)帶來的益處，然而腺病毒作為遞送載體用于人類治療時可能產(chǎn)生免疫反應(yīng)，甚至腫瘤的風(fēng)險，因此如何降低風(fēng)險、發(fā)揮保護(hù)性作用成為進(jìn)一步開發(fā)研究的重點(diǎn)。

2 Ang1 類似物

2.1 vasculotide

Tournaire 等[27]發(fā)現(xiàn)一種短合成肽（HHHRHSF），該肽與Tie2 受體的細(xì)胞外部分具有高親和力，將其與四聚體聚乙二醇支架以物質(zhì)的量比12∶1 進(jìn)行合成，得到一種新型聚乙二醇簇狀 Tie2 激動劑vasculotide[28]。與操縱Ang1 或Ang2 表達(dá)的干預(yù)措施不同，vasculotide 是一種Ang1 模擬物[29]，對Tie2受體具有高度特異性，可直接激活受體及其下游途徑，誘導(dǎo)體內(nèi)持久的Tie2 活化，并且不會取代Ang1或Ang2。vasculotide 治療已被證明可以防止70%～80%致死率濃度的脂多糖誘導(dǎo)的C57 小鼠肺血管內(nèi)皮屏障功能障礙，逆轉(zhuǎn)鈣黏蛋白的衰減，并提高生存率（造模前7 h ip 500 ng vasculotide 提高41.4%，造模后2 h ip 500 ngvasculotide，14 h 時再ip 250 ng提高33.3%）[30]。Kumpers 等[31]在盲腸結(jié)扎穿孔前16、1 h ip 200 ng vasculotide，并于造模后18 h 進(jìn)行組織學(xué)分析，結(jié)果vasculotide 通過減少內(nèi)皮黏附分子表達(dá)減少腎臟中的白細(xì)胞浸潤，此外還降低了盲腸結(jié)扎穿孔誘導(dǎo)的膿毒癥小鼠血清和腹腔灌洗液中炎癥因子（TNF-α、IL-6）、中性粒細(xì)胞（KC/CXCL1、MIP-2/CXCL2）和巨噬細(xì)胞（MCP-1/CCL2）的循環(huán)細(xì)胞因子水平，改善終末器官功能，并降低死亡率（造模前16、1 h 以及造模后24、48 h ip 200 ng vasculotide 風(fēng)險比為0.39；造模后2、24、48 h ip同等劑量風(fēng)險比為0.22）。同課題組另在體外研究中表明，vasculotide 對腹膜巨噬細(xì)胞的釋放或中性粒細(xì)胞的遷移沒有影響，證實(shí)了其內(nèi)皮特異性作用。此外，在類似于典型膿毒癥患者表現(xiàn)的嚴(yán)重流感小鼠模型中觀察到，每日ip 500ng vasculotide 減少了肺水腫、動脈低氧血癥和肺內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，從而提高存活率，即使延遲至感染后72 h 予以治療，也實(shí)現(xiàn)了70%存活率的顯著保護(hù)作用[32]。重要的是，vasculotide 的生產(chǎn)成本低廉，化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，且與任何Tie2 配體無關(guān)，因此vasculotide 可能是治療膿毒血癥的一種新穎實(shí)用的藥物。

2.2 重組人Ang1（rh-Ang1）

rh-Ang1 是R&D 公司生產(chǎn)的重組人血管生成素1，Mammoto 等[33]在內(nèi)毒素信號傳導(dǎo)細(xì)胞實(shí)驗中發(fā)現(xiàn)，30 min 時Rac1 活性提高250%，且RhoA 活性抑制50%，繼而增強(qiáng)E-鈣黏蛋白連接，阻止細(xì)胞骨架重排和通透性過高，從而阻斷內(nèi)毒素介導(dǎo)的間質(zhì)水腫和白細(xì)胞浸潤以及血管滲漏，并在脂多糖誘導(dǎo)的小鼠模型中證明，ip10 μg×2 劑rh-Ang1 預(yù)處理可以阻斷內(nèi)毒素誘導(dǎo)白細(xì)胞浸潤到肺實(shí)質(zhì)。當(dāng)注射給接受盲腸結(jié)扎穿孔的小鼠時，其穩(wěn)定了血管內(nèi)皮屏障功能，防止肺毛細(xì)血管滲漏，并通過抑制細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）表達(dá)減少白細(xì)胞浸潤到肺實(shí)質(zhì)和腎臟[34]，盡管rh-Ang1 具有重組蛋白藥物普遍半衰期短的特點(diǎn)，但治療仍能顯著改善各種膿毒癥相關(guān)器官功能障礙，并增加盲腸結(jié)扎穿孔后的生存時間[35-36]。然而rh-Ang1 治療可能存在包括肺動脈高壓、淋巴管發(fā)芽和增生以及急性腎損傷后的纖維化和炎癥的不良反應(yīng)[37-39]，使用時需衡量利弊。

2.3 BowAng1

BowAng1（REGN108）是Davis 等[40]將Ang1蛋白的C 端纖維蛋白原樣結(jié)構(gòu)域與人IgG Fc 片段融合，經(jīng)過工程改造為四聚體以實(shí)現(xiàn)最佳的Tie2 磷酸化，臨床前實(shí)驗發(fā)現(xiàn)，ip 25 mg/kg BowAng1 聯(lián)合7.5 mg/kg 青蒿琥酯治療，即使是在感染后第5 天給藥，仍顯著降低伯氏瘧原蟲ANKA（PbA）感染的實(shí)驗性腦瘧疾小鼠的血管通透性，保持血腦屏障的完整性，與單獨(dú)使用青蒿琥酯相比提高25%的存活率，100%的小鼠存活至14 d 實(shí)驗結(jié)束[26]，并且這種設(shè)計形式在腎腫瘤模型中也被證明可以增強(qiáng)血管穩(wěn)定性[41]。腎臟腫瘤發(fā)病機(jī)制中的血管通透性增大與膿毒癥具有高度的相似性，為BowAng1 進(jìn)一步在膿毒癥模型中試驗奠定基礎(chǔ)。

2.4 MAT-Ang1/COMP-Ang1

由于重組Ang1 蛋白的大規(guī)模生產(chǎn)受到蛋白質(zhì)聚集和不溶性的阻礙，且純化后蛋白質(zhì)的活性有所減弱，因此Dames 等通過用軟骨基質(zhì)蛋白[CMP，亦稱matrilin-1（MAT）][42]、軟骨寡聚基質(zhì)蛋白（COMP）[43]的短螺旋卷曲結(jié)構(gòu)域替換Ang1 的N-端部分開發(fā)出溶解性佳、更穩(wěn)定有效的Ang1 變體MAT-Ang1（三聚體）、COMP-Ang1（五聚體）[44]。其中MAT-Ang1 在膿毒癥發(fā)作后20 h iv 33 μg 可改善脂多糖誘導(dǎo)的小鼠血管滲漏、炎癥和組織灌注不足[45]。COMP-Ang1 在原代培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞中對細(xì)胞活性影響最強(qiáng)，其誘導(dǎo)的Tie2/Akt 磷酸化持續(xù)時間可達(dá)3～5 h，而自然分泌的Ang1 僅維持1～2 h[46]。并且在小鼠角膜血管生成實(shí)驗中，300 ng COMPAng1 植入6 d 后觀察發(fā)現(xiàn)，其可以抵消VEGF 誘導(dǎo)的血管滲漏，在體內(nèi)形成內(nèi)皮完整、狀態(tài)穩(wěn)定的功能性血管，表現(xiàn)出較600 ng 天然Ang1 更強(qiáng)的治療潛力[44]。當(dāng)在內(nèi)毒素血癥期間注射COMP-Ang1 時，可以防止脂多糖誘導(dǎo)的小鼠腎臟血流動力學(xué)功能減弱和黏附分子表達(dá)，從而預(yù)防由內(nèi)毒素血癥引起的急性腎損傷[47]。然而，COMP-Ang1 是一種大蛋白（約1.75×105），生產(chǎn)、純化和儲存期間仍不夠穩(wěn)定，因此Oh 等通過定點(diǎn)修飾鏈間二硫半胱氨酸鍵創(chuàng)建CMP-Ang1 的二聚體形式（CA1-3），其以N-糖相關(guān)性方式激活Tie2，并刺激血管生成，體外實(shí)驗表明，CA1-3 是一種更易構(gòu)建、相對分子質(zhì)量更小（約7×104）且有效（與COMP-Ang1 有相似水平）的Ang1 類似物，已被證明在小鼠耳損傷模型中可以誘導(dǎo)血管管徑增大，并阻止體內(nèi)血管通透性增大[48]。

2.5 MSC-AngPT1

MSC-AngPT1 是Mei 等用來源于骨髓的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）轉(zhuǎn)染人Ang1基因質(zhì)粒從而塑造Ang1過表達(dá)的一種Ang1 類似物[49]。在氣管內(nèi)滴注800 μg 脂多糖可誘導(dǎo)急性肺損傷模型，30 min 后通過小鼠右頸靜脈緩慢輸注100 μL MSC-pAngPT1（含2.5×105細(xì)胞數(shù)），并于3 d 后取出組織分析發(fā)現(xiàn)，AngPT1 有效阻止了炎癥細(xì)胞浸潤到肺部，維持?jǐn)⊙Y期間肺內(nèi)皮的完整性，并幾乎完全逆轉(zhuǎn)脂多糖誘導(dǎo)的肺通透性增加，其中支氣管肺泡灌洗液中IgM 和白蛋白水平的降低分別為96%、74%，顯著改善了急性肺損傷和更嚴(yán)重的急性呼吸窘迫綜合征[49-50]。并在注射MSC 后，小鼠肺中可持續(xù)2 周檢測到MSC 來源的細(xì)胞，其對Ang1 起著協(xié)同增效作用[50]。

3 Ang2 抑制劑

3.1 Angpt2-siRNA

Angpt2-siRNA 是Stiehl 等[51]以脂質(zhì)體載體DACC 將其特異性遞送至肺血管內(nèi)皮的一種Ang2小干擾RNA。研究發(fā)現(xiàn)，膿毒癥發(fā)生時，肺內(nèi)皮細(xì)胞是Ang2 分泌的主要來源部位，造模前48 h 或造模后10 min 通過尾靜脈注射300 μL Angpt2-siRNA（3.8 mg/kg），并于造模后16 h 進(jìn)行評估，發(fā)現(xiàn)其可以使盲腸結(jié)扎穿孔誘導(dǎo)的膿毒癥小鼠肺中Ang2 表達(dá)降低73.8%，同時增強(qiáng)Tie2 的磷酸化，降低肺部炎性細(xì)胞因子IL-6 水平和ICAM-1 表達(dá)，同時減輕中性粒細(xì)胞器官浸潤、血管滲漏，并改善腎功能，降低整體疾病嚴(yán)重程度，提高生存率，脂多糖模型也同樣證實(shí)了上述現(xiàn)象。其功能抑制了Ang2與Tie2的結(jié)合，減輕了敗血癥和急性呼吸窘迫綜合征模型中的血流動力學(xué)功能減弱，減少休克的發(fā)生，并降低死亡率[52]。

3.2 LC10（RO5485202）、LC06（RO5314193）

Thomas 等[53,25]從人抗體庫中獲得抗Ang2 抗體LC10（RO5485202）、LC06（RO5314193）的結(jié)合結(jié)構(gòu)域，并將獲得的VH 和VL 區(qū)域成熟化，融合到人IgG1 抗體的恒定部分，之后通過基因合成生成所需的基因，PCR 擴(kuò)增并克隆到HEK293-F 系統(tǒng)中，用于瞬時表達(dá)的表達(dá)質(zhì)粒變體中，從而構(gòu)造新型Ang2 抗體。盡管LC10 預(yù)處理并不能阻止炎癥細(xì)胞因子TNF-α、IL-6 水平的增加，但其阻斷了脂多糖誘導(dǎo)的全身炎癥小鼠微循環(huán)系統(tǒng)通透性增加，減緩了內(nèi)毒素血癥發(fā)展早期（0～12 h）在心臟和周圍肌肉中觀察到的周細(xì)胞丟失，但不會對中性粒細(xì)胞遷移造成顯著影響。全身性低血壓、微血管功能受損是膿毒性休克的標(biāo)志，這種血流動力學(xué)改變造成的高死亡率在36 h 即可進(jìn)展到95%，而ip 20 mg/kg LC06、LC10 在造模前24 h 預(yù)處理均可顯著降低這一速率，并在10 h 內(nèi)增加平均血壓和存活率，LC10 在盲腸結(jié)扎穿孔模型中也同樣被證明降低了死亡率。

4 重組人Ang2（rh-Ang2）

與rh-Ang1 類似，rh-Ang2 也是R&D 公司生產(chǎn)的重組人血管生成素2 蛋白。看似矛盾的是，Tzepi等[54]在多重耐藥銅綠假單胞菌（MDR-PA）誘導(dǎo)的敗血癥小鼠中發(fā)現(xiàn)了Ang2 的保護(hù)作用，無論是在接種細(xì)菌前2 h 預(yù)處理還是接種后30 min 使用，生存率均顯著提高，與對照組相比，25 μg/kg rh-Ang2組中性粒細(xì)胞對肝臟的浸潤升高。同樣，rh-Ang2 預(yù)處理可防止大腸桿菌引起的膿毒癥相關(guān)死亡。然而，其未能在脂多糖誘導(dǎo)的小鼠中提供保護(hù)。當(dāng)MDR-PA 接種于U937 細(xì)胞時可誘導(dǎo)炎癥因子IL-6、TNF-α 的分泌，而Ang2 的加入降低了血清TNFα 水平，消除了TNF-α 與MDR-PA 的協(xié)同作用。實(shí)驗發(fā)現(xiàn)，當(dāng)膿毒癥誘因為多微生物時，rh-Ang2 通過調(diào)節(jié)TNF-α 的產(chǎn)生和中性粒細(xì)胞的遷移從而展現(xiàn)出保護(hù)作用。Safioleas 等[55]在25 例急性腎盂腎炎和膿毒癥臨床患者以及40 只急性腎盂腎炎兔子模型中同樣證實(shí)了這一存活機(jī)制。盡管rh-Ang2 可以通過與循環(huán)脂多糖的反向動力學(xué)從而逆轉(zhuǎn)MDRPA 和大腸桿菌引起的膿毒癥所致死亡，但Ang2 的出現(xiàn)仍會介導(dǎo)血管完整性喪失，甚至進(jìn)展為休克，由此表明rh-Ang2 具有雙刃劍特征，且對于膿毒癥誘因具有特異性，因此明確rh-Ang2 的應(yīng)用范圍，并進(jìn)一步發(fā)揮其保護(hù)作用成為開發(fā)的重點(diǎn)。

5 Tie2 激動劑

5.1 ABTAA

Han 等[56-58]發(fā)現(xiàn)了一種新型Ang2 靶向抗體（ABTAA），不同于標(biāo)準(zhǔn)抗體對其活性的單純阻斷，ABTAA 與Ang2 結(jié)合時，會促使Ang2 及其受體Tie2 在該部位聚集，通過將抗體-抗原簇轉(zhuǎn)化為Tie2激活配體的機(jī)制，從而允許Ang2 抑制和Tie2 活化同時發(fā)生。其通過對內(nèi)皮糖萼的保護(hù)來增強(qiáng)血管內(nèi)皮屏障功能，并減輕血管滲漏和器官損傷，對于炎癥帶來的損害具有顯著改善，生存提高率與傳統(tǒng)的Ang2 阻斷抗體ABA 相比顯著提高，在盲腸結(jié)扎穿孔誘導(dǎo)的敗血癥中由13%提高至40%，在內(nèi)毒素血癥中由33%提高至63%，在金黃色葡萄球菌菌血癥中由9%提高至55%。3 種小鼠模型均證明ABTAA在對脈管系統(tǒng)、微血管功能障礙、終末器官損傷和死亡率的保護(hù)方面更有效。這些研究同時強(qiáng)調(diào)了Tie2 激活的重要性，僅阻斷Ang2 不足以在嚴(yán)重膿毒癥期間保持血管內(nèi)皮的完整性，聯(lián)合型抗體具有更顯著的療效。

5.2 Razuprotafib（AKB-9778）

Razuprotafib 是一種皮下給藥的血管內(nèi)皮蛋白酪氨酸磷酸酶（VE-PTP）的高度特異性抑制劑，同時也是一種新型的Tie2 激活劑，2010 年由Akebia Therapeutics 公司在專利中首次提出用于治療炎性疾病如敗血癥等引起的血管滲漏綜合征[59]。Razuprotafib 可以激活Tie2，繼而激活Rac1，并使RhoA 失活，同時觸發(fā)Rap1 蛋白的激活，并降低肌球蛋白輕鏈2（MLC2，也稱為MYL2）的磷酸化，從而穩(wěn)定內(nèi)皮肌動蛋白細(xì)胞骨架，增強(qiáng)EC 連接，阻止炎癥介質(zhì)誘導(dǎo)的通透性增大和白細(xì)胞外滲。Miles 測定顯示，在測定開始前5、0 h 各靜脈注射1 次16 mg/kg Razuprotafib 顯著抑制了10 min 后皮內(nèi)注射225 ng 組胺或100 ng VEGF 誘導(dǎo)的C57 小鼠皮膚中的血管滲漏。10 mmol/L Razuprotafib 同樣阻斷了200 ng/mL VEGF 誘導(dǎo)的單層人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）通透性增大[60]。另外，24 mg/kg Razuprotafib 被證明可以明顯抵消吸入40 min 霧化脂多糖誘導(dǎo)的小鼠4 h 后肺部血管滲漏和60%的中性粒細(xì)胞外滲，其對內(nèi)皮連接的穩(wěn)定作用取決于Tie2 的表達(dá)，而Tie2/Rap1 介導(dǎo)的影響在Cdh5基因敲除小鼠中被發(fā)現(xiàn)甚至能夠脫離血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（VE-cadherin）直接加強(qiáng)內(nèi)皮連接，改善小鼠的血管內(nèi)皮屏障功能[61]。研究表明，脂多糖注射使大鼠產(chǎn)生全身炎癥、可溶性血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（sVE-cadherin）水平升高，繼而誘發(fā)微血管內(nèi)皮屏障功能喪失，微循環(huán)灌流量減少，并且sVE-cadherin會干擾VE-cadherin 介導(dǎo)的EC 間連接，并擾亂VEPTP/VE-cadherin 的相互作用，使RhoA 激活，而Razuprotafib 減輕了這一系列反應(yīng)[62]。除此之外，其在腫瘤、眼病和新型冠狀病毒感染等領(lǐng)域中也有廣泛應(yīng)用，已在臨床Ⅱ期中進(jìn)行測試[63-67]。Razuprotafib的出現(xiàn)表明可以通過激發(fā)Tie2 活性來穩(wěn)定EC 連接，而不需要在EC 連接處增加或積累Tie2 分子，為調(diào)節(jié)Tie2 治療膿毒癥提供了另一種潛在機(jī)制。

6 結(jié)語和展望

及時識別和診治對于膿毒癥患者的預(yù)后至關(guān)重要[68]。Ang/Tie2 軸在維持內(nèi)皮屏障穩(wěn)定性方面起著至關(guān)重要的作用，其在全身感染期間的失調(diào)會導(dǎo)致病理級聯(lián)反應(yīng)，最終導(dǎo)致終末器官衰竭和死亡。除了在膿毒癥病理生物學(xué)中的機(jī)制作用外，Ang/Tie2系統(tǒng)的組成部分還可以作為疾病嚴(yán)重程度和結(jié)局的預(yù)后生物標(biāo)志物，并可能作為膿毒癥管理的重要治療靶點(diǎn)。

得益于生物醫(yī)學(xué)手段的發(fā)展和各種基因蛋白結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫的大規(guī)模擴(kuò)展，通過重組蛋白、腺病毒載體、蛋白工程改造、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、基因編輯等手段已實(shí)現(xiàn)對Ang/Tie2 系統(tǒng)表達(dá)、激活的有效干預(yù)，為膿毒癥治療藥物的開發(fā)創(chuàng)造了便利條件。

這些藥物在臨床前各類膿毒癥模型中表現(xiàn)出良好效果，但在臨床試驗中的證據(jù)較缺乏。腺病毒載體、重組蛋白等方式在帶來益處的同時也存在不良反應(yīng)，對于應(yīng)用于人體的可靠性仍存在爭議。因此，進(jìn)一步設(shè)計并篩選適用于臨床的快速、安全、有效的治療藥物成為首要任務(wù)。同時還需要努力尋找和開發(fā)新興的治療膿毒癥方法。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突