氣相色譜法測(cè)定板栗中樂(lè)果和殺螟硫磷農(nóng)藥殘留

摘 要：建立了氣相色譜法同時(shí)測(cè)定板栗中2種常用有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑殘留量的分析方法。樣品經(jīng)乙腈提取、過(guò)濾、濃縮后，用丙酮定容，注入氣相色譜儀，農(nóng)藥組分經(jīng)DB-17毛細(xì)管柱分離，用火焰光度檢測(cè)器檢測(cè)，保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。結(jié)果顯示，在10～500 μg·L-1濃度范圍內(nèi)，樂(lè)果和殺螟硫磷峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)大于0.999，檢出限為0.006 mg·kg-1，定量限為0.02 mg·kg-1；加標(biāo)回收率在84.01%～100.59%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤5.05%。該方法準(zhǔn)確，前處理過(guò)程簡(jiǎn)便、快捷，適用于板栗中樂(lè)果和殺螟硫磷農(nóng)藥殘留的檢測(cè)分析。

關(guān)鍵詞：氣相色譜；農(nóng)藥殘留；板栗

Determination of Pesticide Residues of Dimethoate and Fenitrothion in Chestnut by Gas Chromatography

HUANG Hong

（Anhui Provincial Center for Forestry High Technology Development， Hefei 230031， China）

Abstract： A method for the simultaneous determination of two common organophosphorus pesticides residues in chestnut by gas chromatography was established. The samples were extracted， filtered and concentrated by ethene， then fixed with acetone and injected into the gas chromatograph. The pesticide components were separated on a DB-17 capillary column， detected by a flame photometric detector， characterized by retention time and quantified by external standard method. The results showed that in the concentration range of 10～500 μg·L-1， the peak areas of dimethoate and fenitrothion showed good linear correlation with the concentration， and the correlation coefficients were more than 0.999. The limits of detection were 0.006 mg·kg-1， and the limits of quantification were 0.02 mg·kg-1. The recoveries of the spiked pesticides were in the range of 84.01%～100.59%， and the relative standard deviations were ≤5.05%. The method is accurate， the pretreatment process is simple and fast， and is suitable for the detection and analysis of pesticide residues of dimethoate and fenitrothion in chestnut.

Keywords： gas chromatography; pesticide residues; chestnut

板栗又稱栗子，有“干果之王”的美稱，板栗富含蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉、B族維生素等，營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美[1]。然而，板栗在生長(zhǎng)過(guò)程中易受病蟲(chóng)害侵?jǐn)_，影響其產(chǎn)量和質(zhì)量。為了促進(jìn)板栗產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，確保板栗的產(chǎn)量和質(zhì)量，板栗在種植過(guò)程中不僅要增強(qiáng)栽培管理，還要重視病蟲(chóng)害的預(yù)防和治療。近幾年，有關(guān)板栗病蟲(chóng)害防治技術(shù)的研究報(bào)道已有不少[2-4]。板栗一直是皖南山區(qū)和大別山區(qū)的主要經(jīng)濟(jì)果林，是安徽省的傳統(tǒng)優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)，但板栗病蟲(chóng)害種類多、果實(shí)成熟期病蟲(chóng)害發(fā)生猖獗，導(dǎo)致了板栗品質(zhì)不優(yōu)、產(chǎn)量下降問(wèn)題[5]。為了提高產(chǎn)量，各種各樣的農(nóng)藥已運(yùn)用到板栗的生產(chǎn)過(guò)程中[6]。隨著人們對(duì)綠色無(wú)公害食品的重視，板栗在生產(chǎn)過(guò)程中長(zhǎng)期使用化學(xué)農(nóng)藥會(huì)造成農(nóng)藥殘留已引起消費(fèi)者的關(guān)注。本文以板栗病蟲(chóng)害防治中常用的2種有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑樂(lè)果和殺螟硫磷為例，對(duì)有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑殘留的檢測(cè)方法進(jìn)行研究，以期找到方便、快捷、實(shí)用的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析方法。

有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑具有效力高、成本低、品種多、殺蟲(chóng)方式多樣等特點(diǎn)，但多數(shù)屬高毒或中等毒性，使用不當(dāng)會(huì)造成農(nóng)藥殘留超標(biāo)，危害人們身體健康。板栗中農(nóng)藥殘留分析方法有氣相色譜-質(zhì)譜法[7]、氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法[8]、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[9]等。氣相色譜儀對(duì)于熱穩(wěn)定、易揮發(fā)農(nóng)藥的分析，結(jié)合專屬的檢測(cè)器，具有靈敏度高、分離效能好、分析速度快等優(yōu)勢(shì)。本文建立了氣相色譜法同時(shí)測(cè)定板栗中樂(lè)果和殺螟硫磷殘留量的分析方法，該方法簡(jiǎn)便、快捷、實(shí)用，各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果符合方法特性參數(shù)的指標(biāo)要求，適用于板栗中樂(lè)果和殺螟硫磷農(nóng)藥殘留的分析。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

乙腈：色譜純；丙酮：色譜純；氯化鈉：分析純；樂(lè)果標(biāo)準(zhǔn)品：100 mg·L-1，購(gòu)買于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所；殺螟硫磷標(biāo)準(zhǔn)品：100 mg·L-1，購(gòu)買于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所。

1.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜儀：美國(guó)安捷倫7890B型（FPD檢測(cè)器）；全自動(dòng)空氣源、氫氣發(fā)生器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、冷卻供水裝置、高速勻漿機(jī)、氮吹儀、旋渦混合器、百分之一電子天平、高速破壁調(diào)理機(jī)等。

1.3 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（10 mg·L-1）：準(zhǔn)確移取1.00 mL單個(gè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品溶液分別注入10.00 mL容量瓶中，用丙酮稀釋至刻度，即為10 mg·L-1的儲(chǔ)備液，儲(chǔ)存于棕色密閉標(biāo)液瓶中，于-20 ℃避光保存。

樂(lè)果、殺螟硫磷混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（1 mg·L-1）：分別準(zhǔn)確移取樂(lè)果、殺螟硫磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.00 mL于同一10.00 mL容量瓶中，用丙酮稀釋至刻度，即為1 mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，儲(chǔ)存于棕色密閉標(biāo)液瓶中，于4 ℃下避光保存。

1.4 方法

1.4.1 試樣制備

鮮板栗待測(cè)用樣去殼后不少于500 g，用高速破壁調(diào)理機(jī)充分粉碎至勻漿，貯存于潔凈無(wú)污染的容器中，置于低溫（-20 ℃）下保存，備用。

1.4.2 提取

準(zhǔn)確稱取10 g（精確到0.01 g）待測(cè)板栗試樣于150 mL高腳燒杯中，加入20 mL水，混勻后，靜置30 min，再加入50.0 mL乙腈，用高速勻漿機(jī)以15 000 r·min-1的速率勻漿2 min，提取液經(jīng)定量濾紙過(guò)濾到裝有5～7 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，蓋上塞子，劇烈振蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層。

1.4.3 凈化、濃縮、定容

從具塞量筒中準(zhǔn)確吸取10.00 mL上清液，放入250 mL平底燒瓶，設(shè)置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀主機(jī)的真空度10 kPa，旋轉(zhuǎn)頻次150 r·min-1，水浴溫度43 ℃，冷卻循環(huán)水溫度4 ℃，待儀器狀態(tài)穩(wěn)定，將平底燒瓶連接到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入2.0 mL丙酮溶解殘余物，備用。

將上述備用液完全轉(zhuǎn)移至15 mL刻度離心管中，再用約3 mL丙酮分3次沖洗平底燒瓶，并將洗液全部轉(zhuǎn)移至離心管，用水浴溫度為45 ℃的氮吹儀吹至近干，最后用檢定合格的移液槍吸取丙酮2.00 mL定容，在旋渦混合器上渦旋0.5 min混勻，用一次性注射器和尼龍濾膜過(guò)濾到2 mL自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶中，用氣相色譜儀檢測(cè)。

1.4.4 氣相色譜條件

色譜柱：DB-17毛細(xì)管柱（30 m×0.53 mm，l.00 μm），美國(guó)安捷倫公司；進(jìn)樣口溫度：220 ℃；檢測(cè)器溫度：250 ℃；柱溫：初始溫度150 ℃保持2 min，以8 ℃·min-1升溫至250 ℃，保持12 min；載氣：氮?dú)?，純度?9.999%，流速為10 mL·min-1；燃?xì)猓簹錃猓魉贋?2.5 mL·min-1；助燃?xì)猓嚎諝?，流速?0 mL·min-1；總流速：28 mL·min-1；柱流速：10 mL·min-1；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；檢測(cè)器：火焰光度檢測(cè)器；進(jìn)樣量：1.0 μL。

1.4.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

稱取10.0 g空白板栗試樣，依照1.4.2～1.4.3的方法進(jìn)行前處理制成試樣空白提取液作為標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋液。準(zhǔn)確移取1 mg·L-1的混合中間溶液0.10 mL、0.20 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL和5.00 mL于10.00 mL容量瓶中，用稀釋液定容至刻度，得到濃度為10 μg·L-1、20 μg·L-1、50 μg·L-1、100 μg·L-1、200 μg·L-1和500 μg·L-1的混合基質(zhì)加標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，臨用現(xiàn)配，以1.4.4的氣相條件檢測(cè)分析，以溶液峰面積為縱坐標(biāo)，以溶液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4.6 方法的檢出限、定量限、回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的測(cè)定

精密移取混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液適量加入10.0 g待測(cè)板栗試樣中，使試樣中樂(lè)果和殺螟硫磷的濃度為0.02 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1、0.20 mg·kg-1。加標(biāo)試樣按照1.4.2～1.4.3的方法進(jìn)行前處理，按照1.4.4的氣相條件測(cè)定，每個(gè)添加濃度做6個(gè)平行樣，根據(jù)獲得的色譜圖以信噪比S/N≥3計(jì)算出方法的檢出限、S/N≥10計(jì)算出方法的定量限，根據(jù)測(cè)定的濃度計(jì)算出相應(yīng)的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果與分析

2.1 氣相色譜圖

按照1.4.4的色譜條件，對(duì)2種農(nóng)藥單個(gè)標(biāo)液和混合標(biāo)液分別進(jìn)樣，以保留時(shí)間定性，混合基質(zhì)加標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見(jiàn)圖1。色譜圖基線平穩(wěn)，目標(biāo)化合物的保留時(shí)間處沒(méi)有雜質(zhì)干擾，樂(lè)果的出峰時(shí)間為10.35 min，殺螟硫磷的出峰時(shí)間為12.21 min，目標(biāo)峰之間分離良好。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性范圍

按1.4.5方法配制混合基質(zhì)加標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。如表1所示，樂(lè)果和殺螟硫磷在10～500 μg·L-1線性良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.999，可以作為定量分析的依據(jù)。

2.3 方法檢出限、定量限、回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

通過(guò)向板栗空白試樣中添加低、中、高3種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，每個(gè)濃度做6個(gè)平行，檢測(cè)后計(jì)算確定樂(lè)果和殺螟硫磷的檢出限、定量限、加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果見(jiàn)表2。樂(lè)果和殺螟硫磷的檢出限均為0.006 mg·kg-1，定量限均為0.02 mg·kg-1；加標(biāo)回收率在84.01%～100.59%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤5.05%。

2.4 實(shí)際樣品檢測(cè)

運(yùn)用本文所建立的方法，對(duì)安徽省六安市金寨縣20個(gè)板栗樣品進(jìn)行樂(lè)果和殺螟硫磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)，均未檢出。

3 結(jié)論

本研究以鮮板栗可食用部分為試樣，建立了氣相色譜法同時(shí)測(cè)定板栗中樂(lè)果和殺螟硫磷殘留量的方法。在10～500 μg·L-1基質(zhì)配標(biāo)濃度范圍內(nèi)，樂(lè)果和殺螟硫磷峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于0.999，樂(lè)果和殺螟硫磷在板栗中的檢出限均為0.006 mg·kg-1、定量限均為0.02 mg·kg-1。該方法前處理過(guò)程簡(jiǎn)便、快捷，線性關(guān)系良好，檢出限、定量限、精密度、準(zhǔn)確度均符合分析方法的要求，適用于板栗中樂(lè)果和殺螟硫磷農(nóng)藥殘留的定性和定量分析。

參考文獻(xiàn)

[1]杜魯慧.板栗的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[J].開(kāi)卷有益-求醫(yī)問(wèn)藥，2022（11）：60.

[2]葛良霞.板栗主要病蟲(chóng)害的防治技術(shù)[J].南方農(nóng)業(yè)，2021，15（36）：33-35.

[3]王磊.板栗病蟲(chóng)害防治方法[J].世界熱帶農(nóng)業(yè)信息，2021（4）：35-37.

[4]郭聰聰，榮艷菊，王東晨.板栗常見(jiàn)病蟲(chóng)害及綜合防治措施[J].河北果樹(shù)，2021（2）：46-47.

[5]王恒義，洪星，張俊.金寨縣板栗產(chǎn)業(yè)振興之思考[J].安徽林業(yè)科技，2019，45（5）：60-63.

[6]劉云.大別山區(qū)板栗主要病蟲(chóng)害及其防治方法[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2008（20）：132.

[7]王宵，李暉，杜業(yè)云，等.QuEChERS-GC/MS法測(cè)板栗中10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J].湖北林業(yè)科技，2017，46（5）：47-52.

[8]席慧，楊振興，張帆.MAE在線GPC-GC-MS/MS法測(cè)定板栗中20種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J].湖南林業(yè)科技，2015，42（4）：56-61.

[9]侯霞，趙雁冰，麻兵繼，等.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定板栗中58種農(nóng)藥殘留[J].河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，20（6）：97-105.

作者簡(jiǎn)介：黃紅（1980—），女，重慶人，本科，助理實(shí)驗(yàn)師。研究方向：食用林產(chǎn)品檢驗(yàn)檢測(cè)。