肉牛病毒性腹瀉及其防治對策

王源元

（大連市普蘭店區(qū)農業(yè)農村局，遼寧 大連 116200）

1 病原特點

牛病毒性腹瀉是由牛病毒性腹瀉粘膜病毒感染所致，該病毒是黃病毒科瘟病毒屬的單股RNA病毒，與羊邊界病毒以及豬瘟病毒的關系非常密切。該病毒粒子呈圓形，可在牛的鼻甲骨等細胞中生長和繁殖。按照臨床表現(xiàn)將其劃分為2 種生物型，即致細胞病變型和非致細胞病變型；如果由于單鏈按照基因型可劃分基因玉型和基因域型，而且每種基因型所有的突變率很高，每種基因型都有多種不同的毒株，并且不同毒株間表現(xiàn)出的致病性也具有明顯差異。實驗室中將其置于電鏡之下能觀察到圓形的病毒粒子。該病毒對胰酶、氯仿以及乙醚的敏感性極強，對低溫環(huán)境具有相應的抵抗力，如果將其置于超過56 ℃的環(huán)境中則會在短時間內被滅活。

2 流行特點

該病毒具有廣泛的宿主范圍，牛、羊、豬、鹿等動物都易感，其中以牛的易感性最高。犢牛和老齡?；疾÷瘦^高。該病毒存在于病牛的多種體液中，可對外界環(huán)境造成污染。一旦健康牛群接觸到已經被污染的生產環(huán)境，病毒通常會經呼吸道和消化道入侵。此外，該病毒也能經過胎盤垂直傳播。

在飼養(yǎng)生產中，如果日常給肉牛供應的飼料中營養(yǎng)配比失衡、牛群飼養(yǎng)密度過大、或飼養(yǎng)環(huán)境的衛(wèi)生條件惡劣等，都會導致牛群感染病毒性腹瀉。臨床以4～24 月齡為發(fā)病的集中階段，但以6～8 月齡的牛群是患病較為嚴重的群體，但此年齡段的牛群感染后死亡率不高，其中隱性感染的病例占比大于50%。

對此，建議相關部門加強對肉牛飼養(yǎng)管理，提高飼料營養(yǎng)水平，合理控制飼養(yǎng)密度，并加強對養(yǎng)殖場的衛(wèi)生監(jiān)管。同時，要加強病毒監(jiān)測與防控工作，及時發(fā)現(xiàn)并處理疫情，以保障畜牧業(yè)健康發(fā)展。

3 臨床癥狀

3.1 急性型 （1）成年牛感染后多以急性發(fā)病為主，牛群多突然發(fā)病，病牛體溫超過40 ℃?；寂Ｊ秤档蜕踔翉U絕，精神狀態(tài)極差，伴隨有干咳以及呼吸困難等癥狀而且嚴重。病牛感染后2～7 d 內，可見有腹瀉癥狀，其排泄物大多為水樣并在其中混雜一些黏液和血液，有惡臭氣味。此外，病?？谇火つび胁煌潭鹊拿訝€與壞死變化，患牛有流涎的癥狀。妊娠母牛感染后，會增加其流產風險，或會在母牛妊娠中期生產出腦部發(fā)育不全的犢牛。母牛感染后泌乳量會嚴重降低。除此之外，病牛發(fā)生急性感染時，其體內的白細胞數(shù)量顯著減少，直接損害機體的淋巴組織，同時血液中血小板的數(shù)量也會降低，臨床可見流鼻血。其排泄物中夾雜有血液，嚴重感染的病牛在注射后或被蚊蟲叮咬后都有出血癥狀。該病毒感染后在病牛的鼻竇、口腔、腸黏膜等部位大量繁殖，極易造成病毒血癥。通常病牛在出現(xiàn)感染的15～30 d 內就會死亡。但是也有一些病?？稍谳^短時間內康復，而且黏膜損傷也會在10～14 d內愈合。因此，對該病應采取嚴格的監(jiān)控和治療措施，以降低疫情的擴散風險，提高治愈率。

3.2 慢性型 該型病牛主要的癥狀是間歇性的腹瀉、食欲明顯降低，其眼角流淚，口腔黏膜有潰瘍并伴有糜爛等變化，病牛的糞便中有血液和黏液混雜。其體重會持續(xù)下降，如果不能夠及時采取有效措施，病牛一般會在幾周或幾個月后死亡。臨床中這類病例數(shù)量不多，但病死率卻高達90%，會給養(yǎng)殖業(yè)造成極大的損失。

妊娠母牛，尤其是妊娠40～125 d 的母牛感染，會嚴重危害未出生的胎牛，導致死胎或流產發(fā)生。由于是隱性感染，很難被及時發(fā)現(xiàn)，進一步增加了防治的難度。因此，必須加強對牛群的日常觀察和檢疫工作，及早發(fā)現(xiàn)疫情并采取果斷措施，以防止疫情擴散和危害加重。同時，要積極推進養(yǎng)殖業(yè)的科學管理和技術升級，提高養(yǎng)殖戶的防疫意識和防治能力，從源頭上減少該病的發(fā)生和傳播。

3.3 剖檢變化 （1）病牛的外觀癥狀：明顯營養(yǎng)不良，關節(jié)普遍腫脹，眼結膜呈黃色，在其舌下有潰瘍狀的斑點。（2）剖檢變化：剖檢病死?？梢娖淦は轮旧n白；胃大網膜有枝狀充血變化；腎臟腫大并呈紅褐色，其包膜比較容易剝離且質脆，同時可見到灰白色的壞死病灶；其肝臟腫脹，其邊緣為鈍圓形，切面外翻；其膽囊可見有出血斑點，膽汁呈油狀；肺臟充血和淤血，并伴有壞死性結節(jié)；心臟腫大，心包中的液體主要為淡黃色，發(fā)現(xiàn)其冠狀溝水腫且為膠凍樣；小腸內容物為灰色，并散發(fā)出惡臭氣味。這些癥狀和病變可作為診斷和治療的參考依據。

4 診斷方法

4.1 病毒分離鑒定 無菌采集病牛的血液樣本，經過反復凍融和抗生素添加，等處理后接種于牛腎系帶細胞或犢牛的睪丸細胞中。經過多代的盲傳培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)細胞會有些病變特征。將病變細胞與標準毒株產生的細胞病變比對。呈現(xiàn)完全一致性，則可判定為病毒性腹瀉病毒感染病例。此外，病毒分離鑒定的最低檢測數(shù)量需達到10 個/mL，這種方法耗時且需要較高的技術要求，不適于大規(guī)模流行病學調查。

4.2 瓊脂擴散試驗 采集病牛糜爛以及潰瘍部位周圍的黏膜樣本，直接與牛病毒性腹瀉黏膜病毒陽性血清進行瓊脂擴散試驗。根據試驗結果就能夠準確判定待檢牛的感染情況。但需注意，瓊脂擴散試驗雖然操作便捷、成本低廉，但比血清中和試驗的敏感度低，僅能粗略檢測血清中的抗體?？捎糜诩膊〉某鹾Y，確診還需需結合其他檢測方法以提高準確性。

4.3 血清中和試驗 在無菌條件下將病毒接種至牛睪丸細胞或犢牛腎細胞中培養(yǎng)。隨后觀察發(fā)現(xiàn)此病毒與待檢血清出現(xiàn)反應。再次將其接種至相應的細胞，仔細觀察細胞的病變。間隔4 周對待檢血清進行2 倍的稀釋處理，若滴度明顯升高4 倍或以上，即可判定為陽性。血清中和試驗能夠給實驗室的定性分析提供確切依據，同時也能實現(xiàn)精確的定量分析。該法有較高的檢出率和良好的重復性，是目前實驗室檢測牛病毒性腹瀉比較常用的方法。由于一部分病牛為隱性感染，會產生免疫耐受，其體內可能不產生抗體。因此，單純的血液抗體檢測并不能全面反映感染的真實狀況。

4.4 免疫熒光技術 該方法通過免疫熒光染色技術結合顯微鏡觀察進行相應檢測，可以直接檢測病料的細胞培養(yǎng)物或病變組織冰凍切片內的病毒粒子。如果細胞感染病毒，則其胞漿中會有熒光顆粒。該法的檢出率超過98%，對非致細胞病變毒株的檢測比較有效。

4.5 RT-PCR 法 根據牛病毒性腹瀉病毒基因序列設計的引物，通過實時逆轉錄聚合酶鏈反應技術，能夠精準檢測待檢器官、組織、血液和排泄物中所存在的病毒，可以有效區(qū)分不同的毒株。即使病毒被滅活，該技術依然能確保對病毒檢測的準確性。該法檢測速度快，特異性強，成本低。但檢測所需的試驗儀器和試劑較昂貴，合成引物的難度也較大，不是臨床應用的首選。

4.6 核酸雜交技術 通過堿基互補配對原則，兩條單鏈核酸退火后可形成穩(wěn)定的雙鏈結構。該技術具有高度的特異性以及敏感性，用于直接檢測目標器官、組織、細胞而且是無創(chuàng)的，對病毒還可進行精確的分型。核酸雜交技術不僅安全可靠，操作簡便，而且檢測速度快，可在技術成熟后作為有效的技術手段進行推廣應用。通過該技術，可在同一張檢測膜上一次性完成多個樣品的檢測分析，為實現(xiàn)高通量檢測提供有力支持。

5 防治方法

5.1 治 療 目前，該病呈現(xiàn)大范圍流行態(tài)勢，還沒有特效藥物治療，多采用幾對癥治療。（1）病牛出現(xiàn)血小板減少的癥狀，及時進行輸血救治。（2）出現(xiàn)發(fā)熱以及腹瀉的患牛，要盡量避免其受到應激刺激，改善飼養(yǎng)生產環(huán)境。配合使用抗生素預防繼發(fā)性的感染，但皮質類和固醇類的藥物盡量不用，否則會有加重消化系統(tǒng)潰瘍和糜爛癥狀。用40 g磺胺脒與30 g 次碳酸鉍，2 次/d，首次用藥量加倍。與此同時，用5%的葡萄糖生理鹽水3 L 與300 萬U 的丁胺卡那霉素混合，靜脈注射。感染嚴重的病?？杉∪庾⑸渚S生素C 和安鈉咖注射液，或將其與復方磺胺甲唑粉、恩諾沙星聯(lián)配合使用，可肌肉或靜脈注射。

5.2 預 防 疫苗免疫是預防牛病毒性腹瀉的首選方式，接種牛病毒性腹瀉弱毒疫苗或豬瘟弱毒疫苗。為有效控制該病，需要逐步對牛群凈化。要定期的監(jiān)測牛群的血清抗體水平，對陽性反應牛立即進行淘汰或撲殺后采取無害化處理。對病牛接觸過的環(huán)境以及生產設備都要進行嚴格消毒。飼養(yǎng)場應該始終堅持自繁自養(yǎng)的原則，必須引種時應對引進的肉牛采取隔離檢疫措施，結果為陰性且健康狀況良好的可混群飼養(yǎng)。為避免細菌和病毒產生耐藥性，飼養(yǎng)場在消毒時建議使用兩種或兩種以上的消毒藥物進行輪替。

6 結語

牛病毒性腹瀉病作為一種具有高傳染性和傳播途徑復雜多樣的動物疫病，目前還沒有特效藥物治療，因此，必須高度重視對該病的預防工作，采取綜合性的措施降低其發(fā)生的風險，從而保障養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和公共衛(wèi)生安全。