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    相同提取條件下野生大球蓋菇羊肚菌馬鞍菌多糖含量的比較研究

    2024-04-21 09:04:58李文文努爾買買提韓大勇
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2024年5期
    關(guān)鍵詞:蓋菇馬鞍大球

    李文文, 努爾買買提,韓大勇,石 越

    (1.伊犁師范大學(xué) 微生物資源保護與開發(fā)利用重點實驗室,新疆伊寧 835000;2.伊犁師范大學(xué) 生物與地理科學(xué)學(xué)院,新疆 伊寧 835000)

    1 概述

    1.1 大球蓋菇

    1.1.1 大球蓋菇種屬及外形特征

    大球蓋菇(Stropharia rugoso-annulata)別稱皺環(huán)球蓋菇(Crinkled global mushroom),隸屬真菌界,擔子菌亞門(Basidiom ycotina)、層菌綱(Hymenomycetes)、同擔子菌亞綱(Homobasidiomycetes)傘菌目(Agaricales)、球蓋菇科(Strophariaceae)、球蓋菇屬(stropharia),其子實體單生、叢生或群生,中等至較大,單個菇團可達數(shù)千克。菌蓋近半球形,后扁平,直徑5~45 cm;菌蓋肉質(zhì),濕潤時表面觸感具有黏性。幼嫩子實體剛開始為白色,常有乳頭狀的小突起,隨著子實體長大,成熟菌蓋漸變成紅褐色或暗褐色,老熟后褪為褐色至灰褐色。菌蓋上有纖維狀鱗片,隨著子實體的生長成熟而逐漸消失。菌蓋邊緣內(nèi)卷,常附有菌幕殘片。菌肉肥厚,色白。菌褶直生,排列密集,初為污白色,成熟后變成灰白色,隨菌蓋平展,逐漸變成褐色或紫黑色。菌柄近圓柱形,靠近基部稍膨大,柄長5~20 cm,柄粗0.5~4.0 cm,菌環(huán)以上接近白色,接近光滑,菌環(huán)以下有黃色細條紋。

    大球蓋菇見圖1。

    圖1 大球蓋菇

    1.1.2 生活習(xí)性

    大球蓋菇適應(yīng)能力較強,高低溫都可生長,但是兩者培育出的菌種外形稍有不同,溫度高時生長快,菇蓋較小且薄,產(chǎn)量較低。溫度低時生長慢,菇蓋較厚,菇質(zhì)更高,溫度在25 ℃左右生長環(huán)境較適宜,在子實體生長期間需要光照,以此來沉淀菇身色素,增加菌種色澤,提高品質(zhì)。

    1.1.3 分布地

    大球蓋菇在主要分布在我國新疆、臺灣、香港、四川、陜西、甘肅、云南、吉林、西藏等地。

    1.1.4 藥用價值

    大球蓋菇對人體有較大的好處,子實體中含有大量的優(yōu)質(zhì)蛋白、多糖及其各種礦物質(zhì),這些物質(zhì)經(jīng)過血液流通,可清除人體血液中的膽固醇、降血壓、軟化血管,還可促進消化,增強人體免疫力。

    1.2 羊肚菌

    1.2.1 羊肚菌種屬及外形特征

    羊肚菌(Morchella esculenta)別稱羊肚蘑、編笠菌、羊肚菜,隸屬真菌界,子囊菌門(Ascomycota)、子囊菌亞門(Ascomycotina)、盤菌綱(Discomycete)、盤菌目(Pezizale)、羊肚菌科(Morchella division)、羊肚菌屬(Morchella),其子實體菌蓋接近球形、橢圓形或卵形,可高達10 cm,其頂端鈍圓,菌種表面有類似羊肚狀的凹坑,凹坑深度不定,呈蛋殼色或淡黃褐色,柄近圓柱形,接近白色,中間呈空心,圓筒形。

    羊肚菌見圖2。

    圖2 羊肚菌

    1.2.2 生活習(xí)性

    羊肚菌喜低溫、高濕環(huán)境,在這種環(huán)境下易萌發(fā)子實體,所以野生羊肚菌子實體的生長時間一般在每年3—5 月或8—9 月。有研究表明,羊肚菌的野外生長條件主要取決于上一年11—12 月份的降雨量,而羊肚菌生長的快慢取決于當年3—5 月份3~5 cm表層土壤溫度是否接近11 ℃。因此,羊肚菌的初生期與初生期地區(qū)的溫度、降雨量和降雨時間有很大關(guān)聯(lián)。羊肚菌多生長在土壤濕潤或降雨量多而且容易保濕的環(huán)境中。光線對子實體的形成有一定的促進作用,子實體的生長發(fā)育具有趨光性。足夠的氧氣和通風(fēng)良好的場所是保證羊肚菌正常生長發(fā)育的必要條件。

    1.2.3 分布地

    羊肚菌在我國的分布及其廣泛,北至東北三省,南至廣東、福建、臺灣,東至山東,西至新疆、西藏、寧夏、貴州共28 個省、市、自治區(qū)。

    1.2.4 藥用價值

    羊肚菌含有大量的氨基酸、蛋白質(zhì)、脂類、維生素、碳水化合物及礦物質(zhì),同時羊肚菌還含有可提高免疫力與抗腫瘤作用的多糖,且有促進腸胃蠕動、幫助消化、提神醒腦、補腎壯陽的功效。

    1.3 馬鞍菌

    1.3.1 馬鞍菌種屬及外形特征

    馬鞍菌(Ascomycetes),別稱雞冠子,隸屬真菌界,子囊菌綱(Ascomycetes)、盤菌目(Pezizale)、馬鞍菌科(Saddle bacteria families),其子實體菌蓋呈馬鞍形,寬約2~4 cm,表面呈褐色或者近乎黑色,菇傘表面光滑或呈卷曲狀,傘邊緣與柄分離,柄呈圓柱形,內(nèi)呈空心狀,長4~9 cm。

    馬鞍菌見圖3。

    圖3 馬鞍菌

    1.3.2 生活習(xí)性

    馬鞍菌生長在夏季的4—5 月份,一般叢生,喜炎熱干旱環(huán)境,這種特有的環(huán)境使其肉質(zhì)鮮美、營養(yǎng)豐富。

    1.3.3 分布地

    馬鞍菌生長時分為單生或群生,其主要分布在我國新疆、河北、山西、黑龍江、江蘇、浙江、西藏、陜西、甘肅、青海、四川等地。

    1.3.4 藥用價值

    馬鞍菌內(nèi)含有大量的蛋白質(zhì)、多糖、皂苷及大量礦物質(zhì),這些物質(zhì)進入人體后激活人體內(nèi)抗體,增強免疫力,其中礦物質(zhì)元素與人體內(nèi)自由基發(fā)生反應(yīng),延緩人體衰老,同時馬鞍菌還可調(diào)節(jié)人體內(nèi)分泌,增強人體胰腺功能,可降低糖尿病的發(fā)生率。

    2 試驗過程

    2.1 材料與方法

    2.1.1 試驗材料

    自然曬干子實體大球蓋菇、羊肚菌、馬鞍菌3 種菌種;葡萄糖、濃硫酸、苯酚、石油醚、95%無水乙醇、三氯乙酸、果膠酶。

    2.1.2 儀器設(shè)備

    HH-S6 型數(shù)顯恒溫水浴鍋,江蘇金怡儀器科技有限公司產(chǎn)品;UPR-II-15TNZ 型優(yōu)普系列超純水機,四川優(yōu)普超純科技有限公司產(chǎn)品;RV 8 S096 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,上海愛郎儀器有限公司產(chǎn)品;H1750R 型高速臺式冷凍離心機,湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司產(chǎn)品;DHG-9140A 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,上海齊欣科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;TU-1901 型全波段紫外分光光度計、布氏漏斗,北京譜析通用儀器有限公司產(chǎn)品。

    2.1.3 試驗方法

    取自然曬干的3 種子實體各20 g,研磨成粉末狀,分3 次倒入濾紙疊好的紙包中,上下封口,將濾紙包塞入提取管中,紙包底部盡量與提取管底端接觸,不可高于虹吸管,將石油醚倒入提取瓶中,其量2/3 左右即可,抽提6~8 h,用玻璃棒蘸取提取管中的石油醚至無脂肪即可。提取結(jié)束后將濾紙包用鑷子夾出放入小燒杯中,將小燒杯放入通風(fēng)櫥中通風(fēng),待濾紙包干燥以后,將菌種粉末倒入燒杯中,加果膠酶10 mg,蒸餾水60 mL,于40 ℃條件下靜置2 h 后取出,加入蒸餾水100 mL,用玻璃棒攪勻,于100 ℃沸水中水浴2 h,用布氏漏斗進行第1 次抽提,第1 次抽提結(jié)束后將濾渣回收,加入蒸餾水100 mL,沸水浴1 h,再次抽提,第3 次加入蒸餾水50 mL,沸水浴30 min 再次進行抽提,將3 次濾液合并,將濾液倒入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中進行濃縮,濃縮至原體積的1/3 左右,加入濃縮體積后7%的2 mol/L三氯乙酸溶液,充分振蕩使其混合均勻,將其放入4 ℃環(huán)境中靜置15 h 左右,將上清液用膠頭滴管吸出,溫度4 ℃條件下以轉(zhuǎn)速12 000 r/min 離心10 min,將離心后的上清液倒入燒杯內(nèi),加入3 倍體積的95%的無水乙醇,再次于4 ℃環(huán)境中靜置15 h 左右進行分層,將上層液體清除,下層沉淀于60 ℃烘箱烘干即為菌種多糖。

    2.2 葡萄糖標準溶液的制備

    精確稱量葡萄糖10 mg,加入蒸餾水定容至100 mL,分別取0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8 mL于試管中,加蒸餾水于1 mL,再加入質(zhì)量分數(shù)為6%的苯酚溶液1 mL,硫酸5 mL,靜置10~15 min混合均勻,沸水浴加熱20~25 min,冷卻至室溫,將分光光度計調(diào)至波長490 nm 處測吸光度,并繪制出標準曲線。

    葡萄糖標準曲線見圖4。

    圖4 葡萄糖標準曲線

    2.3 多糖樣品總含量的測定

    精確稱量粗多糖10 mg,加入蒸餾水定容到100 mL,取多糖溶液1 mL,同上2.2 過程所示,于波長490 nm處測吸光度,根據(jù)上述葡萄糖標準曲線計算出樣品總糖含量。

    2.4 多糖提取液多糖含量的測定

    精確稱量3 種菌種各1 g,研磨成粉末狀,同2.1 試驗方法過程所示,靜置分層以后,取上層清液各1 mL,加蒸餾水定容至100 mL,取此溶液1 mL,同2.2 過程所示,于波長490 nm 處測吸光度,根據(jù)上述葡萄糖標準曲線計算出提取液中的糖含量。

    3 結(jié)果與分析

    3.1 葡萄糖標準曲線

    經(jīng)計算葡萄糖標準曲線為Y=8.247 6X+0.050 8,R2=0.999 1。經(jīng)試驗測定,測得大球蓋菇的吸光度為0.311,將吸光度帶入葡萄糖標準曲線得大球蓋菇的葡萄糖質(zhì)量濃度為0.032 mg/mL。

    3.2 換算因子公式

    式中:W1——大球蓋菇菌種粗多糖的質(zhì)量,10 mg;

    C1——粗多糖溶液中葡萄糖質(zhì)量濃度,0.032 mg/mL;

    D——稀釋倍數(shù),100。

    將上述數(shù)據(jù)帶入公式得換算因子F=3.13。

    同上3.1 計算過程得,羊肚菌吸光度為0.276,葡萄糖質(zhì)量濃度為0.027 mg/mL,換算因子為3.7;馬鞍菌吸光度為0.305,葡萄糖質(zhì)量濃度為0.031 mg/mL,換算因子為3.22。

    3.3 多糖含量測定公式

    式中:C2——大球蓋菇多糖提取液中葡萄糖質(zhì)量濃度,0.219 mg/mL(計算過程同3.1);

    D——稀釋倍數(shù),100;

    F——換算因子,3.13;

    W2——大球蓋菇多糖提取液樣品質(zhì)量,1 g。

    經(jīng)計算得大球蓋菇多糖含量為6.7%,羊肚菌多糖含量為8.1%,馬鞍菌多糖含量為7.1%。

    4 結(jié)論與分析

    4.1 結(jié)論

    采用熱水浸提法提取不同菌種多糖,該方法簡單且效率高,不會輕易破壞多糖內(nèi)部結(jié)構(gòu),使得試驗結(jié)論更具有真實性,以3 種不同菌種做比較,測其多糖含量,以蒸餾水作對比,采用苯酚硫酸法測3 種不同菌種的吸光度。由以上結(jié)果分析可得,在同種條件下3 種菌種吸光度不同,即提取的糖含量不同,故多糖總含量不同,羊肚菌多糖含量明顯高于大球蓋菇和馬鞍菌糖含量,其次是馬鞍菌,大球蓋菇糖含量最少,可看出多糖提取液顏色越深,糖含量越高。

    多糖提取液見圖5。

    圖5 多糖提取液

    4.2 分析

    造成此結(jié)果可能與不同菌種生長環(huán)境不同或者生長時間不同,獲得太陽照射時間或者降雨量有差別,從而使糖含量不同,具體原因還需進一步研究。目前,對多糖的研究不斷深入,發(fā)現(xiàn)多糖能提高免疫力、抗癌,其中礦物質(zhì)元素與人體內(nèi)自由基發(fā)生反應(yīng),延緩人體衰老,同時還可調(diào)節(jié)人體內(nèi)分泌、增強人體胰腺功能,可降低糖尿病的發(fā)生率,可將菌種多糖應(yīng)用到日常生活中。通過3 種菌種多糖做對比,可知哪種菌種含糖量最高,營養(yǎng)價值更高,為日后人們進一步研究多糖含量奠定基礎(chǔ)。例如,做成提高免疫力功能性飲料或者提高免疫力口服液或者用于食品等,使大自然的產(chǎn)物發(fā)揮最大的作用。菌種多糖無疑會成為開發(fā)健康產(chǎn)品的最佳原料選擇,市場前景非常廣闊。

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