基于SCF/C-kit 信號(hào)通路探討黃連解毒湯對(duì)腦出血急性期模型大鼠胃損傷的影響

王春燕 蘭雅文 唐 明 高召凱 張 增 劉歡歡 孔曉璇李雯雯 潘岳峰 安朋朋

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，山東濟(jì)南 250013；2.青島市中醫(yī)醫(yī)院，山東青島 266033；3.青島大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，山東青島 266071）

腦出血可歸屬于中醫(yī)學(xué)“出血性中風(fēng)”范疇[1]，是一種后果嚴(yán)重的腦卒中亞型，具有發(fā)病急、病情變化快及高致死率和致殘率的特點(diǎn)，約占所有高死亡率腦卒中的23.4%[2]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，胃損傷是腦出血后較常見的并發(fā)癥，發(fā)生率為1%~5%[3]。腦出血后全身血管收縮，胃部血流減少，胃部細(xì)菌屏障減弱，表現(xiàn)為脘腹脹滿、餐后腹脹、早飽、噯氣、惡心和嘔吐、腹瀉以及便秘，嚴(yán)重時(shí)可出現(xiàn)嘔血、便血等癥狀。研究表明，腦出血急性期胃損傷的發(fā)生甚至加重，嚴(yán)重影響了腦出血的預(yù)后[4]。

對(duì)急性胃損傷病因的研究發(fā)現(xiàn)，Cajal間質(zhì)細(xì)胞（interstitial cells of Cajal，ICC）可能對(duì)胃部正常收縮具有重要影響。ICC是分布在胃部平滑肌細(xì)胞與神經(jīng)細(xì)胞之間的一類間質(zhì)細(xì)胞，其表面可以表達(dá)酪氨酸激酶受體（C-kit），而作為C-kit受體自然配體的干細(xì)胞因子（SCF），與C-kit相結(jié)合可以激活SCF/C-kit信號(hào)通路，且該通路與ICC的發(fā)育有重要關(guān)聯(lián)。當(dāng)SCF或C-kit發(fā)生突變或其信號(hào)通路受損，會(huì)影響ICC發(fā)育、分化，使ICC數(shù)目減少。

風(fēng)火痰瘀虛毒是中風(fēng)的致病因素，自王永炎院士提出“毒損腦絡(luò)”的理論后，營衛(wèi)失和、毒損腦絡(luò)已成為出血性中風(fēng)的重要病機(jī)，清熱解毒法治療出血性中風(fēng)已越來越被臨床所重視。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，大鼠腦出血急性期可引發(fā)胃黏膜損傷，其機(jī)制可能與胃ICC的結(jié)構(gòu)變化和數(shù)目減少有關(guān)，而黃連解毒湯可通過調(diào)節(jié)大鼠胃動(dòng)素（MTL）及血管活性腸肽（VIP）來改善胃的敏感性及胃的運(yùn)動(dòng)功能紊亂，從而保護(hù)胃黏膜[5-6]?；谇捌谘芯浚狙芯繉腟CF/C-kit信號(hào)通路著手，制作腦出血急性期大鼠模型，造模成功后即給予黃連解毒湯，觀察給藥后24 h、4 d、7 d三個(gè)時(shí)間點(diǎn)大鼠胃損傷及胃組織SCF、C-kit mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量變化情況。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康SD雄性10周齡大鼠120只，體質(zhì)量（200±20）g，由山東大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證號(hào)：0009256。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)青島市中醫(yī)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過（倫理審批號(hào)：2018HC11LQ019）

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 黃連解毒湯藥物組成：黃連9 g，黃芩6 g，黃柏6 g，梔子9 g。使用華潤三九醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)的同批次顆粒劑，6 g生藥可換算0.5 g顆粒劑，使用時(shí)用蒸餾水配制為27 mg/mL懸濁液。枸櫞酸莫沙必利片，5 mg/片，國藥準(zhǔn)字H19990317，山東臨沂魯南貝特制藥有限公司生產(chǎn)，使用時(shí)用蒸餾水配制為0.09 mg/mL懸濁液。

1.3 主要試劑 無水乙醇（批號(hào)：10009218）、二甲苯（批號(hào)：X112051），國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；曙紅Y（醇溶，批號(hào)：A600190），生工生物工程（上海）股份有限公司；蘇木精（批號(hào)：H8070），北京索萊寶科技有限公司；BCA蛋白濃度測定試劑盒（批號(hào)：WLA004）、SDS-PAGE凝膠快速制備試劑盒（批號(hào)：WLA013）、Western洗滌液（批號(hào)WLA025）、ECL發(fā)光液（批號(hào)：WLA003），沈陽萬類生物科技有限公司。

1.4 主要儀器 RM2235石蠟切片機(jī)（德國Leica公司），QH01-9030A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（中國上海精宏公司），BX53顯微鏡（日本OLYMPUS公司），DP73顯微鏡拍照系統(tǒng)（日本OLYMPUS公司），NW10LVF超純水系統(tǒng)（香港Heal Force公司），H-2050R超速冷凍離心機(jī)（湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司），Exicycler 96熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）儀（韓國BIONEER公司），DYY-7C電泳儀（北京六一生物科技有限公司）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 造模 取若干大鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d，常規(guī)消毒麻醉，呈仰臥位固定于立體定向儀，消毒備皮，縱行切口，暴露并分離股動(dòng)脈，取股動(dòng)脈血50 μL。根據(jù)大腦立體定位圖譜調(diào)整大鼠體位，使前囟和后囟基本在同一平面上；于頭部正中行縱行切口，于前囟前0.2 mm，中線左旁3 mm處，用鉆頭鉆孔，骨孔大小約1 mm；緩慢注入自體血15 μL（注射速度約10 μL/min），靜置7 min，以同樣速率繼續(xù)注入自體血35 μL；留針20 min，緩慢退針，骨蠟封閉顱骨孔，縫合皮膚。術(shù)后采用動(dòng)物行為學(xué)（Longa神經(jīng)功能缺損）評(píng)分評(píng)價(jià)模型大鼠神經(jīng)功能，評(píng)分為1～3分說明造模成功[7]。取24只大鼠行假手術(shù)，僅進(jìn)針不注入。

2.2 分組 將造模成功的大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為模型組、黃連解毒湯組、莫沙必利組，每組24只，行假手術(shù)的24只為假手術(shù)組，另取24只正常大鼠作為正常組。

2.3 給藥 參照徐叔云教授的《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》[8]進(jìn)行人與動(dòng)物等效劑量換算大鼠給藥劑量，本研究黃連解毒湯、枸櫞酸莫沙必利用量均根據(jù)人正常使用劑量換算動(dòng)物等效劑量，且因本研究所用大鼠體質(zhì)量基本一致，故使用固定給藥劑量。確認(rèn)造模成功后，黃連解毒湯組大鼠每日給予黃連解毒湯54 mg/d灌胃（每次灌胃給予1 mL濃度為27 mg/mL的黃連解毒湯顆粒劑懸濁液，每日2次），莫沙必利組大鼠每日給予枸櫞酸莫沙必利0.27 mg/d灌胃（每次灌胃給予1 mL濃度為0.09 mg/mL的枸櫞酸莫沙必利懸濁液，每日3次），正常組、假手術(shù)組和模型組均給予生理鹽水灌胃（每次1 mL，每日2次）。各組均連續(xù)灌胃7 d。

2.4 取材 各組分別于給藥24 h、4 d、7 d后，隨機(jī)各取8只大鼠，脫頸法處死，規(guī)定時(shí)間內(nèi)切除全胃，沿胃大彎側(cè)剪開，流水清洗胃內(nèi)容物，肉眼觀察胃的大體觀、有無出血點(diǎn)及潰瘍。隨即取各組大鼠胃自賁門至幽門寬約0.5 cm的條形組織，放入10%甲醛溶液中固定24 h，蒸餾水沖洗24 h，脫水、透明、浸蠟、包埋，制成3 μm切片，置于烤片機(jī)內(nèi)烤30 min后，備用于蘇木精-伊紅（HE）染色使用。取各組大鼠胃竇距幽門0.5 cm的條形組織收集于凍存管中，液氮速凍后，保存于-80 ℃冰箱中，備用于實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative Real-Time PCR，RT-PCR）法、蛋白免疫印跡（Western blot）法的檢測。

2.5 觀察指標(biāo)

2.5.1 HE染色法觀察大鼠胃組織病理形態(tài) 取各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃組織樣本，包埋切片，將展開的切片移到載玻片上，于60 ℃溫箱中放置2 h，烘干，常規(guī)脫蠟至水，蘇木素染色5 min，鹽酸酒精分化，自來水返藍(lán)，伊紅染色3 min，依次浸入75%、85%、95%的乙醇中脫水各2 min，用二甲苯及無水乙醇透明，滴加中性樹膠封片，晾干。通過光鏡觀察胃黏膜的組織形態(tài)及病理變化。

2.5.2 胃黏膜損傷病理評(píng)分 按照文獻(xiàn)[9]中的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃黏膜損傷程度進(jìn)行評(píng)分。

2.5.3 RT-PCR法檢測大鼠胃組織SCF、C-kit mRNA表達(dá) 取各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃組織樣本，加入1 mL TRIpure裂解液，混勻后室溫靜置5 min；再加入200 μL氯仿，靜置3 min；4 ℃、10 000×g離心10 min，將得到的水相轉(zhuǎn)移到新的離心管中；加入等體積異丙醇，置于-20 ℃條件下過夜；15 h后再次離心，棄上清；加入1 mL 75%乙醇，4 ℃、3400×g離心3 min，棄上清；室溫靜置5～6 min使殘余乙醇揮發(fā)；加30 μL RNase-free ddH2O室溫靜置2 min，提取總RNA，檢測RNA的濃度，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，得到對(duì)應(yīng)的cDNA，置于-20 ℃保存，進(jìn)行熒光定量分析。本實(shí)驗(yàn)使用2-△△Ct方法分析樣本mRNA相對(duì)表達(dá)量。引物序列見表1。

表1 各引物序列

2.5.4 Western blot法檢測大鼠胃組織SCF、C-kit蛋白表達(dá) 取各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃組織樣本，加入相應(yīng)裂解液，使用低溫冷凍離心機(jī)，4 ℃、離心半徑12 cm、12 000 r/min，離心10 min，分離上清得到蛋白質(zhì)抽提物，配置BCA工作液，酶標(biāo)儀測定蛋白濃度，制備蛋白上樣液，后行十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳，轉(zhuǎn)印至PVDF膜上，5%脫脂奶粉室溫?fù)u床封閉2 h，加入TRPV1 一抗（稀釋度為1∶500），4 ℃孵育過夜。次日，用Western洗滌液（TBST）對(duì)樣本進(jìn)行洗膜10 min×3 次，用山羊抗兔的二抗（稀釋度為1∶2000）室溫孵育2 h，再次用TBST洗膜10 min×3 次，最 后 用ECL發(fā)光液使其發(fā)光、顯影。使用Quantity One軟件對(duì)樣本數(shù)據(jù)進(jìn)行灰度等相關(guān)分析，在進(jìn)行目的蛋白的相對(duì)含量測定時(shí)，使用同一目的蛋白與內(nèi)參照的灰度比值來表示其相對(duì)表達(dá)量。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 27.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。本研究所有計(jì)量資料均符合正態(tài)分布、方差齊性，用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，2 組數(shù)據(jù)比較用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組數(shù)據(jù)比較用單因素方差分析LSD檢驗(yàn)。以P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 各組大鼠胃組織病理形態(tài)比較 正常組及假手術(shù)組大鼠胃組織均未見明顯炎性細(xì)胞浸潤及水腫，黏膜層、黏膜下層、肌層、漿膜層均正常。假手術(shù)組大鼠偶可見黏膜下層、黏膜層充血。模型組大鼠胃組織可見大量的炎性細(xì)胞浸潤，黏膜血管可見顯著充血、出血、水腫，大量紅細(xì)胞聚集，上皮細(xì)胞大面積脫落，腺體結(jié)構(gòu)被破壞，層次紊亂，細(xì)胞組織間隙增大，多處缺損，出現(xiàn)潰瘍性病變。黃連解毒湯組、莫沙必利組大鼠胃黏膜層炎性細(xì)胞數(shù)目較模型組明顯減少，偶見血管擴(kuò)張，黏膜水腫不明顯，黏膜層連續(xù)完整，胃腺排列、腺管構(gòu)造均正常，未見黏膜潰瘍。見圖1、圖2、圖3。

圖1 各組大鼠給藥24 h胃組織病理形態(tài)（HE染色，×200）

圖2 各組大鼠給藥4 d胃組織病理形態(tài)（HE染色，×200）

圖3 各組大鼠給藥7 d胃組織病理形態(tài)（HE染色，×200）

3.2 各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃黏膜損傷病理評(píng)分比較 模型組大鼠各觀察時(shí)點(diǎn)胃黏膜損傷病理評(píng)分均明顯高于同期正常組、假手術(shù)組（P＜0.01），其中給藥4 d時(shí)評(píng)分明顯高于給藥24 h時(shí)（P＜0.01），給藥7 d時(shí)評(píng)分明顯低于給藥4 d時(shí)（P＜0.01）。各給藥組各觀察時(shí)點(diǎn)胃黏膜損傷病理評(píng)分均明顯低于同期模型組（P＜0.01），給藥4 d時(shí)評(píng)分均明顯高于同組給藥24 h時(shí)（P＜0.01），給藥7 d時(shí)評(píng)分均明顯低于同組給藥24 h、4 d時(shí)（P＜0.05，P＜0.01）；黃連解毒湯組大鼠各觀察時(shí)點(diǎn)胃黏膜病理評(píng)分均明顯低于同期莫沙必利組（P＜0.01）。見表2。

表2 各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃黏膜損傷病理評(píng)分比較（） 單位：分

表2 各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃黏膜損傷病理評(píng)分比較（） 單位：分

注： 與同期正常組比較，**P＜0.01；與同期假手術(shù)組比較，##P＜0.01；與同期模型組比較，△△P＜0.01；與同期莫沙必利組比較，★★P＜0.01；與本組給藥24 h比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與本組給藥4 d比較，◆◆P＜0.01。

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3.3 各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃組織SCF、C-kit mRNA表達(dá)比較 模型組大鼠各觀察時(shí)點(diǎn)胃組織SCF、C-kit mRNA表達(dá)均明顯低于同期正常組、假手術(shù)組（P＜0.01），其中給藥4 d時(shí)上述指標(biāo)表達(dá)明顯低于給藥24 h時(shí)（P＜0.01），給藥7 d時(shí)上述指標(biāo)表達(dá)明顯高于給藥4 d時(shí)（P＜0.01）。各給藥組大鼠各觀察時(shí)點(diǎn)上述指標(biāo)表達(dá)均明顯高于模型組（P＜0.01）；各給藥組組內(nèi)比較，給藥4 d時(shí)各指標(biāo)表達(dá)最低（P＜0.01），而給藥7 d時(shí)各指標(biāo)表達(dá)最高（P＜0.01）。黃連解毒湯組大鼠各觀察時(shí)點(diǎn)上述指標(biāo)表達(dá)均明顯高于莫沙必利組（P＜0.01）。見表3。

表3 各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃組織SCF、C-kit mRNA相對(duì)表達(dá)量比較（）

表3 各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃組織SCF、C-kit mRNA相對(duì)表達(dá)量比較（）

注： 與同期正常組比較，**P＜0.01；與同期假手術(shù)組比較，##P＜0.01；與同期模型組比較，△△P＜0.01；與同期莫沙必利組比較，★★P＜0.01；與本組給藥24 h比較，▲▲P＜0.01；與本組給藥4 d比較，◆◆P＜0.01。

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3.4 各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃組織SCF、C-kit蛋白表達(dá)比較 模型組大鼠各觀察時(shí)點(diǎn)胃組織SCF、C-kit蛋白表達(dá)均明顯低于同期正常組、假手術(shù)組（P＜0.01），其中給藥4 d時(shí)上述指標(biāo)表達(dá)明顯低于給藥24 h時(shí)（P＜0.01），給藥7 d時(shí)上述指標(biāo)表達(dá)明顯高于給藥4 d時(shí)（P＜0.01）。各給藥組大鼠各觀察時(shí)點(diǎn)上述指標(biāo)表達(dá)均明顯高于模型組（P＜0.01）；各給藥組組內(nèi)比較，給藥4 d時(shí)各指標(biāo)表達(dá)最低（P＜0.01），而給藥7 d時(shí)各指標(biāo)表達(dá)最高（P＜0.05，P＜0.01）。黃連解毒湯組大鼠各觀察時(shí)點(diǎn)上述指標(biāo)表達(dá)均明顯高于莫沙必利組（P＜0.01）。見表4、圖4、圖5、圖6。

圖4 各組大鼠給藥24 h SCF、C-kit蛋白電泳圖

圖5 各組大鼠給藥4 d SCF、C-kit蛋白電泳圖

圖6 各組大鼠給藥7 d SCF、C-kit蛋白電泳圖

表4 各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃組織SCF、C-Kit蛋白相對(duì)表達(dá)量比較（）

表4 各組各觀察時(shí)點(diǎn)大鼠胃組織SCF、C-Kit蛋白相對(duì)表達(dá)量比較（）

注： 與同期正常組比較，**P＜0.01；與同期假手術(shù)組比較，##P＜0.01；與同期模型組比較，△△P＜0.01；與同期莫沙必利組比較，★★P＜0.01；與本組給藥24 h比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與本組給藥4 d比較，◆◆P＜0.01。

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4 討論

中醫(yī)認(rèn)為出血性中風(fēng)病因病機(jī)復(fù)雜，營衛(wèi)失和、毒損腦絡(luò)是其重要病機(jī)。余學(xué)杰等[10]認(rèn)為火毒貫穿于中風(fēng)急性期，火熱毒邪猛烈，容易加重臟腑的損害，因此以清熱解毒為本病的治療原則已逐步被臨床認(rèn)可。黃連解毒湯作為清熱解毒的代表方，始載于晉代葛洪所著的《肘后備急方》，后在王燾的《外臺(tái)秘要》中被命名為黃連解毒湯，主治三焦熱盛及各種實(shí)熱火毒之證。方中以大苦大寒之黃連為君，瀉中焦火熱；輔以黃芩瀉上焦火熱，黃柏瀉下焦火熱，梔子通瀉三焦火熱從膀胱而出，使三焦熱邪得清。諸藥合用，共奏清熱解毒之功。有研究表明，黃連解毒湯對(duì)腦出血急性期或者胃黏膜損傷的患者均有一定的治療效果。如王革生等[11]研究表明，中風(fēng)發(fā)生后，急性腦出血的患者發(fā)生了嚴(yán)重的炎性反應(yīng)，而以黃連解毒湯為代表的清熱解毒法對(duì)急性腦出血的火毒證具有明顯的臨床改善作用。又如張建平[12]運(yùn)用黃連解毒湯治療急性腦血管病患者50例，其中49例患者未發(fā)生急性腦血管病常見的應(yīng)激性潰瘍，從而猜想黃連解毒湯有保護(hù)胃黏膜的作用。

現(xiàn)代研究表明，ICC是消化道縱行肌和環(huán)形肌之間的一種特殊細(xì)胞，可產(chǎn)生并且傳播慢波，控制胃平滑肌的運(yùn)動(dòng)；C-kit是ICC的特異性標(biāo)志物，每1個(gè)C-kit單體與1個(gè)SCF分子結(jié)合，SCF二聚化會(huì)觸發(fā)C-kit單體的結(jié)構(gòu)改變，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)酪氨酸自動(dòng)磷酸化，而SCF作用的發(fā)揮依賴于特定的受體與C-kit形成配基受體二聚體復(fù)合物，啟動(dòng)SCF/C-kit信號(hào)通路，對(duì)ICC的發(fā)育、分化及表型維持至關(guān)重要[13]。正常情況下，中樞神經(jīng)系統(tǒng)、胃神經(jīng)系統(tǒng)及胃激素對(duì)胃部肌層組織起控制、調(diào)節(jié)作用。腦出血急性期患者處于應(yīng)激狀態(tài)下，中樞神經(jīng)系統(tǒng)、胃神經(jīng)系統(tǒng)被激活，C-kit及SCF表達(dá)發(fā)生異常，SCF/C-kit信號(hào)通路改變，導(dǎo)致胃Cajal間質(zhì)細(xì)胞的數(shù)目減少，結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，胃電信號(hào)傳遞受阻，胃調(diào)節(jié)功能紊亂，胃黏膜受損，引起胃功能障礙[14]。因此，SCF/C-kit信號(hào)通路可能是腦出血急性期胃損傷發(fā)生的關(guān)鍵因素。

本研究結(jié)果顯示，模型組大鼠的胃黏膜損傷病理評(píng)分明顯高于正常組及假手術(shù)組，且不同觀察時(shí)點(diǎn)評(píng)分差異較大，由此可以猜想在急性腦出血發(fā)生后24 h胃黏膜損傷就已經(jīng)出現(xiàn)，并且呈進(jìn)行性加重，在第4日時(shí)達(dá)到高峰，到第7日胃黏膜損傷程度減輕，這與臨床上腦出血急性期出現(xiàn)顱內(nèi)血腫的高峰的時(shí)間一致[15-16]。黃連解毒湯組及莫沙必利組大鼠給藥24 h、4 d、7 d時(shí)胃黏膜病理損傷評(píng)分均明顯低于模型組，且在給藥7 d時(shí)，2組評(píng)分均明顯低于本組給藥4 d時(shí)，提示黃連解毒湯與枸櫞酸莫沙必利對(duì)腦出血急性期模型大鼠的胃黏膜均能起到一定的保護(hù)作用。模型組大鼠胃組織SCF、C-kit mRNA及蛋白表達(dá)均明顯低于正常組、假手術(shù)組，說明腦出血急性期繼發(fā)胃損傷可能是由于在應(yīng)激狀態(tài)下胃組織SCF、C-kit表達(dá)下降，SCF/C-kit信號(hào)通路發(fā)生異常改變所致。黃連解毒湯組及莫沙必利組大鼠各觀察時(shí)點(diǎn)SCF、C-kit mRNA及蛋白表達(dá)均明顯高于模型組，其中黃連解毒湯組上述指標(biāo)表達(dá)均明顯高于莫沙必利組，說明黃連解毒湯及枸櫞酸莫沙必利均可通過增加胃組織SCF、C-kit mRNA及蛋白的表達(dá)量，啟動(dòng)SCF/C-kit信號(hào)通路，促進(jìn)ICC的分化和發(fā)育，進(jìn)一步調(diào)節(jié)胃神經(jīng)信號(hào)的傳遞，從而保護(hù)胃黏膜，減輕胃損傷，且黃連解毒湯效果更佳。本研究也發(fā)現(xiàn)，黃連解毒湯、枸櫞酸莫沙必利連續(xù)給藥7 d時(shí)，大鼠胃黏膜病理評(píng)分降至最低水平，胃組織SCF、C-kit mRNA及蛋白表達(dá)水平達(dá)到最高，但仍低于假手術(shù)組及正常組，說明藥物雖然可以通過上調(diào)SCF/C-kit信號(hào)通路，改善胃損傷，但在7 d內(nèi)仍無法恢復(fù)至正常水平。

綜上所述，黃連解毒湯對(duì)腦出血急性期繼發(fā)胃損傷有明確的治療作用，其可能的作用機(jī)制為調(diào)控SCF/C-kit信號(hào)通路，增加SCF、C-kit mRNA及蛋白的表達(dá)。但由于本研究為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，樣本較少，觀察時(shí)間較短，下一步課題組擬加大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)樣本量，酌情增加療程，動(dòng)態(tài)觀察黃連解毒湯不同劑量對(duì)腦出血急性期繼發(fā)胃損傷大鼠SCF/C-kit信號(hào)通路調(diào)控的差異性，同時(shí)課題組也擬進(jìn)一步實(shí)施臨床研究，觀察不同劑量黃連解毒湯對(duì)腦出血急性期繼發(fā)胃損傷患者的臨床療效。