古浪縣布魯氏菌病的流行病學(xué)調(diào)查與防控

徐錦鳳，楊 琨，張開禮，袁麗晶，魏潤明

（武威職業(yè)學(xué)院，甘肅 武威 733000）

布魯氏菌病是近年頻發(fā)的人獸共患傳染病，由布魯氏菌引起在羊群中發(fā)病率較高，家畜感染后會嚴(yán)重影響動物的生產(chǎn)性能和繁殖性能，如公畜睪丸炎和附睪炎、母畜出現(xiàn)流產(chǎn)和不孕。同時布魯氏菌還可以感染人，威脅人類的健康。人感染后會出現(xiàn)波狀熱、乏力、關(guān)節(jié)疼等癥狀，且容易遷延至多個臟器系統(tǒng)成為慢性虛弱性疾病。隨著生活水平的提高，牛、羊等家畜流通廣且數(shù)量大，養(yǎng)殖人員對布魯氏菌病認(rèn)識不足，養(yǎng)殖設(shè)備生物安全設(shè)施參差不齊，以及未及時接種疫苗等，使得布魯氏菌病的發(fā)病率呈上升趨勢，給防治工作造成很大困難。因此，家畜布魯氏菌病的預(yù)防具有重要作用，為將布魯氏菌病的擴(kuò)散降到最低水平，新型高效的布魯氏菌病疫苗的開發(fā)迫在眉睫。

1 材料與方法

1.1 樣品來源 對古浪縣5 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)集中養(yǎng)殖區(qū)和散養(yǎng)區(qū)域開展布病知識問卷及羊布病流行病學(xué)調(diào)查,共采集羊血清樣品100 份。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 布魯氏菌病虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)抗原(中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所)；布魯氏菌膠體金試紙條檢測卡（維德維康），標(biāo)準(zhǔn)陰性、陽性血清(中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 流行病學(xué)調(diào)查 通過咨詢古浪縣畜牧局技術(shù)人員，以羊養(yǎng)殖規(guī)模大、養(yǎng)殖較集中的鄉(xiāng)鎮(zhèn)為主要單位，選擇了5 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，通過詢問、發(fā)放調(diào)查問卷、現(xiàn)場查看等方式進(jìn)行調(diào)查，發(fā)放調(diào)查問卷250份。根據(jù)問卷反饋的信息，深入養(yǎng)殖場，對養(yǎng)殖場負(fù)責(zé)人、飼養(yǎng)員及散養(yǎng)農(nóng)戶進(jìn)行詢問，對羊和人患布病的癥狀及羊個體檢查、疫苗使用情況和流通情況等進(jìn)行全面調(diào)查研究。本次調(diào)查對小型規(guī)?；B(yǎng)殖場及散養(yǎng)戶進(jìn)行隨機(jī)抽樣檢查，確定的抽樣調(diào)查對象完全可以代表該縣區(qū)羊養(yǎng)殖的真實(shí)現(xiàn)狀。

1.3.2 血清學(xué)評價 （1）虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn) 根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 18646-2002《動物布魯氏菌病診斷技術(shù)》對所采集的羊血清進(jìn)行布魯氏菌病的血清學(xué)檢查。在玻璃板上標(biāo)記后用50 μL 移液器滴加虎紅抗原30 μL，再滴加被檢血清30 μL，用移液吸頭攪動使血清和抗原混勻，5 min 后觀察凝集情況，同時設(shè)定陰陽性對照。在對照結(jié)果成立的情況下，判定被檢血清結(jié)果。判定方法如下：在5 min內(nèi)進(jìn)行結(jié)果判定,出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判為陽性(+),無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性(-)。

（2）膠體金試紙卡檢測試驗(yàn) 用移液器移取30 μL 分離的血清于膠體金檢測稀釋液中，混勻后滴100 μL 于布魯氏菌膠體金試紙條檢測卡滴液孔。靜置1～2 min，1 min 內(nèi)出現(xiàn)兩條線判定為陽性（+），一條線判定為陰性（-）。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 調(diào)查結(jié)果 走訪共計5 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，調(diào)查發(fā)現(xiàn)，定寧鎮(zhèn)、永豐灘鎮(zhèn)、黃花灘鎮(zhèn)及土門鎮(zhèn)四個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的養(yǎng)殖人員對布病相關(guān)知識及羊患布病的癥狀基本不了解，超過50%以上（見表1）。西靖鎮(zhèn)養(yǎng)殖場有過多次羊患布病導(dǎo)致流產(chǎn)的病例，當(dāng)?shù)孬F醫(yī)站對養(yǎng)殖場進(jìn)行消毒殺菌處理及疫苗注射；對養(yǎng)殖戶進(jìn)行過相關(guān)知識培訓(xùn)。因此，該調(diào)查結(jié)果也為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中對西靖鎮(zhèn)養(yǎng)殖場的羊進(jìn)行抽樣采血及檢測，對該區(qū)域羊布病的發(fā)生情況工作進(jìn)一步調(diào)查。

表1 布魯氏菌相關(guān)知識調(diào)查統(tǒng)計表

2.2 血清學(xué)評價

2.2.1 虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn) 被檢血清在3～5 min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判為陽性（+）；無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性(-)，如圖1 中5、6、7 號樣品結(jié)果所示。

圖1 虎紅平板檢測結(jié)果

通過RBPT 初查檢測5 個養(yǎng)殖區(qū)布魯氏菌病的流行情況。結(jié)果表明該區(qū)5 個養(yǎng)殖區(qū)中C 和E 村羊體內(nèi)存在布魯氏菌抗體，陽性檢出率分別為42.8%和52.9%。其余3 個養(yǎng)殖區(qū)均未檢出陽性（見表2）。

表2 羊布魯氏菌病血清學(xué)檢測情況統(tǒng)計表

2.2.2 膠體金試紙條檢測實(shí)驗(yàn) 用移液器移取30 μL 分離的血清于膠體金檢測稀釋液中，混勻后滴100 μL 于布魯氏菌膠體金試紙條檢測卡滴液孔。靜置1～2 min，1 min 內(nèi)出現(xiàn)兩條線判定為陽性（+），一條線判定為陰性（-）。如圖2 結(jié)果所示。

圖2 膠體金試紙卡檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果

通過膠體金檢測卡檢測5 個養(yǎng)殖區(qū)布魯氏菌病的流行情況。結(jié)果表明該區(qū)5 個養(yǎng)殖區(qū)中C 和E村羊體內(nèi)存在布魯氏菌抗體,陽性檢出率分別為42.8%和52.9%。其余3 個養(yǎng)殖區(qū)均未檢出陽性。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果與RBPT 實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致（見表3）。

表3 羊布魯氏菌病血清學(xué)檢測情況統(tǒng)計表

3 討論

3.1 養(yǎng)羊戶養(yǎng)殖觀念落后，生物安全意識缺乏 本研究通過調(diào)查問卷及走訪的形式對古浪縣5個鄉(xiāng)鎮(zhèn)展開調(diào)查，發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖戶主要以小規(guī)模散養(yǎng)戶居多，且對布病防控知識不甚了解，沒有自我防護(hù)能力。被調(diào)查者基本為農(nóng)民養(yǎng)殖戶，文化水平低，雖然大部分人聽說過布病，但多數(shù)不了解布病的傳播途徑、如何預(yù)防等知識。調(diào)查發(fā)現(xiàn)古浪縣有過羊感染布病流產(chǎn)的先例，養(yǎng)殖戶在畜牧養(yǎng)殖技術(shù)員的指導(dǎo)下進(jìn)行了隔離防護(hù)，并注射了布病疫苗，但防疫措施仍不完善。

3.2 古浪縣羊布病感染率低 本研究利用RBPT方法和膠體金試紙卡檢測方法,對古浪5 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的羊群布魯氏菌病進(jìn)行了較為系統(tǒng)的血清學(xué)調(diào)查。從這次調(diào)查結(jié)果看，羊布病血清學(xué)檢測雖有陽性病例，但初步判定為疫苗免疫后產(chǎn)生的抗體。目前尚無法明確判斷陽性血清病例中是否存在布魯氏菌感染，有待進(jìn)一步觀察。在本次調(diào)查中，未免疫疫苗區(qū)域的羊血清學(xué)檢測結(jié)果均為陰性。表明該區(qū)域布魯氏菌感染率較低。

3.3 防控措施 （1）加大布病危害的宣傳 在此次調(diào)查過程中發(fā)現(xiàn)，大部分養(yǎng)殖戶對布病一無所知，防范意識不強(qiáng)，在養(yǎng)殖過程中很少采取防護(hù)消毒措施。建議今后對羊養(yǎng)殖戶開展布病預(yù)防知識培訓(xùn)及宣傳普及工作。重點(diǎn)對散養(yǎng)農(nóng)戶、販運(yùn)商販進(jìn)行宣傳培訓(xùn)，提高從業(yè)人員生物安全意識。只有廣大群眾都認(rèn)識到布病的危害，自覺參與布病防治，布病才能真正得到控制。

（2）加強(qiáng)牲畜流通監(jiān)管 政府部門應(yīng)嚴(yán)格把關(guān)，嚴(yán)禁販運(yùn)人員從布病陽性地區(qū)調(diào)運(yùn)羊，同時對外地引進(jìn)的羊嚴(yán)格進(jìn)行布病檢測，確保無感染后方可混群飼養(yǎng)。

（3）加大經(jīng)費(fèi)投入 由于養(yǎng)殖戶大多為農(nóng)戶散養(yǎng)，無過多資金來保證養(yǎng)殖過程中的防控投入。應(yīng)提倡養(yǎng)殖戶加強(qiáng)資金和人力投入，保證布病的檢測、免疫和凈化等工作能夠有效開展。

（4）密切部門協(xié)作 布病防控工作涉及面比較廣、執(zhí)行難度高、工作量大，須由衛(wèi)生與畜牧等多部門密切配合與協(xié)作，方能將布病危害降到最低。

4 結(jié)論

本研究調(diào)查分析了古浪縣5 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的流行情況，并通過布魯氏菌虎紅平板凝集試驗(yàn)和膠體金試紙卡檢測實(shí)驗(yàn)對隨機(jī)采集的100 份羊血清進(jìn)行血清學(xué)檢測，發(fā)現(xiàn)3 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均為陰性，未感染布病，2個鄉(xiāng)鎮(zhèn)血清學(xué)陽性率分別為42.8%和52.9%，為疫苗免疫產(chǎn)生的抗體，有待進(jìn)一步跟蹤檢測。雖研究結(jié)果顯示古浪縣地區(qū)羊布病感染率低，但仍需加大布病危害的宣傳,加強(qiáng)牲畜流通監(jiān)管，加大經(jīng)費(fèi)投入，多部門密切協(xié)作，加強(qiáng)布魯氏菌病防控措施，方能將布病危害降到最低。