中醫(yī)藥調(diào)控肝臟疾病Th17/Treg免疫失衡的研究進(jìn)展

楊 文,俞 淵,龐澆安,劉春麗,肖麗君,滕金豪,羅艷萍

(1. 廣西中醫(yī)藥大學(xué),廣西 南寧 530200;2. 廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,廣西 南寧 530012)

輔助性T細(xì)胞17(Helper T cells17, Th17)和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(T regulatory cell, Treg)是同源于CD4+T細(xì)胞分化的不同免疫細(xì)胞亞型,兩者在生理狀態(tài)下發(fā)揮促炎和抑炎兩種相反的作用,維持著機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)。病理狀態(tài)下,Th17分化增多而Treg增殖減少,這種免疫失衡加強(qiáng)了機(jī)體免疫應(yīng)答,造成了持續(xù)性的炎癥狀態(tài)和肝臟細(xì)胞損傷。目前已證實(shí),Th17/Treg平衡在肝臟疾病的產(chǎn)生、進(jìn)展和預(yù)后中都起著重要的調(diào)節(jié)作用[10-14]。中醫(yī)藥治療具有多靶點(diǎn)、個(gè)性化、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)。近年來(lái),大量臨床及實(shí)驗(yàn)研究證明,中醫(yī)藥可調(diào)整機(jī)體免疫環(huán)境中Th17/Treg細(xì)胞失衡,在防治肝臟疾病方面發(fā)揮有效作用?；诖?本文從單體中藥、中藥有效成分、中藥復(fù)方調(diào)整Th17/Treg細(xì)胞失衡防治肝臟疾病的角度進(jìn)行綜述,以期為中醫(yī)藥治療肝臟疾病提供更新的思路。

1 Th17/Treg概述

Th17細(xì)胞是特異性表達(dá)白細(xì)胞介素-17(IL-17,由IL17A編碼)和轉(zhuǎn)錄因子維甲酸相關(guān)孤核受體γt(RORγt,由RORC編碼)的一個(gè)促炎性T細(xì)胞亞群[15]。在白細(xì)胞介素(IL)-6與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)的共同誘導(dǎo)下,初始CD4+T細(xì)胞中的信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)被酪氨酸激酶2 ( JAK2 ) 磷酸化,促進(jìn)下游靶基因 RORC和IL-17A的表達(dá),介導(dǎo)TH17細(xì)胞的分化[16]。RORγt作為T(mén)h17細(xì)胞特征性表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子,可以調(diào)控Th17細(xì)胞分泌促炎介質(zhì)。成熟的Th17細(xì)胞可分泌IL-17、IL-21、IL-22、IL-23及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等多種細(xì)胞因子參與免疫反應(yīng),造成機(jī)體炎癥損傷[17-18]。IL-17可以迅速募集中性粒細(xì)胞到肝臟,促進(jìn)肝細(xì)胞損傷和巨噬細(xì)胞活化,參與肝臟病變中炎癥、纖維化、肝脂肪變性等疾病進(jìn)程[19]。

Treg細(xì)胞的來(lái)源有胸腺和外周分化兩種途徑,在免疫監(jiān)視、防止自身免疫性疾病和限制組織炎癥方面發(fā)揮重要作用。叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子p3(Foxp3)在T細(xì)胞抗原受體(TCR)依賴(lài)性識(shí)別主要組織相容復(fù)合體-Ⅱ(MHC-Ⅱ)配體以及接收IL-2、IL-15、IL-7觸發(fā)的細(xì)胞因子信號(hào)下特異性表達(dá),促進(jìn)Treg細(xì)胞發(fā)育分化[20-21]。Foxp3是Treg細(xì)胞分化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,在缺乏功能性Foxp3的情況下,雖然Treg細(xì)胞在數(shù)量和表型上分化正常,但缺乏調(diào)節(jié)功能且不能抑制自體效應(yīng)T細(xì)胞反應(yīng)[22]。Treg細(xì)胞分泌細(xì)胞因子TGF-β、IL-10。反之,TGF-β又可以和下游SMAD2/3轉(zhuǎn)錄效應(yīng)因子結(jié)合刺激前體CD4+T向Treg分化增殖[23]。IL-10是一種免疫抑制性細(xì)胞因子,可以限制炎癥反應(yīng),在病原感染期間作為抗原免疫反應(yīng)的負(fù)調(diào)節(jié)因子,并在炎癥反應(yīng)期間限制對(duì)宿主細(xì)胞和組織造成的間接傷害[24-25]。

Th17和Treg細(xì)胞受不同細(xì)胞因子影響分化于相同的前體細(xì)胞,發(fā)揮著誘導(dǎo)免疫炎癥反應(yīng)和限制自體免疫兩種相反的作用,兩者既對(duì)立又統(tǒng)一,既保證了機(jī)體正常的免疫應(yīng)答又防止免疫系統(tǒng)過(guò)度應(yīng)答造成自身?yè)p傷,其動(dòng)態(tài)平衡維系著免疫微環(huán)境的穩(wěn)態(tài)。而Th17/Treg細(xì)胞免疫失衡和許多炎癥相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)聯(lián)?；謴?fù)Th17/Treg免疫平衡是治療相關(guān)疾病的新切入點(diǎn)。

2 Th17/Treg免疫失衡與肝臟疾病的關(guān)系

2.1Th17/Treg免疫失衡與非酒精性脂肪肝 慢性炎癥是NAFLD的病理進(jìn)展中的重要過(guò)程。目前研究顯示,Th17/Treg細(xì)胞失衡介導(dǎo)的適應(yīng)性免疫促進(jìn)了NAFLD的進(jìn)展[26-28]。Cairoli等[29]通過(guò)對(duì)患者肝活檢組織進(jìn)行CD4+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞亞群的檢測(cè),評(píng)估肝臟免疫細(xì)胞微環(huán)境。結(jié)果發(fā)現(xiàn),IL-17A表達(dá)增加,FoxP3則與之相反,Th17/Treg的比例與成人NAFLD患者肝臟炎癥和脂肪變性程度呈正相關(guān)趨勢(shì)。Su等[30]的研究發(fā)現(xiàn),在高脂飼養(yǎng)的NAFLD小鼠模型中來(lái)自腸系膜淋巴結(jié)(MLN)的CD4+T細(xì)胞參與了肝臟炎癥和脂質(zhì)積累的過(guò)程。同時(shí),MLNs中出現(xiàn)了Th1、Th17細(xì)胞比例顯著升高和Th2、Treg細(xì)胞比例顯著降低的趨勢(shì)。通過(guò)給予抗生素或益生菌, Th1/Th2和Th17/Treg細(xì)胞比例失衡可得到扭轉(zhuǎn),肝功能改善。

2.2Th17/Treg免疫失衡與病毒性肝炎 細(xì)胞免疫機(jī)制紊亂所造成的病理性炎癥反應(yīng)是病毒性肝炎發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。目前臨床上最為常見(jiàn)的病毒性肝炎為乙型肝炎,研究發(fā)現(xiàn),Th17、Treg 細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子和乙型肝炎的發(fā)生發(fā)展有著密切的聯(lián)系[31]。Liu等[32]研究表明,Th17/Treg平衡可以在抗病毒治療后得到恢復(fù),繼而重建患者免疫系統(tǒng)穩(wěn)態(tài),有助于降低患者HBsAg水平和減輕肝功能損傷。Yang等[33]和Teng等[34]的臨床研究均證實(shí)在乙型肝炎患者中,Th17細(xì)胞的百分比增加,Treg細(xì)胞分化頻率下降,導(dǎo)致Treg/Th17比率升高,而IL-35可以通過(guò)調(diào)節(jié)Treg/Th17比率治療乙型肝炎中的肝細(xì)胞損傷和肝臟炎癥。

2.3Th17/Treg免疫失衡與肝纖維化 肝纖維化是由長(zhǎng)時(shí)間肝損傷所造成的病理結(jié)果,過(guò)量酒精攝入、代謝性疾病、病毒性肝炎等均可引起慢性炎癥導(dǎo)致肝纖維化。炎癥可以激活來(lái)自肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell,HSC)的肌成纖維細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)蛋白取代受損的正常組織,形成纖維瘢痕[35]。研究發(fā)現(xiàn)HSC分泌的前列腺素E2( PGE2)作用于EP2/EP4受體,可以促進(jìn)Foxp3表達(dá)和Treg細(xì)胞活性, Th17、Treg細(xì)胞又可誘導(dǎo)HSC活化,從而形成了肝纖維化的有害環(huán)路[36]。Lan等[37]收集乙型肝炎相關(guān)性肝纖維化患者的外周血進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn),外周血 Treg 細(xì)胞減少、Th17細(xì)胞增加、Treg/Th17比值降低。Treg/Th17失衡與乙型肝炎相關(guān)性肝纖維化的臨床分期密切相關(guān)。Wang等[38]檢測(cè)了64例 NAFLD患者(研究組)和73例健康人(對(duì)照組)的肝功能、肝纖維化指標(biāo):血清透明質(zhì)酸(HA)、層黏連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(CIV),并分析了Th17/Treg 與上述指標(biāo)的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組比較,研究組Th17、 Th17/Treg 水平明顯升高且與肝功能、肝纖維化指標(biāo)呈正相關(guān)。

南通集裝箱多式聯(lián)運(yùn)尚處于起步階段，絕大多數(shù)企業(yè)不具備策劃、組織、協(xié)調(diào)多式聯(lián)運(yùn)的能力和經(jīng)驗(yàn)，整體服務(wù)水平處于較低層次。各企業(yè)間沒(méi)有統(tǒng)一的信息協(xié)調(diào)平臺(tái)，各企業(yè)系統(tǒng)各自獨(dú)立運(yùn)行，還處于一種分割的各自為戰(zhàn)的狀態(tài)，這也不利用構(gòu)建完善的、通暢的集裝箱聯(lián)運(yùn)體系，無(wú)法實(shí)現(xiàn)無(wú)縫鏈接，聯(lián)運(yùn)效率難以提升。

2.4Th17/Treg免疫失衡與肝癌 原發(fā)性肝癌根據(jù)來(lái)源不同主要分為肝細(xì)胞癌(HCC)、肝內(nèi)膽管癌(ICC)、混合型肝細(xì)胞癌-膽管癌(cHCC-CCA)3種不同病理學(xué)類(lèi)型,其中 HCC 占 75%～85%[39]。Th17/Treg免疫平衡在肝癌發(fā)病機(jī)制中有著不可忽視的調(diào)控作用。Wang等[40]研究發(fā)現(xiàn),肝癌患者外周血中Th17細(xì)胞的增加對(duì)應(yīng)了腫瘤-淋巴結(jié)-轉(zhuǎn)移( TNM )階段的進(jìn)展。腫瘤微環(huán)境中的細(xì)胞因子IL-6CD80、CD86、ICOSL通過(guò)共刺激分子接觸參與修飾Th17、Treg細(xì)胞表型,Th17、Treg細(xì)胞同步升高,從而促進(jìn)腫瘤微環(huán)境中的免疫逃逸,削弱抗腫瘤反應(yīng),協(xié)同腫瘤生長(zhǎng)。Lan等[41]的臨床研究顯示,在HCC患者外周血中Th17、Treg細(xì)胞數(shù)量及Treg/Th17比值均高于正常組,Th17、Treg細(xì)胞與腫瘤分期、腫瘤大小呈正相關(guān)。Th17/Treg免疫失衡可能參與了促進(jìn) HCC 的侵襲和進(jìn)展。

2.5Th17/Treg免疫失衡與肝衰竭 肝衰竭是臨床常見(jiàn)的嚴(yán)重肝病癥候群。在我國(guó),病毒、藥物、酒精等所造成的肝臟損害是引起肝衰竭的主要病因[42]。研究發(fā)現(xiàn),Th17/Treg免疫細(xì)胞失衡貫穿了HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭(ACLF)的早期、中期和晚期[43]。失衡的Th17/Treg軸向Th17偏移,Th17表達(dá)失調(diào)異常釋放促炎細(xì)胞因子IL-17、IL-23、TNF-α。雖然Treg細(xì)胞及其效應(yīng)細(xì)胞因子TGF-β和IL-10也通過(guò)代償性誘導(dǎo)上調(diào),但是其抑炎作用不足以有效抑制異常的炎癥反應(yīng)。Ni等[44]采用四氯化碳制備ACLF大鼠模型,實(shí)驗(yàn)顯示,ACLF組Th17細(xì)胞比例及IFN-γ水平均呈先升高后下降趨勢(shì);Treg細(xì)胞比例及IL - 10水平呈逐漸下降并趨于穩(wěn)定的趨勢(shì)。提示在ACLF進(jìn)展過(guò)程中,促炎免疫顯著上調(diào)而抗炎免疫下調(diào)。最終在肝衰竭慢性過(guò)程中形成新的Th17/Treg平衡軸。有臨床研究發(fā)現(xiàn),在ACLF進(jìn)展過(guò)程中恢復(fù)Th17/Treg免疫失衡,有助于維持免疫系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài),可改善患者預(yù)后[45]。

3 中醫(yī)藥調(diào)節(jié)Th17/Treg免疫失衡對(duì)肝臟疾病的防治作用

3.1非酒精性脂肪肝 刺五加總皂苷是刺五加的主要活性成分,具有調(diào)節(jié)免疫、保護(hù)肝損傷、調(diào)血脂等功能。呂鵬等[46]使用高脂飼料制備N(xiāo)AFLD大鼠模型,并采用小中高三種劑量刺五加總皂苷進(jìn)行治療,結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺五加總皂苷各組大鼠相比較模型組IL-2、IL-6、IL-7、TNF-α、INF-γ含量明顯下降,IL-4、IL-10含量上升。刺五加總皂苷通過(guò)糾正Treg/Th17以及Th1/Th2免疫細(xì)胞失衡狀態(tài),抑制炎癥反應(yīng)以改善肝功能和代謝紊亂,防止 NAFLD 大鼠肝臟病變進(jìn)展。

丹參為活血化瘀藥,具有養(yǎng)血護(hù)肝、涼血活血的功效。崔桂玉等[47]采用丹參治療NAFLD模型大鼠,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),丹參治療組RORγt基因表達(dá)量降低,進(jìn)而減少了Th17細(xì)胞增殖及其細(xì)胞因子IL-6、IL-17、TNF-α分泌,同時(shí)Treg細(xì)胞含量升高。丹參可通過(guò)調(diào)整Th17/Treg免疫失衡,減輕炎癥反應(yīng)及脂肪變性,在防治NAFLD中起到一定的作用。

鉤吻素子是從中藥鉤吻中分離出的主要活性成分,藥理作用以抗炎、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫等為主。Yue等[48]的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),鉤吻素子治療可顯著降低NALFD大鼠肝臟組織中IL-6、IL-1β、IFN-γ、IL-17A、TNF-α的水平,提高抗炎細(xì)胞因子IL-10的水平,同時(shí)抑制Th1和Th17細(xì)胞分化,促進(jìn)Th2和Treg細(xì)胞增殖。鉤吻素子通過(guò)調(diào)節(jié)不同亞型T細(xì)胞比例和削弱免疫反應(yīng)來(lái)改善NAFLD。

3.2病毒性肝炎 柴胡疏肝散出自《醫(yī)學(xué)統(tǒng)旨》,由柴胡、陳皮、川芎、香附、枳殼、芍藥、炙甘草組成,具有行氣活血、疏肝解郁的功效?；羧痨o等[50]通過(guò)小鼠尾靜脈注射rAAV8-1.3HBV重組病毒建立HBV感染小鼠模型,采用低中高3種不同劑量進(jìn)行治療,結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同劑量治療組小鼠肝臟組織中HBV-DNA、HBcAg含量依次降低,治療組小鼠肝臟組織Th17/Treg細(xì)胞亞群比例高于對(duì)照組。柴胡疏肝散通過(guò)糾正Th17/Treg細(xì)胞亞群失衡,調(diào)節(jié)免疫功能紊亂,從而減輕肝細(xì)胞免疫損傷。

溫腎方為成都中醫(yī)藥大學(xué)扈曉宇教授參考蒿芩清膽湯(《重訂通俗傷寒論·六經(jīng)方藥》)和右歸丸 (《景岳全書(shū)》卷五十一) 研制而成, 由炮附片、巴戟天、菟絲子、淫羊藿、黃芪、熟地黃、桑寄生、黃芩片、大黃、青蒿、炙甘草組成,功效溫腎扶正、因勢(shì)利導(dǎo)、 透邪外出。張揚(yáng)等[51]的臨床研究表明溫腎方可提高腎陽(yáng)虛型高ALT水平慢性乙型肝炎患者的臨床抗病毒療效,推測(cè)其機(jī)制可能是通過(guò)提高TLR-4活性,降低IL-6水平促進(jìn)Treg細(xì)胞增殖,從而調(diào)控Th17/Treg細(xì)胞的促炎與抑制免疫功能平衡,緩解肝臟炎癥。

柴芍六君湯出自《醫(yī)宗金鑒》,方中包含黨參、白術(shù)、茯神、炙甘草、陳皮、半夏、柴胡、白芍,具有疏肝理氣、健脾化痰的功效。柏文婕等[52]招募了106例慢性乙型肝炎纖維化患者,對(duì)照組53例采取基礎(chǔ)治療,觀察組加用柴芍六君湯內(nèi)服,結(jié)果發(fā)現(xiàn),觀察組患者肝功能指標(biāo)AST、ALT、TBil、GGT及肝纖維化指標(biāo)HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN均顯著低于對(duì)照組,且Th17/Treg比值明顯下降。推測(cè)柴芍六君湯通過(guò)調(diào)節(jié)Th17/Treg免疫細(xì)胞平衡改善肝功能及肝纖維化水平提高臨床療效。

3.3肝纖維化 三甲散來(lái)源于《瘟疫論》,牟德英等[53]基于吳又可“主客交”理論對(duì)三甲散進(jìn)行加減,方中包括鱉甲、穿山甲、僵蠶、土鱉蟲(chóng)、桃仁、柴胡、黃芪、當(dāng)歸,具有養(yǎng)血滋陰和通絡(luò)祛邪的功效。將其用于治療肝纖維化大鼠,結(jié)果發(fā)現(xiàn),加減三甲組肝臟組織中細(xì)胞因子RORγt、FoxP3、RORγt/FoxP3、IL-6、IL-17、IL-10、IL-6/IL-10、IL-17/IL-10均明顯降低,肝纖維化指標(biāo)LN、PCⅢ、HA顯著下降。表明加減三甲散可以調(diào)控Th17/Treg免疫平衡異常,促進(jìn)平衡向Treg偏移,發(fā)揮治療肝纖維化的作用。

芪參湯是來(lái)自黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院張雅麗教授治療肝纖維化的經(jīng)驗(yàn)方,具有益氣養(yǎng)陰、活血化瘀、祛痰通絡(luò)的作用,方中包含黃芪、西洋參、丹參、山楂、荷葉、澤瀉、女貞子、三七、墨旱蓮、絞股藍(lán)、甘草。袁維等[54]將芪參湯用于治療肝纖維化大鼠,結(jié)果發(fā)現(xiàn)芪參湯組大鼠肝臟組織中IL-17A含量下降,RORγt蛋白和mRNA表達(dá)明顯降低,同時(shí)IL-10含量升高,Foxp3 蛋白表達(dá)明顯上升,從而抑制Th17細(xì)胞分化,促進(jìn)Treg細(xì)胞增殖,降低炎癥水平,達(dá)到防治肝纖維化的目的。

肝爽顆粒是由逍遙散加減而成的上市中成藥,具有清熱疏肝、軟堅(jiān)散結(jié)的功效,全方由柴胡、黨參、白術(shù)、當(dāng)歸、丹參、虎杖、茯苓、白芍、桃仁、鱉甲、蒲公英、夏枯草、枳殼組成。陳芳芳等[55]的臨床研究顯示,肝爽顆粒通過(guò)減少Th17細(xì)胞因子IL-17、IL-23分泌及促進(jìn)Treg細(xì)胞因子IL-10、IL-35分泌,恢復(fù)Th17/Treg細(xì)胞平衡,顯著改善了治療組患者肝功能,減輕了肝臟纖維化程度。

3.4肝癌 羥基紅花黃色素A(HSYA)提取自傳統(tǒng)中藥紅花,具有抗腫瘤、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等多種作用。Ma等[56]通過(guò)在小鼠皮下注射Hepal-6肝癌細(xì)胞注入建立腫瘤模型,使用HSYA進(jìn)行藥物治療。結(jié)果顯示,HSYA通過(guò)調(diào)節(jié)RORγt和Foxp3蛋白及mRNA表達(dá),調(diào)整免疫微環(huán)境,抑制肝癌細(xì)胞的增殖。

梁瀟等[58]將溫腎方用于治療乙肝相關(guān)性晚期原發(fā)性肝癌患者,通過(guò)降低外周血中Th17/Treg細(xì)胞比值,下調(diào)IL-17水平,糾正免疫細(xì)胞失衡,達(dá)到了延長(zhǎng)患者中位生存期時(shí)間的效果,提高了內(nèi)科保守治療下晚期肝癌患者的臨床療效。

西黃丸始載于王洪緒所著的《外科證治全生集》,由牛黃、麝香、乳香、沒(méi)藥組成,具有清熱解毒、軟堅(jiān)散結(jié)、活血消癰的功效。劉艷之等[59]將西黃丸用于治療H22荷瘤小鼠,結(jié)果發(fā)現(xiàn)給藥組CD3+、CD4+、CD8+含量上升,同時(shí)血清中細(xì)胞因子IL-2和IFN-γ上升,IL-6、IL-10下降明顯。推測(cè)西黃丸可能是通過(guò)上調(diào)免疫細(xì)胞表達(dá)及糾正Th1/Th2漂移現(xiàn)象以提高免疫力,從而發(fā)揮抑制腫瘤作用。

3.5肝衰竭 解毒化瘀Ⅱ方為廣西中醫(yī)藥大學(xué)毛德文教授創(chuàng)立,藥物組成為茵陳、赤芍、白花蛇舌草、生大黃、郁金、石菖蒲,有清毒解毒、活血化瘀、豁痰醒神的功效 。柏文婕等[60]招募了136例慢性肝衰竭患者,在給予西醫(yī)綜合治療的情況下,對(duì)照組68例予茵陳蒿湯配方顆粒治療,觀察組68例予解毒化瘀顆粒治療。結(jié)果顯示觀察組患者臨床癥狀、肝功能及生存改善,病變程度減輕,其機(jī)制是通過(guò)降低觀察組PCT、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-17、Th17水平,恢復(fù)Th17/Treg失衡偏移,從而阻止肝衰竭進(jìn)展。石清蘭等[61]將解毒化瘀Ⅱ方用于治療慢加急性肝衰竭患者。研究發(fā)現(xiàn),解毒化瘀Ⅱ方可以升高患者Treg細(xì)胞水平,降低Th17和Th17/Treg比值 ,提高機(jī)體免疫狀態(tài),抑制炎癥因子釋放,從而有利于肝臟免疫重建。

陽(yáng)解毒化瘀方為湖南中醫(yī)藥大學(xué)陳斌教授基于清溫并用法所創(chuàng)立,全方由茵陳、白術(shù)、赤芍、附片、丹參、薏苡仁組成,具溫陽(yáng)健脾、解毒化瘀的功效。陳斌等[62]以皮下注射牛血清白蛋白致敏法,腹腔注射D-氨基半乳糖(D-Gal)+脂多糖(LPS)建立慢加急性肝衰竭大鼠模型,將其分為清法組、溫法組、清溫并用法組分別予茵陳蒿湯、茵陳術(shù)附湯、溫陽(yáng)解毒化瘀方治療。結(jié)果顯示3組大鼠肝組織中的FoxP3、RORγtmRNA及IL-10、TGF-β、IL-17A、IL-23、TGF-α水平均下降,其中清溫并用法組最為顯著且持續(xù)穩(wěn)定。通過(guò)減少炎癥因子分泌,扭轉(zhuǎn)Th17/Treg細(xì)胞失衡狀態(tài),陽(yáng)解毒化瘀方改善了肝臟病理?yè)p傷狀態(tài),發(fā)揮抗肝衰竭的作用。也有研究證明陽(yáng)解毒化瘀方可以升高Th17/Treg比值,調(diào)節(jié)Th17/Treg免疫細(xì)胞失衡,推測(cè)是其治療肝衰竭腸源性?xún)?nèi)毒素血癥的調(diào)控機(jī)制[63]。

4 總結(jié)與展望

綜上所述,Th17和Treg細(xì)胞的異常增殖及免疫失衡在肝臟疾病的慢性病變過(guò)程中扮演著重要角色。研究表明,中藥單體、中藥提取物和中藥復(fù)方可以通過(guò)抑制Th17、Treg細(xì)胞異常分化和恢復(fù)Th17/Treg平衡狀態(tài),減輕免疫炎癥反應(yīng)和肝臟功能障礙,為中醫(yī)藥治療肝臟疾病開(kāi)拓了新的思路。但是,Th17/Treg失衡調(diào)控肝臟疾病的相關(guān)研究還存在許多不足:一是現(xiàn)有研究多集中于組織和細(xì)胞層面,Th17/Treg失衡調(diào)控疾病的分子機(jī)制還不夠明確;二是中藥和中藥復(fù)方成分復(fù)雜,是多成分還是單一成分在疾病治療中起到的具體作用還需深入研究;三是中藥和中藥復(fù)方作用靶點(diǎn)多,藥物是單一或者多靶點(diǎn)作用于疾病治療的機(jī)制不明,同時(shí)其會(huì)否通過(guò)其他機(jī)制對(duì)肝臟產(chǎn)生不良影響也尚未明確。未來(lái)通過(guò)與生物信息學(xué)、基因組學(xué)等先進(jìn)技術(shù)結(jié)合,將會(huì)進(jìn)一步闡明Th17/Treg免疫失衡在肝臟疾病發(fā)病中的分子機(jī)制和中醫(yī)藥治療的藥效基礎(chǔ)。在精準(zhǔn)醫(yī)療時(shí)代,肝病患者有望根據(jù)自己的“分子標(biāo)簽”進(jìn)行診斷和治療,最終實(shí)現(xiàn)“個(gè)性化用藥”。

利益沖突:所有作者均聲明不存在利益沖突。