馬榮蓉,冉莉莎,屈麗池,謝念祠,丁夢梅,朱洺志,3,4, ,王坤波,3,4,5,
(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院茶學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖南長沙 410128;2.國家植物功能成分利用工程技術(shù)研究中心,湖南長沙 410128;3.植物功能成分利用省部共建協(xié)同創(chuàng)新中心,湖南長沙 410128;4.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部園藝作物基因資源評(píng)價(jià)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖南長沙 410128;5.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)黃埔創(chuàng)新研究院,湖南長沙 410128)
茯磚茶作為后發(fā)酵黑茶的代表,具有降脂減肥、降血糖、緩解代謝綜合征等功效[1-3],同時(shí)因其在發(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生大量金黃色的“金花”菌而聞名,主要以黑毛茶為原料經(jīng)篩選、渥堆、氣蒸、壓制成型、發(fā)花、干燥和陳化等工序加工制作而成。茯磚茶品質(zhì)特征形成的關(guān)鍵在于“發(fā)花”,其實(shí)質(zhì)是在適宜的溫度、濕度下,以冠突散囊菌為主的多菌群協(xié)同作用的固態(tài)發(fā)酵過程[4-5]。微生物的發(fā)酵作用不僅賦予了茯磚茶金花茂盛、菌香濃郁的特征,而且使得其內(nèi)含活性成分發(fā)生了明顯的變化[6]。
“發(fā)花”是茯磚茶加工過程中微生物作用最活躍的階段,此過程改變了茯磚中茶多酚及兒茶素、黃酮和氨基酸等主要代謝物的組成,促進(jìn)了茯磚茶滋味和湯色的形成[7]。已有研究證明真菌群落在茯磚茶代謝產(chǎn)物的形成中具有潛在作用,不同產(chǎn)地的茯磚茶其真菌群落的多樣性和豐富度存在差異[8]。目前對茯磚茶中“金花”菌的分離鑒定技術(shù)已較為成熟,大多數(shù)學(xué)者將其鑒定為冠突散囊菌[5,9-10],也有學(xué)者將涇陽茯茶中的“金花”菌鑒定為赤散囊菌[11],不同茯磚茶中的“金花”菌在種屬水平上存在差異。彭曉赟等[12]對分離自茯磚茶的冠突散囊菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),揭示了冠突散囊菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物具有多種生物活性,賦予了茯磚茶抗菌、抗氧化等生理功能。“金花”菌作為茯磚茶發(fā)酵過程中的優(yōu)勢微生物,人們往往通過判斷其質(zhì)量和數(shù)量來衡量茯磚茶品質(zhì)的優(yōu)劣。不同地區(qū)生產(chǎn)的茯磚茶因生產(chǎn)過程中所使用的原料和加工條件的不同對其微生物組成以及化學(xué)成分有所影響,可能導(dǎo)致不同地區(qū)茯磚茶的品質(zhì)特征的形成。
因此,比較分析不同地區(qū)茯磚茶的主要化學(xué)成分,利用電子舌系統(tǒng)檢測5 種茯磚茶的滋味屬性,用不同方法檢測其抗氧化活性,觀察對比不同地區(qū)茯磚茶的“金花”菌形態(tài)特征,對了解不同產(chǎn)地茯磚茶品質(zhì)及功能等方面的差異性,以及后續(xù)研究茯磚茶具有重要意義。
茯磚茶 湖南省益陽茶廠、湖北省力沃茶業(yè)股份有限公司、陜西省涇渭茯茶有限公司、浙江省武義駱駝九龍磚茶有限公司和貴州省過江龍生態(tài)黑茶有限公司;沒食子酸、咖啡堿、可可堿、茶葉堿、表兒茶素(EC)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、表沒食子兒茶素(EGC)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、沒食子兒茶素沒食子酸酯(GCG)等標(biāo)準(zhǔn)品 純度≥99%,美國Sigma 公司;總抗氧化力(FRAP 法)、(DPPH 法)、(ABTS 法)試劑盒 蘇州科銘生物技術(shù)有限公司;麥芽膏、酵母膏、葡萄糖、瓊脂、蛋白胨、氯化鉀、硝酸鈉、磷酸氫二鉀、七水硫酸鎂、七水硫酸亞鐵等 純度≥99%,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
Scope.A1 顯微鏡 德國卡爾·蔡司股份有限公司;UV-2550 紫外分光光度計(jì) 日本島津公司;SA 402B 電子舌(配備AAE,CTO,CAO,COO,AE1 傳感器)日本Insent 公司;Waters 高效液相色譜儀e2695-2998 沃特世科技(上海)有限公司;VARIOSKAN FLASH 多功能酶標(biāo)儀 美國Thermo Scientific 公司;YS6003 色差儀 深圳三時(shí)恩公司;SWCJ-2FD 超凈工作臺(tái) 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司;GR85DA 高壓滅菌鍋 致微(廈門)儀器有限公司。
1.2.1 茶湯色差檢測 參照GB/T 23776-2018,茶葉感官審評(píng)方法[13]沖泡茶湯,趁熱過濾并迅速冷卻,對茶湯進(jìn)行拍照;以蒸餾水為對照,用色差儀對茶湯進(jìn)行色差檢測[14]。
1.2.2 主要品質(zhì)成分測定 游離氨基酸參照GB/T 8314-2013,茶游離氨基酸總量的測定[15]、水浸出物參照GB/T 8305-2013,茶水浸出物測定[16],茶多酚參照GB/T 8313-2018,茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測方法[17]進(jìn)行測定,并用UV-2550 紫外分光光度計(jì)進(jìn)行吸光度檢測。游離氨基酸準(zhǔn)曲線y=3.915x+0.0234,R2=0.9962,茶多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.01x+0.0222,R2=0.9993。黃酮類化合物總量的測定采用三氯化鋁比色法[18],稱取3 g(準(zhǔn)確至0.001 g)磨碎試樣于500 mL 錐形瓶中,加沸蒸餾水450 ml,立即移入沸水浴中,浸提45 min(每隔10 min 搖動(dòng)一次),浸提完畢后立即趁熱減壓過濾,殘?jiān)蒙倭繜嵴麴s水洗滌2~3 次。將濾液轉(zhuǎn)入500 mL 容量瓶中,冷卻后用水定容至刻度,搖勻作為供試樣液。
1.2.3 兒茶素組分及生物堿檢測方法 采用本實(shí)驗(yàn)室的高效液相色譜法進(jìn)行檢測,參照GB/T 8314-2013,茶游離氨基酸總量的測定[15]進(jìn)行樣品提取,色譜條件:色譜柱為C18(4.6 mm×150 mm),檢測波長278 nm,進(jìn)樣量10 μL,柱溫35 ℃,流速1.0 mL·min-1。流動(dòng)相A 為超純水,B 相為N,N-二甲基甲酰胺、甲醇和冰乙酸以39.5:2:1.5 為比例的混合液;B 相以9%的初始比例進(jìn)行梯度洗脫,10 min 內(nèi)上升至14%,27 min 內(nèi)至36%并持續(xù)4 min,32 min 下降至9%并持續(xù)到37 min 結(jié)束。
1.2.4 電子舌檢測茶葉的滋味屬性 參照1.2.1 方法進(jìn)行茶湯處理,進(jìn)行傳感器的活化和系統(tǒng)自檢,室溫維持在20 ℃進(jìn)行檢測,味覺傳感器和陶瓷參比電極共清洗210 s,平衡30 s 后開始樣品測試,每個(gè)樣品測量30 s,回味測量30 s。每個(gè)樣測試4 次平行,取后三次的平均值作為測試結(jié)果進(jìn)行分析。
1.2.5 抗氧化活性測定 參照1.2.2 提取試液,采用蘇州科銘生物技術(shù)有限公司DPPH、ABTS 及FRAP檢測試劑盒對樣品DPPH 自由基清除能力、ABTS+自由基清除能力及FRAP 抗氧化力進(jìn)行檢測。正式檢測之前將試液稀釋為干茶浸出物6、3、1.5、1.2 mg/mL 進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),當(dāng)濃度為1.2 mg/mL 時(shí)ABTS、FRAP 試劑盒檢測效果最好,1.5 mg/mL 時(shí)DPPH 試劑盒檢測效果最好,每個(gè)指標(biāo)按照最佳濃度稀釋試液后嚴(yán)格按照試劑盒方法進(jìn)行,使用酶標(biāo)儀分別在波長515 nm(DPPH)、734 nm(ABTS)、593 nm(FRAP)處檢測各樣品吸光值。樣品清除DPPH 自由基能力、ABTS+自由基能力以及總抗氧化能力用從標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲得的抗氧化劑的量(μmol Trolox/mL)來表示。相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)曲線如下:
式中,y 表示吸光差值ΔA;x 表示Trolox 濃度(μmol/mL)。
1.2.6 “金花”菌形態(tài)觀察 “金花”菌的形態(tài)觀察參照王磊等[19]的方法進(jìn)行。參照趙仁亮等[4]、Visagie等[20]的方法配制察氏培養(yǎng)基(CZ)、察氏酵母瓊脂培養(yǎng)基(CYA)、察氏酵母膏瓊脂改良培養(yǎng)基(CYAS)、麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基(MEA)、麥芽汁酵母瓊脂培養(yǎng)基(M40Y)。將分離自不同產(chǎn)地茯磚茶的菌株分別接種于上述5 種培養(yǎng)基于28 ℃培養(yǎng)7 d,記錄菌落特征并拍照,挑取CZ 培養(yǎng)基上少量菌落用乳酸酚棉藍(lán)染液對5 個(gè)菌株孢子進(jìn)行染色,在光學(xué)顯微鏡下觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu)及生長狀況。
采用Microsoft Office Excel 2016 進(jìn)行記錄整理,實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次,結(jié)果使用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示。IBM SPSS Statistics 25.0 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析,P<0.05 表示顯著性差異,GraphPad Prism 8、Cytoscape 進(jìn)行圖形繪制。
由表1 和圖1 可知,5 個(gè)茯磚茶色澤存在明顯差異,湖南茯磚干茶色澤青褐,金花茂盛,茶湯橙黃尚亮;湖北茯磚黃褐帶金花,淺橙紅尚亮;陜西茯磚棕褐帶金花,橙黃明亮;浙江茯磚棕褐帶金花,橙紅尚亮;貴州茯磚棕褐帶金花,茶湯紅橙明亮。對茶湯進(jìn)行色差檢測發(fā)現(xiàn)其色差值存在顯著差異(P<0.05),其中湖南茯磚亮度最高(86.60),浙江茯磚紅度和黃度最高分別為(8.52、57.73)。茶湯顏色的不同主要是由于茶葉中茶黃素、茶紅素和茶褐素的含量存在差異,黃亞輝等[21]的研究表明,茯磚茶中的茶黃素含量均偏低,而茶褐素作為茶黃素和茶紅素的氧化產(chǎn)物在茯磚茶中偏高,茶褐素是茶湯顏色“烏褐”的主要成分,浙江茯磚較深可能是由于其茶褐素較高的原因。在茯磚茶加工過程中,由于“金花”菌本身具備合成色素的能力,因此茯磚茶的湯色差異還可能受到微生物的影響。
圖1 不同產(chǎn)地茯磚茶茶湯及干茶Fig.1 Soup and shape of Fu brick tea in different origins
表1 不同茯磚茶樣品茶湯色差結(jié)果Table 1 Results of color difference in tea broth of different Fu brick tea samples
水浸出物、游離氨基酸、茶多酚、黃酮等成分是茶葉滋味的主要貢獻(xiàn)物。由圖2 可知,湖北茯磚水浸出物含量顯著低于其他地區(qū)茯磚茶,水浸出物是一切可溶性物質(zhì)的總和,其含量的高低對茶葉品質(zhì)的優(yōu)劣有重要作用。5 個(gè)茯磚茶游離氨基酸含量均在10 mg/g 以內(nèi),貴州茯磚含量最高(9.03 mg/g)。游離氨基酸是茶葉中鮮味的主要來源,但由于茯磚茶選用原料本身較粗老,其游離氨基酸含量較低。在茯磚茶渥堆過程中,由于濕熱作用的影響,發(fā)生脫氨、脫羧等反應(yīng)進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為香氣等成分[22],在發(fā)花過程中,微生物又將氨基酸類物質(zhì)作為氮源以維持自身生長繁殖,而導(dǎo)致其含量進(jìn)一步降低[7]。茶多酚包括兒茶素、花青素、黃酮等化合物,其含量與原料有關(guān),在茯磚茶加工過程中也受到濕熱作用和微生物作用的影響。5 個(gè)茯磚茶樣品茶多酚含量存在顯著差異(P<0.05),其中湖北茯磚含量最低(90.8 mg/g),浙江茯磚最高(132.93 mg/g)。黃酮類化合物是茶葉中重要的功能成分,但在自然狀態(tài)下不穩(wěn)定,茶葉加工和儲(chǔ)藏過程中容易發(fā)生轉(zhuǎn)化,因此在茶葉中含量較低[23],5 個(gè)不同產(chǎn)地茯磚茶黃酮含量均低于9 mg/g。
圖2 不同產(chǎn)地茯磚茶主要品質(zhì)成分含量Fig.2 Contents of main quality components of Fu brick tea in different origins
茶葉中的生物堿主要有咖啡堿、可可堿和茶葉堿。可可堿和茶葉堿呈苦味,含量較低,互為同分異構(gòu)體??Х葔A呈苦味,可以和兒茶素、氨基酸等絡(luò)合,使茶湯具有苦后回甘的特色[24]。因其本身較為穩(wěn)定,所以在茯磚茶加工過程中含量變化不大。從表2可知湖南茯磚咖啡堿含量最高(31.513 mg/g),湖北茯磚最低(14.52 mg/g),導(dǎo)致這一差異可能是由于原料的不同。沒食子酸屬酚酸類物質(zhì),其形成是由于茯磚茶發(fā)酵早期的濕熱作用[25],沒食子酸兒茶素在濕熱作用下通過水解逐漸分解,然后產(chǎn)生相應(yīng)的非沒食子酸兒茶素和沒食子酸[26],而EGCG 是沒食子酸生物合成的主要途徑[27]。湖南茯磚、浙江茯磚及貴州茯磚之間沒食子酸含量存在顯著差異(P<0.05),可能是由于加工過程中不同的水分和溫度條件導(dǎo)致。兒茶素作為茶多酚的主要組成部分,可分為簡單兒茶素(DL-C、EC、EGC)和酯型兒茶素(ECG、EGCG、GCG)[28]。酯型兒茶素是強(qiáng)苦味和澀味的重要供體,簡單兒茶素則收斂性較弱[29-30]。湖南、湖北茯磚兒茶素總量較低,陜西、浙江、貴州茯磚含量較高;浙江茯磚含有更多的簡單兒茶素,陜西茯磚含有更多的酯型兒茶素。有研究表明渥堆及發(fā)花程度的不同都會(huì)造成茯磚茶兒茶素不同程度的降低[31]。因此,不同產(chǎn)地茯磚茶中兒茶素的差異一方面可能是由于發(fā)花過程中大量微生物的繁殖,釋放胞外酶使兒茶素各組分進(jìn)行酶促氧化而大幅下降;另一方也可能是由于原料的不同導(dǎo)致。
表2 不同產(chǎn)地茯磚茶兒茶素組分及咖啡堿含量(mg/g)Table 2 Content of catechin fraction and caffeine in Fu brick tea from different origin (mg/g)
通過電子舌研究了茯磚茶的滋味屬性,由雷達(dá)圖(圖3a)可知,湖南茯磚茶具有最強(qiáng)的苦味,但其苦味回味值低于浙江茯磚茶。浙江茯磚茶具有最強(qiáng)的咸味,陜西茯磚茶具有最強(qiáng)的澀味,其澀味回味值也較高;貴州茯磚茶具有最強(qiáng)的鮮味和豐富度。從聚類分析圖(圖3b)來看,茯磚茶樣品的滋味屬性被分為三組:湖南-湖北、貴州、陜西-浙江;這表明湖南和湖北茯磚茶的聚類表現(xiàn)出相似的滋味特征,陜西和浙江茯磚茶的聚類表現(xiàn)出相似的滋味特征。
圖3 不同地區(qū)茯磚茶滋味特征及聚類分析Fig.3 Taste characteristics and clustering analysis of Fu brick tea from different origins
不同地區(qū)的茯磚茶有不同的抗氧化活性,采用三種不同的方法來評(píng)估5 個(gè)不同地區(qū)茯磚茶的抗氧化活性見圖4。結(jié)果顯示,5 種茯磚茶樣的DPPH 自由基清除率無顯著差異;湖北茯磚與其余4 個(gè)地區(qū)茯磚之間FRAP 總抗氧化能力存在顯著差異(P<0.05);湖北茯磚和浙江茯磚之間ABTS+自由基清除能力存在顯著差異(P<0.05)。其中,湖北茯磚茶的FRAP 總抗氧化活性最高(0.18 μmol Trolox/mL),湖南、浙江茯磚茶最低(0.12 μmol Trolox/mL)。浙江茯磚茶的ABTS+抗氧化活性最高(0.4 μmol Trolox/mL),湖北茯磚茶最低(0.31 μmol Trolox/mL)。
圖4 不同地區(qū)茯磚茶DPPH、FRAP、ABTS抗氧化活性比較Fig.4 Comparison of the antioxidant activity DPPH,FRAP and ABTS of Fu brick tea from different origins
對不同地區(qū)茯磚茶主要化學(xué)成分、滋味特征與抗氧化活性進(jìn)行相關(guān)性分析,以探究其相互之間的內(nèi)在聯(lián)系??寡趸芰Φ牟町愂腔诓煌虼u茶中多酚類物質(zhì)的存在,如茶多酚、類黃酮、兒茶素等[32],由圖5 可知,F(xiàn)RAP 與咖啡堿、可可堿、水浸出物含量呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05);而ABTS 抗氧化活性與茶多酚、EC、EGC 等含量存在顯著正相關(guān)(P<0.05),但DPPH 抗氧化活性意外地與這些化學(xué)成分不存在顯著相關(guān)性。有研究報(bào)道,茯磚茶的抗氧化活性,還應(yīng)考慮沒食子酸、兒茶素和茶色素的特性,它們可以協(xié)同或拮抗[8]。因此茯磚茶中關(guān)鍵的抗氧化因子及其相互關(guān)系還有待進(jìn)一步的研究。
圖5 茯磚茶主要生化成分與其抗氧化性及滋味特征相關(guān)性分析Fig.5 Correlation analysis of the main biochemical components with their antioxidant properties and taste characteristics of Fu brick tea
水浸出物、游離氨基酸、茶多酚等成分是茶葉滋味的主要貢獻(xiàn)物,相關(guān)性分析也顯示各化學(xué)成分與滋味屬性存在不同的相關(guān)性??辔杜c氨基酸、沒食子酸、GCG 含量呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05),與可可堿呈顯著正相關(guān)(P<0.05);澀味則與兒茶素類物質(zhì)以及茶多酚、咖啡堿、水浸出物等呈顯著正相關(guān)(P<0.05);除可可堿以外,其余物質(zhì)大多與鮮味和豐富度存在顯著正相關(guān)性(P<0.05);沒食子酸、茶多酚與兒茶素類物質(zhì)與咸味存在顯著正相關(guān)性(P<0.05)。
對5 個(gè)產(chǎn)地茯磚茶分離的5 株“金花菌”在不同培養(yǎng)基的形態(tài)特征進(jìn)行觀察(圖6)。5 個(gè)菌株形態(tài)差異變化受培養(yǎng)基影響較大,主要體現(xiàn)在菌株生長速度及顏色,菌株在CYAS 和M40Y 培養(yǎng)基上生長快,菌株直徑分別為35~42 mm、48~56 mm,菌落致密,菌絲較厚且閉囊殼大量,干燥粗糙;在MEA 培養(yǎng)基上生長速度次之,菌落致密,顏色呈現(xiàn)中央橙黃色,邊緣黃色特征;在CYA 上生長速度較慢,菌落呈現(xiàn)中央黑褐色或褐色,邊緣黃色或淡黃色;在CZ 培養(yǎng)基上,菌株生長緩慢,閉囊殼少量,有色素?cái)U(kuò)散至培養(yǎng)基,形態(tài)差異較小。僅湖南、陜西菌株在CYA 上有滲出液,其它菌株在5 種培養(yǎng)基上均無滲出液。
圖6 不同產(chǎn)地茯磚茶中分離的“金花”菌在不同培養(yǎng)基上的形態(tài)特征Fig.6 Morphological characteristics on different media of"golden flower" fungi bacteria isolated from Fu brick tea of different origins
5 株“金花”菌在同培養(yǎng)基上差異相對較小,在CYA 上,湖南和陜西菌株顏色較深,中央黑褐色邊緣淡黃色,其它菌株顏色較淺;湖南菌株在CYAS 及M40Y 生長速度快于其它菌株,湖北菌株在M40Y上呈黃色云朵狀(圖6b4)。
在顯微鏡下,“金花”菌的有性結(jié)構(gòu)子囊果呈球形或近球形,子囊果在生長后期破裂形成子囊,子囊成熟后釋放子囊孢子[10]。如圖7 所示,5 株“金花”菌均發(fā)現(xiàn)子囊孢子和子囊,其子囊呈球形或近球形,直徑117~156 μm(圖7a~圖7e)。陜西、浙江、貴州菌株均發(fā)現(xiàn)有性結(jié)構(gòu)子囊果,直徑分別為270、543、395 μm,并且存在多核有隔菌絲(圖7j~圖7l),但在湖南菌株中并未發(fā)現(xiàn)子囊果,湖北菌株中發(fā)現(xiàn)已破裂的子囊果(圖7f)。湖北、陜西、浙江、貴州菌株均發(fā)現(xiàn)代表有性結(jié)構(gòu)的子囊果破裂產(chǎn)生子囊孢子團(tuán)(圖7f~圖7i)。由此可見湖南菌株生長速度快于其他菌株,子囊果完全破裂釋放子囊,并且子囊開始釋放子囊孢子;其次是湖北菌株,并未發(fā)現(xiàn)完整的子囊果,而只有正在破裂釋放子囊的子囊果。陜西、浙江、貴州菌株生長速度較慢。
圖7 顯微鏡下菌株的結(jié)構(gòu)特征Fig.7 Structural features of the fungal under the microscope
本研究中5 個(gè)不同產(chǎn)地茯磚茶的游離氨基酸、茶多酚、黃酮、兒茶素、咖啡堿含量存在顯著差異(P<0.05)且滋味差異大。相關(guān)性分析顯示,茯磚茶的主要化學(xué)成分與滋味屬性顯著正相關(guān)??寡趸钚燥@示湖北茯磚與其余4 個(gè)地區(qū)茯磚茶的FRAP 抗氧化活性存在顯著差異(P<0.05),湖北茯磚與浙江茯磚之間ABTS+抗氧化活性存在顯著差異(P<0.05)。茶多酚與茯磚茶的抗氧化活性存在顯著正相關(guān)(P<0.05)。分離不同產(chǎn)地茯磚茶中的“金花”菌發(fā)現(xiàn)它們的形態(tài)結(jié)構(gòu)在察氏酵母瓊脂培養(yǎng)基上存在明顯差異,并且湖南菌株生長速度快于其他菌株,從干茶來看其金花也最為茂盛。
后續(xù)實(shí)驗(yàn)可將不同的“金花”菌接種于相同原料的黑毛茶進(jìn)行“發(fā)花”,或?qū)⑼恢辍敖鸹ā本臃N于不同原料的黑毛茶進(jìn)行“發(fā)花”,探究其品質(zhì)差異。進(jìn)一步揭示原料和微生物對茯磚茶品質(zhì)的影響,為茯磚茶的深入研究提供理論基礎(chǔ)。