基于風(fēng)水水腫大鼠模型的麻黃拆分組分的升降浮沉藥性研究

張宇涵，徐瑞齊，曾夢楠，吳媛媛，葉珊，李本科，曹兵，馮衛(wèi)生，夏永剛，鄭曉珂（1.河南中醫(yī)藥大學(xué)，河南 鄭州 450046；2.河南省中藥開發(fā)工程技術(shù)研究中心，河南 鄭州 450046；.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040）

升降浮沉是中藥對疾病病勢和病位所產(chǎn)生的作用趨向[1-2]，是中藥藥性理論的重要組成部分。在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，構(gòu)建符合現(xiàn)代科學(xué)認知規(guī)律的中藥升降浮沉藥性表征體系，闡釋其科學(xué)內(nèi)涵已經(jīng)成為亟待解決的重要問題[3]。麻黃為麻黃科植物草麻黃（EphedrasinicaStapf）、中麻黃（EphedraintermediaSchrenk et C.A.Mey.）或木賊麻黃（EphedraequisetinaBge.）的干燥草質(zhì)莖，具有發(fā)汗散寒、宣肺平喘、利水消腫的功效，常用于風(fēng)寒感冒，胸悶喘咳，風(fēng)水浮腫之癥[4]。對麻黃進行本草考證[5-6]發(fā)現(xiàn)，歷代中醫(yī)藥著作大多記載其藥性“升浮”。本課題組前期對麻黃各化學(xué)拆分組分的四氣五味藥性進行了歸屬，麻黃生物堿組分味辛性溫，而麻黃多糖組分味苦性涼（寒）[7-10]。一般認為，味屬辛、甘，氣（性）屬溫、熱的藥物多為升浮之性，味屬苦、酸、咸，氣（性）屬寒、涼的藥物多為沉降之性[11]，由此推測麻黃生物堿藥性屬“升浮”，而多糖組分藥性屬“沉降”。目前尚未見有關(guān)麻黃升降浮沉藥性物質(zhì)基礎(chǔ)的實驗研究。因此，本研究擬基于課題組提出的中藥升降浮沉藥性理論的科學(xué)假說，開展麻黃各拆分組分對風(fēng)水水腫大鼠模型的干預(yù)作用及藥性歸屬研究，以期為闡明中藥升降浮沉藥性的科學(xué)內(nèi)涵奠定實驗基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 動物雄性SD 大鼠70 只，SPF 級，體質(zhì)量180～220 g，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（京）2016-0011。本動物實驗經(jīng)河南中醫(yī)藥大學(xué)倫理委員會批準，動物倫理批文號：DWLL2018080003。

1.2 藥物及試劑麻黃，購自鄂托克前旗九康中藥材開發(fā)有限責任公司，經(jīng)河南中醫(yī)藥大學(xué)董誠明教授鑒定為麻黃科植物草麻黃EphedrasinicaStapf 的干燥草質(zhì)莖；通宣理肺丸（批號：19015355），北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠。阿霉素（鹽酸多柔比星，批號：2006E1），深圳萬樂藥業(yè)有限公司；肌酐（CER，貨號：C011-2-1）、尿素氮（BUN，貨號：C013-2-1）、尿蛋白（UP，貨號：C035-2-1）、一氧化氮（NO，貨號：A013-2-1）檢測試劑盒，南京建成生物工程研究所；尿微量白蛋白（MAU，貨號：EEL-R0025c）、免疫球蛋白E（IgE，貨號：E-ELR0517c）、γ 干擾素（IFN-γ，貨號：E-EL-R0009c）、白細胞介素4（IL-4，貨號：E-EL-R0014c）、胃動素（MTL，貨號：E-EL-R0639c）、生長抑素（SST，貨號：E-EL-R00914c）、胃泌素（GT，貨號：E-ELR0472C）ELISA 測定試劑盒，武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司；PE Annexin V 凋亡檢測試劑盒（批號：559763），美國BD Biosciences 公司；DCFH-DA熒光探針（批號：CA1410），北京索萊寶科技有限公司。

1.3 儀器OFT-100 型大小鼠實驗分析系統(tǒng)，成都泰盟軟件有限公司；YLS-1B 型多功能大鼠自主活動記錄儀、YLS-8A 型多功能誘咳引喘儀，濟南益延科技發(fā)展有限公司；iMark 酶標儀，美國Bio-Rad 公司；Vevo?2100 型小動物多普勒超聲診斷儀，加拿大VisualSonics 公司；大鼠代謝籠裝置，江蘇蘇州馮氏實驗動物有限公司；Flow Sight 單細胞分析儀，美國Merck 公司；KQ-500E 型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；Centrifuge 5810 小型高速低溫冷凍離心機，德國Eppendorf 公司；TMC 恒溫孵育器，合肥艾本森科學(xué)儀器有限公司。

2 方法

2.1 藥物制備麻黃水煎液：麻黃水煎液劑量根據(jù)成人臨床用量以體表面積率折算，大鼠的等效劑量為成人用量的28倍。取麻黃1 kg，加入10倍量蒸餾水，煎煮2 次，每次0.5 h，用16 層紗布過濾后，得麻黃水煎液；濃縮干燥后，計算浸膏提取率為15.9%。每次取4.46 g 浸膏配制60 mL 受試藥液，每毫升藥液相當于0.467 g 麻黃原藥材。麻黃多糖和生物堿組分的拆分按照參考文獻[4]中麻黃性味物質(zhì)基礎(chǔ)的拆分方法進行。麻黃生物堿組分（提取率為1.1%）：取麻黃生物堿提取物308.88 mg 溶于60 mL 蒸餾水中。麻黃非生物堿組分（提取率為4.6%）：取麻黃非生物堿組分1 291.68 mg 溶于60 mL 蒸餾水中。麻黃多糖組分（提取率為5.9%）：取麻黃多糖組分1 656.72 mg 溶于60 mL 蒸餾水中。通宣理肺丸：取通宣理肺丸33.6 g，加入60 mL蒸餾水中，超聲混勻。

2.2 模型復(fù)制、分組及給藥將70 只SD 大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周后，按體質(zhì)量隨機挑選10 只作為正常組，其余大鼠作為造模組；造模組分別于第1、8 天尾靜脈注射阿霉素4 mg·kg-1和3.5 mg·kg-1，正常組注射等量的生理鹽水。將造模后的大鼠置于鋼絲籠中，調(diào)節(jié)電扇風(fēng)速為2.5 m·s-1，濕度為40%±5%，進行吹風(fēng)刺激4 d，每天4～6 h；正常組大鼠置于鋼絲籠中，不做吹風(fēng)處理。造模組以大鼠出現(xiàn)四肢浮腫、惡風(fēng)、弓背、毛松、噴嚏、流涕、小便減少等癥狀為造模成功[14-16]。將造模成功的大鼠隨機分為模型組、生物堿組（51.48 mg·kg-1）、非生物堿組（215.28 mg·kg-1）、多糖組（276.12 mg·kg-1）、麻黃組（麻黃水煎液4 670 mg·kg-1）及通宣理肺丸組（陽性藥組，4 326 mg·kg-1）。灌胃給藥體積為10 mL·kg-1，正常組和模型組給予同體積蒸餾水，每日1 次，連續(xù)給藥21 d，期間自由進食、飲水。

2.3 氨水誘咳實驗觀察大鼠咳嗽狀況給藥30 min后，將大鼠置于多功能誘咳引喘儀內(nèi)，用25%氨水噴霧誘咳15 s 后取出，以大鼠腹肌收縮同時張嘴為標準，記錄大鼠的咳嗽潛伏期及2 min 內(nèi)的咳嗽次數(shù)。

2.4 汗腺分泌功能測定給藥30 min后，以仰臥位固定大鼠，用棉簽蘸取無水乙醇拭去大鼠足后跖污物及汗液；待無水乙醇揮發(fā)干燥后，均勻涂上和田-高原氏A 液（2 g 碘溶于100 mL 無水乙醇中）；待其充分干燥后，再涂一層和田-高原氏B液（25 g可溶性淀粉溶于50 mL 蓖麻油中），及時觀察足跖部紫色著色點的變化。

2.5 自主活動次數(shù)測定使用大鼠自主活動記錄儀記錄大鼠的自主活動次數(shù)，實驗在安靜的環(huán)境下進行。給藥30 min 后，將大鼠放入暗箱內(nèi)，適應(yīng)5 min 后開始記錄5 min內(nèi)大鼠的自主活動次數(shù)。

2.6 睡眠時間測定每只大鼠腹腔注射10%水合氯醛溶液（300 mg·kg-1），以翻正反射消失作為入睡判斷標準，以翻正反射再現(xiàn)為睡眠結(jié)束，計算大鼠的睡眠維持時間。

2.7 曠場實驗評估大鼠自主活動情況在安靜環(huán)境下將動物放入曠場活動實驗系統(tǒng)的方箱底面中心，同時進行攝像和計時，5 min 后停止實驗。在每次實驗結(jié)束后，清理并擦拭方箱，以避免前一次實驗留下的任何氣味干擾下一次實驗。實驗結(jié)束后，量化處理大鼠運動總距離，評價大鼠的自主活動情況。

2.8 大鼠超聲心動圖檢測采用小動物超聲心動儀檢測大鼠的心功能指標。將大鼠麻醉后以仰臥位固定于解剖板上，進行胸前脫毛；在大鼠胸前（心臟正上方）涂上適量超聲耦合劑，將超聲探頭置于左側(cè)胸部；取左室長軸切面，在B-Model 下調(diào)節(jié)圖像深度，進行M-Model超聲測量；取3個連續(xù)心動周期，測量心率（HR）、心輸出量（CO）、左心室射血分數(shù)（LVEF）及左心室短軸縮短率（LVFS）的均值。

2.9 胃殘留率、小腸推進率檢測末次給藥后，大鼠禁食12 h 后，再分別灌胃2 mL 半固體糊（0.5 g 羧甲基纖維素鈉溶于100 mL 蒸餾水中，向其中加入10 g活性炭，攪拌均勻）；30 min 后麻醉大鼠，開腹，結(jié)扎胃賁門和幽門后，取出胃及整段大小腸；測量幽門至回盲腸部全長，以及黑色半固體糊的推進距離；將胃切下后，測定胃全質(zhì)量，然后沿胃大彎剪開胃體，洗去內(nèi)容物后擦干，測定胃凈質(zhì)量。計算：小腸推進率（%）=推進距離/小腸全長×100 %；胃殘留率（%）=［（胃全質(zhì)量-胃凈質(zhì)量）/2 mL 半固體糊的質(zhì)量］×100%。

2.10 樣本收集及檢測末次給藥后，將大鼠置于代謝籠中（禁食不禁水），收集給藥后12 h 的尿液；計量后分裝于10 mL 離心管中，以3 500 r·min-1（離心半徑=12.2 cm）離心10 min，留取上清液即為尿液樣本。然后麻醉大鼠，暴露胸腔，剝離氣管周圍組織；將無菌24G 套管針輕輕插入氣管內(nèi)，使用棉線結(jié)扎；用1 mL 注射器吸取生理鹽水（1 mL）注入肺部，并反復(fù)抽吸，將支氣管肺泡灌洗液（BALF）置于離心管中，重復(fù)操作4 次；將BALF 以3 000 r·min-1（離心半徑=12.2 cm）離心15 min，收集上清液。腹主動脈采血后，剖取心、肝、脾、肺、腎組織，稱質(zhì)量后計算各臟器系數(shù)。樣本儲存于-80 ℃?zhèn)溆谩?/p>

嚴格按照試劑盒說明書步驟操作，分別檢測尿液中UP、MAU 水平；BALF 中IL-4、INF-γ、IgE 水平；血清中CRE、BUN、NO 水平；血漿中MTL、GT、SST水平。

2.11 流式細胞術(shù)檢測肺組織細胞凋亡及其活性氧（ROS）水平將新鮮的肺組織置于1.5 mL 離心管中，加入1 mL PBS，剪切成1 mm3小塊；用PBS 洗滌2 次，并以4 ℃、1 500 r·min-1（離心半徑=12.2 cm）離心2 min 后，棄去上清液。將切碎的肺組織用胰蛋白酶在室溫下消化25 min，加入少量血清終止消化；使用PBS沖洗組織，并通過70 μm過濾器過濾收集細胞。嚴格按照試劑盒說明書步驟操作，使用PE Annexin V細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-PE/7-AAD雙染法）檢測肺組織細胞的凋亡情況；使用DCFHDA熒光探針檢測肺組織細胞的ROS水平。

2.12 HE 染色法觀察相關(guān)組織病理變化分別取大鼠右肺前葉、右腎組織、右側(cè)腋下皮膚組織，于4%多聚甲醛溶液中固定24 h；經(jīng)乙醇梯度脫水、二甲苯透明、石蠟包埋，切成3～5 μm 薄片；組織切片經(jīng)二甲苯脫蠟、乙醇梯度洗脫后，常規(guī)HE 染色；無水乙醇洗脫細胞，二甲苯脫水透明，中性樹膠封片；在光學(xué)顯微鏡下觀察各組織病理變化并進行病理評分。

2.13 統(tǒng)計學(xué)處理方法采用SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析；計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示；多組間比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA），兩兩比較采用Dunnett-t檢驗；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠體質(zhì)量及臟器系數(shù)的影響與正常組比較，模型組大鼠的體質(zhì)量增長緩慢，肺臟、腎臟系數(shù)明顯升高（P＜0.05，P＜0.01），心、肝、脾臟系數(shù)無明顯差異（P＞0.05）；與模型組比較，各給藥組大鼠體質(zhì)量均有不同程度增長，但各組臟器系數(shù)無明顯差異（P＞0.05）。

3.2 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠呼吸系統(tǒng)的影響

3.2.1 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠咳嗽潛伏期及咳嗽次數(shù)的影響 結(jié)果見圖1。與正常組比較，模型組大鼠的咳嗽潛伏期顯著縮短（P＜0.01），咳嗽次數(shù)顯著增多（P＜0.01）。與模型組比較，各給藥組大鼠的咳嗽潛伏期顯著延長（P＜0.01），咳嗽次數(shù)顯著減少（P＜0.05，P＜0.01），其中生物堿和多糖組分的效果接近麻黃。

圖1 各組大鼠的咳嗽潛伏期及咳嗽次數(shù)（±s，n=6）Figure 1 Cough incubation period and cough frequency of rats in each group（±s，n=6）

3.2.2 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠肺組織病理變化的影響 結(jié)果見圖2。正常組大鼠的肺泡結(jié)構(gòu)正常，肺泡壁完整，周圍及腔內(nèi)未見炎癥細胞浸潤。與正常組比較，模型組大鼠的肺泡壁增厚，肺泡上皮細胞發(fā)生脫落，且伴有明顯的炎癥細胞浸潤，局部出現(xiàn)腔內(nèi)血管擴張充血，病理評分顯著升高（P＜0.01）。與模型組比較，各給藥組大鼠的肺泡壁腫脹減輕，肺泡內(nèi)炎癥細胞浸潤及上皮細胞脫落現(xiàn)象有所緩解，病理評分顯著降低（P＜0.05，P＜0.01），其中生物堿組分的改善效果最接近麻黃。

圖2 各組大鼠的肺組織病理學(xué)觀察（HE 染色，×200；±s，n=6）Figure 2 Lung histopathological observation of rats in each group（HE staining，×200；±s，n=6）

3.2.3 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠BALF 中炎癥因子水平的影響 結(jié)果見圖3。與正常組比較，模型組大鼠BALF 中的IL-4、IgE 水平顯著升高（P＜0.01），IFN-γ 的水平顯著降低（P＜0.01）。與模型組比較，各給藥組大鼠BALF 中的IL-4、IgE 水平顯著降低（P＜0.05，P＜0.01），IFN-γ 的水平顯著升高（P＜0.05，P＜0.01），其中生物堿組分的改善效果最接近麻黃。

圖3 各組大鼠支氣管肺泡灌洗液中的炎癥因子水平（±s，n=6）Figure 3 Levels of inflammatory factors in bronchoalveolar lavage fluid of rats in each group（±s，n=6）

3.2.4 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠肺組織細胞凋亡及ROS 水平的影響 結(jié)果見圖4。與正常組比較，模型組大鼠肺組織細胞的凋亡率及ROS 水平顯著升高（P＜0.01）。與模型組比較，各給藥組大鼠肺組織細胞的凋亡率及ROS 水平顯著降低（P＜0.01），作用效果為生物堿組分＞多糖組分＞非生物堿組分。

圖4 各組大鼠肺組織細胞的凋亡情況及活性氧（ROS）水平（±s，n=3）Figure 4 Apoptosis and reactive oxygen species（ROS）levels of lung tissue cells in each group（±s，n=3）

3.3 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠泌尿系統(tǒng)的影響

3.3.1 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠發(fā)汗水平及排尿量的影響 結(jié)果見圖5。與正常組比較，模型組大鼠的足趾汗腺著色點數(shù)無明顯變化（P＞0.05），排尿量顯著降低（P＜0.01）。與模型組比較，麻黃組、生物堿組、多糖組及通宣理肺丸組大鼠的足趾汗腺著色點數(shù)顯著增多（P＜0.05，P＜0.01），麻黃組、生物堿組及通宣理肺丸組大鼠的排尿量顯著增加（P＜0.01）。HE 染色結(jié)果顯示，正常組大鼠腋下皮膚可見正常腺體，腺體呈管狀分布，汗管不擴張，汗腺上皮細胞排列緊密，未見分泌現(xiàn)象。在給予麻黃及生物堿組分干預(yù)30 min 后，觀察到大鼠腋下皮膚汗腺導(dǎo)管及腺體擴張，空泡發(fā)生率較高，腺上皮細胞胞漿豐富，分泌旺盛；多糖組分次之，而非生物堿及通宣理肺丸的作用效果不明顯。

圖5 各組大鼠的發(fā)汗水平、排尿量及腋下皮膚組織病理切片（±s，n=6）Figure 5 The level of sweating，urine output and pathological section of axillary skin tissue of rats in each group（±s，n=6）

3.3.2 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠腎損傷的影響結(jié)果見圖6。與正常組比較，模型組大鼠血清CRE、BUN 水平及尿液UP、MAU 水平均顯著升高（P＜0.05，P＜0.01）。與模型組比較，各給藥組大鼠的血清CRE 水平無明顯變化（P＞0.05），尿液UP 水平顯著降低（P＜0.05，P＜0.01）；麻黃組、生物堿組、多糖組及通宣理肺丸組大鼠的血清BUN 水平及尿液MAU 水平顯著降低（P＜0.05，P＜0.01）。HE 染色結(jié)果顯示，正常組大鼠的腎小球結(jié)構(gòu)清晰，細胞以規(guī)則、結(jié)構(gòu)完整的方式排列，無明顯病理變化。與正常組比較，模型組大鼠腎小球發(fā)生腫脹，腎小球基底膜及腎小囊增厚，壓迫毛細血管袢，并與之發(fā)生粘連，腎小管擴張且排列紊亂，管腔內(nèi)偶見蛋白管型，腎皮質(zhì)或間質(zhì)中偶見炎性細胞浸潤。與模型組比較，麻黃及其生物堿組分可以不同程度改善風(fēng)水水腫模型大鼠的腎臟病理變化，而多糖、非生物堿組分及通宣理肺丸改善效果次之。

圖6 各組大鼠的血清、尿液生化指標及腎臟組織病理切片（±s，n=6）Figure 6 Serum and urine biochemical parameters and renal tissue pathological sections of rats in each group（±s，n=6）

3.4 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠中樞系統(tǒng)的影響

3.4.1 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠自主活動次數(shù)及睡眠時間的影響 結(jié)果見圖7。與正常組比較，模型組大鼠的睡眠時間明顯延長（P＜0.05），自主活動次數(shù)顯著減少（P＜0.01）。與模型組比較，各給藥組大鼠的自主活動次數(shù)顯著增加（P＜0.01），麻黃組、生物堿組及通宣理肺丸組大鼠的睡眠時間顯著縮短（P＜0.05，P＜0.01）。

圖7 各組大鼠的自主活動次數(shù)及睡眠時間（±s，n=5）Figure 7 The number of autonomic activities and sleep time of rats in each group（±s，n=5）

3.4.2 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠活動狀態(tài)的影響 結(jié)果見圖8。與正常組比較，模型組大鼠的活動總距離顯著縮短（P＜0.01）。與模型組比較，麻黃組、生物堿組、多糖組及通宣理肺丸組大鼠的活動總距離顯著延長（P＜0.05，P＜0.01）。其中生物堿組分的改善效果最為明顯且接近麻黃，提示麻黃生物堿組分的藥性偏升浮。

圖8 各組大鼠的活動狀態(tài)及活動總距離（±s，n=6）Figure 8 Activity state and total distance of activity of rats in each group（±s，n=6）

3.5 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠消化系統(tǒng)的影響結(jié)果見圖9。與正常組比較，模型組大鼠的胃殘留率顯著升高（P＜0.01），小腸推進率及血漿MTL、GT 水平顯著下降（P＜0.01），血漿SST 水平無明顯變化（P＞0.05）。與模型組比較，麻黃多糖組大鼠的胃殘留率顯著降低（P＜0.01），小腸推進率及血漿GT水平顯著升高（P＜0.01）；非生物堿組大鼠的血漿SST 水平明顯升高（P＜0.05）。結(jié)果提示，麻黃多糖組分的藥性偏沉降。

圖9 各組大鼠的胃腸運動指標及血漿胃腸激素水平（±s，n=6）Figure 9 The gastrointestinal motility parameters and plasma gastrointestinal hormone levels of rats in each group（±s，n=6）

3.6 麻黃拆分組分對風(fēng)水水腫模型大鼠循環(huán)系統(tǒng)的影響結(jié)果見圖10。與正常組比較，模型組大鼠的血清NO 水平顯著降低（P＜0.01），心功能指標LVEF、LVFS 有下降的趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。與模型組比較，給藥組大鼠的血清NO水平明顯升高（P＜0.05，P＜0.01），生物堿組大鼠的心臟LVFS明顯升高（P＜0.05）。

圖10 各組大鼠的血清NO 水平及心臟功能指標（±s，n=6）Figure 10 Cardiac function parameters and serum NO level of rats in each group（±s，n=6）

4 討論

風(fēng)水的病因病機是衛(wèi)氣不固，外感風(fēng)邪，風(fēng)邪犯肺。故肺的宣發(fā)肅降失常，導(dǎo)致營衛(wèi)不和，進一步引起津液的布散失常，則產(chǎn)生“水腫”?！督饏T要略》中記載：“諸有水者……當發(fā)其汗乃愈……當利小便乃愈”，以“發(fā)汗”和“利尿”為治療原則。麻黃性溫，味苦辛，具有“發(fā)汗解表，宣肺平喘，利水消腫”之功效，為“發(fā)汗解表之要藥”，即麻黃的功效與風(fēng)水水腫的治療原則一致，并且符合“病位在表者宜升浮不宜沉降”的治療原則，因此采用麻黃治療風(fēng)水水腫之癥是可行的。通過查閱文獻發(fā)現(xiàn)，升降浮沉藥性與機體的五大系統(tǒng)（中樞系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)）密切相關(guān)[12-13，17-18]。因此，本研究基于升降浮沉藥性理論假說[3]，設(shè)計了兼有表證的風(fēng)水水腫大鼠模型，通過檢測五大系統(tǒng)相關(guān)指標，同時選擇以麻黃為主要調(diào)節(jié)氣機藥物的臨床常用方劑通宣理肺丸為陽性對照藥，觀察了麻黃各組分對風(fēng)水水腫模型大鼠的改善效果，從而明確麻黃升降浮沉藥性的物質(zhì)基礎(chǔ)。

《景岳全書·腫脹》中指出：“凡水腫等證……其本在腎，其標在肺……故凡治腫者必先治水，治水者必先治氣，若氣不能化，則水必不利”[19-20]。而肺為水之上源，主氣，司呼吸，既能宣發(fā)衛(wèi)氣，調(diào)節(jié)腠理開合，將代謝后的津液化為汗液排出體外；又能肅降肺氣，將體內(nèi)水液向下輸送，經(jīng)腎和膀胱的氣化作用而生成尿液排出體外[21]。因此，當肺功能失調(diào)時，首先影響的是呼吸系統(tǒng)，其次還會影響泌尿系統(tǒng)。在本研究中，通宣理肺丸及麻黃生物堿、非生物堿和多糖三種組分均能不同程度地緩解模型大鼠的咳嗽癥狀，降低肺細胞凋亡及其ROS 水平，并且降低BALF 中炎癥因子IL-4、IgE 水平，改善肺組織病理損傷狀況，其中以麻黃生物堿組分的效果更接近麻黃。除此之外，研究還發(fā)現(xiàn)，生物堿組分能夠增加風(fēng)水水腫模型大鼠的排汗量和排尿量，具有顯著的“發(fā)汗、利尿”功效，作用與麻黃相似；另外，生物堿和多糖組分還可以顯著降低模型大鼠的血清BUN 及尿液UP、MAU 水平，顯著改善大鼠的腎臟病理損傷，治療水腫之癥。結(jié)果提示，麻黃生物堿組分可能通過肺氣宣發(fā)、發(fā)汗解表來改善風(fēng)水水腫之癥，“肺氣宣發(fā)”有外行趨表，輕浮宣散之勢，趨向于外；“發(fā)汗”功效在于疏風(fēng)解表，趨勢由內(nèi)而外，均體現(xiàn)“浮”之藥性。肺氣不宣，吸氣功能減弱，會導(dǎo)致供氧不足而呼吸短促，進而影響中樞系統(tǒng)的功能[22]。麻黃的3 種組分均可不同程度減少風(fēng)水水腫模型大鼠的睡眠時間，增加自主活動次數(shù)和活動總距離，其中生物堿的作用最接近于麻黃。肺清肅之性不順，影響腸道功能，進而會影響整個消化系統(tǒng)功能[23]。麻黃的多糖組分能顯著降低風(fēng)水水腫模型大鼠的胃殘留率，提高小腸推進率以及血漿GT 水平；而生物堿組分在一定程度上表現(xiàn)出抑制胃腸運動，這可能與生物堿組分的升浮藥性有關(guān)；多糖組分促進胃腸運動提示其有向下的作用趨勢，表明多糖組分具有一定的沉降藥性。麻黃生物堿組分可以升高風(fēng)水水腫模型大鼠的LVFS，有改善其心臟功能的作用趨勢，但整體效果不太明顯。因此，麻黃可能通過發(fā)汗、利尿和改善腎臟損傷來治療風(fēng)水大鼠的水腫之癥，其發(fā)揮“升浮”藥性的物質(zhì)基礎(chǔ)可能是生物堿組分，發(fā)揮“沉降”藥性的物質(zhì)基礎(chǔ)可能是多糖組分，二者組合到一起可同時體現(xiàn)升浮和沉降的藥性，提示麻黃的升降浮沉藥性是可拆分或組合的。

綜上所述，麻黃生物堿組分可宣發(fā)肺氣、發(fā)汗解表，作用趨向于外；能興奮神經(jīng)中樞，抑制胃腸運動，作用趨向于上。麻黃多糖組分可促進胃腸運動，作用趨向于下。結(jié)果表明，麻黃生物堿組分藥性屬“升”，多糖組分屬“降”，同時可能也是麻黃發(fā)揮“宣發(fā)肺氣、發(fā)汗解表、利水消腫”功效的物質(zhì)基礎(chǔ)。