雞胚給養(yǎng)調(diào)控雞體健康研究進(jìn)展

■ 何夙旭 吳子林 劉 強(qiáng) 景勝凡 張海軍*

（1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京 100081；2.河北詠諾生物科技有限公司，河北石家莊 050200）

近年來，隨著我國經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展、人民生活水平的提高以及膳食結(jié)構(gòu)的變化，禽肉和蛋的需求量持續(xù)增長。然而，我國畜禽養(yǎng)殖業(yè)長期面臨著飼料資源供應(yīng)不足的問題。為解決飼料糧食安全問題，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部推行了《飼用豆粕減量替代三年行動(dòng)方案》。同時(shí)，我國全面禁止使用抗生素的政策實(shí)施，對(duì)飼料糧食的營養(yǎng)品質(zhì)和安全提出了更高的要求。

肉、蛋雞養(yǎng)殖業(yè)面臨營養(yǎng)不均衡導(dǎo)致的組織性器官病變、長期高溫高濕等熱應(yīng)激反應(yīng)，以及細(xì)菌和病毒引起的疾病等問題[1-2]。雞胚給養(yǎng)技術(shù)對(duì)于提高雛雞一生的免疫力、抗病能力和生產(chǎn)性能以及對(duì)肉雞和蛋雞的健康生產(chǎn)極為重要[3-4]。這可以減少抗生素的使用量，并有效推行蛋禽方面的豆粕減量替代工作，從而實(shí)現(xiàn)高效健康持續(xù)的養(yǎng)殖模式。

在雞胚注射研究領(lǐng)域，美國、以色列、波蘭和印度等國家的研究較為廣泛，大部分已證實(shí)胚胎注射對(duì)提高生產(chǎn)性能、改善腸道發(fā)育、促進(jìn)肌肉和骨骼生長，在增強(qiáng)抗氧化和免疫功能等方面具有顯著效果[5-7]。盡管我國在該領(lǐng)域的研究起步較晚，但越來越多的研究者認(rèn)識(shí)到雞胚給養(yǎng)技術(shù)對(duì)機(jī)體生產(chǎn)性能和健康的重要性。文章對(duì)雞胚給養(yǎng)技術(shù)研究中的注射物質(zhì)種類進(jìn)行了系統(tǒng)綜述，并探討了其在雞的器官發(fā)育、腸道菌群、抗逆性和抗病性等方面的作用，旨在為家禽健康養(yǎng)殖提供另一思路。

1 雞胚給養(yǎng)技術(shù)原理與注射技術(shù)

雞胚給養(yǎng)技術(shù)的原理是直接注射營養(yǎng)物質(zhì)或藥物到雞胚體內(nèi)，以滿足其營養(yǎng)和治療需求。該技術(shù)可以繞過胚胎臟器發(fā)育的限制，直接滿足生長和發(fā)育的需求[8]。在胚胎發(fā)育過程中，不同的胚胎外膜（包括卵黃囊、羊膜、絨毛膜和尿囊）在營養(yǎng)、保護(hù)、呼吸和代謝物存儲(chǔ)方面起重要作用。注射可選擇的部位包括卵黃囊、卵白、羊膜腔和氣室等。通常，在孵化的早期階段，注射目標(biāo)是氣室。在后期階段，當(dāng)胚胎內(nèi)的新生雛鳥攝取羊膜液時(shí)，選擇注射羊膜來輸送化合物。膜腔是胚胎內(nèi)部的中心腔室，可在整個(gè)發(fā)育期間為胚胎提供營養(yǎng)物質(zhì)。因此，注射到羊膜腔一般沒有時(shí)間限制。卵白注射距離胚胎較遠(yuǎn)，操作方便，對(duì)胚胎影響較小，因此應(yīng)用較廣泛。卵黃囊注射適用于注射到卵黃囊內(nèi)的外源物質(zhì)，因?yàn)槁腰S是胚胎發(fā)育過程中的主要營養(yǎng)來源。此外，卵黃囊距離胚胎較遠(yuǎn)，注射后的應(yīng)激反應(yīng)較小[9]。

2 雞胚給養(yǎng)要素研究

目前大部分研究側(cè)重于篩選具有有效調(diào)控作用的營養(yǎng)物質(zhì)，以拓展雞胚注射的營養(yǎng)物質(zhì)范圍。已經(jīng)證實(shí)的有益物質(zhì)主要包括碳水化合物[如葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、果糖、核糖、氨基酸[如甲硫氨酸、半胱氨酸及其代謝物、S-腺苷甲硫氨酸（SAM）、多胺、?；撬?、谷胱甘肽]、礦物元素、維生素、益生元[如菊粉、果寡糖（FOS）、半乳寡糖（GOS）、醇寡糖（MOS）、木寡糖（XOS）、異麥芽寡糖、幾丁寡糖（COS）、綠藻多糖（CPS）]、益生菌（如芽孢桿菌、雙歧桿菌、乳酸菌等）以及合生元等[9-10]。

3 雞胚給養(yǎng)促進(jìn)器官發(fā)育研究

器官發(fā)育在雞的生長和免疫中扮演著重要角色。通過深入了解雞的器官發(fā)育過程和相關(guān)調(diào)控機(jī)制，可以為改善雞的生長性能、提高生產(chǎn)效益和健康水平提供科學(xué)依據(jù)。

3.1 脾臟發(fā)育方面的研究

脾臟是禽類中最大的淋巴器官，由聚集的淋巴細(xì)胞和呈現(xiàn)抗原的細(xì)胞組成，在細(xì)胞免疫和體液免疫中起著關(guān)鍵的作用。對(duì)于不同營養(yǎng)素在胚胎內(nèi)注射對(duì)脾臟發(fā)育和免疫的研究受到廣泛關(guān)注。

在雞胚發(fā)育期（ED）11 時(shí)，胚內(nèi)注射維生素C 顯著增加了脾臟中白細(xì)胞介素-4（IL-4）的表達(dá)，并降低了白細(xì)胞介素1β（IL-1β）和干擾素-γ(IFN-γ)的表達(dá)。這表明維生素C 可以調(diào)節(jié)脾臟免疫反應(yīng)，減輕免疫壓力。此外，維生素C 還調(diào)控了DNA 甲基化（DNMT1 和DNMT3A）和去甲基化（Tet2、Tet3、Gadd45β、MBD4 和TDG）過程。然而，免疫因子的表達(dá)是否與DNA 甲基化變化相關(guān)仍需要進(jìn)一步研究[11]。在孵化后期，免疫器官重量與早期的營養(yǎng)代謝和免疫密切相關(guān)。單獨(dú)注射輔酶Q10 或與維生素E 聯(lián)用均能增加脾臟重量[12]。而在ED18，子宮內(nèi)注射大豆異黃酮可以提高雛雞脾臟重量，并增加抗氧化酶GSH-PX 和SOD mRNA 的表達(dá)，同時(shí)顯著降低免疫細(xì)胞因子IFN-γ和TNF-α的基因表達(dá)[13]。另外，亞麻籽油的注射能夠增加1 日齡肉雞脾臟IFN-γ的表達(dá)，并促進(jìn)肉雞21 d 齡脾臟IL-2和IL-4的表達(dá)[14]。

目前，益生菌研究主要集中在乳酸菌方面。研究表明，在第18 天的胚胎發(fā)育期內(nèi)，通過胚內(nèi)注射腸球菌可以顯著增加出殼雛雞的脾臟重量[15]。此外，在第18 天胚胎發(fā)育期內(nèi)，胚內(nèi)注射多種乳酸菌（包括Lactobacillus salivarius、L.reuteri、L.crispatus和L.johnsonii），可以增加脾臟中干擾素（IFN）α、IFN-β、IFN-γ、白細(xì)胞介素（IL）-8 和IL-12 的表達(dá)。轉(zhuǎn)錄組分析還揭示了不同乳酸菌對(duì)脾臟細(xì)胞因子表達(dá)的差異調(diào)控[16]。此外，合生元注射可以同時(shí)提供有益菌和益生元，有效改善腸道微生態(tài)平衡，提高系統(tǒng)免疫。因此，合生元的應(yīng)用優(yōu)于單獨(dú)使用益生菌或益生元[17-19]。研究還比較了不同合生元組合后對(duì)脾臟中B 淋巴細(xì)胞類型和數(shù)量等指標(biāo)的注射效果，結(jié)果顯示菊粉與乳酸鏈球菌亞種乳酸鏈球菌的組合效果最佳[20]。此外，通過比較在肉用雞羅斯308（ROS）和波蘭本地雞綠腿鷓鴣（GP）胚胎內(nèi)注射乳酸球菌亞種乳酸球菌IBB477、益生寡糖-低聚半乳糖和合生元后的脾臟基因甲基化水平，研究結(jié)果顯示GP 的脾臟中受到調(diào)控的免疫細(xì)胞比例較高，胚胎注射效果也優(yōu)于ROS[5，18]。

3.2 肝臟發(fā)育方面的研究

肝臟作為主要的代謝器官，在營養(yǎng)代謝、脂肪消化、血液蛋白合成以及內(nèi)分泌和外分泌功能等方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。它參與廣泛的新陳代謝和穩(wěn)態(tài)功能，并負(fù)責(zé)合成、代謝、排泄和解毒等過程。

Hassan 等[12]的研究表明，胚胎期單獨(dú)給予輔酶Q10或與維生素E聯(lián)合使用，可以增加肝臟重量，更好地發(fā)揮脂肪代謝功能。有機(jī)酸通常被用作酸化劑，廣泛抑制細(xì)菌和真菌的生長，同時(shí)保護(hù)飼料和宿主免受病原體的危害[12]。盡管甲酸注射于ED4 會(huì)增加死亡率，但與激動(dòng)劑聯(lián)合給予甲酸可以更有效地激活血清、肝臟、心臟和大腦組織中的SOD 抗氧化酶[21]。此外，以往的研究表明精油可以促進(jìn)脂肪和膽固醇代謝。在ED12 給予精油，通過調(diào)控與肉雞肝臟發(fā)育相關(guān)的GUCY2C、MC5R和MTMR6基因的表達(dá)，以及與緊密連接和膽固醇穩(wěn)態(tài)相關(guān)的BVES和CUBN基因的表達(dá)來發(fā)揮功能[22]。

較多研究表明，在胚期給養(yǎng)中添加益生菌、益生元或合生元可以促進(jìn)肝臟發(fā)育。例如，植物乳桿菌組調(diào)控了肝臟中三酰甘油、總膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇含量，降低了肝臟低密度脂蛋白膽固醇含量[23]。蛋室注射寡糖（RFO）和L.plantarumIBB3036，改變了成年肉雞肝臟中重要的產(chǎn)能代謝途徑。具體表現(xiàn)為增加CAC（檸檬酸循環(huán)）、電子傳遞鏈和ATP合成相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)，同時(shí)下調(diào)了有關(guān)應(yīng)激性反應(yīng)如HSP70和EPRS1 蛋白的表達(dá)。這支持了短鏈脂肪酸（SCFAs）下調(diào)脂肪合成通路的觀點(diǎn)，從而減少了肝臟脂肪積累[24]。在ED12 胚胎內(nèi)蛋室注射L.plantarumIBB3036 和拉非糖家族寡糖的合生元后，肝臟蛋白質(zhì)組的結(jié)果顯示參與TCA 循環(huán)和呼吸電子鏈、糖酵解/糖異生、有機(jī)氮化合物生物合成的蛋白質(zhì)以及細(xì)胞骨架蛋白都發(fā)生了變化，表明合生元可以調(diào)控線粒體功能，加速肉雞肝臟中主要能量代謝途徑[5]。不同合生元組合對(duì)雛雞肝臟代謝轉(zhuǎn)錄調(diào)控存在差異，例如GOS+L.salivarius主要激活與免疫過程有關(guān)的基因，而RFO+L.plantarum上調(diào)參與代謝途徑基因的表達(dá)[25]。

3.3 腸道發(fā)育方面的研究

改善早期腸道發(fā)育的方法包括增加腸道指數(shù)和調(diào)節(jié)腸道形態(tài)。例如，調(diào)節(jié)上皮高度和上皮高度/腺狀細(xì)胞高度比。這些措施有助于增強(qiáng)腸道對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收能力。肉雞的腸道健康和發(fā)育的改善已成為當(dāng)前胚蛋注射研究的關(guān)注焦點(diǎn)。

羊膜注射甘油（GLY）和胰島素樣生長因子（IGFI）在ED17.5 的實(shí)驗(yàn)中表明，第14 天時(shí)，IGF-I 組的飼料攝入量和體重增長高于其他組，并且其飼料系數(shù)較低。在21～42 d 期間，IGF-I、GLY 和IGF-I+GLY 均能促進(jìn)體重增加。此外，GLY 還有助于孵化時(shí)以及7 日齡時(shí)回腸絨毛的增高，從而提高消化吸收[26]。另外，胚內(nèi)注射L-精氨酸[4]、L-甲硫氨酸[7，27]、半胱氨酸和賴氨酸[28]均增加了腸道重量、絨毛高度和隱窩深度，改善了腸道上皮的結(jié)構(gòu)和功能完整性。

N-乙酰谷氨酸（NAG）羊膜注射改善了腸道結(jié)構(gòu)，降低了回腸小腸上皮隱窩深度（CD），提高了空腸的絨毛高度（VH）/CD比值，并增強(qiáng)了空腸中肽酶和麥芽糖酶的mRNA 表達(dá)水平，加速了早期的生長性能[29]。維生素D3和25-羥基維生素D3的比較結(jié)果顯示，25-羥基維生素D3處理對(duì)空腸絨毛長度（VL）和腺泡深度（CD）比（RVC）有更顯著的提高，同時(shí)具有更高水平的血漿IgG 含量。這表明25-羥基維生素D3可能因?yàn)槠浒胨テ谳^長或吸收速度較快而具有更顯著的作用效果[30]。

在ED18 期間，比較了胚胎注射無機(jī)硒和有機(jī)硒的影響。結(jié)果顯示，兩者均能增加腸道發(fā)育、GSH-Px活性、體重、生長和飼料轉(zhuǎn)化率，并促進(jìn)早期生長。然而，有機(jī)硒對(duì)絨毛表面積、抗體滴度、淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞比率也有顯著影響，且優(yōu)于無機(jī)硒[31]。另外，在ED18，子宮注射大豆異黃酮可以提高雛雞的絨毛高度，并提高緊密連接蛋白Claudin-1 和免疫因子IGF-1 的表達(dá)水平[13]。相比之下，在ED18 時(shí)，羊膜注射核苷酸對(duì)腸道形態(tài)和發(fā)育沒有顯著影響。然而，腸道發(fā)育的指標(biāo)基因homeobox（Cdx）在早期齡時(shí)有顯著上調(diào)，這也是腸絨毛長度增加的原因之一[32]。

研究表明，益生菌、益生元和合生元對(duì)雞胚注射有積極影響。這些措施可以改善腸道結(jié)構(gòu)，降低小腸上皮塊的深度（CD），提高VH/CD 比值，從而促進(jìn)消化吸收[33-37]。進(jìn)一步的研究也表明，通過調(diào)節(jié)腸道相關(guān)連接蛋白mucin-2、受體蛋白TLR-2、TLR-4、游離脂肪酸受體（FFAR2 和FFAR4）以及免疫因子TNF-α、IL-1β、IL-10 和IL-12p40 等，益生菌注射可以改善腸道屏障完整性[3，17，34，38-39]。此外，通過蛋白質(zhì)組比較Citrobacter 或乳酸菌胚蛋注射對(duì)腸道的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，Citrobacter 可以激活核因子紅細(xì)胞2 相關(guān)因子2（NRF2）介導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)和急性相應(yīng)信號(hào)傳導(dǎo)通路，而乳酸菌激活了糖異生Ⅰ和心血管系統(tǒng)中的一氧化氮信號(hào)傳導(dǎo)通路。在免疫因子調(diào)節(jié)方面，Citrobacter 激活了促炎復(fù)合物核因子κB（NF-κB），導(dǎo)致抗炎和促炎細(xì)胞因子（如IL-1b、Oncostatin M、IL-6 和血管內(nèi)皮生長因子）的上調(diào)[40]。

表皮生長因子是一種生物活性的蛋白質(zhì)，對(duì)皮膚細(xì)胞的生長和再生起著重要作用。注射豬源的表皮生長因子可以增加胚胎發(fā)育過程中表皮生長因子受體（EGFR）的表達(dá)水平。然而，對(duì)育成后的生長性能和腸道發(fā)育是否產(chǎn)生影響尚不清楚[41]。植物提取物因其獨(dú)特的免疫力提升作用，在胚胎營養(yǎng)方面也得到了相關(guān)研究。例如，黃芪多糖（APS）在雞胚注射研究中顯示出可以改善腸道結(jié)構(gòu)和形態(tài)，增加黏膜中IgA+細(xì)胞數(shù)量和分泌性免疫球蛋白A（sIgA）水平。此外，APS 還顯著刺激了白細(xì)胞介素（IL）-2、白細(xì)胞介素（IL）-4、干擾素γ（IFN-γ）和Toll樣受體（TLR）-4基因的表達(dá)水平。這些結(jié)果表明，通過在卵中注射APS，有潛在的促進(jìn)肉雞在孵化后早期階段的腸道發(fā)育和增強(qiáng)腸道黏膜免疫的作用[42-43]。

4 調(diào)控腸道菌群方面的研究

腸道微生物在營養(yǎng)消化和吸收中扮演重要角色，并與免疫系統(tǒng)的發(fā)育密切相關(guān)。在孵化期間，建立良好的腸道菌群狀態(tài)對(duì)于肉雞生長后期的腸道健康至關(guān)重要。

在ED18 時(shí)，通過體內(nèi)注射L-精氨酸（Arg），能夠增加雛雞盲腸早期微生物的α-多樣性，增加乳桿菌目和梭菌目的相對(duì)豐度，同時(shí)減少變形菌門的相對(duì)豐度[4，44]。此外，Arg 還能促進(jìn)乳酸桿菌、瘤胃球菌屬和梭菌屬在盲腸的菌群定植。另外，在ED19 時(shí)通過注射亞麻籽油，能夠增加胚胎期的微生物多樣性，并對(duì)腸道微生物群落進(jìn)行調(diào)節(jié)[14]。

卵內(nèi)注射枯草芽孢桿菌和乳酸菌等益生菌能夠有效調(diào)控腸道菌群，降低大腸菌的數(shù)量，并增加短鏈脂肪酸的產(chǎn)量[23，33，39]。然而，目前對(duì)于通過胚胎內(nèi)注射益生菌實(shí)現(xiàn)胚胎內(nèi)部遷移和腸道定植的研究仍較有限。利用圖像系統(tǒng)觀察組織中大腸桿菌的定植情況，發(fā)現(xiàn)在注入羊膜的卵中，注射后2 h大腸桿菌細(xì)胞數(shù)量顯著高于氣室注射組。此外，大腸桿菌還實(shí)時(shí)遷移至肺、脾臟和腹氣囊。通過圖像系統(tǒng)的評(píng)估表明羊膜體外注射的效果優(yōu)于氣室注射[45]。

在比較不同益生元（如COS 和CPS）的胚蛋應(yīng)用效果時(shí)，由于COS 在水中溶解度較高，能夠快速轉(zhuǎn)運(yùn)到血液和發(fā)育中的腸道，從而發(fā)揮更出色的益生作用[46]。XOS 和MOS 對(duì)腸道菌群產(chǎn)生不同的影響。XOS刺激了梭菌科、固糞鏈球菌科、乳桿菌科、芽孢桿菌科和白塞氏桿菌科等菌的生長，而MOS 則包括鏈霉菌科、布魯氏菌科、乳桿菌科和鏈球菌球菌科[37]。GOS 可以有效穩(wěn)定地促進(jìn)土著菌雙歧桿菌屬的生長，并對(duì)肉雞的腸道環(huán)境長期產(chǎn)生影響[38]。這些結(jié)果表明，在生命早期給予益生菌和益生元可以調(diào)節(jié)腸道微生物群落的組成和結(jié)構(gòu)，并對(duì)腸道環(huán)境產(chǎn)生長遠(yuǎn)的影響。

5 雞胚給養(yǎng)對(duì)抗逆性影響情況

5.1 抗熱應(yīng)激

鑒于肉雞品系生長迅速，產(chǎn)生較多代謝熱，保持適宜環(huán)境溫度至關(guān)重要。然而，在實(shí)際養(yǎng)殖中，高溫環(huán)境對(duì)肉雞的生長和免疫能力有限制作用。肉雞在高溫環(huán)境下傾向于通過行為和生理調(diào)節(jié)來維持體溫，以減少熱產(chǎn)生和增加代謝熱的散失。急性或慢性熱應(yīng)激都會(huì)顯著影響家禽的生長性能。

高溫環(huán)境對(duì)家禽的生長性能有著重要影響?？箟难嶙鳛橐环N有效的熱應(yīng)激緩解物質(zhì)被廣泛應(yīng)用。研究發(fā)現(xiàn)，在ED18 時(shí)注射抗壞血酸可以緩解高溫條件下飼養(yǎng)和孵化引起的單核細(xì)胞數(shù)量的增加，并且阻止了高溫孵化導(dǎo)致的杯狀細(xì)胞減少。此外，抗壞血酸的注射還恢復(fù)了嗜酸性粒細(xì)胞的數(shù)量，在肉雞到41日齡時(shí)仍然具有長期影響[47]。在ED17.5，注射黑種草提取物可以降低高溫孵化條件下雛雞血漿中的MDA 水平，提高血漿中的SOD 水平，并緩解熱應(yīng)激效應(yīng)[48]。在ED17，注射綠原酸（CGA）到雞胚的羊膜腔可以提高高溫養(yǎng)殖條件下不利影響腸道結(jié)構(gòu)的能力，降低血液中AST和ALP 的活性，從而減輕了熱應(yīng)激對(duì)腸道的氧化損傷[49]。在ED17.5，注射GABA 到胚胎的羊膜腔可以降低受熱暴露的雛雞血漿脂質(zhì)過氧化水平，增加孵化時(shí)的肌原紅提取物含量，改善出殼后的生長表現(xiàn)。此外，它還可以降低血漿膽固醇和丙二醛的水平，提高總抗氧化能力，并降低肝臟FAS、L-FABP 和HSP70 mRNA的表達(dá)，提高熱耐受能力[50]。

在ED12，卵內(nèi)注射益生元GOS 可以改善高溫應(yīng)激下雞的飼料轉(zhuǎn)化率，同時(shí)降低體溫并提高成活率[51]。GOS 通過調(diào)節(jié)脾臟中與免疫和應(yīng)激相關(guān)的基因IL-4、IL-12p40、CAT 和SOD 的表達(dá)，提高雞對(duì)熱應(yīng)激的抵抗力[52]。此外，半胱氨酸和賴氨酸等氨基酸也能改善熱應(yīng)激[28]。然而，對(duì)于胚蛋注射來緩解熱應(yīng)激的研究仍處于早期階段，需要進(jìn)一步研究和驗(yàn)證具體的應(yīng)用和效果。

5.2 抗氧化性

肉雞在生長和發(fā)育過程中，會(huì)受到營養(yǎng)中有害物質(zhì)、微生物、高溫高濕等因素的影響，導(dǎo)致代謝產(chǎn)生自由基和其他活性氧化物質(zhì)。當(dāng)這些物質(zhì)積累到高水平時(shí)，可能引發(fā)氧化應(yīng)激，對(duì)細(xì)胞、組織和器官造成損害，進(jìn)而影響肉雞的生長性能和免疫功能。因此，保持肉雞適當(dāng)?shù)目寡趸芰τ兄诰S持其免疫系統(tǒng)的正常功能，增強(qiáng)對(duì)疾病的抵抗力，同時(shí)提高肉雞的生長性能。

肉雞通過攝入富含抗氧化物質(zhì)的飼料，如維生素C、維生素E、硒等，補(bǔ)充體內(nèi)的抗氧化物質(zhì)。目前胚蛋注射抗氧化性的研究也集中在上述營養(yǎng)物。在ED17時(shí)，通過羊膜注射L-抗壞血酸，降低了血清丙二醛（MDA）含量，增加了超氧化物歧化酶（SOD）的活性，從而提升了肉質(zhì)的嫩度[46]。Se以其在動(dòng)物細(xì)胞中平衡新陳代謝和氧化應(yīng)激反應(yīng)方面的作用而聞名。注射LAB-nano-Se 可以提高血液中的總抗氧化能力以及SOD、CAT 和GPX 活性[53]。血漿抗氧化系統(tǒng)是肉雞抗氧化系統(tǒng)的重要組成部分。通常使用T-AOC、GSH-Px、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量來評(píng)估血漿抗氧化能力。ED11 注射VC（血漿檢測(cè)），顯著提高了42日齡（D42）的T-AOC活性。在D35，VC組的T淋巴細(xì)胞SI顯著增加，VC組的溶菌酶活性（D21）顯著增加。此外，VC 組的IgA（D1）和IgM（D1 和21）顯著增加，而VC 組的IgA（D21）呈上升趨勢(shì)[11]。在ED 9，胚外注射錳可上調(diào)胚胎心臟中錳型超氧化物歧化酶mRNA 的表達(dá)[54]。高溫環(huán)境下會(huì)降低后代雛雞的日增重、飼料攝入量、胸肌百分比、血清堿性磷酸酶活性以及胸肉和腿肉的紅色值，但卻增加了飼料轉(zhuǎn)化率、血清門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和乳酸脫氫酶活性、總膽固醇、尿酸和三碘甲狀腺原氨酸含量、腹脂沉積以及后代雛雞胸肉和腿肉的亮度[33]。結(jié)果表明，胚外錳注射可以增強(qiáng)雞胚心臟的抗氧化能力[54]。在ED12，羊膜注射葉酸可以增加十二指腸絨毛的高度、寬度，以及絨毛高度與隱窩深度的比值，同時(shí)也可以增加空腸的絨毛寬度。此外，羊膜注射葉酸還能提高肉用雞胚胎的發(fā)育并改善抗氧化狀態(tài)，表現(xiàn)為丙二醛水平和超氧化物歧化酶活性的增加[55]。在ED14，注射4 株不同雙歧桿菌可降低血清丙二醛含量，增加超氧化物歧化酶活性，并提高血清免疫球蛋白水平（IgA、IgM、IgY和總IgS）[33]。

以上研究表明，胚蛋注射特定抗氧化物質(zhì)（如維生素C、硒等）能增加肉雞的抗氧化能力。他們能清除自由基、防止氧化應(yīng)激、減少細(xì)胞損傷。然而，對(duì)胚蛋注射抗氧化物質(zhì)的具體效果和劑量還需進(jìn)一步研究和驗(yàn)證。

6 雞胚給養(yǎng)提升抗病能力

肉雞和蛋雞養(yǎng)殖中常伴隨著細(xì)菌感染、真菌感染、病毒感染等多種疾病，這給家禽養(yǎng)殖業(yè)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。提高胚蛋注射對(duì)疾病的抗性仍處于初級(jí)階段。研究發(fā)現(xiàn)，將輔酶Q10 直接注射到雞蛋中，能顯著增強(qiáng)整個(gè)飼養(yǎng)期內(nèi)免疫性新城疫病（ND）的抗體水平。此外，第28日齡和第42日齡時(shí)，禽流感AI 和IBD 疾病的抗體水平也顯著提高[12]。同樣，在胚胎18 日齡時(shí)，通過給予不同的天然免疫刺激劑（如未甲基化CpG 寡核苷酸、多肌苷酸聚胞苷酸和禽類抗微生物肽）進(jìn)行兩兩組合試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，CpG+Poly I∶C 組合對(duì)抵抗大腸桿菌感染具有較好的保護(hù)效果，具有較強(qiáng)的抵抗細(xì)菌和病毒病原體的能力[56]。此外，在胚胎7 日齡時(shí)，研究了在Dokki-4 和El-Salam 兩個(gè)品系雞中胚內(nèi)注射蜂王漿對(duì)孵化、生長和血液參數(shù)的影響。發(fā)現(xiàn)蜂王漿能提高孵化率，同時(shí)El-Salam 品系的體重和體重增長顯著高于Dokki-4 品系。此外，蜂王漿注射降低了血液脂質(zhì)譜參數(shù)、單核細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量，并增加了總蛋白、球蛋白、血紅蛋白和淋巴細(xì)胞水平。此外，Dokki-4 品系對(duì)禽流感病毒（AIV）和綿羊紅細(xì)胞（SRBCs）的抗體水平顯著高于El-Salam 品系，而蜂王漿注射則增強(qiáng)了對(duì)AIV、新城疫病毒（NDV）和SRBCs的抗體水平。因此，胚內(nèi)注射蜂王漿在Dokki-4 品系上表現(xiàn)出優(yōu)于El-Salam 品系的應(yīng)用效果[57]。肉雞和蛋雞養(yǎng)殖過程中可能出現(xiàn)多種疾病，如細(xì)菌、真菌和病毒感染等，給家禽養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。早期胚蛋注射提高抗病能力的方法還處于起步階段。研究發(fā)現(xiàn)，直接將輔酶Q10注射到雞蛋中能夠顯著增加整個(gè)飼養(yǎng)期ND 疾病的抗體滴度。此外，在28、42日齡時(shí)，雞蛋注射輔酶Q10還能明顯提高對(duì)AI 和IBD 疾病的抗體滴度[12]。另一項(xiàng)研究表明，ED 18，在雞蛋中注射納米銀和微量元素或氨基酸組合，發(fā)現(xiàn)與維生素（B1 和B6）以及微量元素（Zn 和Se）結(jié)合的納米銀能顯著提高感染vND 病毒肉雞的存活周期。此外，在感染vND 病毒后的24 h 內(nèi)，注射納米銀的肉雞表現(xiàn)出更高水平的IL-6 和IL-2 基因表達(dá)。納米銀還能增強(qiáng)雞仔對(duì)新城疫病毒的免疫應(yīng)答和抗病性[58]。

7 小結(jié)與展望

鑒于以上討論，我們可以得出結(jié)論：雞胚注射技術(shù)在營養(yǎng)與健康領(lǐng)域具有廣闊應(yīng)用前景。近年來，創(chuàng)新發(fā)展與應(yīng)用已建立了營養(yǎng)研究模型，研究了營養(yǎng)功能、營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)與代謝，評(píng)估了功能性營養(yǎng)成分并探索了營養(yǎng)與疾病關(guān)聯(lián)。這些工作推動(dòng)了營養(yǎng)與健康領(lǐng)域的進(jìn)一步發(fā)展。胚期營養(yǎng)與腸道微生物、腸道健康的關(guān)系已經(jīng)初步明確。未來，雞胚注射技術(shù)需要建立全面、系統(tǒng)化的胚蛋應(yīng)用評(píng)價(jià)體系，綜合考慮胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖與器官形成、健康和免疫等指標(biāo)。此外，還需要加強(qiáng)功能基因研究，將雞胚注射技術(shù)與基因編輯技術(shù)結(jié)合，研究營養(yǎng)、免疫、細(xì)胞分化等相關(guān)基因的功能。通過在雞胚內(nèi)操縱特定基因或調(diào)節(jié)其表達(dá)水平，進(jìn)一步了解這些基因在營養(yǎng)代謝和健康維持中的作用，從而有助于解析營養(yǎng)與基因之間的相互作用。這將擴(kuò)展?fàn)I養(yǎng)與健康研究領(lǐng)域，深入了解其在胚蛋發(fā)育中的作用和調(diào)控機(jī)制。