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    結(jié)核抗體檢驗(yàn)在肺結(jié)核鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值

    2024-01-25 16:53:50廖育榮
    中國(guó)醫(yī)藥指南 2024年2期
    關(guān)鍵詞:蛋白芯片免疫吸附膠體金

    廖育榮

    廈門(mén)大學(xué)附屬第一醫(yī)院,廈門(mén) 361000

    肺結(jié)核為臨床常見(jiàn)的慢性傳染性疾病,多由結(jié)核分枝桿菌感染導(dǎo)致,患病后隨病情進(jìn)展可對(duì)機(jī)體重要臟器造成一定損傷,嚴(yán)重影響患者生命健康[1]。報(bào)道顯示,目前肺結(jié)核發(fā)病率仍呈每年上升趨勢(shì),且由于肺結(jié)核早期缺乏典型特征,癥狀受病情影響較大,臨床早期診斷具有一定難度,易延誤患者病情、影響預(yù)后[2-3]。以往臨床多通過(guò)細(xì)菌學(xué)檢查進(jìn)行確診,但由于傳統(tǒng)涂片抗酸染色敏感性較低,分枝桿菌培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),對(duì)于早期診斷存在一定局限性[4]。目前結(jié)核抗體檢驗(yàn)已逐漸應(yīng)用于肺結(jié)核評(píng)估診斷中,隨檢驗(yàn)方法不斷改善,其敏感度及特異度均有所提高,但不同檢驗(yàn)方法間診斷準(zhǔn)確性仍存在較大差異,而結(jié)核菌素(purified protein derivative,PPD)試驗(yàn)為一種利用結(jié)核菌感染后對(duì)結(jié)核蛋白產(chǎn)生變態(tài)反應(yīng)的輔助診斷方案,但檢查結(jié)果易受外界因素干擾[5-6]。目前臨床鮮有研究對(duì)比不同結(jié)核抗體檢驗(yàn)方案及PPD 試驗(yàn)對(duì)肺結(jié)核的診斷準(zhǔn)確率?;诖?,本研究試分析結(jié)核抗體檢驗(yàn)聯(lián)合PPD 試驗(yàn)在肺結(jié)核鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

    1 對(duì)象與方法

    1.1 研究對(duì)象 選取130 例我院2021 年8 月至2022 年8 月就診的疑似肺結(jié)核患者作為研究對(duì)象。其中男75 例(57.69%),年齡22~72 歲,平均(54.84±6.25)歲;平均BMI(22.84±1.05)kg/m2。

    納入標(biāo)準(zhǔn):均經(jīng)臨床初步診斷為疑似肺結(jié)核患者;可接受本研究檢查方案;患者及家屬知曉本研究,并簽訂同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn):合并其他呼吸系統(tǒng)疾病者;合并肺部惡性腫瘤;合并肝、腎等重大臟器功能障礙者;合并自身免疫系統(tǒng)疾病、循環(huán)系統(tǒng)疾病者;合并其他感染性疾病者;合并精神異常或檢查依從性較差者。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

    1.2 方法 兩大類(lèi)方法具體步驟如下:

    結(jié)核抗體檢驗(yàn):采集所有患者入院后次日晨起空腹?fàn)顟B(tài)下外周靜脈血5 ml,37℃條件下經(jīng)離心半徑8 cm、3500 r/min 離心10 min 后,分離血清于-20℃冰箱保存待測(cè)。分別進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附法、蛋白芯片法、膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn),其中酶聯(lián)免疫吸附法檢驗(yàn)試劑盒購(gòu)于程度永安生物制藥有限公司,采用GF-M3000 型酶標(biāo)儀及PW-960 型自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī);蛋白芯片法檢驗(yàn)試劑盒購(gòu)于南京大淵生物科技公司;膠體金法檢驗(yàn)試劑盒購(gòu)于上海奧普生物科技公司。所有操作均嚴(yán)格按照儀器及試劑盒相關(guān)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

    PPD 試驗(yàn):于患者前臂掌側(cè)采用1 ml 注射器皮內(nèi)注射0.1 ml 含5 IU 的PPD 試劑,于注射后48~72 h觀察記錄硬結(jié)平均直徑,若硬結(jié)直徑≤4 mm 為陰性,5~9 mm 為弱陽(yáng)性,10~19 mm 為陽(yáng)性,≥20 mm 或局部發(fā)生壞死、水泡、潰爛等為強(qiáng)陽(yáng)性。本研究將陽(yáng)性及強(qiáng)陽(yáng)性納入陽(yáng)性診斷結(jié)果。

    1.3 觀察指標(biāo) 觀察分析下列指標(biāo):

    (1)統(tǒng)計(jì)酶聯(lián)免疫吸附法、蛋白芯片法、膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)診斷結(jié)果。

    (2)比較酶聯(lián)免疫吸附法、蛋白芯片法、膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)診斷效能。

    (3)膠體金法、PPD 試驗(yàn)單獨(dú)及二者聯(lián)合診斷結(jié)果,聯(lián)合診斷結(jié)果采用并聯(lián)原則。

    (4)比較膠體金法、PPD 試驗(yàn)單獨(dú)、聯(lián)合診斷效能。

    (5)比較膠體金法、PPD 試驗(yàn)單獨(dú)、聯(lián)合診斷對(duì)不同類(lèi)型肺結(jié)核檢出率。

    診斷效能相關(guān)公式:

    特異度=真陰性數(shù)/真陰性數(shù)+假陽(yáng)性數(shù);

    靈敏度=真陽(yáng)性數(shù)/真陽(yáng)性數(shù)+假陰性數(shù);

    準(zhǔn)確度=檢測(cè)正確的數(shù)量(真陽(yáng)性+真陰性)/總檢測(cè)樣本數(shù)量×100%;

    陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=真陽(yáng)性例數(shù)/(真陽(yáng)性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù));

    陰性預(yù)測(cè)值=真陰性例數(shù)/(真陰性例數(shù)+假陰性例數(shù))。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0 軟件對(duì)不同數(shù)據(jù)類(lèi)型進(jìn)行處理分析,計(jì)量資料用表示,計(jì)數(shù)資料用n(%)表示,兩組間比較行χ2檢驗(yàn),默認(rèn)雙側(cè)檢驗(yàn),P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 不同結(jié)核抗體檢驗(yàn)診斷結(jié)果 經(jīng)臨床診斷結(jié)果顯示,130 例疑似肺結(jié)核患者中,陽(yáng)性82 例,陰性48例。經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附法結(jié)核抗體檢驗(yàn)結(jié)果顯示,陽(yáng)性54 例;經(jīng)蛋白芯片法結(jié)核抗體檢驗(yàn)結(jié)果顯示,陽(yáng)性60 例;經(jīng)膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)結(jié)果顯示,陽(yáng)性71 例。見(jiàn)表1。

    表1 不同結(jié)核抗體檢驗(yàn)診斷結(jié)果(例)

    2.2 不同結(jié)核抗體檢驗(yàn)診斷效能比較 與酶聯(lián)免疫吸附法、蛋白芯片法比較,膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)對(duì)于肺結(jié)核診斷靈敏度82.93%(68/82)、準(zhǔn)確度86.92%(113/130)較高,漏診率17.07%(14/82)較低(P<0.05)。見(jiàn)表2。

    表2 不同結(jié)核抗體檢驗(yàn)診斷效能比較 [例(%)]

    2.3 膠體金法、PPD 試驗(yàn)單獨(dú)、聯(lián)合診斷結(jié)果 經(jīng)PPD 試驗(yàn)診斷結(jié)果顯示,130 例疑似肺結(jié)核患者中,陽(yáng)性72 例;經(jīng)膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)聯(lián)合PPD 試驗(yàn)診斷結(jié)果顯示,陽(yáng)性82 例。見(jiàn)表3。

    表3 膠體金法、PPD試驗(yàn)單獨(dú)、聯(lián)合診斷結(jié)果(例)

    2.4 膠體金法、PPD 試驗(yàn)單獨(dú)、聯(lián)合診斷效能 與膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)、PPD 試驗(yàn)單獨(dú)診斷比較,聯(lián)合診斷靈敏度96.34%(79/82)、準(zhǔn)確度95.38%(124/130)較高,漏診率3.66%(3/82)較低(P<0.05)。見(jiàn)表4。

    表4 膠體金法、PPD試驗(yàn)單獨(dú)、聯(lián)合診斷效能 [例(%)]

    2.5 不同類(lèi)型肺結(jié)核檢出率比較 經(jīng)臨床診斷結(jié)果顯示,82 例肺結(jié)核患者中,原發(fā)性肺結(jié)核21 例,血行播散性肺結(jié)核14 例,繼發(fā)性肺結(jié)核35 例,結(jié)核性胸膜炎12 例。與膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)、PPD 試驗(yàn)單獨(dú)診斷比較,聯(lián)合診斷對(duì)于血行播散性肺結(jié)核、結(jié)核性胸膜炎檢出率較高(P<0.05)。見(jiàn)表5。

    表5 不同類(lèi)型肺結(jié)核檢出率比較 [例(%)]

    3 討論

    肺結(jié)核為臨床常見(jiàn)呼吸系統(tǒng)傳染性疾病,目前診斷肺結(jié)核主要通過(guò)痰涂片染色鏡檢,結(jié)合X 線胸片檢查,根據(jù)結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行確診,但分離培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),且X 線檢查缺乏特異性,易出現(xiàn)誤診、漏診等現(xiàn)象,延誤患者最佳治療時(shí)機(jī),影響預(yù)后恢復(fù)[7-8]。因此,積極探討肺結(jié)核早期評(píng)估診斷方案具有重大意義。

    血清學(xué)抗體免疫檢測(cè)技術(shù)為結(jié)核病診斷方案之一,具有簡(jiǎn)便快捷、特異性、敏感性高等優(yōu)勢(shì),對(duì)于肺結(jié)核、肺外結(jié)核鑒別診斷具有一定價(jià)值[9]。本研究通過(guò)比較不同結(jié)核抗體檢驗(yàn)方法對(duì)肺結(jié)核診斷價(jià)值,結(jié)果發(fā)現(xiàn),膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)對(duì)于肺結(jié)核診斷靈敏度、準(zhǔn)確度均高于酶聯(lián)免疫吸附法、蛋白芯片法,提示臨床可通過(guò)膠體金法進(jìn)行結(jié)核抗體檢驗(yàn),以提高肺結(jié)核診斷準(zhǔn)確率。報(bào)道顯示,TBSA(結(jié)核分枝桿菌基因)為一種特異性較高的結(jié)核分枝桿菌分泌抗原,易被機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別并產(chǎn)生特異性抗體[10-11],而酶聯(lián)免疫吸附法結(jié)核抗體檢驗(yàn)通過(guò)酶聯(lián)免疫間接檢測(cè)樣本中TBSA 結(jié)核抗體IgG,檢測(cè)不受結(jié)核菌素試驗(yàn)影響,對(duì)于無(wú)痰性結(jié)核病、菌陰結(jié)核病及肺外結(jié)核病特異性較高。結(jié)核蛋白芯片法為一種以微孔濾膜為載體,利用微陣列技術(shù)將純化的種抗原固相于同一濾膜上,加入血清標(biāo)本反應(yīng)后,經(jīng)顯色系統(tǒng)利用專(zhuān)用芯片閱讀儀、軟件分析顯色后的芯片,對(duì)多種結(jié)核抗體進(jìn)行同步檢測(cè),可有效區(qū)分活動(dòng)性肺結(jié)核及穩(wěn)定性肺結(jié)核[12]。而膠體金法以結(jié)核特異性外膜成分LAM 為標(biāo)記抗原,通過(guò)標(biāo)記抗原檢測(cè)血清中結(jié)核分枝桿菌抗體,結(jié)核IgG 抗體可特異性與葡萄球菌A蛋白膠體金綴合物結(jié)合顯色,從而有效鑒別診斷結(jié)核分枝桿菌感染[13]。國(guó)內(nèi)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),采用膠體金法檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌感染靈敏度及特異度分別為78.32%、89.25%,對(duì)于復(fù)治型肺結(jié)核抗體陽(yáng)性檢出率可達(dá)85.45%,具有較高診斷價(jià)值[14]。本研究與其結(jié)果基本一致。

    PPD 試驗(yàn)?zāi)壳耙褟V泛應(yīng)用于結(jié)核分枝桿菌感染診斷中,對(duì)于兒童、青少年結(jié)核病篩查具有較高應(yīng)用價(jià)值,通過(guò)TB-PPD 皮膚試驗(yàn)后,48~72 h 即可判斷結(jié)核菌感染情況[15]。本研究結(jié)果顯示,膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)聯(lián)合PPD 試驗(yàn)對(duì)于肺結(jié)核診斷準(zhǔn)確度可達(dá)95.38%,提示臨床可通過(guò)膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)、PPD 試驗(yàn)聯(lián)合應(yīng)用于早期篩查結(jié)核分枝桿菌感染,以提高診斷靈敏度,減少漏診、誤診現(xiàn)象發(fā)生,且兩種檢測(cè)方法操作均較為簡(jiǎn)便,可相互補(bǔ)充,有助于疑似肺結(jié)核痰涂片結(jié)果陰性患者診斷。此外,本研究還發(fā)現(xiàn),膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)、PPD 試驗(yàn)聯(lián)合診斷對(duì)于血行播散性肺結(jié)核、結(jié)核性胸膜炎檢出率較高,臨床可通過(guò)聯(lián)合診斷結(jié)果針對(duì)性制訂治療方案。

    綜上所述,膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)對(duì)于肺結(jié)核具有較高診斷價(jià)值,臨床可通過(guò)膠體金法結(jié)核抗體檢驗(yàn)聯(lián)合PPD 試驗(yàn)對(duì)肺結(jié)核進(jìn)行早期篩查,以提高診斷準(zhǔn)確性。

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