孫亞茹, 王建科, 蔡吉松, 彭安權(quán), 錢 娟, 周 容, 姚 斌, 沈 軍, 陳 漢, 孟祥書(shū)
(1. 余慶縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,貴州 余慶 564400;2. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué),河北 保定 071000;3. 遵義盛祥農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司,貴州 余慶 564400;4. 余慶縣益寵康動(dòng)物診所,貴州 余慶 564400)
犬細(xì)小病毒病是由犬細(xì)小病毒(Canineparvovirus,CPV)引起的急性、高度接觸性傳染病[1]。該病可導(dǎo)致嚴(yán)重的出血性胃腸炎或心肌炎,并伴有淋巴細(xì)胞減少癥,多發(fā)于2~6月齡幼犬和未接種疫苗的犬,純種犬易感性較高[2~4]。自20世紀(jì)70年代首次發(fā)現(xiàn)CPV-2型以來(lái),已出現(xiàn)3種變異株(CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c)[5]。目前部分商品疫苗使用CPV-2b毒株,部分疫苗仍然使用原始的CPV-2毒株,導(dǎo)致免疫效果欠佳或免疫失敗[6],因此快速診斷和治療該病在臨床上具有重要意義?,F(xiàn)將3例犬細(xì)小病毒病的臨床診治情況介紹如下,供同行參考。
病例1:2023年3月3日接診,金毛犬、雌性、3月齡、體重3 kg,3月1日發(fā)生嘔吐、精神不振,3日腹瀉嚴(yán)重且有腥臭味,體溫38.5 ℃,鼻鏡干燥。病例2:2023年 4月7日接診,雜交泰迪犬、雄性、6月齡、8 kg,嘔吐1天,體溫38.9 ℃,精神不振,鼻鏡干燥,排醬樣稀便并有惡臭味。病例3:2023年4月9日接診,德國(guó)牧羊犬、雄性、4月齡、體重13 kg,嘔吐1天,體溫37.5 ℃,排血水樣糞便并有惡臭味。根據(jù)病犬的臨床癥狀,疑似犬細(xì)小病毒感染。
2.1 CPV試條管檢查
用棉簽采集犬的新鮮糞便,使用上海快靈生物工程有限公司生產(chǎn)的犬細(xì)小病毒抗原檢測(cè)封閉免疫試條管(膠體金法),按說(shuō)明書(shū)方法進(jìn)行檢測(cè)(檢測(cè)線T和質(zhì)控線C均出現(xiàn)1條紅色條帶,無(wú)論顏色深淺均判為陽(yáng)性;僅質(zhì)控線C出現(xiàn)1條紅色條帶,檢測(cè)線T不出現(xiàn)紅色條帶,判為陰性;質(zhì)控線C未出現(xiàn)紅色條帶,無(wú)論檢測(cè)線T是否出現(xiàn)紅色條帶,均判為無(wú)效),結(jié)果3例病犬均為CPV陽(yáng)性(見(jiàn)圖1)。
病例1 病例2 病例3圖1 CPV試條管檢測(cè)結(jié)果
2.2 血常規(guī)檢查
采集病例2、病例3血液(病例1因犬主拒絕未檢查),用邁瑞B(yǎng)C-2800型動(dòng)物血液細(xì)胞分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢查。由表1可見(jiàn):病例2紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積升高,說(shuō)明病犬有脫水現(xiàn)象;其他指標(biāo)正常,無(wú)繼發(fā)細(xì)菌感染。病例3紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積升高,說(shuō)明病犬有脫水現(xiàn)象;淋巴細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比升高,中性粒細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比降低,感染情況較重。
表1 病犬血常規(guī)檢查結(jié)果
2.3 CPV核酸PCR檢測(cè)
分別采集3只病犬的新鮮糞便或肛門拭子,使用TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0試劑盒[寶生物工程(大連)有限公司]提取DNA,參照文獻(xiàn)報(bào)道引物(P1-AGAATGATAGGCGG TTTGTGTGT,F1-CTTTGTTTCCTGTGCTGTCGT)[7],按2×M5TaqHiFi PCR Mix(北京聚合中美生物科技有限公司,型號(hào):MF002-10)說(shuō)明書(shū)方法,使用TGreat Expert梯度PCR儀(TIANGEN公司,型號(hào):OSE-GP-03)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物使用電泳儀(北京東方瑞利科技有限公司,型號(hào):DYY-300C)經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳。結(jié)果:3份樣品均擴(kuò)增出973 bp目的條帶(見(jiàn)圖2),判定3例病犬均存在CPV感染。
M:DL 2 000 DNA Marker;1:陽(yáng)性對(duì)照;2:陰性對(duì)照;3:病例1肛門拭子;4:病例2糞便;5:病例3糞便
根據(jù)病犬臨床癥狀及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果,確診3例病犬均為犬細(xì)小病毒病。
4.1 特異性治療
0.9%氯化鈉10 mL+犬細(xì)小病毒單克隆抗體0.5 mL/kg,靜脈注射,1次/天,連用1周;0.9%氯化鈉10 mL+犬細(xì)小病毒高免血清0.5 mL/kg,靜脈注射,1次/天,連用1周;0.9%氯化鈉10 mL+白蛋白0.5 mL/kg,靜脈注射,1次/天,連用1周。
4.2 對(duì)癥治療控制繼發(fā)感染
5%糖鹽水50 mL+氨芐西林鈉50 mg/kg,靜脈注射,1次/天,連用1周;5%糖鹽水50 mL+維生素C 60 mg/kg+維生素B 30 mg/kg+止血敏0.1 mL/kg+慶大霉素2萬(wàn)IU/kg,靜脈注射,1次/天,連用1周(癥狀好轉(zhuǎn)后藥量減半);5%糖鹽水5 mL+恩諾沙星0.5 mL/kg,肌肉注射,1次/天,連用1周;0.9%氯化鈉100 mL+50%葡萄糖注射液50 mL,靜脈注射,1次/天,連用1周。
4.3 輔助治療
干擾素20萬(wàn)U/kg、抑菌蛋白0.1 mL/kg、氫溴酸東莨菪堿1 mL,分別肌肉注射,1次/天,癥狀好轉(zhuǎn)停止用藥。
經(jīng)上述方法治療1周后,3只病犬臨床癥狀完全消失,精神狀態(tài)良好,飲食恢復(fù)正常。
5.1犬細(xì)小病毒病臨床多發(fā),潛伏期為3~7天,發(fā)病急,病程短,不及時(shí)治療易導(dǎo)致死亡[8]。治療時(shí)多采用綜合療法,包括補(bǔ)液、止吐、控制繼發(fā)感染、抗病毒及其他輔助治療和飲食管理[9]。在治療過(guò)程中可能出現(xiàn)病情加重的情況,應(yīng)注意與腸套疊、其他病毒感染等區(qū)別。此外,該病毒對(duì)腸腺隱窩的破壞可引起絨毛萎縮、腹瀉、嘔吐、腸出血、繼發(fā)細(xì)菌感染[3],應(yīng)注意止血、止吐、平衡酸堿、補(bǔ)充電解質(zhì)和體液,并進(jìn)行抗病毒和抗菌治療。本次治療的3例病犬臨床表現(xiàn)均為腸炎型,出現(xiàn)嘔吐、腹瀉后立即就醫(yī),病例1、3治療3~5天臨床癥狀基本穩(wěn)定,但病例2在治療第2、3天時(shí)病情加重,通過(guò)繼續(xù)采用特異性治療+對(duì)癥治療+輔助治療的綜合治療方法,1周后康復(fù)。
5.2犬細(xì)小病毒病臨床上有52%的病例表現(xiàn)為心肌炎型[10],對(duì)于心肌炎型病例的治療方法探究也需要加以考慮。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,心肌炎型多見(jiàn)于4~6周齡幼犬,未出現(xiàn)臨床癥狀就突然死亡,或出現(xiàn)嚴(yán)重呼吸困難后死亡[11],而大部分幼犬因母源抗體的保護(hù),不易出現(xiàn)急性心肌炎癥狀[5]。
5.3對(duì)于犬細(xì)小病毒病的預(yù)防,一要加強(qiáng)消毒:CPV對(duì)普通消毒劑有較強(qiáng)的抵抗力,但對(duì)紫外線、福爾馬林、次氯酸鈉、氧化劑比較敏感,要定期對(duì)犬舍、飼養(yǎng)用具、周圍環(huán)境使用不同消毒液進(jìn)行交替消毒。二要加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng),提高免疫力:合理搭配犬飼糧,保證營(yíng)養(yǎng)全面,適當(dāng)補(bǔ)充維生素,提高機(jī)體免疫力,減少疾病發(fā)生。三要及時(shí)免疫:注射CPV疫苗是預(yù)防該病的重要方法。目前,市場(chǎng)上多用國(guó)產(chǎn)犬五聯(lián)疫苗或者進(jìn)口犬四聯(lián)、八聯(lián)疫苗進(jìn)行免疫。此外建議使用WSAVA(世界小動(dòng)物獸醫(yī)協(xié)會(huì))推薦的犬核心疫苗(犬細(xì)小病毒、犬瘟熱、犬腺病毒),可有效預(yù)防個(gè)體感染,確保群體免疫[4]。根據(jù)寵物疫苗接種國(guó)際指南,使用改良減毒活疫苗給成年犬接種頻率不超過(guò)3年[12~14]。