白及銹病病原菌的鑒定及抗銹病資源篩選

DOI： 10.11931/guihaia.gxzw202311040

吳巧芬， 馬曉雅， 夏科， 等， 2024.

白及銹病病原菌的鑒定及抗銹病資源篩選 ［Ｊ］.

廣西植物， 44（6）： 1129-1137.

WU QF， MA XY， XIA K， et al.， 2024.

Identification of Bletilla striata rust pathogen and resistance resources screening ［J］.

Guihaia， 44（6）： 1129-1137.

摘" 要：" 為鑒定引起廣西種植區(qū)白及銹病的病原菌種類且篩選抗銹病的白及資源，該研究對白及銹病病原菌進行分離，并采用形態(tài)學和分子生物學的方法對病原菌進行鑒定，同時通過人工接種病原菌法對23份白及進行銹病抗性評價以及篩選抗銹病的白及資源。結果表明：（1）從白及感病葉片中分離的銹病病原菌X2夏孢子呈金黃色，卵圓形或橢圓形，大小為（21.43～30.95） μm × （13.10～19.05） μm；冬孢子呈橘紅色、紅褐色，倒卵形或棍棒狀，大小為（17.25～30） μm × （5.5～6.65） μm。（2）把菌株X2全長689 bp的ITS序列（OQ826009）與GenBank 已登陸的序列進行相似性分析發(fā)現(xiàn)，菌株X2與Coleosporium sp.（KY783686.1）匹配度最高，序列一致性為95.86%，但系統(tǒng)發(fā)育樹表明，X2與Coleosporium bletiae （MN108161.1，OP363680.1）聚為一類群；結合形態(tài)學和分子生物學的方法，鑒定菌株X2為Coleosporium bletiae。（3）人工接種菌株X2 14 d后，23份白及的病情指數范圍在0～70.7之間，并根據病情指數將 ２３ 份白及劃分為 ６ 個抗性等級，即表現(xiàn)為免疫的白及1份，病情指數為0；表現(xiàn)為高抗的白及4份，病情指數為1.7～4.7；表現(xiàn)為抗病的白及6份，病情指數為5.6～9.4；表現(xiàn)為中抗的白及5份，病情指數為12.7～18.3；表現(xiàn)為感病的白及5份，病情指數為32.0～49.1；表現(xiàn)為高感的白及2份，病情指數為62.2～70.7。綜上認為，表現(xiàn)為免疫和高抗的5份白及（分別來自云南紅河、廣西恭城、廣西百色、貴州遵義、湖北宜昌）病情指數低、抗銹病能力強，可推廣應用或作為培育抗銹病優(yōu)良種質的親本材料。該研究結果為后續(xù)開展白及銹病的有效防治與致病機理研究提供了支撐。

關鍵詞： 白及， 銹病， 病原菌鑒定， 鞘銹菌， 抗病資源

中圖分類號：" Q945.8

文獻標識碼：" A

文章編號：" 1000-3142（2024）06-1129-09

收稿日期：" 2024-02-28" 接受日期： 2024-04-21

基金項目：" 廣西重點研發(fā)計劃項目 （桂科AB18294026）； 桂林市技術應用與推廣計劃項目 （20220135-1）； 廣西科學院園藝植物種質資源創(chuàng)新及利用創(chuàng)新研究團隊啟動經費項目 （CQZ-E-1919）； 廣西植物研究所基本業(yè)務費項目 （桂植業(yè)24011）； 廣西植物功能物質與資源持續(xù)利用重點實驗室自主研究課題（ZRJJ2023-9）。

第一作者： 吳巧芬（1993—），碩士，助理研究員，主要從事藥用植物栽培研究，（E-mail） 2547508570@qq.com。

*通信作者：" 鄭文俊，博士，教授，主要從事民族鄉(xiāng)土景觀及風景旅游規(guī)劃研究，（E-mail）149480860@qq.com； 仇碩，博士，副研究員，主要從事園藝植物種質資源創(chuàng)新與利用研究，（E-mail）qiushuo001@163.com。

Identification of Bletilla striata rust pathogen

and resistance resources screening

WU Qiaofen1， MA Xiaoya1，2， XIA Ke1， LU Xi1，2， LIU Qiao1，

ZHAO Zhiguo1， ZHENG Wenjun2*， QIU Shuo1*

（ 1. Guangxi Key Laboratory of Plant Functional Phytochemicals and Sustainable Utilization， Guangxi Institute of Botany， Guangxi

Zhuang Autonomous Region and Chinese Academy of Sciences， Guilin 541006， Guangxi， China; 2. College of Tourism amp;

Landscape Architecture， Guilin University of Technology， Guilin 541006， Guangxi， China ）

Abstract：" In order to identify the pathogen that caused rust of Bletilla striata in Guangxi Zhuang Autonomous Region and to screen resistance resources for B. striata， the rust pathogen was isolated from infected leaves of B. striata and identified using morphology and molecular methods. At the same time， the resistance of 23 B. striata from different regions was evaluated by artificial inoculation of pathogen. The results were as follows： （1） The urediopores of strain X2 isolated from diseased leaves in B. striata were golden yellow， oval， （21.43-30.95） μm × （13.10-19.05） μm. The teleutospores were golden yellow， obovate or clavate， （17.25-30） μm × （5.5-6.65） μm. （2） The length of ITS sequence of strain X2（OQ826009） was 689 bp， which were compared with other ITS sequences in the GenBank， and the similarity reached 95.86% compared with Coleosporium sp. （KY783686.1）. But the phylogenetic tree showed that the sequence was clustered together with two sequences of Coleosporium bletiae （MN108161.1， OP363680.1）. The strain X2 was identified as Coleosporium bletiae by combining morphology and molecular methods. （3） After 14 days of artificial inoculation with strain X2， the disease index of 23 Bletilla striata ranged from 0 to 70.7. And the resistance of strain X2 from 23 B. striata were divided into six different levels according to the disease index. Among them， one immune materials was identified for the disease index was 0. Four highly resistant materials were identified for the disease index was 1.7-4.7. Six disease-resistant materials were identified for the disease index was 5.6-9.4. Five medium-resistant materials were identified for the disease index was 12.7-18.3. Five susceptible materials were identified for the disease index was 32.0-49.1 and two highly susceptible materials were identified for the disease index was 62.2-70.7. In conclusion， five materials （one immune material and four highly resistant materials） of B. striata from different places

（Honghe City in Yunnan Province， Gongcheng County and Baise City in Guangxi Zhuang Autonomous Region， Zunyi City in Guizhou Province and Yichang City in Hubei Province， respectively） can be promoted directly or applied as parent materials for creating excellent germplasm to resist the rust in B. striata for they express immune or highly resistance. This study" provides the basis for further research on pathogenesis and control of rust in B. striata.

Key words： Bletilla striata， rust， pathogen identification， Coleosporium sp.， resistance resource

白及（Bletilla striata）是蘭科白及屬（Bletilla）多年生草本植物，又名白芨，別名白根、地螺絲、羊角七等（中國植物志，1999）。白及是一種重要的中藥材品種，具有收斂止血、消腫生肌功效，可外治創(chuàng)傷出血、瘡瘍腫毒、皮膚皸裂，內治吐血、咳血、慢性胃潰瘍以及腫瘤等（Sun et al.， 2016；Zhang et al.， 2019；中華人民共和國藥典，2020）。白及既可用于止癢、消退色斑、消除痤瘡、防止粗糙，也可作糊料，制作高級香煙的煙蒂以及釀酒等（劉光斌等，2005；宋志姣等，2019）。此外，白及葉態(tài)優(yōu)美、花型獨特、花大色艷，還可用于園藝觀賞。隨著白及規(guī)?；N植面積的不斷擴大，病蟲害發(fā)生越來越多，其中銹病是近年來較為嚴重的主要病害之一，全國多地均有白及銹病流行的現(xiàn)象（游崇娟，2012）。因此，有必要確定白及銹病的發(fā)生情況及病原菌種類，并篩選抗病性較好的種質資源。

白及銹病是由真菌寄生引起的一類病害，受銹病侵染嚴重的葉片上密布孢子堆，從而導致光合作用受阻、葉片扭曲干枯，不僅影響白及的美觀，還使白及產量和品質下降（宋莉莎，2019；徐明玥等，2023）。近年來，在廣西地區(qū)白及銹病連年大面積發(fā)生，總體發(fā)病率在50%以上，給生產造成極大損失。余中蓮等（2021）研究表明，銹病病原菌是氣傳性寄生菌，隨氣流傳播，受環(huán)境影響較大，溫度、水分、風力等均可影響銹菌的傳播，作物生產區(qū)一旦感染該病害，就很難防控。銹菌致病種類繁多，同種銹菌可感染不同植物，同種植物也可感染多種銹菌（余中蓮等，2021），僅云南省保山市的紫皮石斛就發(fā)現(xiàn)了柄銹菌（Puccinia sp.）和鞘銹菌（Coleosporium sp.）兩種不同屬的病原菌（胡永亮等，2013；趙桂華等，2016）。據調查結果顯示，湖北、貴州、重慶等地白及銹病在4—6月均有發(fā)生，有的種植區(qū)發(fā)病率在90%以上（劉燕琴等，2017；宋莉莎，2019；徐明玥等，2023）。前人研究鑒定了貴州、湖北、江西、云南等地白及銹病病原菌為鞘銹菌（Coleosporium sp.）（游崇娟，2012；宋莉莎，2019；徐明玥等，2023）。然而，廣西地區(qū)未見白及銹病病原菌的相關報道?，F(xiàn)階段，白及銹病的防控主要有農業(yè)管理和化學藥劑防治，防治效果一般，并且容易引起農藥殘留、污染環(huán)境等問題（趙仁全等，2016；劉燕琴等，2017；楊德輝等，2018）。有研究認為，在農業(yè)生產中，選育和推廣抗銹病的品種是控制和治理銹病最經濟、安全和有效的途徑（于海天等，2020；成良強等，2022）。

基于以上情況，廣西種植區(qū)的白及銹病病原菌是否和其他地區(qū)的一致仍需要鑒定，同時不同地理來源的白及對銹病抗性是否存在差異也需要進行評價。本研究通過對白及銹病的調查和病原菌的形態(tài)學及分子生物學鑒定，并進一步通過人工接種法對不同地理來源的23份白及進行抗性評價，擬探討：（1）廣西種植區(qū)白及銹病的發(fā)病特征；（2）廣西種植區(qū)白及銹病病原菌在系統(tǒng)發(fā)育上屬于哪個類別；（3）不同地理來源的白及對銹病抗性的差異。本研究首次對不同地理來源的白及進行抗性評價，并篩選對銹病具有較好抗性的白及材料，以期明確廣西種植的白及銹病發(fā)生情況及病原菌種類，為后續(xù)開展白及銹病的有效防治與致病機理研究提供基礎。

1" 材料與方法

1.1 材料

供試白及均從不同地理來源引種栽培于桂林市雁山區(qū)廣西植物研究所科研試驗種植基地（110°17′ E、25°01′ N）（表1）；供試的菌株取自3號白及銹病侵染葉片上的病原菌，并將其命名為X2。

1.2 方法

1.2.1 白及銹病調查" 2022年4—10月，觀察3號白及的田間自然發(fā)病情況，拍照、記錄白及銹病癥狀，并統(tǒng)計發(fā)病植株和病害嚴重度。

1.2.2 病原菌形態(tài)觀察" 選取銹病典型癥狀病葉，于體視顯微鏡下觀察孢子堆形態(tài)。挑取葉片背面夏孢子，將其置于載玻片上，用無菌水做浮載劑，制成臨時玻片。對產生冬孢子的葉片則采用切片法制成玻片，即用刀片切取含有冬孢子堆的葉片組織，觀察橫切面。將制成的玻片置于萊卡正置式顯微鏡DM2500下觀察病原菌形態(tài)，對病原菌進行拍照，同時測量夏孢子和冬孢子的大小。

1.2.3 分子生物學鑒定" 選取與白及銹病夏孢子形態(tài)相同的新鮮病葉，用無菌毛刷輕輕刷下葉背的夏孢子，采用CTAB法提取病原菌DNA。用rDNA-ITS引物 ITS1（5′-TCCGTAGGTGAACCTGCG

G-3′）/ITS4（5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′）進行PCR擴增。反應體系共 25 μL： Master Mix 12.5 μL、10 μmol·L-1引物各1 μL、30 ng·μL-1模板 DNA 1 μL、ddH2O 9.5 μL。反應程序： 94 ℃預變性 3 min，94 ℃變性30 s，55 ℃退火 30 s，72 ℃延伸45 s，30個循環(huán)；72 ℃終延伸5 min；PCR 產物經1% 的瓊脂糖凝膠電泳檢測后，送武漢擎科生物科技有限公司測序。將測序獲得的菌株rDNA-ITS序列在GenBank數據庫中進行BLAST同源性比對分析，下載同源性較高的rDNA-ITS序列?；诠┰嚲旰瓦x取同源性大于95%的其他菌株ITS序列的rDNA-ITS序列，采用MEGA 7. 0軟件構建系統(tǒng)發(fā)育樹。

1.2.4 白及銹病抗性鑒定

1.2.4.1 人工接種銹病孢子" 將上述（1.2.3）病葉的夏孢子堆用無菌毛刷輕輕刷進無菌水中，制備成病原菌孢子懸浮液（光學顯微鏡100倍視野下20～25個孢子），加入0.1%濃度的吐溫-80，均勻噴灑在23份不同地理來源的健康白及葉片背面，以加入0.1%吐溫-80的無菌水為對照，套上塑料袋保濕24 h，每個處理6株，3個重復；接種后每天觀察植株情況，14 d后以葉片為取樣單位統(tǒng)計發(fā)病情況，并記錄相關數據。

1.2.4.2 銹病抗性評價" 參照賀占雪等（2019）的方法，結合廣西地區(qū)白及銹病的發(fā)病特點稍作改進。接種銹病病原菌后根據白及每張葉片上病斑面積占整個葉面積的百分比進行病害分級。分級標準：0級，無病斑；1級，病斑占葉面積0～20%；2級，病斑占葉面積21%～40%；3級，病斑占葉面積41%～60%；4級，病斑占葉面積61%～80%；5級，病斑占葉面積在80%以上。病情指數（ID）=∑（各級病葉數×該級代表數值）/（調查總葉片數×最重級別代表數值）×100。根據病情指數將白及材料抗性評價標準進行劃分，即免疫（immune， I），病情指數=0；高抗（high resistance， HR），0＜病情指數≤5；抗?。╮esistance， R），5＜病情指數≤10；中抗（moderate resistance， MR），10＜病情指數≤30；感病（susceptible， S），30＜病情指數≤50；高感（high susceptible， HS），病情指數＞50。

1.3 數據處理與分析

使用Excel 2010和 SPSS 22.0軟件進行數據統(tǒng)計和分析。

2" 結果與分析

2.1 白及銹病的發(fā)生情況

經調查發(fā)現(xiàn)，2022年廣西桂林市種植區(qū)的白及4月上旬開始出現(xiàn)銹病，受銹病侵染的葉片背面散生許多粉末狀的黃色夏孢子堆，葉片正面有淡黃色的病斑，隨著時間的推移，夏孢子堆邊緣變蠟質，顏色逐漸變深；9月下旬，夏孢子堆周圍形成表面蠟狀、光滑的紅褐色冬孢子堆，冬孢子堆單生或聚在一起成圓環(huán)狀。廣西桂林市種植區(qū)的白及銹病主要危害葉片，未見侵染花、果、葉鞘，銹菌傳播速度快，發(fā)病率高，其中3號白及達到100%，被害嚴重的葉片形成大型枯斑、干枯，嚴重影響白及的觀賞效果和產量（圖1）。

2.2 白及銹病病原菌的形態(tài)特征

選取白及的典型銹病葉片，對病原菌形態(tài)特征進行觀察，結果如圖2所示，廣西桂林市種植的白及銹病病原菌具有夏孢子和冬孢子兩種形態(tài)。夏孢子堆呈黃色、橘黃色，粉末狀，無包被，中心隆起，單個夏孢子堆的直徑為0.2～0.5 mm（圖2：A，B）；夏孢子呈金黃色，卵圓形或橢圓形，大小為（21.43～30.95） μm × （13.10～19.05） μm，長寬比小于2∶1，壁無色，表面有疣狀突起（圖2：C，D）。冬孢子堆呈橘紅色、紅褐色，由多個冬孢子排列成柵欄狀排列，表面覆蓋有透明的膠狀物；冬孢子為倒卵形、棍棒狀，大小為（17.25～30.0） μm × （5.5～6.65） μm，長寬比小于5∶1，壁無色（圖2：E）。上述特征與Coleosporium bletiae的形態(tài)特征基本相符（游崇娟，2012）。

2.3 白及銹病病原菌的分子鑒定

采用ITS1/ITS4引物對菌株X2的ITS序列進行擴增。測序結果顯示，菌株X2的ITS序列（OQ826009）長度為698 bp。將所得到的ITS序列在GenBank數據庫中進行同源性比對，結果顯示菌株X2與銹病病原菌Coleosporium sp.（KY783686.1）的匹配度最高，序列一致性為95.86%。但是，以里氏木霉Trichoderma reesei（Z31016.1）為外群對照，基于菌株X2的ITS序列與同源性大于95%的其他菌株的ITS序列構建系統(tǒng)發(fā)育樹，結果顯示菌株X2與鞘銹菌屬（Coleosporium）的白及鞘銹菌Coleosporium bletiae（MN108161.1，OP363680.1）、馬先蒿鞘銹菌Coleosporium pedicularidis（KP017554.1）、千里光鞘銹菌Coleosporium senecionis（KY810475.1）、兔兒傘鞘銹菌Coleosporium cacaliae（KY810462.1）、鞘銹菌Coleosporium sp.（MW666045.1）、風鈴草鞘銹菌Coleosporium campanulae（KP017555.1）聚為一個大類群，而與Coleosporium bletiae（MN108161.1，OP363680.1）聚為一個小類群，親緣關系最近，但單獨一支（圖3）。

以上結果說明廣西桂林市種植的白及銹病病原菌為C. bletiae，但與已報道的白及銹病致病菌存在一定的遺傳分化。

2.4 白及種質資源的銹病抗性鑒定

人工接種菌株X2 14 d后，白及發(fā)病癥狀與田間自然發(fā)病癥狀相似，葉片有淡黃色的夏孢子堆，但不同來源的白及病害程度存在較大差異（圖4）。根據病害程度計算23份白及的病情指數范圍為0～70.7，不同地理來源白及之間的差異性如表2所示。根據病情指數將23份白及對菌株X2的抗性劃分為6個等級，其中來自云南紅河的白及表現(xiàn)為免疫（I），病情指數為0，占試驗總數的4.35%；來自廣西恭城、廣西百色、貴州遵義和湖北宜昌的白及表現(xiàn)為高抗（HR），病情指數為1.7～4.7，占試驗總數的17.39%；來自廣西賀州、湖南桑植、四川巴中、四川廣元、重慶及湖北襄陽的白及表現(xiàn)為抗病（R），病情指數為5.6～9.4，占試驗總數的26.09%；來自廣西資源（1號）、廣西河池、江西修水、江西上饒、江蘇南京的白及表現(xiàn)為中抗（MR），病情指數為12.7～18.3，占試驗總數的21.74%；來自廣西資源（2號）、廣西桂林、廣西靖西、江西永新及安徽廣德的白及表現(xiàn)為感?。⊿），病情指數為32.0～49.1，占試驗總數的21.74%；來自云南羅平、湖南永州的白及表現(xiàn)為高感（HS），病情指數為62.2～70.7，占試驗總數的8.69%。

以上結果說明，不同地理來源的白及對菌株X2的抗性存在較大差異。在23份白及中，免疫和高抗的白及病情指數低于5.0，表現(xiàn)抗銹病能力強；抗病和中抗的資源最多，共有11份，病情指數為5.6～17.0。

3" 討論與結論

3.1 廣西種植區(qū)的白及銹病發(fā)病特征

余中蓮等（2021）的報道認為，銹病可危害植物的莖、葉、花、果等組織，嚴重影響藥用植物的產量和品質。本研究發(fā)現(xiàn)，銹病主要危害白及的葉片，侵染初期葉片背面散生粉末狀的黃色夏孢子堆，侵染后期密布黃色孢子堆，進而導致葉片光合作用受阻，從而影響白及的發(fā)育，這與湖北白及銹病發(fā)病特征一致（徐明玥等，2023）。然而，與貴州等其他白及種植區(qū)相比（宋莉莎，2019），廣西種植區(qū)的白及發(fā)病時間相對較早，發(fā)病率及病情指數高，其原因可能是銹病屬于氣傳性病害，環(huán)境、氣候等條件均可影響其發(fā)病時間、傳播速度和病情指數（余中蓮等，2021），這與王曉鳴等（2020）和楊雙昱等（2022）在玉米和花椒等農作物上的研究報道類似。此外，陳文娟等（2018）和高新培等（2023）的研究表明，不同地區(qū)銹病的發(fā)病情況與寄主和銹菌的遺傳背景有關。因此，還需進一步研究不同白及種植區(qū)銹病病原菌的寄主以及遺傳背景等。

3.2 廣西種植區(qū)的白及銹病病原菌鑒定

Kaneko（1981）的研究認為，孢子的形態(tài)大小可作為銹菌傳統(tǒng)分類的依據。本研究通過形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn)，廣西種植區(qū)的白及銹病病原菌具有夏孢子、冬孢子兩種形態(tài)，其中夏孢子金黃色，卵圓形或橢圓形，表面有疣狀突起；冬孢子橘紅色或紅褐色，倒卵形、棍棒狀，與已報道的白及鞘銹菌相似（游崇娟，2012）。本研究還發(fā)現(xiàn)，廣西種植區(qū)的白及銹菌冬孢子小于宋莉莎（2019）報道的白及銹菌冬孢子，其原因可能是病原菌的孢子形態(tài)大小隨地理分布、寄主植物、取樣時間和測試者及測定方式的不同發(fā)生的變化（游崇娟，2012；席剛俊等，2018；羅凱等，2021），這進一步說明不能單憑孢子形態(tài)大小對銹菌進行分類。rDNA-ITS序列因具有較高的保守性常被用于銹病病原菌分類和系統(tǒng)發(fā)育的研究。韓盛等（2022）基于ITS序列鑒定伊犁橡

膠草銹病的病原菌為山柳菊柄銹菌（Puccnicia hieracii）；鄧東等（2022）利用ITS序列鑒定云南省玉溪豌豆上的銹病病原菌應為豌豆?；停║romyces viciae-fabae ex P. sativaum），而來源于其它地區(qū)蠶豆上的銹病病原菌為蠶豆?；停║. viciae-fabae ex V. faba）。本研究基于ITS序列鑒定廣西種植區(qū)的白及銹病病原菌為鞘銹菌，與徐明玥等（2023）和游崇娟（2012）在白及銹病上的研究結果一致。Park和 Wellings（2012）的研究認為，基因突變和重組是銹菌高度變異的原因。前人的研究表明，銹菌易受到自身和寄主產生的誘變物質或傳播過程中某些自然因素以及化學藥劑的刺激，從而導致遺傳物質發(fā)生改變，而異核現(xiàn)象和有性生殖可能使銹菌發(fā)生基因重組（張靜秋等，2013；Ali et al.， 2014；姚強，2018）。本研究通過構建系統(tǒng)發(fā)育樹，發(fā)現(xiàn)廣西種植區(qū)的白及銹病病原菌與Coleosporium bletiae（MN108161.1，OP363680.1）聚為一個類群，但為不同分支，說明病原菌與這些Coleosporium bletiae之間存在遺傳分化，可能是不同的生理小種，這與黃亮（2022）和郭云燕等（2013）在小麥條銹菌和玉米南方銹菌上的研究結果類似。下一步應該采集不同種植區(qū)的白及銹病病原菌進行深入鑒定及遺傳多樣性分析，為白及銹病防控奠定基礎。

3.3 不同地理來源的白及對銹病的抗性差異

王曉鳴等（2020）和段璐瑤等（2020）的研究認為，植物在不同地理環(huán)境間形成的種質資源及育成品種的遺傳背景存在較大差異，而抗性基因（組合）的不同會影響其對銹病的抗性。陳文娟等（2018）研究表明，不同地理來源的玉米種質對南方銹病的抗性存在較大差異，而抗性玉米種質之間遺傳多樣性較高。譚小艷等（2021）研究表明，新泰地區(qū)引進的黃花菜品種普遍為銹病易感植株，而當地的品種抗病能力較強。本研究對23份不同地理來源的白及進行了銹病抗性評價發(fā)現(xiàn)，不同地理來源的白及存在較大的抗性差異，導致這種現(xiàn)象的原因可能是不同地區(qū)的白及長期受生殖隔離的影響而引起的，造成這種抗性差異的原因需要進一步分析生理生化及分子水平上的差異。本研究篩選了1份免疫、4份高抗、6份抗病、5份中抗、5份感病、2份高感的白及，其中表現(xiàn)免疫和高抗的僅有5份，分別來自云南紅河、廣西恭城、廣西百色、貴州遵義、湖北宜昌，病情指數相對較低，抗銹病能力強，可推廣應用或作為培育抗銹病優(yōu)良種質的親本材料。而抗病和中抗的資源雖然具有一定的抗性，但隨著發(fā)病時間的持續(xù)，病情加重，不宜直接推廣。

參考文獻：

ALI S， GLADIEUX P， LECONTE M， et al.， 2014. Origin， migration routes and worldwide population genetic structure of the wheat yellow rust pathogen Puccinia striiformis f. sp. tritici ［J］. PLoS Pathog， 10（1）： e1003903.

CHEN WJ， LI WC， YANG ZH，et al.， 2018. Preliminary identification and genetic diversity analysis of maize germplasm resources for resistance to southern corn rust ［J］. J Plant Genet Resour， 19（2）： 225-231." ［陳文娟， 李萬昌， 楊知還， 等， 2018. 玉米抗南方銹病種質資源初步鑒定及遺傳多樣性分析 ［J］. 植物遺傳資源學報， 19（2）： 225-231.］

CHENG LQ， GUO JB， LI W， et al.， 2022. Novel genotypes and quantitative trait locus for rust resistance in peanut ［J］. Chin J Oil Crop Sci， 44（5）： 1074-1080." ［成良強， 郭建斌， 李威濤， 等， 2022. 花生抗銹病種質篩選及抗性QTL分析 ［J］. 中國油料作物學報，" 44（5）： 1074-1080.］

Chinese Phanmacopoeia Commission， 2020. Pharmacopoeia of the People’s Republic of China： Part I ［S］. Beijing： China Medical Science Press： 103." ［國家藥典委員會， 2020. 中華人民共和國藥典： 一部 ［S］. 北京： 中國醫(yī)藥科技出版社： 103.］

DENG D， SUN FF， SUN SL， et al.， 2022. Molecular identification of pathogens causing rust disease on faba bean and pea ［J］. J Plant Prot， 49（4）： 1071-1076." ［鄧東， 孫菲菲， 孫素麗， 等， 2022. 蠶豆和豌豆銹病病原菌的分子鑒定 ［J］. 植物保護學報， 49（4）： 1071-1076.］

DUAN LY， YAO FJ， LONG L， et al.， 2020. Evaluation of resistance to stripe rust and analysis of Yr genes of wheat landraces from different spring wheat growing regions in China ［J］. J Plant Prot， 47（5）： 973-986." ［段璐瑤， 姚方杰， 龍黎， 等， 2020. 中國不同春麥區(qū)小麥地方種質抗條銹病評價及抗性基因分析 ［J］. 植物保護學報， 47（5）： 973-986.］

Flora of China Editorial， 1999. Flora Reipublicae Popularis Sinicae： Vol. 18 ［M］. Beijing： Science Press： 50." ［中國植物志編輯委員會， 1999. 中國植物志： 第18卷 ［M］. 北京： 科學出版社： 50.］

GAO XP， ZHAO Y， LIU BF， et al.， 2023. Population genetic analysis of Puccinia striiformis tritici in main winter-increasing areas based on virulent phenotypes and genotypes ［J］. Sci" Agric Sin， 56（14）： 2629-2642." ［高新培， 趙鋆， 劉博凡， 等， 2023. 基于毒性表型和基因型的主要冬繁區(qū)小麥條銹菌群體遺傳分析 ［J］. 中國農業(yè)科學， 56（14）： 2629-2642.］

GUO YY， CHEN MG， SUN SL，et al.， 2013. Genetic diversity of Puccinia polysora Underw. in China ［J］. Sci Agric Sin， 46（21）： 4523-4533." ［郭云燕， 陳茂功， 孫素麗， 等， 2013. 中國玉米南方銹病病原菌遺傳多樣性 ［J］. 中國農業(yè)科學， 46（21）： 4523-4533.］

HAN S， GAO Q， XING T， et al.， 2022. Isolation and identification of pathogens causing rust disease on Taraxacum kok-saghyz Rodin in Xinjiang ［J］. Xinjiang Agric Sci， 59（5）： 1231-1235." ［韓盛， 高強， 邢濤， 等， 2022. 新疆橡膠草銹病病原菌的分離與鑒定 ［J］. 新疆農業(yè)科學， 59（5）： 1231-1235.］

HE ZX， MA JP， YANG B， et al.， 2019. Evaluation of the resistance of main walnut varieties in Yunnan Province to Alternaria alternata ［J］. Plant Prot， 45（4）： 195-200." ［賀占雪， 馬建鵬， 楊斌， 等， 2019. 云南主栽核桃品種對Alternaria alternata葉枯病的抗病性評價 ［J］. 植物保護， 45（4）： 195-200.］

HU YL， BAI XH， LI GL， et al.， 2013. Identification of the pathogen of Dendrobium rust and its fungicide screening ［J］. Chin J Trop Agric， 33（10）： 53-55." ［胡永亮， 白學慧， 李桂琳， 等， 2013. 石斛銹病病原初步鑒定及其防治藥劑篩選 ［J］. 熱帶農業(yè)科學， 33（10）： 53-55.］

HUANG L， 2022. Pangenome assembly of wheat stripe rust and population structure analysis of wheat stripe rust in central and western China ［D］. Chengdu： Sichuan Agricultural University." ［黃亮， 2022. 小麥條銹菌泛基因組構建及中國中西部五省小麥條銹菌群體結構分析 ［D］. 成都： 四川農業(yè)大學.］

KANEKO S， 1981. The species of Coleosporium， the causes of pine needle rusts in the Japanese Archipelago ［J］. Rept Tottori Myco Inst， 19： 1-159.

LIU GB， HUANG Z， HUANG CG， et al.， 2005. Functions and application in cosmetics of Bletilla striata （Thunb） Reichb. F ［J］. Deterg Cosmet， 28（8）： 22-24." ［劉光斌， 黃忠， 黃長干， 等， 2005. 天然植物白芨膠的功能及在化妝品中的應用 ［J］. 日用化學品科學， 28（8）： 22-24.］

LIU YQ， LIU J， LIU X， et al.， 2017. Occurrence characteristics and chemical control of Bletilla striata rust ［J］. Mod Agric Sci Technol， 22： 80-81." ［劉燕琴， 劉杰， 劉旭， 等， 2017. 白及銹病發(fā)生特點及藥劑防治效果研究 ［J］. 現(xiàn)代農業(yè)科技， 22： 80-81.］

LUO K， LI ZS， JIANG Y， et al.， 2021. Pathogen identification and fungicide screening of Dendrobium officinale rust disease ［J］. Subtrop Plant Sci， 50（4）： 318-322." ［羅凱， 李澤生， 姜艷， 等， 2021. 鐵皮石斛銹病病原鑒定及藥劑篩選 ［J］. 亞熱帶植物科學， 50（4）： 318-322.］

PARK RF， WELLINGS CR， 2012. Somatic hybridization in the Uredinales ［J］. Ann Rev Phytopathol， 50： 219-239.

SONG LS， 2019. Studies on pathogen identification and disease control of major fungal diseases on Bletilla striata ［D］. Guiyang： Guizhou University." ［宋莉莎， 2019. 白及主要真菌病害病原鑒定及防治研究 ［D］. 貴陽： 貴州大學.］

SONG ZJ， TANG D， LI Y， et al.， 2019. Microwave-assisted extraction， antioxidant activity and deproteinization of polysaccharides from Bletilla formosana ［J］. Nat Prod Res Dev， 31（8）： 1317-1325." ［宋志姣， 湯丹， 李悅， 等， 2019. 小白及多糖提取、脫蛋白工藝及抗氧化性研究 ［J］. 天然產物研究與開發(fā)， 31（8）： 1317-1325.］

SUN AJ， LIU JQ， PANG SQ， et al.， 2016. Two novel phenanthraquinones with anti-cancer activity isolated form Bletilla striate ［J］. Bioorg Med Chem Lett， 26（9）： 2375-2379.

TAN XY， MA YH， LI C， et al.， 2021. Investigation on the incidence of daylily leaf rust and its control measures ［J］. China Cucurbits Veg， 34（5）： 101-104." ［譚小艷， 馬耀華， 李創(chuàng)， 等， 2021. 黃花菜葉銹病發(fā)病情況調查及防治對策 ［J］. 中國瓜菜， 34（5）： 101-104.］

WANG XM， LIU J， GUO YY，et al.， 2020. Multiorigins of initial infection sources of Puccinia polysora causing southern rust of maize in China ［J］. J Maize Sci， 28（3）： 1-14." ［王曉鳴， 劉駿， 郭云燕， 等， 2020. 中國玉米南方銹病初侵染源的多源性 ［J］. 玉米科學， 28（3）： 1-14.］

XI GJ， ZHAO N， ZHAO JR， et al.， 2018. Identification of new diseases of Coleosporium zanthoxyli in Dendrobium officinale ［J］. J SW For Univ（Nat Sci）， 38（2）： 202-205." ［席剛俊， 趙楠， 趙菊潤， 等， 2018. 鐵皮石斛花椒鞘銹菌新病害鑒定分析 ［J］. 西南林業(yè)大學學報（自然科學）， 38（2）： 202-205.］

XU MY， JIANG JW， LIU GS， et al.， 2023. Pathogen identification and field control agents screening of leaf rust of Bletilla striata ［J］. Plant Prot， 49（4）： 269-275." ［徐明玥， 江健偉， 劉艮森， 等， 2023. 白及銹病的病原鑒定及其田間防治藥劑篩選 ［J］. 植物保護， 49（4）： 269-275.］

YANG DH， LI DC， LIU Q， et al.， 2018. Comparative test of the effect of several drugs on the control of Bletilla striata rust disease ［J］. S China Agric， 12（30）： 46-47." ［楊德輝， 李定超， 留青， 等， 2018. 幾種藥劑對防治白及銹病效果對比試驗 ［J］. 南方農業(yè)， 12（30）： 46-47.］

YAO Q， 2018. Study on the epidemic rule of wheat stripe rust in Qinghai Province ［D］. Yangling： Northwest A amp; F University." ［姚強， 2018. 青海省小麥條銹病流行規(guī)律研究 ［D］. 楊凌： 西北農林科技大學.］

YANG SY， YANG L， ZENG Q，et al.， 2022. Studies on the incidence and chemical control of prickly ash rust in Sichuan Province ［J］. J Sichuan For Sci Technol， 43（2）： 138-144." ［楊雙昱， 楊莉， 曾全， 等， 2022. 四川省花椒銹病發(fā)病規(guī)律及藥劑防治研究 ［J］. 四川林業(yè)科技， 43（2）： 138-144.］

YOU CJ， 2012. Taxonomic and phylogenetic study of a rust genus Coleosporium in China ［D］. Beijing： Beijing Forestry University." ［游崇娟， 2012. 中國鞘銹菌的分類學和分子系統(tǒng)發(fā)育研究 ［D］. 北京： 北京林業(yè)大學.］

YU HT， WANG LP， YANG F， et al.， 2020. Improvement of a method for resistance evaluation of faba bean （Vicia faba L.） rust and screening for resistance germplasms ［J］. Acta Phytopathol" Sin， 50（6）： 702-710." ［于海天， 王麗萍， 楊峰， 等， 2020. 蠶豆抗銹病鑒定方法的改進及資源篩選 ［J］. 植物病理學報， 50（6）： 702-710.］

YU ZL， YANG J， LEI MY， et al.， 2021. Status quo of and challenges for research on rust disease in medicinal plants ［J］. China J Chin Mat Med， 46（14）： 3566-3576." ［余中蓮， 楊娟， 雷美艷， 等， 2021. 藥用植物銹病研究現(xiàn)狀與展望 ［J］. 中國中藥雜志， 46（14）： 3566-3576.］

ZHANG C， GAO F， GAN S， et al.， 2019. Chemical characterization and gastroprotective effect of an isolated polysaccharide fraction from Bletilla striata against ethanol-induced acute gastric ulcer ［J］. Food Chem Toxicol， 131： 110539.

ZHANG JQ， LIU B， CHEN WQ， et al.， 2013. Temperature-sensitivity of population of Puccinia striiformis Westend ［J］. Acta Phytopathol Sin， 43（1）： 88-90." ［張靜秋， 劉博， 陳萬權， 等， 2013. 小麥條銹菌群體溫度敏感性測定 ［J］. 植物病理學報， 43（1）： 88-90.］

ZHAO GH， XI GJ， ZHAO N， et al.， 2016. The first report of Dendrobium devonianum Paxt. caused by Coleosporium paederiae in China ［J］. J W Chin For Sci， 45（5）： 128-131." ［趙桂華， 席剛俊， 趙楠， 等， 2016. 雞矢藤鞘銹菌引起的紫皮石斛銹病首次報道 ［J］. 西部林業(yè)科學，" 45（5）： 128-131.］

ZHAO RQ， WANG DQ， LIU H， et al.， 2016. Pathogen identification and control of Bletilla striata rust disease ［J］. Agric Technol Serv， 33（16）： 71." ［趙仁全， 萬大群， 劉海， 等， 2016. 白及銹病病原鑒定及其防治方法 ［J］. 農技服務， 33（16）： 71.］

（責任編輯" 蔣巧媛" 王登惠）