銅魚華雙身蟲的宿主特異性及其寄生鰓的組織病理學(xué)

摘要：圓口銅魚（Coreius guichenoti）是國家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物，銅魚華雙身蟲（Sindiplozoon coreius）的寄生會(huì)引起圓口銅魚死亡，探明銅魚華雙身蟲的致病機(jī)理，可為圓口銅魚的人工馴養(yǎng)、繁殖等提供指導(dǎo)。通過對(duì)寄生銅魚華雙身蟲的圓口銅魚鰓進(jìn)行病理組織切片研究，發(fā)現(xiàn)該雙身蟲的寄生會(huì)導(dǎo)致鰓小片相互粘連、鰓小片的上皮細(xì)胞增生和酸性粒細(xì)胞增多等炎癥反應(yīng)，以及出現(xiàn)鰓絲擠壓變形的癥狀。此外，與圓口銅魚在同一養(yǎng)殖系統(tǒng)的齊口裂腹魚（Schizothoraxprenanti）和金沙鱸鯉（Percocypris pingi），以及廣西壯族自治區(qū)西江水系野生的烏原鯉（Procypris mera），均感染了雙身蟲，形態(tài)學(xué)和ITS2 及COI分子鑒定結(jié)果表明它們均為銅魚華雙身蟲。研究結(jié)果表明銅魚華雙身蟲的宿主特異性不高，要避免同一科屬的魚類混養(yǎng)而相互交叉感染。

關(guān)鍵詞：?jiǎn)沃澄x；銅魚華雙身蟲；組織病理學(xué)；宿主特異性

中圖分類號(hào)：Q18 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-3075（2024）03-0172-06

圓口銅魚（Coreius guichenoti）是長江上游珍稀特有魚類，由于過度捕撈、大壩修建和環(huán)境污染，其數(shù)量顯著下＼降（Xiong et al，2014），2021 年新調(diào)整的《國家重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物名錄》增補(bǔ)圓口銅魚為國家二級(jí)保護(hù)野生動(dòng)物。在圓口銅魚人工馴養(yǎng)過程中，發(fā)現(xiàn)其鰓部會(huì)寄生一種雙身蟲，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致魚類死亡。通過形態(tài)學(xué)測(cè)量和DNA 序列比對(duì)分析，鑒定為銅魚華雙身蟲（Sindiplozoon coreius）新種（Cao et al，2021）。華雙身蟲隸屬于扁形動(dòng)物門（Platyhelminthes）單殖吸蟲綱（Monogenea）鉤鋏蟲目（Mazocraeidea）雙身蟲科（Diplozoidae）。單殖吸蟲通常具有幾丁質(zhì)的后吸器，通過中央錨鉤和小鉤固著在魚鰓，攝食鰓上皮細(xì)胞和血液，刺激粘液分泌，影響魚類呼吸（Lu et al，2008）。為了進(jìn)一步弄清銅魚華雙身蟲的致病機(jī)理，我們對(duì)病魚的鰓進(jìn)行了組織病理學(xué)研究。

另外，在圓口銅魚發(fā)生雙身蟲病的同一養(yǎng)殖系統(tǒng)中，還混養(yǎng)有金沙鱸鯉（Percocypris pingi）、齊口裂腹魚（Schizothorax prenanti）和中華鱘（Acipenser si?nensis），經(jīng)過2～3 年混養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)金沙鱸鯉和齊口裂腹魚也感染了雙身蟲。在西江水系采集的野生烏原鯉（Procypris mera）鰓部也發(fā)現(xiàn)了雙身蟲的感染。通過初步的形態(tài)學(xué)鑒定，這3 種魚寄生的雙身蟲與圓口銅魚寄生的銅魚華雙身蟲比較相似。

單殖吸蟲通常具有嚴(yán)格的宿主特異性（Whitting?ton et al，2000），雙身蟲的宿主特異性一般也比較高（Gao et al，2007），但有些種類的宿主特異性比較弱，如西伯利亞擬雙身蟲（Paradiplozoon homoion）可寄生15 種以上的鯉科魚類（Matejusova et al，2004）。那么寄生在同一養(yǎng)殖系統(tǒng)中不同宿主的雙身蟲是否為同一種？是否存在宿主轉(zhuǎn)移？本文通過收集金沙鱸鯉、齊口裂腹魚和烏原鯉的雙身蟲，并進(jìn)行形態(tài)學(xué)和分子鑒定，以闡釋雙身蟲的宿主特異性。

1 材料與方法

1.1 雙身蟲收集及標(biāo)本制作、測(cè)量

實(shí)驗(yàn)魚采集于武漢某養(yǎng)殖場(chǎng)人工養(yǎng)殖的圓口銅魚、齊口裂腹魚和金沙鱸鯉，以及廣西壯族自治區(qū)西江水系的烏原鯉。從魚鰓上剝離雙身蟲，清水沖洗干凈后，在解剖鏡（LEICA PN：MDG33/10450123）下活體觀察、拍照和繪圖；一部分蟲體用多聚甲醛固定，用來制作標(biāo)本；另外一部分蟲體用純酒精保存，用作分子鑒定。

甲醛固定的蟲體經(jīng)洋紅染色、梯度酒精脫水、二甲苯透明、中性樹膠固定后（Khotenovsky，1981），在顯微鏡（LEICA：DM2000）下觀察，測(cè)量后吸器和交配器幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)的大小。文中數(shù)據(jù)記錄除特別標(biāo)明外，單位均為μm。