蘋果樹腐爛病發(fā)生及新型防治藥劑篩選

摘 要：【目的】研究蘋果樹腐爛病的發(fā)生情況并篩選新型防治藥劑。

【方法】于2021年4～9月定點(diǎn)定期調(diào)查新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第五師81團(tuán)（新疆雙河市）蜜脆蘋果示范園蘋果樹腐爛病發(fā)生情況，分析病斑擴(kuò)展規(guī)律，在蘋果幼果期、果實(shí)膨大期噴施3種濃度的氨基寡糖素進(jìn)行免疫誘抗，在春季、夏季采用刮治法、涂干法對(duì)已發(fā)病病斑進(jìn)行助劑校正和藥劑復(fù)配試驗(yàn)，觀察病斑的復(fù)發(fā)情況并計(jì)算防治效果。

【結(jié)果】2021年4月和5月2個(gè)月的新生病斑數(shù)占整個(gè)生長期新生病斑數(shù)的91.28%。4～6月病斑擴(kuò)展量占整個(gè)生長期病斑擴(kuò)展量的77.14%；在蘋果樹的幼果期和果實(shí)膨大期噴施氨基寡糖素能夠誘導(dǎo)寄主產(chǎn)生抗性，對(duì)腐爛病的防效分別為88.89%、91.67%；化學(xué)藥劑添加助劑后有利于提高防效，戊挫醇200倍液+透翠100倍液和代森銨200倍液+透翠100倍液等2種處理對(duì)腐爛病的防效均為87.5%；化學(xué)藥劑和生物藥劑復(fù)配后防效最高（防效達(dá)81.2%），配比為戊唑醇200倍液與枯草芽孢桿菌200倍液5∶1；枯草芽孢桿菌200倍液與代森銨200倍液1∶2的處理防效為75.2%，戊唑醇200倍液與枯草芽孢桿菌200倍液1∶5處理防效最低，防效為69.2%。

【結(jié)論】2021年在4～6月病斑新增和擴(kuò)展的高峰期進(jìn)行預(yù)防，在幼果期噴施氨基寡糖素500倍液可有效提高蘋果樹勢，增強(qiáng)對(duì)腐爛病的抵抗力，在刮除病斑后涂抹戊挫醇200倍液+透翠100倍液、代森銨200倍液+透翠100倍液、施用戊唑醇200倍液與枯草芽孢桿菌200倍液按照5∶1的配比可有效降低蘋果樹腐爛病的發(fā)生和復(fù)發(fā)。

關(guān)鍵詞：蘋果樹腐爛??；發(fā)生規(guī)律；免疫誘抗；生物防治；藥劑復(fù)配

中圖分類號(hào)：S436.611"" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A"" 文章編號(hào)：1001-4330（2024）06-1461-07

0 引 言

【研究意義】腐爛病是危害蘋果樹的一種枝干類病害，蘋果樹腐爛病發(fā)病初期樹皮稍隆起，水漬狀，呈褐色，病組織松軟，有酒糟味，發(fā)病后期引起主干樹皮大面積腐爛導(dǎo)致整樹枯死［1］。對(duì)于該病害的防治多采用刮除病斑涂抹化學(xué)藥劑的方式，尚缺少新型藥劑，因此研究蘋果樹腐爛病發(fā)生規(guī)律，對(duì)篩選新型防治蘋果腐爛病藥劑有重要意義。【前人研究進(jìn)展】杜琴［2］研究表明，涂抹防治腐爛病防效較好的藥劑有好立克200倍液和40%福美砷50倍液。焦浩等［3］篩選出戊唑醇等5種化學(xué)藥劑對(duì)腐爛病有較好的防治效果，其中43%戊唑醇新生病斑減少為84.1%。翟世玉等［4］施用枯草芽孢桿菌LF17發(fā)酵液對(duì)腐爛病菌的抑菌率為93.80%。張俊祥等［5］研究表明，解淀粉芽孢桿菌在田間對(duì)蘋果樹腐爛病防效可達(dá)90%，胡清玉等［6］通過根施菌肥木美土里（枯草芽孢桿菌Bs-0728）可提高蘋果樹的抗病性、降低蘋果樹腐爛病的發(fā)病率。黨海月等［7］采用新型蛋白誘抗劑阿泰靈對(duì)蘋果樹進(jìn)行根灌和葉片噴施處理，表明誘抗劑通過誘導(dǎo)病程相關(guān)蛋白表達(dá)可提高蘋果樹的抗病性。枯草芽孢桿菌對(duì)于蘋果樹腐爛病有較好的抑制作用，但田間防效與室內(nèi)防效差別較大［8］。楊阿麗等［9］將枯草芽孢桿菌與戊唑醇、咪酰胺等化學(xué)藥劑混配（混配比例1∶1、1∶2、1∶3）對(duì)抑制蘋果樹腐爛病病菌有較好的作用，在提高枯草芽孢桿菌的穩(wěn)定性和防效的同時(shí)又減少了化學(xué)藥劑的用量。殷輝等［10］優(yōu)化分析研究得出，枯草芽孢桿菌與甲基硫菌靈按照5∶5復(fù)配后對(duì)蘋果樹腐爛病抑菌率為81.36%?？莶菅挎邨U菌與嘧菌酯、噻呋酰胺等化學(xué)藥劑混配使用，可提高枯草芽孢桿菌的穩(wěn)定性和防效［11-14］。植物免疫誘抗劑是一種能調(diào)節(jié)植物自身的新陳代謝生物農(nóng)藥，提高植物體內(nèi)抗菌物質(zhì)的活性水平，加強(qiáng)植物自身的保護(hù)屏障，從而抵抗腐爛病菌的入侵。鄭莫非［14］在防治香梨腐爛病試驗(yàn)中將殺菌劑噻霉酮與幾丁聚糖、氨基寡糖素2種免疫誘抗劑混配，誘抗劑對(duì)噻霉酮的殺菌作用增效顯著，在幾丁聚糖的增效作用下，噻霉酮對(duì)庫爾勒香梨樹離體枝條上病菌的平均抑制率提升至76.82%，氨基寡糖素增效作用提升至59.17%。【本研究切入點(diǎn)】化學(xué)藥劑防治蘋果病害，樹體易產(chǎn)生抗藥性、病斑易復(fù)發(fā)，目前關(guān)于新疆雙河市蘋果樹腐爛病的相關(guān)研究較少，需要篩選防治蘋果樹腐爛病的藥劑。【擬解決的關(guān)鍵問題】監(jiān)測新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第五師81團(tuán)（雙河市）蜜脆蘋果示范園的蘋果樹腐爛病發(fā)病情況，并在幼果期、果實(shí)膨大期噴施3種濃度的氨基寡糖素進(jìn)行免疫誘抗，在春季、夏季采用刮治法對(duì)已發(fā)病病斑進(jìn)行助劑校正和藥劑復(fù)配試驗(yàn)，為新疆雙河市蘋果樹腐爛病綠色防控措施的制定奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 供試蘋果

試驗(yàn)設(shè)在新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第五師81團(tuán)（新疆雙河市）蘋果示范園基地（82°32′32.2368″E， 44°42′47.6712″N），試驗(yàn)地面積約667 hm2（1 000 畝），樹齡6年，主栽品種為蜜脆，授粉品種為寒富，防護(hù)品種為海棠。采取矮砧密植方式，栽植密度1.5 m×4 m。該示范園為該地區(qū)種植蘋果樹面積最大的果園。

1.1.2 供試藥劑

供試藥劑中有免疫誘抗劑（銳抗5%氨基寡糖素）、生物藥劑（1 000×108芽孢/g枯草芽孢桿菌可濕性粉劑）和化學(xué)藥劑（45%戊唑醇、45%代森銨），還包含助劑（透翠樹皮穿透劑）。銳抗5%氨基寡糖素（上海滬聯(lián)生物藥業(yè)股份有限公司）、1 000×108芽孢/g枯草芽孢桿菌可濕性粉劑（武漢科諾生物科技股份有限公司）、透翠樹皮穿透劑（深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司）、43%戊唑醇（德國拜爾）、45%代森銨（湖北雙吉化工有限公司）。

1.2 方 法

1.2.1 蘋果樹腐爛病田間發(fā)病調(diào)查

在果園中按照五點(diǎn)取樣法選擇5塊樣地，每塊樣地選取100株蘋果樹，于2021年4～9月每月月中和月末調(diào)查2次，逐株調(diào)查統(tǒng)計(jì)腐爛病病斑數(shù)量。并在每塊樣地中100株蘋果樹中選取10株發(fā)病明顯的果樹，定期測量記錄病斑直徑、計(jì)算擴(kuò)展速率［15］。

1.2.2 枝干噴淋氨基寡糖素田間防效測定

試驗(yàn)于2021年5月（幼果期）、6月（果實(shí)膨大期）進(jìn)行，在樹勢好、病株少的區(qū)域中隨機(jī)選取80株健康未發(fā)病樹，分別噴施氨基寡糖素500倍、1 000倍、1 500倍3種處理的藥劑，使用噴壺全樹噴施，每個(gè)處理重復(fù)20株，空白對(duì)照20株，每月觀察并記錄1次發(fā)病情況，計(jì)算發(fā)病率［16］。

1.2.3 刮病斑涂抹法防效測定

1.2.3.1 助劑校正防效

試驗(yàn)于2021年5月進(jìn)行，使用刮治法涂抹枯草芽孢桿菌200倍、戊挫醇200倍液、代森銨200倍液3種處理，每種處理加助劑透翠100倍進(jìn)行助劑校正試驗(yàn)，共6種處理，每種處理隨機(jī)選擇10棵樹，共計(jì)60棵樹，處理每棵樹面積最大的1處病斑。每月觀察并記錄1次發(fā)病情況，于成熟期后計(jì)算校正防效［16］。

1.2.3.2 枯草芽孢桿菌可濕性粉劑與戊唑醇、代森銨復(fù)配田間防效測定

楊阿麗等［9］研究表明，戊唑醇與枯草芽孢桿菌按1∶1、1∶2、1∶3比例混配防治蘋果樹腐爛病，抑菌率達(dá)到91.82%、92.28%和95.23%。結(jié)合楊阿麗［9］的研究結(jié)果進(jìn)一步增加了藥劑配置比例。設(shè)置2種化學(xué)藥劑43%戊唑醇200倍液、45%代森銨200倍液，與枯草芽孢桿菌200倍液、枯草芽孢桿菌200倍液+透翠100倍液分別按5∶1、2∶1、1∶1、1∶2和1∶5比例混配，每種比例7組處理，每組處理重復(fù)10次。試驗(yàn)于2021年5月進(jìn)行，采用刮治法，試驗(yàn)對(duì)照只刮除病斑不涂抹藥劑。于成熟期后觀察復(fù)發(fā)情況并計(jì)算防效［16］。

1.3 數(shù)據(jù)處理

于2021年9月下旬果實(shí)成熟期后調(diào)查病斑復(fù)發(fā)情況。采用SPSS、Graphpad軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行顯著性分析［16-17］。

2 結(jié)果與分析

2.1 蘋果樹腐爛病田間發(fā)生動(dòng)態(tài)變化

研究表明，從萌芽期（4月）開始到成熟期（9月）每月均會(huì)產(chǎn)生新病斑，4、5月為新病斑出現(xiàn)的高峰，2個(gè)月平均新增病斑99.5個(gè)，占整個(gè)生長期新增病斑的91.28%，5月新增病斑數(shù)最高為119個(gè)，6月之后新增病斑逐漸減少。

4月病斑擴(kuò)展較快。4～6月平均擴(kuò)展0.67 cm，占整個(gè)生長期擴(kuò)展量的77.14%，7月之后病斑擴(kuò)展緩慢。4～8月整體呈下降的趨勢，9月氣溫降低，病斑擴(kuò)展有上升的趨勢。圖1

2.2 枝干噴淋氨基寡糖素的田間防效

研究表明，在5月（幼果期）與6月（果實(shí)膨大期）噴淋不同濃度氨基寡糖素對(duì)蘋果樹腐爛病均有防效。5月（幼果期）氨基寡糖素500倍液防效最高，防效為88.89%，其次為氨基寡糖素1 000倍液防效為77.78%，氨基寡糖素1 500倍液防效最低，為55.56%。6月（果實(shí)膨大期）氨基寡糖素500倍液防效最高為91.67%，其次為氨基寡糖素1 000倍液防效為83.33%，氨基寡糖素1 500倍液防效最低為50%。表1

2.3 刮病斑涂抹法防效

2.3.1 助劑校正防效

研究表明，刮除病斑防效最高的處理為戊挫醇200倍液+透翠100倍液、代森銨200倍液+透翠100倍液防效均為87.5%，其次為戊挫醇200倍液、代森銨200倍液防效分別為84.2%、83.3%，防效最低的為枯草芽孢桿菌200倍液+透翠100倍液，防效為50%。助劑校正防效校正效果較高的為代森銨200倍液+透翠100倍校正防效為25.15%，矯正防效最低的為枯草芽孢桿菌200倍液+透翠100倍校正效果為-33.3%。表2，表3

2.3.2 枯草芽孢桿菌可濕性粉劑與戊唑醇、代森銨復(fù)配防效

研究表明，戊唑醇200倍液防效與枯草芽孢桿菌200倍液防效呈極顯著性差異（P＜0.01），戊唑醇200倍液與枯草芽孢桿菌200倍液按5∶1混配防效與枯草芽孢桿菌200倍液防效差異顯著（P＜0.05）；戊唑醇200倍液+透翠100倍與枯草芽孢桿菌200倍液+透翠100倍按1∶5混配防效與戊唑醇200倍液+透翠100倍防效差異顯著（P＜0.05），代森銨200倍液與枯草芽孢桿菌200倍液按5種比例混配防效與枯草芽孢桿菌單劑防效差異極顯著（P＜0.01），代森銨200倍液+透翠100倍防效與枯草芽孢桿菌200倍液+透翠100倍防效呈顯著性差異（P＜0.05）。其中化學(xué)藥劑與生物藥劑5∶1混配防治效果最佳濃度為戊唑醇200倍液+透翠100倍液與枯草芽孢桿菌200倍液+透翠100倍液混配，防治效果為83.2%，其次為戊唑醇200倍液+枯草芽孢桿菌200倍液，防治效果為81.2%；化學(xué)藥劑與生物藥劑混配防治效果最差為戊唑醇200倍液+透翠100倍液與枯草芽孢桿菌200倍液+透翠100倍液按1∶5混配，防治效果為69.2%。藥劑混配后防效雖然無化學(xué)藥劑高，但是要高于生物藥劑，化學(xué)藥劑占比越高防治效果越好。表4

3 討 論

3.1

蘋果樹腐爛病在新疆各蘋果產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生，試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，蘋果樹腐爛病新增病斑高峰期為4～6月，病斑擴(kuò)展的高峰期為4、5月，與杜戰(zhàn)濤等［18］研究結(jié)果基本一致。

3.2 植物免疫通常由外源的激發(fā)子誘導(dǎo)產(chǎn)生，誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性，氨基寡糖素作為寡糖類的免疫誘抗劑因不會(huì)對(duì)病原菌產(chǎn)生抑制作用［19］，0.5%氨基寡糖素在室內(nèi)對(duì)蘋果樹腐爛病有防治效果［20］。試驗(yàn)從幼果期到果實(shí)膨大期分別噴施3種濃度的 5%氨基寡糖素，防治效果在2個(gè)時(shí)期最高達(dá)到了88.89%、91.67%，與早期研究得出的在不同時(shí)期噴施相同濃度免疫誘抗劑，蘋果樹所產(chǎn)生的防治效果有所不同，在果樹的花前期、幼果期是病原菌入侵、發(fā)病的一個(gè)高峰期［21］，也是噴施免疫誘抗劑增強(qiáng)果樹抗病性的關(guān)鍵時(shí)期。

3.3

拮抗細(xì)菌對(duì)真菌的主要作用是抑制分生孢子的萌發(fā)和菌絲生長，施用枯草芽孢桿菌可以對(duì)腐爛病病原菌產(chǎn)生抑制作用［22］。王帥等［20］研究表明，枯草芽孢桿菌可濕性粉劑在離體枝條上對(duì)蘋果樹腐爛病防治效果達(dá)92.7%。試驗(yàn)在刮除病斑后噴施枯草芽孢桿菌可濕性粉劑可以有效的降低病斑的擴(kuò)展復(fù)發(fā)，在200倍處理下的防治效果最高達(dá)62.5%。生物藥劑在田間試驗(yàn)中出現(xiàn)防效降低可能是藥劑自身的原因，也可能是受外界因素的影響。

3.4

研究發(fā)現(xiàn)不同濃度的滲透劑加入枯草芽孢桿菌中，降低了藥劑的防效，可能是滲透劑干擾了生物菌劑的活性，但滲透劑加入化學(xué)藥劑中提高了防效。研究僅對(duì)新疆第五師雙河市蘋果樹腐爛病生長期發(fā)生情況進(jìn)行初步調(diào)查。病害的發(fā)生與氣候關(guān)系密切，在后期的研究中，將連續(xù)3～5年觀察病害的發(fā)生情況，觀察全年病斑變化情況，調(diào)查每月新生病斑，采用熒光PCR監(jiān)測無癥狀帶菌率。

4 結(jié)論

蘋果樹腐爛病的防控可在萌芽期前、果實(shí)膨大期噴施氨基寡糖素500倍液增強(qiáng)樹體抗性。對(duì)舊病斑復(fù)發(fā)可先刮病斑后涂抹戊挫醇200倍液+透翠100倍液、代森銨200倍液+透翠100倍液、（化學(xué)藥劑∶生物藥劑）5∶1比例復(fù)配液進(jìn)行交替處理，可有效控制病斑復(fù)發(fā)及新病斑產(chǎn)生。

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Survey of the occurrence of apple tree Valsa canker

and screening of new control agents

Abstract：【Objective】 To explore the occurrence of apple tree Valsa canker and green prevention and control measures in Shuanghe City， Xinjiang.

【Methods】" In April-September 2021， we investigated the dynamics of apple tree Valsa canker and the expansion pattern of spots in the honey crisp apple demonstration orchard of 81 mission in Shuanghe City， Xinjiang by using the method of regular surveys at fixed points， and sprayed three concentrations of Amino-oligosaccharide at the young fruit stage and fruit expansion stage for immuno-induced resistance， and conducted the auxin correction test and agent compounding test in spring and summer to observe the recurrence of spots by using the scraping and dry coating methods.After that， the control effect was calculated by using the scraping and drying methods to correct the disease spots in spring and summer.

【Results】 The results showed that the number of new spots in April and May accounted for 91.28% of the new spots in the whole growing season， and the expansion of spots from April to June accounted for 77.14% of the expansion of spots in the whole growing season; the spraying of Amino-oligosaccharide at the young fruit stage and fruit expansion stage of apple trees could induce host resistance， and the effectiveness of control against rots was 88.89% and 91.67%， respectively.The effectiveness of Tebuconazole 200 times + 100 times of Tebuconazole and 200 times of Tebuconazole + 100 times of Tebuconazole was 87.5% for both treatments; the highest effectiveness of Tebuconazole 200 times of Tebuconazole and Bacillus subtilis 200 times of Tebuconazole and Bacillus subtilis 200 times of Tebuconazole was 81.2%; the effectiveness of Bacillus subtilis 200 times of Tebuconazole and Bacillus subtilis 200 times of Tebuconazole was 1∶2.The efficacy of tebuconazole 200 times with Bacillus subtilis 200 times 1∶2 was 75.2%， and the lowest efficacy of tebuconazole 200 times with Bacillus subtilis 200 times 1∶5 was 69.2%.

【Conclusion】" The study showed that the peak period of disease spot addition and expansion is from April to June， so preventive measures are recommended in this time.Spraying 500 times of amino-oligosaccharide at the young fruit stage can effectively improve the apple tree potential and enhance the disease resistance to the Valsa canker.Applying 200 times of pentothal 200 + 100 times of Turpentine， 200 times of Daidzinium + 100 times of Turpentine， and a 5∶1 ratio of chemical to biological agent compound can effectively reduce the occurrence and recurrence of apple tree Valsa canker after scraping the spots.

Key words：apple tree Valsa canker; occurrence pattern; immune-induced resistance; biological control; pharmaceutical compounding