全氟烷基類化合物對卵巢的毒性作用及其機(jī)制研究進(jìn)展

呂詠敏，胡曉潔，尹小瑞，張?zhí)K云

南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院婦科，南京 210006

環(huán)境內(nèi)分泌干擾物（EDCs）又稱環(huán)境激素、內(nèi)分泌活性化合物、內(nèi)分泌干擾化合物，是會(huì)干擾有機(jī)體激素的合成及功能的外源性化學(xué)物質(zhì)。全氟烷基類化合物（PFASs）是EDCs 的的一種，目前廣泛用于各種工業(yè)、農(nóng)業(yè)和商業(yè)化學(xué)物品中。PFASs 的種類眾多，主要有全氟辛酸酯（PFOA）、全氟壬酸酯（PFNA）、全氟辛烷磺酸酯（PFOS）和全氟己烷磺酸酯（PFHxS）等。PFASs 由碳和氟原子構(gòu)成，其中的氟原子半衰期較長，導(dǎo)致PFASs降解時(shí)間較長，可在自然環(huán)境和生物樣品中持久存在。人主要是通過攝入被污染的水、食物和灰塵間接攝入PFASs。目前人血清里可以普遍檢測到PFOA、PFNA、PFOS 及PFHxS 等。PFASs 對人類生殖功能的影響是目前的研究熱點(diǎn)。卵巢作為女性生殖器官，能產(chǎn)生卵子并且分泌類固醇類激素，具有生殖和內(nèi)分泌功能。女性出生時(shí)卵巢內(nèi)已有足夠數(shù)量的始基卵泡，青春期部分卵泡會(huì)在性激素的調(diào)控下發(fā)育為初級卵泡、次級卵泡和竇卵泡等，經(jīng)過募集卵泡、選擇優(yōu)勢卵泡后排卵。EDCs可以通過影響卵泡發(fā)育、性激素合成影響卵巢的生殖和內(nèi)分泌功能，導(dǎo)致更年期提前、卵巢早衰和不孕等疾病。國內(nèi)外已有較多關(guān)于PFASs對卵巢毒性作用的相關(guān)報(bào)道，現(xiàn)從卵子發(fā)生、卵泡發(fā)育及卵巢類固醇激素合成過程等方面將PFASs對卵巢的毒性作用及其機(jī)制進(jìn)行綜述如下。

1 PFASs對卵巢的毒性作用

PFASs 對卵巢的毒性作用主要表現(xiàn)在延遲月經(jīng)初潮時(shí)間、導(dǎo)致月經(jīng)周期紊亂、抑制卵巢類固醇激素合成、導(dǎo)致卵巢衰老、多囊卵巢綜合征（PCOS）及子宮內(nèi)膜異位癥等方面。

1.1 PFASs 可導(dǎo)致月經(jīng)初潮延遲 女性平均月經(jīng)初潮年齡一般為13歲左右，若較平均值延長2～2.5年仍無青春期發(fā)育體征出現(xiàn)被稱為月經(jīng)初潮延遲。月經(jīng)初潮階段的子宮對EDCs 十分敏感，性激素水平?jīng)Q定月經(jīng)初潮的時(shí)間，初潮時(shí)間的延遲可能與日后生理疾病的發(fā)生、不良妊娠結(jié)局的出現(xiàn)以及年老后心血管疾病的增加有關(guān)。目前國內(nèi)外就PFASs水平與月經(jīng)初潮早晚的相關(guān)性研究并沒有得到共識。有研究稱，PFASs 的暴露與月經(jīng)初潮時(shí)間的早晚并無明確的相關(guān)性［1］。也有一項(xiàng)通過對2931 例8～18歲女孩進(jìn)行的橫向研究發(fā)現(xiàn)，血清中PFOA 和PFOS的濃度與初潮的年齡有較大的關(guān)系，濃度最高的四分位數(shù)組與最低四分位數(shù)組相比較，PFOA 和PFOS分別造成了初潮時(shí)間延遲130、138 天［2］。一個(gè)丹麥的出生隊(duì)列在2008～2009 年對267 例20 歲左右的女性進(jìn)行了隨訪，發(fā)現(xiàn)與PFOA 濃度較低的參考組相比，體內(nèi)PFOA 濃度較高的女性其月經(jīng)初潮年齡會(huì)推遲5.3個(gè)月，而PFOS 的暴露水平并沒有發(fā)現(xiàn)與月經(jīng)初潮的年齡相關(guān)［3］。一項(xiàng)英國隨機(jī)對照試驗(yàn)［1］發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組為218 例初潮年齡＜11.5 歲的女孩，對照組為230 例初潮年齡≥11.5 歲女孩，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，初潮年齡的早晚與接觸PFOSA、 EtFOSAA、MeFOSAA、 PFOS、PFOA、PFHxS及 PFNA等物質(zhì)無關(guān)。

1.2 PFASs 導(dǎo)致月經(jīng)周期紊亂 月經(jīng)周期的主要特征包括其規(guī)律性、周期長度和月經(jīng)量。無論是動(dòng)物模型還是臨床相關(guān)性分析結(jié)果均發(fā)現(xiàn)，PFASs 暴露會(huì)影響正常月經(jīng)周期的建立。據(jù)Lyngs? 等［4］報(bào)道，在三個(gè)國家（格陵蘭島、波蘭和烏克蘭）的1623例育齡期婦女體內(nèi)，PFOA 的暴露水平與較長的月經(jīng)周期（周期長度≥32 天）之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上的明顯相關(guān)性，而對PFOS 暴露水平的分析中并沒有發(fā)現(xiàn)其與月經(jīng)周期的相關(guān)性。另有一項(xiàng)對950 例中國婦女的橫斷面分析顯示，PFOA、PFOS、PFNA 和PFHxS暴露水平的增高與育齡期女性月經(jīng)周期的紊亂和月經(jīng)周期的延長有關(guān)。PFOA、PFNA 和PFHxS 濃度較高的女性更有可能出現(xiàn)月經(jīng)量過少的情況［5］。

從丹麥國家出生隊(duì)列（DNBC）研究［6］結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在隨機(jī)納入1240例孕婦的臨床資料后，發(fā)現(xiàn)PFOA、PFOS 與月經(jīng)不調(diào)有關(guān)，接觸PFOA 和PFOS 較多的婦女出現(xiàn)月經(jīng)紊亂的概率會(huì)升高。LUM 等［7］使用了來自密歇根州和德克薩斯州的501 對夫婦的數(shù)據(jù)，這些夫婦在為懷孕而停止避孕時(shí)加入了一個(gè)前瞻性隊(duì)列--生育力和環(huán)境縱向調(diào)查（LIFE）研究。與PFDA血清濃度最低的三分位數(shù)相比，第二個(gè)三分位數(shù)的女性月經(jīng)周期延長3%，但PFOA 濃度最高的三分位數(shù)女性的月經(jīng)周期比PFOA 最低的三分位數(shù)的女性短2%，PFOS并沒有觀察到與月經(jīng)周期的相關(guān)性。當(dāng)然，也有研究發(fā)現(xiàn)，母親接觸PFOA 和 PFOS 與其月經(jīng)周期的長短或其后代的卵巢卵泡數(shù)量之間并沒有明確的關(guān)聯(lián)［3］。由于研究設(shè)計(jì)差異和潛在的地理暴露差異，很難解釋PFASs 水平升高是否會(huì)導(dǎo)致月經(jīng)不調(diào)，或者月經(jīng)不調(diào)是否會(huì)導(dǎo)致血清PFASs 水平升高，因?yàn)樵陆?jīng)也是女性PFAS 代謝的關(guān)鍵途徑之一。

1.3 PFASs 可抑制卵巢類固醇激素的合成 血清PFOS 水平與女性血清性激素水平相關(guān)，PFASs 可能通過上調(diào)或下調(diào)負(fù)責(zé)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)和卵巢類固醇生成的蛋白質(zhì)的表達(dá)來干擾卵巢的正常生理功能。ZHANG 等［8］研究發(fā)現(xiàn)，PFOS 暴露可能會(huì)降低卵巢早衰患者血清中雌二醇及催乳素的水平，同時(shí)升高卵泡刺激素的水平。MCCOY 等［9］研究發(fā)現(xiàn)，在接受體外受精的女性中，PFOS的濃度與血清雌二醇的水平之間存在負(fù)相關(guān)。一項(xiàng)納入25 957例成年女性的隊(duì)列研究［10］結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PFOS暴露水平與女性血清雌二醇水平降低相關(guān)。另有研究［11］結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PFOS暴露導(dǎo)致25～35 歲、健康、正常月經(jīng)周期的未經(jīng)產(chǎn)女性血清雌二醇和孕酮水平明顯降低。HEFFERNAN等［12］研究發(fā)現(xiàn)，在沒有多囊卵巢綜合征的健康女性中，PFOS的暴露會(huì)顯著降低游離雄激素指數(shù)FAI。

研究［8-12］認(rèn)為，PFOA 暴露可能與血清性激素水平變化無關(guān)。2011～2012 年全國健康和營養(yǎng)調(diào)查的研究［13］結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PFOS、PFOA 暴露與12～80 歲女性的血清睪酮水平無關(guān)。另有研究［3］發(fā)現(xiàn)，PFOS和PFOA 的子宮內(nèi)暴露不會(huì)影響其后代的血清總睪酮、性激素結(jié)合球蛋白、FAI、脫氫表雄酮、雌二醇、卵泡刺激素、黃體生成素及抗苗勒管激素的水平。但也有體外研究［14］報(bào)道，低劑量的PFOA 可以通過加速脂肪酸的代謝來刺激睪丸中類固醇激素的生成。

HEFFERNAN 等［12］在多囊卵巢綜合征的病例組和對照組中發(fā)現(xiàn)，PFNA 的暴露與雄烯二酮的水平均呈正相關(guān)，PFHxS 的暴露和健康女性血清總睪酮水平呈正相關(guān)。ZHANG 等［8］發(fā)現(xiàn)，PFHxS 暴露會(huì)升高原發(fā)性卵巢功能不全患者的卵泡刺激素水平，同時(shí)降低患者體內(nèi)的雌二醇水平。也有研究［9，13］認(rèn)為，PFNA、PFHxS暴露與女性血清性激素水平?jīng)]有明顯相關(guān)性。與成人相比，青少年對PFASs 的易感性更強(qiáng)。一項(xiàng)針對12～17 歲青少年的研究［15］結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PFOA、PFUnDA 和PFOS 的血清濃度分別與性激素結(jié)合球蛋白、卵泡刺激素以及睪酮的血清水平呈負(fù)相關(guān)，但在年輕成年人中并沒有發(fā)現(xiàn)這些相關(guān)性。同樣，對于參加C8 健康項(xiàng)目的6～9 歲女孩來說，血清中的睪酮水平也與PFOS 的暴露呈負(fù)相關(guān)［16］。有關(guān)PFASs的暴露與性激素的水平的相關(guān)性還需要更多的研究來證實(shí)。

1.4 PFASs 可導(dǎo)致卵巢衰老、PCOS 及子宮內(nèi)膜異位癥 早發(fā)性卵巢功能不全（POI） 是一種由多病因引起的女性在40 歲前卵巢功能的減退，臨床表現(xiàn)為閉經(jīng)或者月經(jīng)稀發(fā)4～6 個(gè)月，間隔＞4 周連續(xù)兩次FSH＞25 IU/L。POI 會(huì)導(dǎo)致不孕、骨質(zhì)疏松、泌尿生殖器官萎縮、心血管疾病、認(rèn)知功能減退及抑郁等。直鏈PFOS、支鏈PFOS、直鏈全氟辛烷磺酸和PFNA及其他PFASs 類型都可能與卵巢的提前衰老、自然絕經(jīng)年齡的提前有關(guān)。

我們前期研究［8］共檢測了120 例POI 患者、120與之匹配的健康對照體檢者血清中十種常見PFASs的水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，POI 患者血清中PFOA、PFOS 和PFHxS 的水平顯著增高，且隨著PFOA、PFOS 和PFHxS 暴露水平的增高，POI 的發(fā)病率也顯著增高。但本研究并未發(fā)現(xiàn)POI發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加與PFDA、PFNA、PFBS、PFDoA、PFUnDA和PFHpA暴露的相關(guān)性。另有一項(xiàng)國家級健康和營養(yǎng)調(diào)查研究［10］發(fā)現(xiàn)，PFOA 和PFOS 的暴露與較早的絕經(jīng)年齡呈明顯的正相關(guān)趨勢。有學(xué)者［17］發(fā)現(xiàn)，相比于健康體檢者，全子宮切除術(shù)后患者體內(nèi)PFOA、PFOS、PFHxS 和PFNA 水平升高。但也有部分研究結(jié)論不一致，DHINGRA 等［18］研究發(fā)現(xiàn)，PFOA 暴露水平與自然絕經(jīng)時(shí)間并沒有顯著的關(guān)聯(lián)。

PCOS 是青春期及育齡期女性常見的內(nèi)分泌紊亂癥候群，該疾病的病因尚未完全了解，可能和遺傳和環(huán)境因素有關(guān)。一項(xiàng)對180 例PCOS 的不孕患者和180 例健康對照者的研究［19］顯示，血清中PFDoA的濃度與PCOS 不孕癥發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)存在顯著的正相關(guān)。而PFBS、PFHpA、PFHxS、PFOA、PFOS、 PFNA、PFDA 以及PFUnDA 與PCOS 的發(fā)生并無明顯關(guān)聯(lián)性。一項(xiàng)2003～2006 年的臨床研究［20］數(shù)據(jù)顯示，子宮內(nèi)膜異位癥女性血清PFOA、 PFNA 和PFOS 的平均水平均高于健康女性。目前，只有少數(shù)研究［21］表明，PFASs的暴露會(huì)增加女性罹患卵巢癌的風(fēng)險(xiǎn)，但該研究未觀察到顯著相關(guān)性，且納入病例數(shù)量較少。

2 PFASs的卵巢毒性作用機(jī)制

PFASs 可能從卵子發(fā)生、卵泡發(fā)育及卵巢類固醇激素合成過程等方面發(fā)揮毒性作用。PFASs可能通過激活過氧化物酶體增殖物受體 （PPAR） 信號通路、中斷卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞胞間通訊以及誘導(dǎo)產(chǎn)生氧化應(yīng)激等途徑干擾卵子的發(fā)生，PFOS可通過抑制類固醇生成急性調(diào)節(jié)蛋白mRNA 表達(dá)、抑制KiSS1 轉(zhuǎn)移抑制因子 （Kiss1） 和 KISS1 受體（Kiss1r） 的表達(dá)，影響卵泡發(fā)育。PFASs 可通過調(diào)控負(fù)責(zé)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)和卵巢類固醇生成蛋白質(zhì)的表達(dá)，抑制卵巢類固醇激素的合成。

2.1 PFASs 影響卵子發(fā)生的機(jī)制 卵子發(fā)生是指從胚胎發(fā)育早期開始，經(jīng)過胚胎期、出生、直至性成熟才完成的由原始生殖細(xì)胞形成到卵原細(xì)胞，再由卵原細(xì)胞形成成熟卵細(xì)胞的過程。PFASs 可以通過影響卵子的發(fā)生干擾早期卵泡的生成。其潛在作用機(jī)制可能包括激活過氧化物酶體增殖物受體（PPAR） 信號通路、中斷卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞胞間通訊以及誘導(dǎo)產(chǎn)生氧化應(yīng)激等。

PPAR是核激素受體家族，可能參與了PFASs致生殖毒性的過程中。已知的三個(gè)PPAR家族成員α、β/δ 和γ 都有在卵巢中表達(dá)。PPAR-α 和PPAR-β/δ亞型主要在卵巢的膜和基質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)，而PPAR-γ亞型在顆粒細(xì)胞和黃體中高度表達(dá)。PPAR-α 可以通過各種靶基因的反式激活來調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝和能量穩(wěn)態(tài)，PFASs可以通過與PPAR-α相互作用從而引發(fā)代謝障礙［22］。而PFASs 激活PPAR-γ 后能夠抑制參與卵母細(xì)胞減數(shù)分裂的基因（如內(nèi)皮素-1 和一氧化氮合酶）的合成，這意味著它在雌性卵子發(fā)生中發(fā)揮了作用［23］。

一項(xiàng)研究［24］報(bào)告稱，用10 μg/mL 的PFNA 體外處理牛卵母細(xì)胞22h 會(huì)破壞卵母細(xì)胞成熟期間的發(fā)育能力。卵母細(xì)胞存活率的下降可能是由于PPAR-α 的過表達(dá)引起卵巢脂肪代謝紊亂進(jìn)而引起脂肪堆積所造成的。另一項(xiàng)研究［25］也證實(shí)了卵細(xì)胞質(zhì)中過多的脂肪與卵母細(xì)胞發(fā)育能力受損和卵母細(xì)胞存活率降低相關(guān)。PFASs 可以結(jié)合并激活PPAR受體，干擾卵子的發(fā)生，進(jìn)而影響卵巢的相關(guān)功能。

除了對PPAR信號通路的影響外，PFASs還可能干擾卵泡的細(xì)胞間通信。卵泡內(nèi)部是無血管的，顆粒細(xì)胞之間以及顆粒細(xì)胞和卵母細(xì)胞之間的細(xì)胞-細(xì)胞通信依賴于低分子營養(yǎng)物質(zhì)、信號分子和廢物通過縫隙連接的雙向轉(zhuǎn)移。當(dāng)在體外用含PFOS 的水溶液處理44 小時(shí)后，豬卵巢中活卵母細(xì)胞的數(shù)量和成熟卵母細(xì)胞的百分比明顯減少［26］。同樣，體外暴露于PFOS7 天的胎鼠卵母細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)更多的凋亡和壞死［27］。這些結(jié)果可能歸因于PFOS 干擾了卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞之間的縫隙連接通信所造成的。

PFASs 還可能通過促進(jìn)活性氧簇（ROS）的產(chǎn)生，增加DNA 損傷以及降低總抗氧化能力從而誘導(dǎo)氧化應(yīng)激。小鼠每日暴露于PFOA 會(huì)抑制卵巢中超氧化物歧化酶和過氧化氫酶的活性，促進(jìn)ROS 的生成，增加p53 和Bax 蛋白 （在凋亡細(xì)胞死亡中很重要）的表達(dá)［27］。另一項(xiàng)研究同樣說明，將大鼠暴露于PFOA，會(huì)明顯增加ROS 的產(chǎn)生，干擾線粒體呼吸鏈中復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的活性并導(dǎo)致卵母細(xì)胞的凋亡［28］。

2.2 PFASs 影響卵泡發(fā)育的機(jī)制 研究［29］發(fā)現(xiàn)，PFASs可以在卵泡發(fā)育的幾個(gè)不同階段影響嚙齒動(dòng)物卵泡的形成和/或功能。暴露于PFOS4 個(gè)月的成年雌性小鼠排卵前的卵泡數(shù)量會(huì)出現(xiàn)明顯減少，閉鎖卵泡數(shù)量明顯增加。此外，小鼠血清中雌二醇和孕酮水平出現(xiàn)降低，可能是由于PFOS 降低了類固醇生成急性調(diào)節(jié)蛋白 （Star） 的 mRNA 水平的表達(dá)，PFOS 對 Star 蛋白的這種影響被認(rèn)為是卵泡成熟和排卵障礙的可能原因。CHEN 等［27］也報(bào)告了類似的發(fā)現(xiàn)，PFOS 導(dǎo)致妊娠小鼠卵巢中黃體數(shù)量明顯減少，并且卵巢中 Star mRNA 水平的表達(dá)也出現(xiàn)了降低。

新生雌性大鼠暴露于PFOS 后，其卵巢原始卵泡、生長卵泡和黃體的數(shù)量顯著減少［28］。PFOS可能通過抑制KiSS1 、Kiss1r 表達(dá)及下丘腦中kisspeptin神經(jīng)元的活性發(fā)揮卵巢的毒性作用。kisspeptin 信號通路參與卵巢周期的調(diào)節(jié)及人類青春期的啟動(dòng)。PFOA 、PFOS 可能是通過破壞下丘腦kisspeptin 神經(jīng)元信號干擾卵泡發(fā)育。

妊娠小鼠經(jīng)過全氟丁烷磺酸鹽 （PFBS）處理后，產(chǎn)下的雌性后代會(huì)表現(xiàn)出卵巢功能受損的許多癥狀：卵巢大小和重量降低、卵泡數(shù)量減少（所有階段）、陰道開放延遲、發(fā)情時(shí)間延遲、發(fā)情期延長和血清雌二醇水平的降低。此外，PFBS 還會(huì)破壞與低甲狀腺素血癥一致的甲狀腺激素的合成，表現(xiàn)為妊娠第20 天及雌性后代中甲狀腺激素三碘甲狀腺原氨酸（T3） 和甲狀腺素（T4） 的血清水平的降低［30］。越來越多的動(dòng)物和人體研究［31］結(jié)果發(fā)現(xiàn)，甲狀腺激素的水平會(huì)隨著 PFASs 濃度的增加而減少。甲狀腺激素在卵巢卵泡發(fā)育和成熟以及其他生理功能的維持中起著不可或缺的作用。甲狀腺激素不足可能通過影響卵泡液抑制素、雌激素和其他細(xì)胞因子的產(chǎn)生來影響卵泡的正常發(fā)育。

2.3 PFASs 影響卵巢類固醇激素合成的機(jī)制 卵巢的另一個(gè)主要功能是產(chǎn)生和分泌性類固醇激素。卵巢類固醇激素的生成依賴于卵泡膜細(xì)胞和顆粒細(xì)胞的協(xié)調(diào)作用以及下丘腦-垂體-性腺軸的調(diào)控。甾體激素的生物合成需要多種羥化酶及芳香化酶的作用，在LH 的刺激下，卵泡膜細(xì)胞內(nèi)的膽固醇經(jīng)P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶 （CYP11A1） 的催化轉(zhuǎn)化為孕烯醇酮。孕烯醇酮在3β 羥基類固醇脫氫酶 （3β-HSD） 的作用下轉(zhuǎn)化為前體雄激素脫氫表雄酮（DHEA），其中涉及酶 17α 羥化酶、20-脫氨酶（CYP17A1） 或孕酮的產(chǎn)生。然后，孕酮和 DHEA 分別通過 CYP17A1 或 3β-HSD 轉(zhuǎn)化為雄激素A4。卵泡膜細(xì)胞中產(chǎn)生的最終雄激素類固醇是睪酮 T。A4和T 是卵泡膜細(xì)胞類固醇生成的雄激素的終產(chǎn)物，可以跨過卵泡基底層遷移到顆粒細(xì)胞中。在排卵前的卵泡中，顆粒細(xì)胞增殖并分化，產(chǎn)生越來越多的17β-雌二醇。卵泡膜細(xì)胞含有LH 受體 （LHRs），LH在與其受體結(jié)合后，刺激卵泡膜細(xì)胞衍生基因的轉(zhuǎn)錄，這些基因編碼膽固醇轉(zhuǎn)化為雄激素所需的酶。顆粒細(xì)胞含有FSH 受體 （FSHRs），與FSH 結(jié)合后會(huì)刺激顆粒細(xì)胞衍生基因的轉(zhuǎn)錄，這些基因編碼雄激素向雌激素轉(zhuǎn)化所必需的酶。

PFASs 可以通過上調(diào)或下調(diào)負(fù)責(zé)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)和卵巢類固醇生成的蛋白質(zhì)的表達(dá)來干擾內(nèi)分泌系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。攝入全氟十二烷酸（PFDoA）的雌性大鼠，其青春期前卵巢黃體生成素/絨毛膜促性腺激素受體、Star、Cyp11a1 和 Hsd17b3 的 mRNA 表達(dá)會(huì)顯著下降，導(dǎo)致雌二醇的合成明顯減少［32］。成年雌性大鼠長期暴露于PFOS 可能會(huì)通過減少組蛋白的乙?；絹硪种芐tar 的表達(dá)從而降低雌二醇的生物合成［33］。游離的豬卵巢顆粒細(xì)胞經(jīng)過PFOS或PFOA 處理后，細(xì)胞內(nèi)LH/FSH 調(diào)控的孕酮、雌二醇和雄烯二酮的分泌會(huì)受到明顯抑制［33］。鑒于PFASs 的暴露不會(huì)改變卵巢中的底物（膽固醇）的供應(yīng)，Star mRNA 水平的降低可能是膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)減少的原因，而膽固醇是卵巢類固醇生成的必要前體。

PFASs 具有一定的弱雌激素活性，并且與其他弱雌激素一樣，在與雌二醇結(jié)合后，這些化合物也會(huì)產(chǎn)生一定的抗雌激素作用。下丘腦中的GnRH 神經(jīng)元不表達(dá)ER，雌二醇和T 主要通過弓狀核 （ARC）和前腹室周圍核 （AVPV） 中的kisspeptin 神經(jīng)纖維向GnRH 神經(jīng)元發(fā)送反射信號。雌二醇和T 可以下調(diào)ARC 核團(tuán)但是上調(diào)AVPV 核團(tuán)中kisspeptin 的表達(dá)［34］。有研究發(fā)現(xiàn)，成年雌性小鼠經(jīng)過PFOS 處理后，其AVPV 神經(jīng)元中kisspeptin 的表達(dá)受到抑制，小鼠出現(xiàn)動(dòng)情間期延長和排卵障礙［35］。我們課題組前期研究［36］也發(fā)現(xiàn)PFHxS 的慢性染毒可以通過抑制小鼠下丘腦ARC 和AVPV 核團(tuán)中kisspeptin 的表達(dá)，影響性腺軸的功能，抑制LH 脈沖峰的釋放，導(dǎo)致卵泡發(fā)育和排卵障礙。另有研究［37］報(bào)道了PFOA影響動(dòng)情周期及排卵功能的可能機(jī)制與下丘腦中kisspeptin 神經(jīng)元活動(dòng)的改變有關(guān)。因此，PFASs 可能通過抑制ER 介導(dǎo)的AVPV 核團(tuán)中kisspeptin 的表達(dá)造成排卵障礙或生育力的下降。

綜上所述，PFASs 作為EDCs 的一種，可能導(dǎo)致月經(jīng)初潮時(shí)間的延遲、月經(jīng)周期的紊亂、類固醇激素水平的異常、卵巢功能低下、PCOS、子宮內(nèi)膜異位癥等。PFASs 可能從卵子發(fā)生、卵泡發(fā)育及卵巢類固醇激素合成過程等方面發(fā)揮卵巢毒性作用。PFASs可能通過激活PPAR 信號通路、中斷卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞胞間通訊以及誘導(dǎo)產(chǎn)生氧化應(yīng)激等途徑干擾卵子的發(fā)生，PFOS可通過抑制類固醇生成急性調(diào)節(jié)蛋白mRNA 表達(dá)、抑制Kiss1 及Kiss1r 表達(dá)，影響卵泡發(fā)育。PFASs可通過調(diào)控負(fù)責(zé)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)和卵巢類固醇生成蛋白質(zhì)的表達(dá)，抑制卵巢類固醇激素的合成。PFASs 各亞型之間、PFASs 與其他EDCs 之間是否存在協(xié)同卵巢毒性作用，尚需進(jìn)一步研究探索。