ESET通過lncRNA GMDS-AS1調(diào)控肝癌細(xì)胞增殖、凋亡、糖酵解的研究

黃俊玲，鐘騰猛，黃森平，高鑫艷

作者單位：1右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，廣西壯族自治區(qū) 百色533000；2百色市人民醫(yī)院肝膽外科，廣西壯族自治區(qū) 百色533099；3右江民族醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院，廣西壯族自治區(qū) 百色533000

肝細(xì)胞癌（HCC）是世界范圍內(nèi)最常見的人類癌癥之一，其死亡率居所有癌癥之首［1］。HCC的發(fā)病是由于表觀遺傳的改變導(dǎo)致癌基因的激活和抑癌基因的失活，進(jìn)而誘導(dǎo)的肝細(xì)胞癌［2］。表觀遺傳的改變包括異常甲基化、組蛋白修飾和核糖核酸（RNA）干擾，這不會(huì)改變遺傳密碼，但會(huì)影響mRNA的轉(zhuǎn)錄［3］。組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶集合域分叉1（SET domain， bifurcated 1，ESET）基因位于染色體1q21上，編碼143 kDa的蛋白質(zhì)，具有多個(gè)功能域。大量研究證明，ESET在多種惡性腫瘤中高度表達(dá)，與腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲緊密相關(guān)［4］。ESET的過度表達(dá)與HCC進(jìn)展、腫瘤侵襲性和HCC病人的低生存率顯著相關(guān)，ESET的失活降低HCC細(xì)胞的增殖和遷移能力，表明ESET是HCC中的重要癌基因。遺憾的是，ESET發(fā)揮作用的潛在調(diào)控機(jī)制研究甚少。長鏈非編碼RNA（lncRNA）起初被認(rèn)為作為是多余的，現(xiàn)在很多研究已證實(shí)，lncRNA在生物功能調(diào)控中具有重要作用，尤其肝細(xì)胞癌［5］。多種多樣的lncRNA在腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移中起關(guān)鍵作用［6］，但仍有部分新發(fā)現(xiàn)的lncRNA的作用仍不完全清楚。lncRNA甘露糖4，6-脫水酶反義RNA1（GDP-Mannose 4，6-Dehydratase Antisense RNA1，lncRNA GMDS-AS1）是近期在肺腺癌中新發(fā)現(xiàn)的lncRNA［7］，其在肝癌中的作用尚未可知。本研究擬以肝癌細(xì)胞為研究對(duì)象，觀察ESET、lncRNA GMDS-AS1在肝癌組織中的表達(dá)及對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、凋亡、糖酵解的作用，揭示ESET、lncRNA GMDS-AS1在肝癌細(xì)胞中發(fā)揮調(diào)控作用的潛在關(guān)系，為肝癌的治療提供新的治療靶點(diǎn)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 樣本來自右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院和百色市人民醫(yī)院2019年1月至2020年1月期間接診的行肝癌手術(shù)切除的49例病人的癌組織及對(duì)應(yīng)的癌旁組織。所有病人均簽署知情同意書，本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

人永生化正常肝細(xì)胞THLE-2、肝癌細(xì)胞HepG2購自美國菌種保藏中心；DMEM培養(yǎng)液、胎牛血清購自美國Gibco；Lipofectamin 3000試劑購自美國Thermo Fisher Scientific；TRIzol液購自美國Invitrogen；反轉(zhuǎn)錄試劑盒、定量聚合酶鏈反應(yīng)（qPCR）試劑盒購自日本Takera；鼠抗ESET（A-1）單抗、ESET siRNA質(zhì)粒購自美國圣克魯斯生物；兔抗細(xì)胞增殖抗原標(biāo)志物Ki-67單抗、兔抗葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（GLUT1）多抗、兔抗乳酸脫氫酶A（LDHA）單抗、兔抗活化胱天蛋白酶-3（C-caspase-3）單抗均購自Cell Signaling Technology；HRP標(biāo)記的二抗購自北京索萊寶公司；細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒（CCK8）購自上海東仁化學(xué)研究所；膜聯(lián)蛋白-V異硫氰酸熒光素/碘化丙啶（Annexin V-FITC/PI）細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒購自上海翌圣生物；RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀（RIP）試劑盒購自Millipore公司。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng) THLE-2、HepG2細(xì)胞使用混有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為37 ℃、5%二氧化碳的恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，隔天更換一次培養(yǎng)液。

1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與分組 正常培養(yǎng)的THLE-2、HepG2細(xì)胞設(shè)為THLE-2、HepG2組。將HepG2細(xì)胞分為空白組（不做任何處理）、空載體組（轉(zhuǎn)染pcDNA或si-con）、敲減ESET組（轉(zhuǎn)染si-ESET）、過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1組（轉(zhuǎn)染pcDNA-GMDS-AS1）。具體的轉(zhuǎn)染方法：使用3倍的Lipofectamin 3000轉(zhuǎn)染試劑與各組待轉(zhuǎn)染物質(zhì)（DNA或質(zhì)粒）混合與HepG2細(xì)胞共轉(zhuǎn)染8 h，更換新培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）或蛋白質(zhì)印跡法確認(rèn)轉(zhuǎn)染效率。

1.2.3 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ESET、lncRNA GMDSAS1的表達(dá) 收集細(xì)胞，Trizol液提取總RNA，反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成互補(bǔ)DNA（cDNA），-20 ℃保存待用。以cDNA為模板qPCR實(shí)驗(yàn)的模板，按照qPCR試劑盒要求操作，檢測(cè)分析ESET、lncRNA GMDS-AS1的表達(dá)。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）為內(nèi)參，2-ΔΔCt法計(jì)算ESET、lncRNA GMDS-AS1的表達(dá)水平。儀器程序設(shè)置為：95 ℃，2 min；95 ℃，30 min；60 ℃，30 s；72 ℃，30 s；72 ℃，5 min，41個(gè)循環(huán)。ESET，正向引物5'-AAGACCAGAAGCTCCGTGAA-3'，反向引物5'-CCTGGGAACTGCTCTTCTTG-3'；lncRNA GMDS-AS1，正向引物5′-AATGCTTTGAGGCCAAGCTA-3′，反向引物5′-TGGGTTCATAAGGGTTGCAT-3′；GAPDH，正向引物5'-GACAACAGCCTCAAGATCATCAG-3'，反向引物5'-GTGGCAGTGATGGCATGGA-3'。

1.2.4 蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)ESET、Ki-67、GLUT-1、LDHA、C-caspase-3的蛋白表達(dá) 收集細(xì)胞或組織勻漿，冰上放射免疫沉淀法裂解30 min，提取總蛋白，測(cè)定蛋白濃度，變性。取變性后的蛋白上清做蛋白電泳上樣模板。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳蛋白電泳結(jié)束后，用轉(zhuǎn)膜儀將蛋白從凝膠轉(zhuǎn)移至NC膜，轉(zhuǎn)模環(huán)境需在0 ℃以下。使用含2.5%脫脂奶粉的封閉液對(duì)膜封閉處理（37 ℃孵育2 h）。洗膜3次，將膜浸入稀釋的一抗溶液中（鼠抗ESET（A-1）單抗，1∶800；兔抗Ki-67單抗，1∶1 000；兔抗GLUT-1多抗，1∶1 500；兔抗LDHA單抗，1∶1 000；兔抗C-caspase-3單抗，1∶2 000），4 ℃孵育過夜。充分洗膜，將膜轉(zhuǎn)入稀釋的二抗溶液中，37 ℃孵育2 h。洗膜，用ECL發(fā)光液顯影，曝光。Image J軟件分析蛋白灰度值，以目的蛋白灰度/內(nèi)參GAPDH的灰度表示蛋白的表達(dá)量。

1.2.5 CCK8法檢測(cè)細(xì)胞活性 收集細(xì)胞，調(diào)至0.5×105個(gè)/毫升，取200 μL細(xì)胞接種至96孔板，更換新鮮培養(yǎng)液，分別培養(yǎng)24、48、72、96 h。取出培養(yǎng)24、48、72、96 h的各組細(xì)胞，向細(xì)胞中加入10 μL的CCK8反應(yīng)液，避光孵育20 min。在490 nm波長下檢測(cè)細(xì)胞吸光度［D（λ）490］。

1.2.6 Annexin V-FITC/PI檢測(cè)細(xì)胞凋亡 收集細(xì)胞，洗滌后用結(jié)合緩沖液制成懸液，取500 μL至于反應(yīng)管，再依次加入Annexin V-FITC（5 μL）、PI（5 μL），避光孵育20 min，上流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡?？偟蛲雎剩?）=早期凋亡率（%）+晚期凋亡率（%）。

1.2.7 RIP實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ESET與lncRNA GMDS-AS1的相互作用 收集細(xì)胞，調(diào)至1×107個(gè)/毫升，取1.0 mL至EP管，用磷酸緩沖鹽溶液洗滌3次，加入裂解液冰上裂解。結(jié)束后，分別向EP管中加入5 μL異染色質(zhì)相關(guān)小RNA、免疫球蛋白G（IgG）抗體、Argonaute 2蛋白（Ago2）抗體，再加入2.5 μL的RNA酶抑制劑，輕輕吹打混勻。4 ℃低溫離心10 min（12 000 r/min），洗滌3次，取上清置于磁珠中，4 ℃孵育過夜。用洗滌液洗滌磁珠3次，將磁珠結(jié)合復(fù)合物用于qRT-PCR實(shí)驗(yàn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)中的數(shù)據(jù)均用SPSS 22.0進(jìn)行專業(yè)的統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料使用表示。兩組數(shù)據(jù)比較使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組數(shù)據(jù)之間的比較使用單因素方差分析聯(lián)合LSD-t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肝癌組織和癌旁組織中ESET mRNA和lncRNA GMDS-AS1表達(dá)的影響 與癌旁組織相比，肝癌組織中ESET的mRNA和蛋白表達(dá)均顯著升高，lncRNA GMDS-AS1的表達(dá)顯著降低（P＜0.05），肝癌組織中l(wèi)ncRNA GMDS-AS1的表達(dá)與ESET的表達(dá)之間呈負(fù)相關(guān)性，見表1。THLE-2組相比，HepG2組細(xì)胞ESET的mRNA和蛋白表達(dá)均顯著升高，lncRNA GMDS-AS1表達(dá)顯著降低（P＜0.05），見表2。

表1 ESET mRNA和lncRNA GMDS-AS1在肝癌組織和癌旁組織的表達(dá)/

表1 ESET mRNA和lncRNA GMDS-AS1在肝癌組織和癌旁組織的表達(dá)/

注：ESET mRNA為組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶集合域分叉1微小RNA，lncRNA GMDS-AS1為長鏈非編碼RNA甘露糖4，6-脫水酶反義RNA1。

lncRNA GMDS-AS1 1.02±0.31 0.63±0.20 7.57＜0.001組別癌旁組織肝癌組織t值P值例數(shù)49 49 ESET mRNA 0.99±0.33 5.18±0.94 29.44＜0.001 ESET蛋白0.23±0.07 0.69±0.14 20.57＜0.001

表2 ESET mRNA和lncRNA GMDS-AS1在THLE-2、HepG2中的表達(dá)/

表2 ESET mRNA和lncRNA GMDS-AS1在THLE-2、HepG2中的表達(dá)/

注：ESET mRNA為組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶集合域分叉1微小RNA，lncRNA GMDS-AS1為長鏈非編碼RNA甘露糖4，6-脫水酶反義RNA1，ESET為組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶集合域分叉1。

lncRNA GMDS-AS1 1.01±0.13 0.51±0.08 9.83＜0.001組別THLE-2組HepG2組t值P值重復(fù)次數(shù)9 9 ESET mRNA 1.00±0.17 4.15±0.32 26.08＜0.001 ESET蛋白0.24±0.03 0.67±0.10 12.36＜0.001

2.2 敲減ESET抑制肝癌細(xì)胞的增殖 與空載體組相比，敲減ESET組細(xì)胞ESET的mRNA和蛋白表達(dá)均顯著降低，Ki-67蛋白表達(dá)顯著降低，細(xì)胞在48、72、96 h的活性顯著降低（P＜0.05）。見表3。

表3 敲減ESET抑制肝癌細(xì)胞增殖/

表3 敲減ESET抑制肝癌細(xì)胞增殖/

注：ESET為組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶集合域分叉1，Ki-67為細(xì)胞增殖抗原標(biāo)志物。①與空載體組比較，P＜0.05。

組別空白組空載體組敲減ESET組F值P值細(xì)胞活性（A490）96 h 0.96±0.10 0.95±0.13 0.77±0.09①8.82 0.001重復(fù)次數(shù)48 h 0.46±0.08 0.44±0.06 0.32±0.06①11.38＜0.001 ESET mRNA 0.98±0.22 0.96±0.03 0.50±0.24①18.62＜0.001 ESET 9蛋白0.58±0.07 0.60±0.09 0.24±0.04①75.70＜0.001 Ki-67 0.70±0.11 0.69±0.05 0.35±0.11①40.15＜0.001 24 h 0.25±0.04 0.26±0.02 0.24±0.03 0.93 0.408 72 h 0.71±0.13 0.68±0.07 0.46±0.07①18.84＜0.001 9 9 9

2.3 敲減ESET對(duì)肝癌細(xì)胞糖酵解和凋亡的影響與空載體組相比，敲減ESET組細(xì)胞GLUT-1、LDHA的蛋白表達(dá)均顯著降低，C-caspase-3蛋白表達(dá)顯著升高，細(xì)胞凋亡率顯著升高（P＜0.05）。見表4，圖1。

圖1 敲減組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶集合域分叉1（ESET）的肝癌細(xì)胞凋亡圖及GLUT-1、LDHA、C-caspase-3的蛋白表達(dá)：A為肝癌細(xì)胞的凋亡圖；B為GLUT-1、LDHA和C-caspase-3的蛋白圖

表4 敲減ESET對(duì)肝癌細(xì)胞糖酵解和凋亡的影響/

表4 敲減ESET對(duì)肝癌細(xì)胞糖酵解和凋亡的影響/

注：ESET為組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶集合域分叉1，GLUT-1為葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1，LDHA為乳酸脫氫酶A，C-caspase-3為活化胱天蛋白酶-3。①與空載體組比較，P＜0.05。

組別空白組空載體組敲減ESET組F值P值凋亡率/%4.19±0.59 3.74±0.51 14.41±1.5①329.97＜0.001重復(fù)次數(shù)9 9 9 GLUT-1 0.66±0.04 0.64±0.08 0.47±0.10①16.35＜0.001 LDHA 0.72±0.13 0.76±0.05 0.43±0.10①29.79＜0.001 C-caspase-3 0.25±0.04 0.27±0.02 0.45±0.18①9.53 0.001

2.4 過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的影響 與空載體組相比，過表達(dá)lncRNA GMDSAS1組細(xì)胞lncRNA GMDS-AS1的表達(dá)顯著升高，Ki-67蛋白表達(dá)顯著降低，在48、72、96 h的活性顯著降低（P＜0.05）。見表5。

表5 過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1抑制肝癌細(xì)胞的增殖/

表5 過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1抑制肝癌細(xì)胞的增殖/

注：lncRNA GMDS-AS1為長鏈非編碼RNA甘露糖4，6-脫水酶反義RNA1，Ki-67為細(xì)胞增殖抗原標(biāo)志物。①與空載體組比較，P＜0.05。

組別空白組空載體組過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1組F值P值細(xì)胞活性（A490）96 h 1.03±0.11 0.98±0.12 0.72±0.08①22.73 0.001重復(fù)次數(shù)48 h 0.45±0.08 0.46±0.06 0.34±0.06①8.80＜0.001 lncRNA GMDS-AS1 1.00±0.14 1.10±0.09 5.19±0.43①725.89＜0.001 Ki-67 0.65±0.09 0.63±0.08 0.42±0.06①24.25＜0.001 24 h 0.29±0.04 0.28±0.05 0.27±0.03 0.54 0.590 72 h 0.68±0.09 0.65±0.08 0.47±0.07①17.95＜0.001 9 9 9

2.5 過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1對(duì)肝癌細(xì)胞糖酵解和凋亡的影響 與空載體組相比，過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1組細(xì)胞GLUT-1、LDHA的蛋白表達(dá)均顯著降低，C-caspase-3蛋白表達(dá)顯著升高，細(xì)胞凋亡率顯著升高（P＜0.05）。見表6，圖2。

圖2 過表達(dá)長鏈非編碼RNA甘露糖4，6-脫水酶反義RNA1（lncRNA GMDS-AS1）的肝癌細(xì)胞凋亡圖及GLUT-1、LDHA、C-caspase-3的蛋白表達(dá)：A為過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1的肝癌細(xì)胞凋亡圖；B為GLUT-1、LDHA、C-caspase-3的蛋白圖

表6 過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1抑制肝癌細(xì)胞糖酵解、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡/

表6 過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1抑制肝癌細(xì)胞糖酵解、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡/

注：lncRNA GMDS-AS1為長鏈非編碼RNA甘露糖4，6-脫水酶反義RNA1，GLUT-1為葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1，LDHA為乳酸脫氫酶A，C-caspase-3為活化胱天蛋白酶-3。①與空載體組比較，P＜0.05。

凋亡率/%3.89±0.84 3.92±0.86 14.67±1.94①200.23＜0.001組別空白組空載體組過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1組F值P值重復(fù)次數(shù)9 9 9 GLUT-1 0.61±0.04 0.60±0.08 0.42±0.10①17.15＜0.001 LDHA 0.74±0.11 0.75±0.09 0.43±0.07①35.61＜0.001 C-caspase-3 0.21±0.04 0.23±0.05 0.49±0.08①62.74 0.001

2.6 ESET與lncRNA GMDS-AS1的結(jié)合 與空載體組相比，過表達(dá)ESET組Ago2抗體的細(xì)胞中l(wèi)ncRNA GMDS-AS1表達(dá)顯著升高（P＜0.05）。見表7。

表7 RIP實(shí)驗(yàn)結(jié)果/

表7 RIP實(shí)驗(yàn)結(jié)果/

注：RIP為RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀，lncRNA GMDS-AS1為長鏈非編碼RNA甘露糖4，6-脫水酶反義RNA1，IgG為免疫球蛋白G，Ago2為Argonaute 2蛋白，Input為異染色質(zhì)，ESET為組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶集合域分叉1。

Input 8.84±0.39 8.79±0.92 0.15 0.883組別空載體組過表達(dá)ESET組t值P值重復(fù)次數(shù)Ago2 2.14±0.21 4.97±0.52 15.14＜0.001 lncRNA GMDS-AS1 IgG 0.89±0.10 0.91±0.13 0.37 0.719 9 9

3 討論

ESET是人類肝癌中表達(dá)上調(diào)最顯著的表觀遺傳調(diào)節(jié)因子，ESET的上調(diào)與肝癌病人的轉(zhuǎn)移形成、預(yù)后較差密切相關(guān)［8-9］。近期，Shao等［10］在肝癌的研究中報(bào)道，ESET在肝癌組織和細(xì)胞中低表達(dá)，作為miR-621的下游靶基因調(diào)控肝癌的放射敏感性，揭示miR-621/ESET通路通過激活p53信號(hào)通路的活性提高肝癌細(xì)胞的放射敏感性。本研究發(fā)現(xiàn)，ESET在肝癌組織中的表達(dá)異常升高，并且敲減ESET具有抑制肝癌細(xì)胞增殖、糖酵解，促進(jìn)凋亡的作用，這均與前人的研究相呼應(yīng)。但是ESET發(fā)揮致癌作用的潛在機(jī)制仍需繼續(xù)研究。此研究還發(fā)現(xiàn)了lncRNA GMDS-AS1在肝癌組織中的表達(dá)與ESET的表達(dá)具有明顯的負(fù)相關(guān)性，于是猜測(cè)ESET在肝癌細(xì)胞中的作用可能與lncRNA GMDS-AS1有一定關(guān)系。

lncRNA已被證明是癌癥進(jìn)展的重要調(diào)節(jié)因子，包括肝細(xì)胞癌［11-12］。lncRNA DEAD/H盒蛋白11反義RNA 1調(diào)控肝癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲、糖代謝和凋亡過程［13］。lncRNA遠(yuǎn)端同源框6反義RNA1（lncRNA DLX6-AS1）的沉默，可抑制肝癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，促進(jìn)凋亡的發(fā)生［14］。但是，lncRNA GMDS-AS1在肝癌中的作用仍有待進(jìn)一步研究。Zhao等［15］在肺腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)新的失調(diào)lncRNA，lncRNA GMDS-AS1作為腫瘤抑制基因在肺腺癌中低表達(dá)，過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1能夠在體內(nèi)外抑制癌細(xì)胞的增殖并促進(jìn)凋亡；深入研究還發(fā)現(xiàn)，GMDS-AS1是miR-96-5p的靶基因，GMDS-AS1與miR-96-5p相關(guān)，調(diào)節(jié)LUAD細(xì)胞的增殖和凋亡，說明lncRNA GMDS-AS1作為肺腺癌治療的潛在靶點(diǎn)的前景。但是，lncRNA GMDS-AS1作為新發(fā)現(xiàn)的癌癥調(diào)控因子，其在肝癌中的功能尚未有人研究。本研究使用qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了肝癌組織和癌旁組織中l(wèi)ncRNA GMDS-AS1的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，lncRNA GMDS-AS1在肝癌組織中表達(dá)下調(diào)，這與Zhao在肺腺癌中的研究結(jié)果相吻合［16］。進(jìn)一步研究，通過構(gòu)建過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1的肝癌細(xì)胞，檢測(cè)細(xì)胞增殖、凋亡、糖酵解發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)lncRNA GMDS-AS1抑制了癌細(xì)胞的增殖、糖酵解，促進(jìn)癌細(xì)胞的凋亡，說明lncRNA GMDS-AS1在肝癌中也扮演抑癌基因的角色［17］。此研究還通過RIP實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，ESET與lncRNA GMDS-AS1之間存在結(jié)合力［18］。

綜上所述，甲基轉(zhuǎn)移酶ESET促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖、糖酵解，抑制凋亡，發(fā)揮促進(jìn)癌癥惡化的作用，產(chǎn)生這種作用的潛在機(jī)制與負(fù)向調(diào)節(jié)抑癌因子lncRNA GMDS-AS1相關(guān)，為肝癌的精準(zhǔn)治療提供新靶點(diǎn)。