發(fā)酵大豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及免疫功能的影響

■ 張國(guó)欣 王永海 宋志剛*

（1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東泰安 271018；2.高密市畜牧業(yè)發(fā)展中心，山東濰坊261500）

豆粕具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其蛋白質(zhì)含量豐富，常作為家禽營(yíng)養(yǎng)中蛋白質(zhì)的主要來(lái)源。隨著家禽集約化養(yǎng)殖程度的提高、規(guī)模的擴(kuò)大、市場(chǎng)上對(duì)豆粕的需求量也越來(lái)越大。然而，豆粕中存在抗?fàn)I養(yǎng)因子，制粒后顆粒較硬，難以消化，且家禽從攝入食物到排泄時(shí)間較短，因此還沒(méi)來(lái)得及消化的豆粕便隨之排出，造成了資源的浪費(fèi)和成本的增加。

發(fā)酵豆粕通過(guò)微生物發(fā)酵，有效地降解了豆粕中的主要抗?fàn)I養(yǎng)因子，可改善飼料適口性，對(duì)促進(jìn)動(dòng)物的健康成長(zhǎng)具有重要意義[1-2]。目前學(xué)者對(duì)發(fā)酵豆粕對(duì)蛋雞的影響研究中發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵豆粕組產(chǎn)蛋率、哈氏單位、蛋殼厚度和蛋形指數(shù)均有所提升[3-4]。目前鮮有在海蘭褐蛋雞試驗(yàn)上進(jìn)行發(fā)酵豆粕與40%豆粕高比例的替代研究，本試驗(yàn)以海蘭褐蛋雞為研究對(duì)象，研究用發(fā)酵豆粕替代40%豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及免疫功能的影響，旨在為發(fā)酵豆粕替代正常豆粕在家禽飼糧中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及試驗(yàn)地點(diǎn)

試驗(yàn)材料為濕態(tài)發(fā)酵豆粕，由某公司提供，以豆粕為原料，使用乳酸菌、酵母菌和丁酸梭菌等益生菌發(fā)酵制成，活菌總數(shù)為1×108CFU/g。試驗(yàn)地點(diǎn)在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)科技創(chuàng)新院畜牧科技實(shí)驗(yàn)站進(jìn)行。試驗(yàn)雞舍及配備的蛋雞福利養(yǎng)殖設(shè)備均由山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選用48 周齡144 只體型和產(chǎn)蛋率基本一致的海蘭褐蛋雞，隨機(jī)分為2 組，每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12 只。對(duì)照飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組用發(fā)酵豆粕替代40%的正常豆粕（飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1）。試驗(yàn)期為8 周，每天統(tǒng)計(jì)生產(chǎn)性能，第4 周和第8 周結(jié)束時(shí)測(cè)蛋品質(zhì)，采集血清。

表1 飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1 生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)

生產(chǎn)性能：試驗(yàn)期內(nèi)以重復(fù)為單位統(tǒng)計(jì)采食量、產(chǎn)蛋數(shù)、產(chǎn)蛋重，計(jì)算平均產(chǎn)蛋率、料蛋比、平均蛋重和平均日采食量。

產(chǎn)蛋率（%）=產(chǎn)蛋數(shù)/試驗(yàn)蛋雞數(shù)量×100

合格蛋率（%）=合格蛋數(shù)/總產(chǎn)蛋數(shù)×100

平均蛋重（g）=產(chǎn)蛋總重量（g）/產(chǎn)蛋總數(shù)（個(gè)）

平均日采食量（g）=總采食量（g）/[試驗(yàn)蛋雞數(shù)量（只）×試驗(yàn)天數(shù)（d）]

料蛋比=總耗料量（g）/總產(chǎn)蛋重量（g）

蛋品質(zhì)：第4周和第8周時(shí)，分別從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取3 個(gè)雞蛋，測(cè)定蛋品質(zhì)。采用色差儀（CR-410型，日本美能達(dá)公司）測(cè)定蛋殼顏色，電子天平稱蛋重，游標(biāo)卡尺測(cè)定雞蛋的長(zhǎng)、短徑，蛋殼厚度測(cè)量?jī)x（ETG-1061 型，日本Robot-mation 公司）測(cè)定蛋殼厚度，蛋殼強(qiáng)度測(cè)試儀（EFG-0503 型，日本Robotmation 公司）測(cè)定蛋殼強(qiáng)度，多功能蛋品質(zhì)檢測(cè)儀（EMT-5200 型，日本Robot-mation 公司）測(cè)定蛋白高度、蛋黃顏色、哈氏單位。

1.3.2 外周免疫指標(biāo)

第4 周和第8 周時(shí)，分別于每個(gè)重復(fù)中選取體重接近的1 只雞翅下靜脈采血3 mL，收集血清，標(biāo)記好后于-20 ℃保存待測(cè)。用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）檢測(cè)血清中內(nèi)毒素（ET）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）和免疫球蛋白A（IgA）的含量。所有的測(cè)定程序都嚴(yán)格按照制造商的說(shuō)明進(jìn)行。批內(nèi)和批間變異系數(shù)（CV）均小于10%。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，采用Excel進(jìn)行初步處理，再用SAS 9.1.3 統(tǒng)計(jì)軟件ANOVA 進(jìn)行單因子方差分析，P<0.05 表示差異顯著，0.05≤P<0.10 表示具有差異顯著趨勢(shì)，P>0.05表示差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞生產(chǎn)性能影響

由表2、表3 分析可得，飼糧中用發(fā)酵豆粕代替蛋雞飼糧中40%豆粕可顯著提高海蘭褐蛋雞1～4 周的合格蛋率（P<0.05），對(duì)1～4 周產(chǎn)蛋率、平均日采食量和5～8周的合格蛋率有提升的趨勢(shì)（0.05≤P<0.10），對(duì)其他生產(chǎn)性能指標(biāo)無(wú)顯著影響（P>0.05）。

表2 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞1～4周生產(chǎn)性能的影響

表3 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞5～8周生產(chǎn)性能的影響

2.2 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞蛋品質(zhì)影響

由表4 分析可得，飼糧中用發(fā)酵豆粕代替蛋雞飼糧中40%豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞第4 周的蛋黃顏色和哈氏單位有降低的趨勢(shì)（0.05≤P<0.10），對(duì)其他蛋品質(zhì)指標(biāo)沒(méi)有顯著影響（P>0.05）。

表4 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞第4周蛋品質(zhì)的影響

由表5 分析可得，飼糧中用發(fā)酵豆粕代替蛋雞飼糧中40%豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞第8 周蛋品質(zhì)沒(méi)有顯著影響（P>0.05）。

表5 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞第8周蛋品質(zhì)的影響

2.3 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞免疫功能的影響

由表6 分析可得，發(fā)酵豆粕代替蛋雞飼糧中40%豆粕顯著提高了海蘭褐蛋雞第4 周和第8 周血清IgA水平（P<0.05），降低了第4 周血清ET 水平（P<0.05），且第4 周血清IL-1β有降低趨勢(shì)（0.05≤P<0.10），其余指標(biāo)沒(méi)有顯著差異（P>0.05）。

表6 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞的生產(chǎn)性能的影響

評(píng)估產(chǎn)蛋率與合格蛋率是衡量蛋雞生產(chǎn)性能的主要指標(biāo)。本試驗(yàn)研究表明，用發(fā)酵豆粕代替40%普通豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞第1～4 周合格蛋率有顯著影響，對(duì)產(chǎn)蛋率和平均日采食量有提升的趨勢(shì)。王偉鋒等[5]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中分別添加1%和3%的發(fā)酵豆粕，與對(duì)照組相比，產(chǎn)蛋率出現(xiàn)了顯著降低的現(xiàn)象，其余指標(biāo)則無(wú)顯著差異。而孫亞楠等[6]發(fā)現(xiàn)用2%的發(fā)酵豆粕代替豆粕不僅提高了蛋雞產(chǎn)蛋率，而且還降低了破蛋率；也有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)5%的發(fā)酵豆粕使合格蛋率得到顯著提高，而料蛋比等其余指標(biāo)則無(wú)顯著變化[7]。合格蛋率和采食量的顯著提升，是因?yàn)槎蛊稍谶M(jìn)行發(fā)酵過(guò)程中，使得其中的蛋白質(zhì)分解為多肽和氨基酸等小分子物質(zhì)，有利于機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，并且豆粕在發(fā)酵完后會(huì)產(chǎn)生一種酸香味，誘食效果較強(qiáng)，可以促進(jìn)動(dòng)物的采食[8]。

3.2 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞蛋品質(zhì)的影響

蛋品質(zhì)是區(qū)分蛋雞所產(chǎn)雞蛋好壞的主要依據(jù)，從而直接影響雞蛋的商業(yè)價(jià)值和種用價(jià)值，其外在品質(zhì)和內(nèi)在品質(zhì)都是驗(yàn)證雞蛋好壞的重要指標(biāo)[9]。蛋黃顏色是蛋黃色澤的一個(gè)反映指標(biāo)，其值越大表示蛋黃顏色越深。在本試驗(yàn)中，發(fā)酵豆粕替換40%豆粕使海蘭褐蛋雞第4 周蛋黃顏色有所降低，這與李彬等[9]添加5%濕基豆粕顯著降低蛋黃顏色結(jié)論相一致，而與吳俊峰等[10]發(fā)現(xiàn)飼料中添加發(fā)酵豆粕使得蛋黃顏色提高則不同，這可能與此次替換豆粕比例較大有關(guān)。哈氏單位可以衡量蛋白的新鮮程度，其數(shù)值越大，表示蛋越新鮮。陳慶達(dá)[4]等研究表明，日糧中添加7.5%濕性發(fā)酵豆粕可以提高哈氏單位，改善蛋品質(zhì)。而本試驗(yàn)結(jié)果顯示，用40%發(fā)酵豆粕代替普通豆粕，蛋雞第4周哈氏單位有下降趨勢(shì)，結(jié)果的差異可能與發(fā)酵豆粕高劑量使用的影響有關(guān)，內(nèi)在機(jī)制影響還需做進(jìn)一步的研究。

3.3 發(fā)酵豆粕對(duì)海蘭褐蛋雞免疫功能的影響

免疫系統(tǒng)的存在是為了免受致病性細(xì)菌的入侵和其他有毒有害物質(zhì)的侵害[11]，而動(dòng)物機(jī)體免疫力的強(qiáng)弱可由血清中白細(xì)胞介素水平和抗體水平來(lái)體現(xiàn)[12]。白細(xì)胞介素可介導(dǎo)免疫細(xì)胞的活化、增殖和分化以及對(duì)炎癥反應(yīng)的調(diào)控，以此來(lái)保持機(jī)體炎癥反應(yīng)的平衡[13-14]。

IL-1β通過(guò)參與細(xì)胞生命周期活動(dòng)來(lái)介導(dǎo)機(jī)體的炎癥反應(yīng)[15]，同時(shí)還可與TNF-α共同介導(dǎo)其他細(xì)胞因子來(lái)調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)[16]。

本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，用發(fā)酵豆粕代替蛋雞飼糧中40%豆粕顯著提高了海蘭褐蛋雞第4 周和第8 周IgA 水平，并且顯著降低了第4 周血清ET 水平，同時(shí)第4周血清IL-1β有降低趨勢(shì)。第8周的蛋雞血清ET含量對(duì)照組和試驗(yàn)組差異不顯著。腸道菌群與腸道炎癥的產(chǎn)生十分密切，益生菌的減少會(huì)降低對(duì)致病菌的抑制作用，致病菌可通過(guò)破壞腸道黏膜，打破腸道穩(wěn)態(tài)，引起炎癥反應(yīng)[17]，而陳國(guó)營(yíng)等[18]用枯草芽孢桿菌發(fā)酵的豆粕飼喂蛋雞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其腸道有害菌數(shù)量顯著下降，有益菌數(shù)量則顯著上升。由此可得出，發(fā)酵豆粕所使用的菌種也起到了至關(guān)重要的作用，在目前的研究中，丁酸梭菌有利于維持腸道健康和菌群平衡，還可以緩解腸道損傷，有利于增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體抵抗力[19-20]。乳酸菌同樣作為益生菌的一種，不僅可以抑制細(xì)菌的附著[21]，還可以產(chǎn)生氨基酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可提高動(dòng)物機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，維護(hù)腸道健康[22-23]。這也可能是許多學(xué)者在進(jìn)行發(fā)酵豆粕試驗(yàn)時(shí)所得出來(lái)試驗(yàn)結(jié)果不盡相同的原因。許麗惠等[24]在發(fā)酵豆粕對(duì)黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組的血清蛋白有不同程度提高，而Nie 等[25]和Ruan 等[26]以及Chiang 等[27]在試驗(yàn)中同樣也得到了相似的結(jié)果。球蛋白是B淋巴細(xì)胞所分泌的一種抗體，在體液免疫中發(fā)揮著重要作用，球蛋白含量的增加使得機(jī)體抵抗力有所提升，而IgA 水平的提高也進(jìn)一步印證了Cheng 等[28]的研究結(jié)果，發(fā)酵豆粕的添加應(yīng)用可提高機(jī)體的免疫力。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，用發(fā)酵豆粕代替飼糧中40%豆粕可提高海蘭褐蛋雞合格蛋率和采食量，降低IL-1β因子和ET水平，提高海蘭褐蛋雞IgA水平從而增強(qiáng)了機(jī)體免疫力和抵抗力。