枇杷葉歷代炮制沿革及其現(xiàn)代研究的可視化分析

蒯夢(mèng)妮,張志國(guó),雷思敏,楊喜艷,吳 萍*

(1.常德市第一人民醫(yī)院,湖南 常德 415700;2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,湖南 長(zhǎng)沙 410007;3.長(zhǎng)沙衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院,湖南 長(zhǎng)沙 410100)

枇杷葉為薔薇科枇杷屬植物枇杷Eriobotryajaponica(Thunb.) Lindl.的干燥葉,寇宗奭《本草衍義》載:“其葉形似琵琶,故名。”枇杷葉始載于《名醫(yī)別錄》[1],具有清肺止咳、降逆止嘔之功效,臨床上用于肺熱咳嗽、氣逆喘急、胃熱嘔逆、煩熱口渴等癥。2020 版《中華人民共和國(guó)藥典(一部)》分別收載了枇杷葉和蜜枇杷葉[2]。枇杷葉臨床入藥多以湯劑為主,且其炮制前后臨床應(yīng)用有所差異,生品長(zhǎng)于清肺止咳,多用于肺熱咳喘;蜜炙后能增強(qiáng)潤(rùn)肺止咳作用,常用于肺燥咳嗽[3]。在歷代本草中,有關(guān)枇杷葉的炮制方法記載較多,枇杷葉炮制最早可追溯于晉代,出現(xiàn)凈制;后經(jīng)各朝各代的演變更替,出現(xiàn)甘草汁+酥制、蜜制、棗汁制、姜汁制、切制、炙制、制炭等各種炮制方法?，F(xiàn)代對(duì)枇杷葉化學(xué)成分研究報(bào)道較多,對(duì)枇杷葉及其炮制品的藥理活性、臨床應(yīng)用等研究比較少。為更好地挖掘枇杷葉的作用,擴(kuò)大其臨床應(yīng)用,本研究對(duì)枇杷葉歷代炮制沿革、枇杷葉的研究進(jìn)展進(jìn)行可視化分析,以期為枇杷葉的進(jìn)一步研究提供參考。

1 枇杷葉古代炮制方法沿革

1.1 凈制

枇杷葉凈制首載于晉《肘后備急方》“拭去毛”。宋代有“刷去毛《傷寒總病論》”“溫水浸,刷去毛《普濟(jì)本事方》”“洗,刷去毛盡《小兒衛(wèi)生總微論方》”。元代有“去毛,陰干《瑞竹堂經(jīng)驗(yàn)方》”“去毛尖《衛(wèi)生寶鑒》”。明代有“肥厚而大者良,刷去毛凈,不爾令人咳《本草通玄》”。清代有“去毛筋《溫?zé)峤?jīng)緯》”。以上凈制方法均包含枇杷葉去毛,一直沿用至今[4]。

1.2 切制

枇杷葉切制方法有“凈刷去葉后毛,剉碎(元《活幼心書》)”。

1.3 炮炙

枇杷葉炮炙方法有加輔料炮炙與不加輔料炮炙。其中加輔料炮炙方法有:甘草汁、酥為輔料,“凡使,采得后秤,濕者一葉重一兩,干者三葉重一兩者,是氣足,堪用,使粗布拭上毛令盡,用甘草湯洗一遍,卻用綿再拭令干。每一兩以酥一分炙之,酥盡為度(南北朝《雷公炮炙論》)”;蜂蜜為輔料,“拭去毛蜜涂炙,去毛涂蜜慢火炙(唐《外臺(tái)秘要》、宋《圣濟(jì)總錄》)”“洗,刷去毛盡,涂蜜,炙焦黃色(宋《小兒衛(wèi)生總微論方》)”“凡用剖去背上細(xì)毛,凈盡,著蜜抹勻火烘(明《滇南本草》)”;姜汁為輔料,“拭去毛……姜汁炙(宋《圣濟(jì)總錄》)”“去毛盡涂姜汁炙令香熟為度(宋《太平惠民和劑局方》)”“去毛,姜汁炙黃(明《奇效良方》)”“背有黃毛,凡入劑中惟棵葉用,以粗布拭去毛凈,搗,姜汁浸炙微黃,倒碎煎湯(明《本草蒙荃》)”;棗汁為輔料,“凈刷去毛涂棗汁炙香熟(宋《圣濟(jì)總錄》)”;甘草汁、姜汁或甘草汁、蜜水為輔料,“凡用拭去毛,甘草湯洗再試。治胃病,以姜汁炙,肺病以蜜水涂炙(明《本草綱目》)”。不加輔料炮炙方法有:炙法,“拭去毛炙(晉《肘后備急方》)”“炙去毛(宋《博濟(jì)方》)”“炙,刷去毛(宋《傷寒總病論》)”“用葉需火炙,布拭去毛,不爾射人肺,令咳不已(宋《重修政和經(jīng)史證類備用本草》)”;焙法,“溫水浸,刷去毛,焙(宋《普濟(jì)本事方》)”。枇杷葉古代炮制方法見表1。

表1 枇杷葉古代炮制方法

1.4 枇杷葉歷代炮制方法可視化分析

應(yīng)用Cytoscape 3.7.1軟件以“制法、出處、朝代”為節(jié)點(diǎn),各節(jié)點(diǎn)間依附關(guān)系為連線,構(gòu)建枇杷葉歷代炮制方法可視化網(wǎng)絡(luò),接著用Network Analyzer功能對(duì)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?以順時(shí)針降序排列各節(jié)點(diǎn),其中節(jié)點(diǎn)形狀越大、顏色越深說明其在網(wǎng)絡(luò)中被引用的越多,見圖1。由圖1可知,凈制在歷代炮制規(guī)范中出現(xiàn)次數(shù)最多,在宋代枇杷葉的炮制方法得到了發(fā)展,出現(xiàn)的炮制方法種類最多。

圖1 枇杷葉歷代炮制方法可視化節(jié)點(diǎn)圖

2 《中華人民共和國(guó)藥典》及地方炮制規(guī)范相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中枇杷葉炮制要求

2.1 歷版《中華人民共和國(guó)藥典》中枇杷葉的炮制要求

自1963年版《中華人民共和國(guó)藥典》收錄枇杷葉后,歷版《中華人民共和國(guó)藥典》中枇杷葉炮制品有枇杷葉和蜜枇杷葉,見表2。

表2 歷版《中華人民共和國(guó)藥典》收錄的枇杷葉炮制規(guī)范

2.2 現(xiàn)行地方炮制規(guī)范要求

通過查詢20個(gè)省份枇杷葉現(xiàn)行炮制規(guī)范[26],其中枇杷葉炮制品有鮮枇杷葉、枇杷葉、炒枇杷葉、蜜枇杷葉,見表3。

表3 枇杷葉地方炮制規(guī)范

經(jīng)考證各省份現(xiàn)行炮制規(guī)范,枇杷葉炮制方法為凈制、切制、炮炙(炒枇杷葉、蜜枇杷葉)。其中枇杷葉凈制時(shí)各地方規(guī)范都要求除去茸毛;切制時(shí)有要求切5～10mm絲(上海)、切粗絲(湖南)、切寬絲(北京)、鍘成寬1～1.7cm的橫條片(云南)、切3mm絲(吉林);炒枇杷葉只有上海炮制規(guī)范收載;大部分地方炮制規(guī)范都收載有蜜枇杷葉,然而蜜炙時(shí)每100kg枇杷葉絲,輔料煉蜜的用量北京與吉林用煉蜜25kg,其余各地為20kg。由此可見各地方炮制規(guī)范對(duì)枇杷葉的切制和蜜炙沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),形成了各地的特色。

3 枇杷葉現(xiàn)代研究可視化分析

在CNKI文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)中,以“枇杷葉”為主題詞選擇全文搜索檢索查詢方式,查找1955-2022年間文獻(xiàn),去除無用文獻(xiàn)后共得到345篇有效文獻(xiàn),本研究通過CiteSpace 6.1.R2軟件進(jìn)行可視化網(wǎng)絡(luò)分析。

3.1 枇杷葉關(guān)鍵詞共現(xiàn)分析

關(guān)鍵詞是進(jìn)行文獻(xiàn)研究的核心觀點(diǎn)與主題的高度概括,基于某領(lǐng)域關(guān)鍵詞共現(xiàn)分析,可以挖掘該領(lǐng)域研究熱點(diǎn)。運(yùn)行Citespace 6.1.R2軟件進(jìn)行關(guān)鍵詞分析,選擇時(shí)間跨度為1955-2022年,時(shí)間切片為1年,節(jié)點(diǎn)類型為關(guān)鍵詞,生成關(guān)鍵詞知識(shí)圖譜(圖2)。關(guān)鍵詞知識(shí)圖譜中節(jié)點(diǎn)代表關(guān)鍵詞,節(jié)點(diǎn)大小代表關(guān)鍵詞出現(xiàn)頻次,節(jié)點(diǎn)越大代表關(guān)鍵詞共現(xiàn)頻次越大,節(jié)點(diǎn)間的連線代表關(guān)鍵詞間的共現(xiàn)強(qiáng)度。圖2中共出現(xiàn)333個(gè)節(jié)點(diǎn)、473條連接,網(wǎng)絡(luò)密度為0.008 6。分析結(jié)果顯示,該領(lǐng)域關(guān)鍵詞出現(xiàn)頻次前10的有熊果酸、齊墩果酸、提取、科羅索酸、三萜酸、總黃酮、化學(xué)成分、提取工藝、超聲波、多糖。說明目前枇杷葉的成分研究以及圍繞化學(xué)成分的提取方法及工藝已經(jīng)比較全面,未來的研究可以從藥理作用及臨床應(yīng)用等方面著手。

圖2 枇杷葉關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖譜

3.2 枇杷葉關(guān)鍵詞聚類分析

在關(guān)鍵詞共現(xiàn)分析的基礎(chǔ)上進(jìn)行聚類分析,通過LLR計(jì)算方式歸納出了10個(gè)聚類板塊,分別為:“#0齊墩果酸”“#1分離純化”“#2抗氧化”“#3藥理作用”“#4正交試驗(yàn)”“#5質(zhì)量控制”“#6烏索酸”“#7揮發(fā)油”“#8功能成分”“#9提取效果”“#10枇杷”,聚類圖譜見圖3。模塊化Q值為0.853 3(>0.3),聚類平均輪廓值為0.967 9(>0.5),本次聚類顯著有效。由聚類分析可知“#0齊墩果酸”“#4正交試驗(yàn)”“#5質(zhì)量控制”“#6烏索酸”“#7揮發(fā)油”“#8功能成分”圍繞了枇杷葉的質(zhì)量控制方面進(jìn)行了大量研究。其中齊墩果酸是枇杷葉中的主要活性成分之一,也是《中華人民共和國(guó)藥典》中作為評(píng)判枇杷葉質(zhì)量?jī)?yōu)劣的成分之一。同時(shí)研究者對(duì)枇杷葉的質(zhì)量控制采用了高效液相、薄層掃描、一測(cè)多評(píng)、指紋圖譜、氣相色譜、氣質(zhì)聯(lián)用等一系列的研究方法。朱詩(shī)塔等[27]采用高效液相色譜同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)地枇杷葉中3種黃酮類成分(蘆丁、槲皮素和山柰酚)的含量,發(fā)現(xiàn)山柰酚含量在不同產(chǎn)地樣品中最穩(wěn)定,均可檢出,可作為枇杷葉質(zhì)量控制的標(biāo)志成分。蔡雪萍等[28]采用一測(cè)多評(píng)測(cè)定法測(cè)定了枇杷葉中6個(gè)三萜酸成分的含量,為枇杷葉多指標(biāo)成分評(píng)價(jià)提供了參考。

圖3 枇杷葉關(guān)鍵詞聚類圖譜

從“#2抗氧化”“#3藥理作用”聚類模塊可知,枇杷葉中黃酮類成分、多糖類成分、總酚類成分等具有良好的抗氧化活性[29-31]。枇杷葉提取物可通過激活PI3K/Akt信號(hào)通路減輕LPS誘導(dǎo)的A549細(xì)胞增殖抑制、凋亡和氧化應(yīng)激效應(yīng)[32]。枇杷葉中6種三萜酸在腸道菌群生物轉(zhuǎn)化后可能具有一定的降血糖增效作用。枇杷葉提取物對(duì)卵清蛋白誘導(dǎo)的哮喘小鼠氣道炎癥有抑制效果[33]。葉廣億等[34]通過化痰止咳平喘動(dòng)物實(shí)驗(yàn),表明蜜炙枇杷葉優(yōu)于生枇杷葉,并且水提物優(yōu)于醇提物。

4 討論

4.1 枇杷葉歷代炮制方法的演變

由上述表1和圖1可知,枇杷葉歷代炮制方法中出現(xiàn)次數(shù)最多的為凈制,且所有的凈制都要求去毛(有拭去毛、炙去毛、刷去毛、火炙后用布拭去毛、溫水浸后刷去毛等方式),一直沿用至今。從《新修本草》中“枇杷葉,須火炙,布拭去毛,不爾,射入肺,令咳不已”的記載可看出,歷代醫(yī)家解釋了枇杷葉去毛的原因是擔(dān)心未去毛的枇杷葉會(huì)導(dǎo)致咳嗽。自唐代后隨著醫(yī)藥學(xué)的發(fā)展、炮制技術(shù)的提高,枇杷葉出現(xiàn)了炙制、蜜炙、姜汁制等,由于蜜炙可增強(qiáng)潤(rùn)肺止咳作用,其中蜜炙枇杷葉逐漸成為主流的炮制方法。由《中華人民共和國(guó)藥典》和地方炮制法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)可知,目前各地所用枇杷葉的炮制品也多為蜜枇杷葉。

4.2 枇杷葉研究現(xiàn)狀分析

本研究關(guān)鍵詞共現(xiàn)與聚類分析顯示,枇杷葉的主要研究涉及了化學(xué)成分、有效成分的提取分離、藥理作用等方面。枇杷葉化學(xué)成分研究有熊果酸、齊墩果酸、科羅索酸、山柰酚、三萜酸等。提取分離用到了神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)技術(shù)、微波輔助提取、超聲提取、索式提取、大孔樹脂、柱層析等。藥理作用有化痰止咳、抗糖尿病、抗氧化、抗炎等。從目前的研究現(xiàn)狀可知,關(guān)于枇杷葉的化學(xué)成分研究較多,但是大部分化學(xué)成分研究多局限于單一的化學(xué)成分或是某幾種化學(xué)成分研究,還不能從整體上反映枇杷葉的質(zhì)量控制;而在藥理作用與臨床研究方面的研究還不夠深入。隨著多學(xué)科在中醫(yī)藥學(xué)中的應(yīng)用發(fā)展,為中藥的研究帶來了新的機(jī)遇,這也為枇杷葉由“單味藥→藥對(duì)→方劑→臨床”的點(diǎn)狀應(yīng)用向全面發(fā)展帶來了極大的可行性。

綜上所述,由枇杷葉歷代炮制方法的演變可知,枇杷葉歷代炮制方法大致為凈制、切制、不加輔料制與加輔料制,其中蜜炙自唐代《外臺(tái)秘要》出現(xiàn)后,一直沿用至今。然而對(duì)于現(xiàn)今枇杷葉炮制用輔料的標(biāo)準(zhǔn)、炮炙的火候、輔料的用量等尚未有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),流通中的枇杷葉藥材與其炮制品標(biāo)準(zhǔn),還有待進(jìn)一步研究。本研究將枇杷葉炮制方法與現(xiàn)代研究進(jìn)行了可視化處理,為開展枇杷葉的炮制工藝規(guī)范化、經(jīng)典名方復(fù)方中藥制劑研發(fā),和及時(shí)了解枇杷葉研究發(fā)展動(dòng)態(tài)提供了參考。