31～60日齡中速型黃羽肉雞異亮氨酸需要量研究

范秋麗 茍鐘勇 張 賽 林廈菁 董曉麗 鄧遠(yuǎn)帆 蔣宗勇 阮 棟* 蔣守群*

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所,畜禽育種國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南動(dòng)物營養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州 510640;2.希杰(上海)商貿(mào)有限公司,上海 201107)

異亮氨酸既是畜禽生長發(fā)育的必需氨基酸之一,又是支鏈氨基酸中唯一兼并生糖和生酮的氨基酸[1]。異亮氨酸不僅能夠促進(jìn)機(jī)體合成蛋白質(zhì)以及需要的激素和酶類,抑制蛋白質(zhì)的分解[2-3];還可作為合成谷氨酰胺的底物參與調(diào)節(jié)氨基酸代謝和能量供應(yīng)[4]。前人研究報(bào)道,異亮氨酸可加速胚胎生長發(fā)育[5],還可通過促進(jìn)蛋白質(zhì)的沉積和利用改善肉品質(zhì)、降低氮排放[6-7],通過提高腸道消化酶活性和有益菌群豐度改善腸道健康[1],通過提高抗氧化酶活性提高機(jī)體抗氧化功能;此外,異亮氨酸還可通過改善黏膜物理屏障、增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬和殺菌能力以及調(diào)節(jié)免疫因子活性等提高機(jī)體非特異性免疫功能[8]。本課題組前期在黃羽肉雞和種母雞上的研究表明,不同水平異亮氨酸可改善1～63日齡快大型黃羽肉雞生長性能[9],同時(shí)還顯著影響黃羽肉種雞采食量、產(chǎn)蛋率和蛋品質(zhì)[10]。近年,在低蛋白質(zhì)飼糧中添加合成氨基酸降低飼料成本和節(jié)約蛋白質(zhì)飼料資源技術(shù)的研究及應(yīng)用日益受到重視,但目前國內(nèi)外關(guān)于地方特色和優(yōu)勢品種肉雞對(duì)異亮氨酸需要量的研究報(bào)道鮮少。為此,本試驗(yàn)以31～60日齡中速型黃羽肉雞為對(duì)象,研究飼糧異亮氨酸水平對(duì)其生長性能、胴體性狀、血漿生化指標(biāo)、腸道氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)以及蛋白質(zhì)代謝和肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)量的影響,為科學(xué)配制中速型黃羽肉雞飼糧提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1日齡黃羽肉雞母雞購自佛山新廣農(nóng)牧有限公司。異亮氨酸純度≥90%,由希杰(上海)商貿(mào)有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用1 080只初始體重為(649.17±0.84) g的31日齡黃羽肉雞母雞,根據(jù)體重一致原則隨機(jī)分為6個(gè)組,每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30只雞。各組飼糧異亮氨酸水平分別為0.58%、0.66%、0.74%、0.82%、0.90%和0.98%。試驗(yàn)期30 d。所有試驗(yàn)雞1～30日齡飼喂相同營養(yǎng)水平的飼糧。

1.3 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)所用飼糧主要由玉米、豆粕、小麥和花生粕等原料組成,飼糧營養(yǎng)水平參考各原料實(shí)測值以及《黃羽肉雞營養(yǎng)需要量》(NY/T 3645—2020)標(biāo)準(zhǔn)科學(xué)配制。應(yīng)用氨基酸分析儀(L-8900,Hitachi,日本)測定各組飼糧異亮氨酸實(shí)際水平分別為0.58%、0.67%、0.74%、0.83%、0.90%、0.98%,各組飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)安排專人負(fù)責(zé)飼養(yǎng)。試驗(yàn)雞于封閉式雞舍地面平養(yǎng),地面鋪放谷殼,自由采食顆粒料,自由飲水,自然通風(fēng),保持雞舍清潔衛(wèi)生。按常規(guī)飼養(yǎng)操作規(guī)程飼養(yǎng)和常規(guī)免疫程序免疫。

續(xù)表1項(xiàng)目 Items飼糧異亮氨酸水平 Dietary isoleucine levels/%0.580.660.740.820.900.98營養(yǎng)水平 Nutrient levels2)代謝能 ME/(MJ/kg)12.6012.6012.6012.6012.6012.60粗蛋白質(zhì) CP18.0618.0718.0218.1818.2018.05鈣 Ca0.810.800.780.780.780.78總磷 TP0.570.550.540.530.540.54非植酸磷 NPP0.260.260.260.260.260.26賴氨酸 Lys1.051.021.031.051.031.02蛋氨酸 Met0.410.410.410.410.410.41蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys0.720.720.720.720.720.72色氨酸 Trp0.180.180.180.180.180.18蘇氨酸 Thr0.740.750.750.720.730.74精氨酸 Arg1.051.031.061.061.041.03亮氨酸 Leu1.861.841.851.841.831.86纈氨酸 Val0.800.820.840.810.820.83異亮氨酸 Ile0.580.670.740.830.900.98

1.5 樣品采集與制備

試驗(yàn)結(jié)束時(shí),每重復(fù)選取接近平均體重的2只雞翅靜脈采集全血5 mL于含有肝素鈉的抗凝管中,3 500 r/min離心10 min后取上層血漿分裝于500 μL滅菌離心管,于-80 ℃保存?zhèn)錅y血漿生化指標(biāo)。采血后的試驗(yàn)雞頸部放血致死,屠體、半凈膛、全凈膛、胸肌和腿肌等分割方法按《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量計(jì)算方法》(NY/T 823—2020)操作。剖取空腸和回腸中間部位約5 cm剪開,用生理鹽水將內(nèi)容物沖洗干凈后濾紙吸去多余水分,分裝于2 mL無核糖核酸酶(RNase)離心管中,于-80 ℃保存?zhèn)錅y空腸和回腸氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)以及蛋白質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)量。取肝臟樣品分裝于2 mL無RNase離心管中,于-80 ℃保存?zhèn)錅y肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)量。

1.6 指標(biāo)測定及方法

1.6.1 生長性能

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天20:00斷料供水,次日08:00以重復(fù)為單位稱重,計(jì)算平均日增重、平均日采食量和料重比;記錄整個(gè)試驗(yàn)期各組死亡雞數(shù)量,統(tǒng)計(jì)死亡率。

1.6.2 胴體性狀

屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率等的計(jì)算方法均參照《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量計(jì)算方法》(NY/T 823—2004)。

1.6.3 血漿生化指標(biāo)

血漿白蛋白(ALB)、尿酸(UA)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)含量以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)和肌酸激酶(CK)活性等生化指標(biāo)檢測試劑盒均購自南京建成生物工程研究所,各指標(biāo)測定步驟和結(jié)果計(jì)算嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.6.4 腸道氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)以及蛋白質(zhì)代謝和肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)

空腸、回腸和肝臟組織RNA提取、cDNA反轉(zhuǎn)錄以及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)等操作流程和條件均參考Ruan等[11]的方法。引物設(shè)計(jì)采用NCBI Primer-BLAST在線軟件,內(nèi)參基因選用β-肌動(dòng)蛋白(β-actin),并采用2-ΔΔCt法計(jì)算所有目的基因mRNA相對(duì)表達(dá)量。引物信息見表2。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

應(yīng)用SAS 9.2軟件中的GLM過程進(jìn)行單因素方差分析,在組間差異顯著的前提下進(jìn)行Duncan氏多重比較、線性(linear)以及二次(quadratic)趨勢分析,P<0.05為差異顯著,0.05≤P<0.10為差異有顯著趨勢,試驗(yàn)結(jié)果以平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示。

對(duì)差異顯著的關(guān)鍵生長性能和胴體性狀指標(biāo)應(yīng)用REG程序進(jìn)行二次曲線(y=Ax2+Bx+C,y表示相應(yīng)指標(biāo)測定值,x表示飼糧異亮氨酸水平,A和B分別代表回歸方程的二次項(xiàng)和一次項(xiàng)系數(shù),C為方程的常數(shù)項(xiàng),x0=-B/2A為飼糧異亮氨酸適宜水平)回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧異亮氨酸水平對(duì)31～60日齡黃羽肉雞生長性能的影響

由表3可知,黃羽肉雞料重比隨飼糧異亮氨酸水平的升高呈線性和二次變化(P<0.05),當(dāng)飼糧異亮氨酸水平為0.82%時(shí),料重比最低,顯著低于其他水平(P<0.05);終末體重(P=0.086)和平均日增重(P=0.091)均隨飼糧異亮氨酸水平的升高呈升高趨勢。飼糧異亮氨酸水平對(duì)平均日采食量和死亡率無顯著影響(P>0.05)。

表3 飼糧異亮氨酸水平對(duì)31～60日齡黃羽肉雞生長性能的影響

2.2 飼糧異亮氨酸水平對(duì)60日齡黃羽肉雞胴體性狀的影響

由表4可知,隨著飼糧異亮氨酸水平的升高,黃羽肉雞屠宰率呈線性和二次變化(P<0.05),腹脂率呈線性降低(P<0.05),胸肌率有升高的趨勢(P=0.071)。與0.58%異亮氨酸水平組相比,0.82%異亮氨酸水平組半凈膛率顯著升高(P<0.05),0.74%和0.82%異亮氨酸水平組全凈膛率顯著升高(P<0.05)。飼糧異亮氨酸水平對(duì)腿肌率無顯著影響(P>0.05)。

表4 飼糧異亮氨酸水平對(duì)60日齡黃羽肉雞胴體性狀的影響

2.3 飼糧異亮氨酸水平對(duì)60日齡黃羽肉雞血漿生化指標(biāo)的影響

由表5可知,黃羽肉雞血漿ALB和TC含量隨飼糧異亮氨酸水平的升高呈線性和二次變化(P<0.05),血漿GOT活性隨飼糧異亮氨酸水平的升高有降低趨勢(P=0.093)。與0.58%異亮氨酸水平組相比,0.74%和0.82%異亮氨酸水平組血漿UA含量顯著降低(P<0.05)。飼糧異亮氨酸水平對(duì)血漿GLU和TG含量以及血漿GPT和CK活性均無顯著影響(P>0.05)。

2.4 飼糧異亮氨酸水平對(duì)60日齡黃羽肉雞腸道氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因表達(dá)的影響

由表6可知,黃羽肉雞空腸和回腸小肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(PepT1)mRNA相對(duì)表達(dá)量隨飼糧異亮氨酸水平的升高呈線性和二次變化(P<0.05),空腸B0系統(tǒng)中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體(B0AT)mRNA相對(duì)表達(dá)量隨飼糧異亮氨酸水平的升高有升高趨勢(P=0.071)。飼糧異亮氨酸水平對(duì)空腸興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體3(EAAT3)、堿性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(CAT1)以及回腸B0AT、EAAT3和CAT1 mRNA相對(duì)表達(dá)量均無顯著影響(P>0.05)。

表6 飼糧異亮氨酸水平對(duì)60日齡黃羽肉雞腸道氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因表達(dá)的影響

2.5 飼糧異亮氨酸水平對(duì)60日齡黃羽肉雞腸道蛋白質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

由表7可知,與0.58%異亮氨酸水平組相比,0.74%和0.82%異亮氨酸水平組黃羽肉雞回腸20S蛋白酶體(20SP)mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著降低(P<0.05)。隨著飼糧異亮氨酸水平的升高,空腸(P=0.076)和回腸(P=0.093)真核細(xì)胞翻譯起始因子4E結(jié)合蛋白1(4E-BP1)以及回腸核糖體蛋白S6激酶1(S6K1)mRNA相對(duì)表達(dá)量(P=0.068)呈升高趨勢。飼糧異亮氨酸水平對(duì)空腸S6K1、20SP、組織蛋白酶B(CTSB)以及回腸CTSBmRNA相對(duì)表達(dá)量均無顯著影響(P>0.05)。

表7 飼糧異亮氨酸水平對(duì)60日齡黃羽肉雞腸道蛋白質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

2.6 飼糧異亮氨酸水平對(duì)60日齡黃羽肉雞肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

由表8可知,黃羽肉雞肝臟3-羥基3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMGCR)mRNA相對(duì)表達(dá)量隨飼糧異亮氨酸水平的升高呈線性和二次變化(P<0.05),肝臟肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1(CPT1)mRNA相對(duì)表達(dá)量呈二次變化(P<0.05)。與0.58%異亮氨酸水平組相比,0.82%異亮氨酸水平組肝臟沉默信息調(diào)節(jié)因子1(SIRT1)mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著升高(P<0.05)。飼糧異亮氨酸水平對(duì)肝臟過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)mRNA相對(duì)表達(dá)量無顯著影響(P>0.05)。

表8 飼糧異亮氨酸水平對(duì)60日齡黃羽肉雞肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

2.7 二次曲線回歸分析估測飼糧異亮氨酸適宜水平

由表9可知,以料重比、屠宰率、半凈膛率、全凈膛率和腹脂率等差異顯著的生長性能和胴體性狀指標(biāo)為效應(yīng)指標(biāo),通過二次曲線回歸方程估測,31～60日齡黃羽肉雞母雞飼糧異亮氨酸適宜水平分別為0.76%、0.83%、0.79%、0.81%和0.79%。

表9 二次曲線回歸模型估測飼糧異亮氨酸適宜水平

3 討 論

3.1 飼糧異亮氨酸水平對(duì)31～60日齡黃羽肉雞生長性能和胴體性狀的影響

飼糧組成以及肉雞品種、性別和日齡等因素均影響肉雞異亮氨酸需要量。目前,肉雞異亮氨酸需要量研究報(bào)道主要集中在玉米-豆粕型飼糧和在白羽肉雞方面。Corzo等[12]研究報(bào)道,玉米-豆粕型飼糧中添加0.5和1.0 g/kg的異亮氨酸可提高28～42日齡羅斯308肉公雞體重、飼料轉(zhuǎn)化率和胸肌率,同時(shí)降低腹脂率。Ma等[6]研究報(bào)道,玉米-豆粕型飼糧中添加0.13%和0.26%異亮氨酸除了提高1～42日齡科寶肉公雞體增重和飼料轉(zhuǎn)化率以及降低腹脂率外,還可提高平均日采食量。Kidd等[13]研究表明,玉米-豆粕型飼糧中添加不同水平異亮氨酸顯著提高18～56日齡肉公雞體重、飼料轉(zhuǎn)化率和胴體性狀,且30～56日齡肉雞飼糧異亮氨酸適宜水平為5.5～6.6 g/kg。Hale等[14]研究報(bào)道,玉米-豆粕型飼糧0.42%～0.82%水平異亮氨酸顯著影響30～42日齡愛拔益加(AA)、羅斯508和羅斯708肉母雞體重、采食量、飼料轉(zhuǎn)化率、胸肌率和腿肌率,且以生長性能和胴體性狀為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過二次曲線回歸模型估測,飼糧異亮氨酸適宜水平為0.63%～0.68%。本研究結(jié)果表明,玉米-豆粕型飼糧0.58%～0.98%水平異亮氨酸雖然對(duì)31～60日齡黃羽肉雞平均日增重、平均日采食量和腿肌率無顯著影響,但顯著影響料重比和腹脂率,同時(shí)顯著影響屠宰率、半凈膛率和全凈膛率,說明適宜飼糧異亮氨酸水平可改善肉雞生長性能和胴體品質(zhì),此結(jié)果與前人研究報(bào)道一致,同時(shí)也與羅燕紅等[15]應(yīng)用異亮氨酸降低肥育豬料重比、提高屠宰率的研究結(jié)果相似。本課題組前期研究黃羽肉雞精氨酸[11]、蛋氨酸[16]、色氨酸[17]和蘇氨酸[18]等氨基酸需要量均使用二次曲線回歸模型進(jìn)行最適需要量估測,因此,本試驗(yàn)以料重比、屠宰率、半凈膛率、全凈膛率和腹脂率等差異顯著的生長性能和胴體性狀指標(biāo)為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過二次回歸方程估測,得出31～60日齡黃羽肉雞母雞飼糧異亮氨酸適宜水平為0.76%～0.83%,此結(jié)果高于《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)和《黃羽肉雞營養(yǎng)需要量》(NY/T 3645—2020)中相同日齡階段肉用仔雞的需要量0.63%～0.75%和黃羽肉雞的需要量0.67%。

3.2 飼糧異亮氨酸水平對(duì)黃羽肉雞血漿生化指標(biāo)的影響

ALB和UA可在一定程度上反映蛋白質(zhì)和氨基酸在體內(nèi)的代謝平衡情況,ALB含量升高,表明機(jī)體蛋白質(zhì)合成和免疫反應(yīng)都有所增強(qiáng);UA含量降低,則表明機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的利用率提高[19]。低蛋白質(zhì)飼糧導(dǎo)致機(jī)體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的攝入量增加,胰島素敏感性降低,從而使血液GLU含量升高[20]。TG和TC含量是反映機(jī)體內(nèi)脂肪代謝的關(guān)鍵指標(biāo),其含量降低表明體內(nèi)脂代謝增強(qiáng)[21]。GPT、GOT和CK活性增強(qiáng),表明機(jī)體存在損傷和代謝障礙[18]。Ullah等[22]研究表明,飼糧異亮氨酸水平對(duì)蛋雞血清ALB含量無顯著影響,但顯著降低GLU含量。Ma等[6]研究發(fā)現(xiàn),飼糧異亮氨酸水平顯著降低肉雞血清TG和TC含量,同時(shí)通過升高胰島素含量降低血清GLU含量。本課題組林廈菁等[10]前期研究顯示,飼糧異亮氨酸水平顯著影響快大型黃羽肉種雞血清TG、TC、GLU含量和CK活性。本研究結(jié)果表明,飼糧異亮氨酸水平顯著影響中速型黃羽肉雞血漿ALB、UA和TC含量,且隨著飼糧異亮氨酸水平的升高,血漿ALB和TC含量呈線性和二次變化,血漿UA含量降低,此結(jié)果與前人研究結(jié)果一致,說明適宜水平的異亮氨酸可提高蛋白質(zhì)沉積和脂代謝;同時(shí),飼糧異亮氨酸水平對(duì)血漿GPT、GOT和CK活性均無顯著影響,此結(jié)果與Dong等[23]和Azzam等[24]應(yīng)用異亮氨酸和纈氨酸等支鏈氨基酸在蛋雞上的研究結(jié)果相似,這說明在本試驗(yàn)條件下,飼糧異亮氨酸的補(bǔ)充對(duì)肉雞機(jī)體未造成損傷。

3.3 飼糧異亮氨酸水平對(duì)黃羽肉雞腸道氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)以及蛋白質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

編碼寡肽和氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因在腸道的表達(dá)可揭示氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)吸收機(jī)制,其中具有代表性的有PepT1、B0AT、EAAT3和CAT1等基因,分別在轉(zhuǎn)運(yùn)腸上皮細(xì)胞刷狀緣膜和基底膜上的二肽、三肽、中性和陽離子氨基酸以及大型脂肪族氨基酸中發(fā)揮著重要的作用[25-26]。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),PepT1和B0AT在腸道中的表達(dá)受飼糧色氨酸水平的影響[17]。Zhang等[27]研究報(bào)道,仔豬低蛋白質(zhì)飼糧補(bǔ)充亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸等支鏈氨基酸可提高空腸PepT1、B0AT和CAT1表達(dá)水平。本研究結(jié)果表明,飼糧異亮氨酸水平顯著影響黃羽肉雞空腸和回腸PepT1 mRNA相對(duì)表達(dá)量,與前人研究結(jié)果相似,且空腸和回腸PepT1 mRNA相對(duì)表達(dá)量隨飼糧異亮氨酸水平的升高呈線性和二次變化,這說明適宜水平的異亮氨酸可促進(jìn)腸道內(nèi)寡肽的轉(zhuǎn)運(yùn)。

氨基酸激活的哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號(hào)通路是參與蛋白質(zhì)合成的主要信號(hào)通路之一,mTOR激活后可磷酸化下游靶點(diǎn)4E-BP1和S6K1,進(jìn)而啟動(dòng)蛋白質(zhì)的翻譯和合成[28]。研究報(bào)道,肉雞腸道和肌肉中4E-BP1、S6K1基因表達(dá)水平均隨飼糧亮氨酸水平的升高而顯著升高,從而促進(jìn)肉雞腸道的發(fā)育和體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成[29-30]。本研究結(jié)果顯示,隨著飼糧異亮氨酸水平的升高,黃羽肉雞空腸和回腸4E-BP1以及回腸S6K1 mRNA相對(duì)表達(dá)量均有升高的趨勢,與前人研究結(jié)果相似。溶酶體和ATP依賴的泛素/蛋白酶系統(tǒng)是蛋白質(zhì)水解的主要途徑,其中20SP和CTSB是主要的水解酶和蛋白水解核心[31]。本研究結(jié)果表明,黃羽肉雞回腸20SPmRNA相對(duì)表達(dá)量隨飼糧異亮氨酸水平的升高顯著降低,此結(jié)果與Miao等[32]應(yīng)用精氨酸在蛋雞十二指腸上的研究結(jié)果相似,說明適宜水平的異亮氨酸可通過提高蛋白質(zhì)合成相關(guān)基因表達(dá)和降低蛋白質(zhì)水解相關(guān)基因表達(dá)提高肉雞體內(nèi)蛋白質(zhì)沉積,此結(jié)果也與本研究中肉雞血漿UA含量變化結(jié)果一致。

3.4 飼糧異亮氨酸水平對(duì)黃羽肉雞肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

SIRT1已被證明可參與機(jī)體脂肪代謝和抗氧化,且SIRT1的激活可通過抑制脂肪生成相關(guān)基因HMGCR和PPARγ的表達(dá),同時(shí)提高脂肪分解相關(guān)基因CPT1的表達(dá)來緩解脂質(zhì)沉積[33-34]。Ma等[6]研究發(fā)現(xiàn),低蛋白質(zhì)飼糧添加異亮氨酸可通過激活單磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)和Janus激酶2(JAK2)/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)信號(hào)通路降低肉雞脂肪沉積,其中肝臟和脂肪組織PPARγ表達(dá)量降低,同時(shí)CPT1表達(dá)量升高。本研究結(jié)果表明,隨著飼糧異亮氨酸水平的升高,肉雞肝臟HMGCRmRNA相對(duì)表達(dá)量呈線性和二次變化,肝臟CPT1 mRNA相對(duì)表達(dá)量呈二次變化;此外,肝臟SIRT1 mRNA相對(duì)表達(dá)量也隨飼糧異亮氨酸水平的升高而顯著升高,這說明適宜水平的異亮氨酸可通過降低肝臟脂肪合成相關(guān)基因表達(dá)水平以及提高脂肪分解相關(guān)基因表達(dá)水平達(dá)到降低脂肪沉積的目的,此結(jié)果也與本研究中肉雞血漿TC含量和腹脂率變化的趨勢相對(duì)應(yīng)。

4 結(jié) 論

飼糧適宜水平的異亮氨酸可改善31～60日齡黃羽肉雞母雞生長性能和胴體性狀,同時(shí)調(diào)節(jié)腸道氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)以及蛋白質(zhì)代謝和肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)。通過二次曲線回歸模型估測,肉雞獲得最佳生長性能和胴體性狀的飼糧異亮氨酸適宜水平為0.76%～0.83%;其中,以料重比為主要評(píng)價(jià)指標(biāo),黃羽肉雞母雞飼糧異亮氨酸適宜水平為0.76%,每日需要量為735 mg。