基于生物信息學(xué)探討M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)基因?qū)Ω伟┗颊哳A(yù)后及藥物治療效果的影響

白媛媛 侯恩存

(1 廣西中醫(yī)藥大學(xué)研究生院,廣西南寧市 530001;2 廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院腫瘤二區(qū),廣西南寧市 530011)

肝癌是臨床上常見的癌癥,在過去20年里,發(fā)展中國家的肝癌發(fā)生率及病死率逐漸超過發(fā)達(dá)國家[1]。由于臨床表現(xiàn)出現(xiàn)較晚、對常規(guī)化療和靶向治療的高耐藥、頻繁復(fù)發(fā)等因素,肝癌的病死率居高不下[2]。肝癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素包括HBV感染、丙型肝炎病毒感染、脂肪肝、過量酗酒等。手術(shù)治療僅適用于早期肝癌患者,而這部分患者僅占15%左右,且隨著肝臟再生能力的下降,可選擇的治療方式越少,這導(dǎo)致肝癌患者的預(yù)后較差[3]。因此,需要構(gòu)建能夠預(yù)測肝癌患者預(yù)后的模型,從而個(gè)性化地制訂更為合理的治療方案來提高肝癌患者生存率。

巨噬細(xì)胞作為人體先天免疫系統(tǒng)中一種極為重要的免疫細(xì)胞,它不僅可以通過自身的吞噬功能有效清除外來病原體,還可以通過釋放多種免疫激活因子刺激其他免疫細(xì)胞的功能,使人體免受外來病原體的侵害。研究表明,巨噬細(xì)胞具有高度異質(zhì)性和可塑性,可在不同組織分泌的信號因子刺激下被活化,并出現(xiàn)表型轉(zhuǎn)化及功能變化[4-6]。隨著對免疫細(xì)胞與癌癥之間關(guān)系研究的深入,有學(xué)者發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境中存在大量的巨噬細(xì)胞浸潤,即腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associated macrophage,TAM),并且發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞釋放的多種細(xì)胞因子如巨噬細(xì)胞集落刺激因子、白細(xì)胞介素4等,可誘導(dǎo)TAM向M2型極化,而M2型TAM的主要功能為促腫瘤血管生成,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲、遷移和浸潤,以及抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)[7-9]。目前已有研究顯示,肝癌細(xì)胞內(nèi)的Wnt配體通過經(jīng)典Wnt信號通路刺激TAM向M2型極化,從而導(dǎo)致肝癌細(xì)胞增殖、遷移和免疫耐受[10]。另有學(xué)者發(fā)現(xiàn),在肝癌發(fā)展的早期階段,肝星狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在肝癌衍生生長因子的刺激下會(huì)分別轉(zhuǎn)變?yōu)榘┌Y相關(guān)成纖維細(xì)胞和M2型TAM,在細(xì)胞轉(zhuǎn)換期間肝星狀細(xì)胞與巨噬細(xì)胞存在相互作用,可相互刺激對方進(jìn)行轉(zhuǎn)換[11]。此外,有研究表明,通過上調(diào)受體相互作用蛋白激酶與抑制脂肪酸氧化可阻斷M2型TAM的免疫抑制作用,這對肝癌發(fā)生與發(fā)展有抑制作用[12]。由此可見,M2型TAM與肝癌的發(fā)生和發(fā)展息息相關(guān),并且通過藥物實(shí)現(xiàn)阻斷M2型TAM的相關(guān)功能可能是治療肝癌的一種新方向。因此,本研究通過生物信息學(xué)方法篩選與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因,分析該類基因?qū)Ω伟┗颊哳A(yù)后的影響,并基于與該類基因相關(guān)的藥物進(jìn)行藥物敏感性分析,為肝癌的臨床診療提供參考。

1 材料與方法

1.1 肝癌患者的基因表達(dá)、臨床數(shù)據(jù)及肝癌基因突變數(shù)據(jù)的獲取 在癌癥基因組圖譜(the Cancer Genome Atlas,TCGA)數(shù)據(jù)庫(https://portal.gdc.cancer.gov/repository)界面下,在“Cases”的“Project”中選擇“LIHC”,在“File”的“Data Category”“Data Type”中分別選擇“transcriptome profiling”“Gene Expression Quantification”,下載基因表達(dá)數(shù)據(jù),對下載后的數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理,共獲得374例肝癌患者肝癌組織樣本和50個(gè)正常組織樣本的基因表達(dá)數(shù)據(jù);在“Cases”選擇不變的情況下,在“File”的“Data Category”中選擇“Clinical”,下載肝癌患者相關(guān)的臨床數(shù)據(jù),在對數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理后獲取肝癌患者的年齡、性別、生存時(shí)間、腫瘤分級與分期等臨床數(shù)據(jù),用于后續(xù)的生存分析;在“Cases”選擇不變的情況下,在“File”的“Data Category”“Data Type”中分別選擇“simple nucleotide variation”“Masked Somatic Mutation”,下載肝癌基因突變數(shù)據(jù)。在基因表達(dá)匯編(Gene Expression Omnibus,GEO)數(shù)據(jù)庫(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo)中下載肝癌基因表達(dá)譜芯片GSE20140,芯片內(nèi)包含37例肝癌患者的肝癌組織樣本基因表達(dá)數(shù)據(jù)和臨床數(shù)據(jù),利用GPL5474平臺(tái)獲取每個(gè)探針結(jié)果所代表的基因名稱。

1.2 與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因的篩選 基于R語言(4.1.2版本),利用CIBERSORT算法分析從TCGA數(shù)據(jù)庫獲得的正常組織樣本和肝癌組織樣本中22種免疫細(xì)胞的占比,將分析結(jié)果作為每個(gè)組織樣本中22種免疫細(xì)胞的相對含量。利用CIBERSORT算法分析結(jié)果提供的參數(shù)信息,當(dāng)所有免疫細(xì)胞子集上反褶積結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),則可判定每個(gè)組織樣本中免疫細(xì)胞相對含量分析結(jié)果具有準(zhǔn)確性,剔除不準(zhǔn)確的組織樣本;利用CIBERSORT算法分析結(jié)果提供的相關(guān)系數(shù),設(shè)定相關(guān)系數(shù)為0.3再次進(jìn)行篩選,并剔除正常組織樣本,最終獲得與M2型巨噬細(xì)胞具有相關(guān)性的肝癌組織樣本。利用R語言的Pearson檢驗(yàn),分析最終篩選得到的肝癌組織樣本中基因表達(dá)與M2型巨噬細(xì)胞相對含量的相關(guān)性,設(shè)定過濾條件為P=0.01,最終獲得與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因,并輸出相關(guān)性結(jié)果,繪制關(guān)系網(wǎng)絡(luò)圖。

1.3 與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因的富集分析 使用R語言的Bioconductor包對與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因進(jìn)行基因本體論(Gene Ontology,GO)功能富集分析與京都基因和基因組百科全書(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,其中GO功能富集分析包含生物過程、細(xì)胞組分和分子功能。最后通過ggplot2包對GO功能富集分析結(jié)果和KEGG通路富集分析結(jié)果進(jìn)行可視化處理,繪制GO功能富集分析的柱狀圖與KEGG通路富集分析的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖。

1.4 與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌預(yù)后基因篩選及生存分析 (1)使用R語言對從TCGA數(shù)據(jù)庫與GEO數(shù)據(jù)庫下載得到的肝癌組織樣本基因表達(dá)數(shù)據(jù)進(jìn)行批次整理,將兩者合并取交集。根據(jù)已獲得的與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因進(jìn)行篩選,獲得兩個(gè)數(shù)據(jù)庫都包含的與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因,用于后續(xù)的生存分析。(2)基于從TCGA數(shù)據(jù)庫獲得的肝癌患者肝癌組織樣本基因表達(dá)數(shù)據(jù)和生存數(shù)據(jù),運(yùn)用R軟件中的survival包,采用單因素COX回歸模型分析方法進(jìn)行生存分析,設(shè)定篩選標(biāo)準(zhǔn)為P<0.05,得到與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌預(yù)后基因,其中危險(xiǎn)比(hazard ratio,HR)<1的基因?yàn)榈惋L(fēng)險(xiǎn)基因,HR>1的基因?yàn)楦唢L(fēng)險(xiǎn)基因,最后以森林樹圖呈現(xiàn)結(jié)果。(3)針對獲得的與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌預(yù)后基因,運(yùn)用R語言進(jìn)行LASSO回歸算法篩選特征性基因,最終獲得4個(gè)特征性基因。將上述4個(gè)特征性基因的表達(dá)量乘以各自的LASSO回歸系數(shù)并相加,以建立風(fēng)險(xiǎn)評分公式。根據(jù)公式并基于TCGA數(shù)據(jù)庫肝癌患者的相關(guān)數(shù)據(jù),可計(jì)算每例肝癌患者的風(fēng)險(xiǎn)評分。根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評分的中位值,將肝癌患者分為高風(fēng)險(xiǎn)組和低風(fēng)險(xiǎn)組,利用R語言中的survival包比較兩組患者的生存情況,并運(yùn)用ggsurvplot包繪制生存曲線。

1.5 腫瘤突變負(fù)荷分析、抗癌藥物篩選及藥物敏感性分析 根據(jù)從TCGA數(shù)據(jù)庫下載得到的肝癌基因突變數(shù)據(jù),篩選出高風(fēng)險(xiǎn)組和低風(fēng)險(xiǎn)組中具有肝癌基因突變的肝癌患者,利用R語言的limma包對兩組的腫瘤基因突變數(shù)據(jù)進(jìn)行差異表達(dá)分析,得到兩組的腫瘤突變負(fù)荷,通過繪制小提琴圖將數(shù)據(jù)可視化。利用R語言的oncoPredict包對從TCGA數(shù)據(jù)庫獲得的肝癌患者基因表達(dá)數(shù)據(jù)進(jìn)行藥物敏感性分析,提取高風(fēng)險(xiǎn)組和低風(fēng)險(xiǎn)組中的差異表達(dá)基因,與抗癌藥物敏感性基因組學(xué)數(shù)據(jù)庫(www.cancerrxgene.org)下載的基因進(jìn)行取交集,獲取兩組中基因的藥物敏感性分析數(shù)據(jù),利用R語言limma包對兩組的藥物敏感性結(jié)果進(jìn)行差異分析。

2 結(jié) 果

2.1 與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因的篩選結(jié)果 最終共獲得110個(gè)與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因,其中正相關(guān)基因有32個(gè),負(fù)相關(guān)基因有78個(gè),見圖1。

2.2 與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因的富集分析結(jié)果 GO功能富集分析結(jié)果顯示,與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因涉及445個(gè)生物過程、48個(gè)細(xì)胞成分和39個(gè)分子功能,其中生物過程主要有內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)育、信號受體活性的負(fù)調(diào)控、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)信號通路等,見圖2。KEGG通路富集分析共得到30條信號通路,在信號通路上的富集數(shù)量最多的8個(gè)基因分別為衣被蛋白復(fù)合體(coatomer protein complex,COP)Z1、COPZ2、大麻素受體相互作用蛋白1(cannabinoid receptor interacting protein 1,CNRIP1)、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素結(jié)合蛋白(corticotropin releasing hormone binding protein,CRHBP)、含LY6/PLAUR結(jié)構(gòu)域蛋白1(LY6/PLAUR domain containing 1,LYPD1)、環(huán)形交叉軸突導(dǎo)向受體同源物4(roundabout guidance receptor,homolog 4,ROBO4)、磷酸二酯酶2A(phosphodiesterase 2A,PDE2A)、同源盒蛋白 A13(homeobox A13,HOXA13),其涉及的信號通路主要為內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)育、信號受體活性的負(fù)調(diào)控等,見圖3。

圖2 GO功能富集分析柱狀圖(僅展示前10個(gè)條目)

圖3 KEGG通路富集分析網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖

2.3 與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌預(yù)后基因篩選及生存分析結(jié)果 (1)單因素COX回歸分析共篩選12個(gè)與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌預(yù)后基因,分別是PDE2A、信號識別顆粒19(signal recognition particle 19,SRP19)、C型凝集素域家族3成員B(C-type lectin domain family 3 member B,CLEC3B)、核纖層蛋白B1(lamin B1,LMNB1)、安眠蛋白A亞基α(meprin A subunit alpha,MEP1A)、TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子9(TATA-box binding protein associated factor 9,TAF9)、CRHBP、脫氧核糖核酸酶 Ⅰ 樣蛋白3(deoxyribonuclease Ⅰ like 3,DNASE1L3)、電壓依賴性陰離子通道 1(voltage dependent anion channel 1,VDAC1)、突觸回蛋白4 (synaptogyrin 4,SYNGR4)、具有序列相似性的家族107成員A(family with sequence similarity 107 member A,FAM107A)、含溴結(jié)構(gòu)域蛋白8(bromodomain containing 8,BRD8),其中高風(fēng)險(xiǎn)基因有7個(gè),低風(fēng)險(xiǎn)基因有5個(gè),見圖4。再通過LASSO回歸的10倍交叉驗(yàn)證,最后確定4個(gè)特征性基因,分別是CLEC3B、LMNB1、TAF9、SYNGR4,其中CLEC3B為低風(fēng)險(xiǎn)基因,LMNB1、TAF9、SYNGR4為高風(fēng)險(xiǎn)基因,見圖5。建立風(fēng)險(xiǎn)評分公式,風(fēng)險(xiǎn)評分=-0.248×CLEC3B+0.008×LMNB1+0.230×TAF9+0.006×SYNGR4。(2)高風(fēng)險(xiǎn)組和低風(fēng)險(xiǎn)組肝癌患者的生存時(shí)間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),高風(fēng)險(xiǎn)組肝癌患者的生存時(shí)間更短,見圖6。

圖4 與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌預(yù)后基因森林樹圖

圖5 LASSO回歸模型圖

圖6 高風(fēng)險(xiǎn)組與低風(fēng)險(xiǎn)組的生存曲線圖

2.4 腫瘤突變負(fù)荷分析、抗癌藥物篩選及藥物敏感性分析結(jié)果 高風(fēng)險(xiǎn)組和低風(fēng)險(xiǎn)組的腫瘤突變負(fù)荷差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.004),見圖7。通過對高風(fēng)險(xiǎn)組和低風(fēng)險(xiǎn)組中基因?qū)?yīng)的藥物敏感性數(shù)據(jù)進(jìn)行差異分析,選取差異較大的藥物(P<0.01),并結(jié)合目前臨床治療肝癌的主要藥物進(jìn)行篩選,確定5-氟尿嘧啶、阿法替尼、阿培利司、AT13148抑制劑這4種抗癌藥物,其中5-氟尿嘧啶、阿法替尼、阿培利司在低風(fēng)險(xiǎn)組中較敏感(P<0.001),而AT13148抑制劑在高風(fēng)險(xiǎn)組中較敏感(P<0.001),見圖8。

圖7 高風(fēng)險(xiǎn)組和低風(fēng)險(xiǎn)組的腫瘤突變負(fù)荷差異分析小提琴圖

圖8 高風(fēng)險(xiǎn)組和低風(fēng)險(xiǎn)組的藥物敏感性差異分析

3 討 論

目前認(rèn)為巨噬細(xì)胞與癌癥的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。有學(xué)者發(fā)現(xiàn),炎癥的發(fā)生會(huì)招募多種免疫細(xì)胞,包括巨噬細(xì)胞,巨噬細(xì)胞會(huì)通過釋放促炎性細(xì)胞因子引起微環(huán)境的改變,這容易導(dǎo)致炎癥周圍組織出現(xiàn)基因突變,從而引發(fā)癌變[13-14]。發(fā)生癌變后,巨噬細(xì)胞在腫瘤細(xì)胞釋放的多種細(xì)胞因子的刺激下轉(zhuǎn)變?yōu)門AM。在腫瘤微環(huán)境中存在大量的TAM,而TAM具有多種形態(tài)與功能,其中M2型TAM具有抑制免疫、促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的功能[15-16]。目前已知M2型TAM在肝癌的進(jìn)展中發(fā)揮了重要作用[17-18],因此本研究主要從M2型巨噬細(xì)胞入手,探討M2型巨噬細(xì)胞對肝癌患者預(yù)后和相關(guān)藥物治療效果的影響。

本研究共獲得110個(gè)與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因,KEGG通路富集分析結(jié)果提示在信號通路上的富集數(shù)量最多的8個(gè)基因前3位為COPZ1、COPZ2、CNRIP1。COPZ1是共原子蛋白復(fù)合物1的組成部分,參與核內(nèi)體的成熟、自噬和高爾基膜上包被囊泡的構(gòu)建。一項(xiàng)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究顯示,在大多數(shù)肝癌細(xì)胞系中COPZ1的蛋白表達(dá)量高于正常人肝細(xì)胞,敲除COPZ1后肝癌細(xì)胞的增殖和遷移能力受到抑制,且COPZ1與TAM的浸潤水平有較強(qiáng)的相關(guān)性[19]。 CNRIP1是腫瘤發(fā)展過程中重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,其可通過抑制γ-丁?；u化酶1介導(dǎo)的肉堿代謝來抑制肝癌細(xì)胞的增殖[20]。此外,CNRIP1還可以通過Ras/蛋白激酶B信號通路來促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖、侵襲;敲除CNRIP1后,肝癌細(xì)胞中的Ras信號通路受到抑制,且肝癌細(xì)胞的增殖、侵襲能力增強(qiáng)[21]。有研究顯示,CNRIP1蛋白廣泛分布于腹膜組織、腸道組織、肝臟組織的巨噬細(xì)胞和外周血單核細(xì)胞[22]。CNRIP1可以促進(jìn)C-C基序趨化因子配體5的表達(dá),而C-C基序趨化因子配體5可募集M2型TAM[23]。上述研究提示COPZ1、CNRIP1在肝癌進(jìn)展中發(fā)揮重要作用,這可能與其增加TAM的浸潤水平或具有募集TAM的作用有關(guān)。目前尚無COPZ2與肝癌之間相關(guān)性的研究,COPZ2在肝癌發(fā)展中的作用及機(jī)制仍待進(jìn)一步探索。

本研究GO功能富集分析結(jié)果顯示,與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因涉及多種生物過程,其中包括內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)育;而KEGG通路富集分析結(jié)果也顯示內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)育信號通路是與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌基因涉及的主要通路。腫瘤的發(fā)生和發(fā)展與血管新生密切相關(guān),血管新生是腫瘤組織生長和轉(zhuǎn)移所必需的,而血管新生主要依賴內(nèi)皮細(xì)胞的分化和發(fā)育[24]。有研究表明,當(dāng)腫瘤微環(huán)境處于缺氧狀態(tài),巨噬細(xì)胞會(huì)極化為M2型TAM,通過分泌促血管生成因子,包括血管內(nèi)皮生長因子A、表皮細(xì)胞生長因子、胎盤生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子β、腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素1β、白細(xì)胞介素8、C-C基序趨化因子配體2、C-X-C基序趨化因子配體8和C-X-C基序趨化因子配體12,促進(jìn)腫瘤組織血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化與增殖,通過修復(fù)血管及刺激血管新生,給癌細(xì)胞提供氧氣和營養(yǎng),促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖[25]。而下調(diào)血管內(nèi)皮生長因子受體的表達(dá)可以顯著抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲,從而抑制肝癌的血管新生,因此靶向內(nèi)皮生長因子受體的治療對腫瘤治療意義重大[26]。

本研究通過單因素COX回歸和LASSO回歸分析,最終確定了4個(gè)具有特征性的與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌預(yù)后基因,分別是CLEC3B、LMNB1、TAF9、SYNGR4。根據(jù)這4個(gè)基因建立風(fēng)險(xiǎn)評分公式,然后進(jìn)行分組及生存分析,結(jié)果顯示風(fēng)險(xiǎn)評分較高的肝癌患者(高風(fēng)險(xiǎn)組)的生存時(shí)間短于風(fēng)險(xiǎn)評分較低的肝癌患者(低風(fēng)險(xiǎn)組)(P<0.05),提示上述4個(gè)基因在肝癌進(jìn)展中具有重要作用,可影響肝癌患者的預(yù)后。研究表明,CLEC3B在肝癌中的表達(dá)降低,其表達(dá)水平與肝癌患者的生存率呈正相關(guān),表明CLEC3B可能可以作為肝癌的潛在預(yù)后生物標(biāo)志物[27];LMNB1表達(dá)上調(diào)與肝癌的增殖、遷移和入侵有關(guān)[28];TAF9可以促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲,其表達(dá)上調(diào)與肝癌進(jìn)展及患者總生存期的降低有關(guān)[29]。但目前SYNGR4與腫瘤之間相關(guān)性的研究極少,其在腫瘤尤其是肝癌發(fā)展中的作用機(jī)制有待研究。

腫瘤突變負(fù)荷在腫瘤免疫治療中多被用于預(yù)測免疫檢查點(diǎn)抑制劑的療效,目前已成為諸多惡性腫瘤的重要標(biāo)志物[30]。因此,本研究進(jìn)一步分析高風(fēng)險(xiǎn)組與低風(fēng)險(xiǎn)組肝癌患者的腫瘤突變負(fù)荷,發(fā)現(xiàn)高風(fēng)險(xiǎn)組肝癌患者的腫瘤突變負(fù)荷高于低風(fēng)險(xiǎn)組(P<0.05),說明基于CLEC3B、LMNB1、TAF9、SYNGR4的風(fēng)險(xiǎn)評分較高的肝癌患者一般較少從免疫治療中獲益。此外,藥物敏感性分析結(jié)果顯示,5-氟尿嘧啶、阿法替尼、阿培利司在低風(fēng)險(xiǎn)組中較敏感(P<0.05),而AT13148抑制劑在高風(fēng)險(xiǎn)組中較敏感(P<0.05),表明5-氟尿嘧啶、阿法替尼、阿培利司更適合低風(fēng)險(xiǎn)評分的肝癌患者,而AT13148抑制劑更適合高風(fēng)險(xiǎn)評分的肝癌患者。目前上述抗癌藥已經(jīng)在臨床抗癌治療中得到廣泛應(yīng)用,但它們在不同肝癌人群中的作用機(jī)制還需進(jìn)一步研究證實(shí)?？傊?基于與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的肝癌預(yù)后基因(CLEC3B、LMNB1、TAF9、SYNGR4)建立的風(fēng)險(xiǎn)評分,有助于臨床醫(yī)師評估免疫治療及常用抗癌藥物對肝癌患者的療效,從而制訂更適宜的治療方案以改善患者的預(yù)后。

綜上所述,多個(gè)與M2型巨噬細(xì)胞相關(guān)的基因在肝癌的發(fā)生和發(fā)展中具有重要作用,其中CLEC3B、LMNB1、TAF9、SYNGR4與肝癌患者的預(yù)后密切相關(guān),且有助于評估免疫治療及抗癌藥物的療效。但是今后仍需開展相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討相關(guān)基因的作用機(jī)制,并開展多中心、大樣本的前瞻性研究去驗(yàn)證該風(fēng)險(xiǎn)評分的預(yù)測準(zhǔn)確性。