典型豬瘟的流行病學(xué)、診斷和控制

文│王沛琦（山東省濟(jì)南市萊蕪區(qū)苗山鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心）

典型豬瘟是家豬和野豬最重要的病毒性疾病之一，在實(shí)施嚴(yán)格的控制措施后，在幾個(gè)國(guó)家已成功被根除。但世界上大部分生豬養(yǎng)殖地區(qū)，典型豬瘟仍不斷出現(xiàn)，南美洲、中美洲、東歐和亞洲都常有報(bào)道?？刂拼胧┌ㄏ到y(tǒng)接種疫苗、及時(shí)和可靠的診斷、撲殺受感染的豬群、建立疫區(qū)并限制區(qū)內(nèi)豬群活動(dòng)和買(mǎi)賣(mài)、追蹤可能的接觸豬只。

一、病毒特性

典型豬瘟病毒屬于黃病毒科瘟病毒屬，瘟病毒屬成員還包括牛病毒性腹瀉病毒和邊界病毒。國(guó)際病毒分類委員會(huì)最近瘟病毒屬的重新分類，牛病毒性腹瀉病毒1被重新命名為瘟病毒A，牛病毒性腹瀉病毒2被命名瘟病毒B，典型豬瘟病毒被重新命名成瘟病毒C。包膜病毒顆粒由四種結(jié)構(gòu)蛋白組成，即核心蛋白（C）和包膜糖蛋白E1、E2和Erns，核心包裹著約12.3kb的單鏈RNA基因組。八種非結(jié)構(gòu)蛋白為Npro、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B。包膜糖蛋白E2和Erns是病毒附著所必需的，病毒包膜與生物膜融合后，病毒核被釋放到細(xì)胞質(zhì)中，隨后病毒RNA被釋放到細(xì)胞質(zhì)中并進(jìn)行翻譯。檢測(cè)主要針對(duì)包膜糖蛋白E2、Erns和NS3的抗體，主要的免疫原是包膜糖蛋白E2。

典型豬瘟毒株的分類主要基于包膜糖蛋白E2基因，也基于非結(jié)構(gòu)蛋白NS5B基因。在系統(tǒng)發(fā)育分析的基礎(chǔ)上，典型豬瘟病毒可分為3個(gè)基因型和3個(gè)或4個(gè)亞群：1.1、1.2、1.3，2.1、2.2、2.3，3.1、3.2、3.3、3.4。所有的基因型都在亞洲出現(xiàn)，但基因3型主要出現(xiàn)在亞洲，基因2型主要在東歐，基因1型主要在南美洲和中美洲。大多數(shù)高毒力的毒株屬于基因1型，基因2型和基因3型為中等毒力毒株，遺傳變異性相對(duì)高于基因1型。在全球范圍內(nèi)，過(guò)去幾十年最流行的是基因2型。

二、臨床癥狀、病理和流行病學(xué)

豬感染后的潛伏期一般為3～10天，豬群感染的進(jìn)展相對(duì)緩慢，病毒侵入豬群幾周后，臨床癥狀才逐漸明顯。對(duì)于繁殖期豬群生育能力可能會(huì)降低。感染進(jìn)程主要取決于病毒毒株的毒力，在很大程度上也取決于動(dòng)物的年齡。年輕動(dòng)物感染后的死亡通常很嚴(yán)重，高達(dá)80%，而在年老豬中，感染引起的癥狀較輕，癥狀不明顯，甚至可能只是亞臨床癥狀。

可以根據(jù)臨床癥狀分為三種感染形式，即急性（短暫）、慢性和晚發(fā)性（持續(xù)病程）。急性形式的特點(diǎn)是仔豬（＜12周齡）高燒（＞40℃），成年豬的發(fā)熱稍輕（39.5℃）。最初癥狀包括結(jié)膜炎、呼吸道癥狀、胃腸道癥狀、便秘或腹瀉，病豬通常嗜睡，神經(jīng)癥狀變得頻繁，例如抽搐、麻痹、動(dòng)作不協(xié)調(diào)和步態(tài)蹣跚甚至癱瘓。發(fā)熱后約2周，可能出現(xiàn)皮膚出血或發(fā)紺，部位包括腹部、后臀部、耳朵和尾巴。在急性致死的病例中，死亡通常發(fā)生在感染后2～4周，根據(jù)動(dòng)物的年齡和病毒毒株的毒力，10～30天的死亡率最高可達(dá)100%。該病毒可導(dǎo)致嚴(yán)重的免疫抑制和白細(xì)胞減少，由此產(chǎn)生的繼發(fā)感染癥狀可能會(huì)掩蓋典型豬瘟病毒感染的臨床癥狀，嚴(yán)重的呼吸道和胃腸道繼發(fā)感染會(huì)使病程復(fù)雜化。在康復(fù)的情況下，強(qiáng)烈的體液免疫會(huì)持續(xù)終生，從而抵抗感染，抗體可在感染后2～3周被檢測(cè)到。剖檢顯示不同器官（如肺、腎、腸、喉和膀胱）漿膜和黏膜表面的淋巴結(jié)腫大、瘀斑和出血，還可觀察到扁桃體炎、腸內(nèi)壞死性潰瘍、淋巴網(wǎng)狀系統(tǒng)病變、非化膿性腦炎和脾梗塞，因此常被誤診為非化膿性腦炎。

慢性只發(fā)生在少數(shù)感染豬身上，大多數(shù)是年輕豬，這些豬無(wú)法產(chǎn)生有效的免疫反應(yīng)來(lái)清除典型豬瘟病毒。公認(rèn)的觀點(diǎn)是慢性感染總是致命的，感染豬在2～4個(gè)月后死亡。臨床癥狀與急性感染類似，不過(guò)相對(duì)比較溫和，隨著疾病的發(fā)展，臨床癥狀變得不明顯，如波動(dòng)性發(fā)熱、慢性腸炎和體型消瘦等。病理性病變包括胸腺萎縮、淋巴器官耗竭、小腸、結(jié)腸和回盲瓣壞死和潰瘍。慢性形式的繼發(fā)感染往往是復(fù)雜的，從而掩蓋了最初的典型豬瘟病毒感染。盡管免疫系統(tǒng)在整個(gè)感染過(guò)程中產(chǎn)生了抗體，但始終無(wú)法完全消除病毒。

與其他豬瘟病毒一樣，典型豬瘟病毒能夠在妊娠階段穿過(guò)胎盤(pán)，妊娠時(shí)間和病毒毒株的毒力是影響感染結(jié)果的關(guān)鍵因素。晚發(fā)性是子宮內(nèi)感染或極早期產(chǎn)后感染導(dǎo)致持續(xù)病毒血癥的后遺癥，盡管母豬通常只表現(xiàn)出輕微的臨床癥狀，但流產(chǎn)、死產(chǎn)、木乃伊胎和胎兒畸形是較常見(jiàn)的結(jié)果。晚發(fā)性通常是低至中等毒力毒株感染的結(jié)果，一般不會(huì)立即殺死母豬或胎兒。妊娠第50天至70天的子宮內(nèi)感染和仔豬出生后的早期感染，導(dǎo)致持續(xù)感染的仔豬出生，臨床表現(xiàn)為正?；蛏L(zhǎng)遲緩，不會(huì)引起嚴(yán)重臨床癥狀。仔豬出生后生長(zhǎng)不良，并逐漸表現(xiàn)出一些臨床癥狀，例如皮膚點(diǎn)狀出血和消瘦。盡管晚發(fā)性典型豬瘟是致命的，但仔豬仍可以存活幾周到幾個(gè)月，在這個(gè)過(guò)程中仔豬持續(xù)大量排毒，充當(dāng)危險(xiǎn)的傳染源，因此這些仔豬在流行病學(xué)上具有極其重要的意義。

沒(méi)有任何癥狀是典型豬瘟病毒感染所特有的，許多其他感染也會(huì)導(dǎo)致類似的疾病癥狀，如非洲豬瘟、豬皮炎和腎病綜合征、豬繁殖和呼吸綜合征、細(xì)小病毒病、Aujeszky’s病、鉤端螺旋體病和丹毒感染。

典型豬瘟病毒的易感宿主是豬科的不同成員，尤其是家豬和歐洲野豬。典型豬瘟病毒可以水平和垂直傳播，水平傳播通過(guò)感染豬和易感豬之間的直接或間接接觸發(fā)生。間接傳播途徑包括喂食受病毒污染的垃圾或泔水，以及通過(guò)接觸人類或飼養(yǎng)設(shè)備進(jìn)行傳播。接觸感染通常通過(guò)口鼻途徑發(fā)生，較少通過(guò)結(jié)膜、黏膜、皮膚擦傷、人工授精和使用受污染的器械發(fā)生。有研究表明在實(shí)驗(yàn)條件下可通過(guò)氣溶膠傳播，可能在豬群內(nèi)流行中起到作用。受感染的豬從感染開(kāi)始到死亡或產(chǎn)生特異性抗體，都會(huì)排出病毒，主要途徑是唾液、淚液、尿液、糞便和精液。在疫苗接種不完善的感染國(guó)家，傳染性較低的典型豬瘟病毒毒株的傳播往往被掩蓋，再加上管理和生物安全問(wèn)題（泔水喂養(yǎng)和共用設(shè)備等），使得病毒在豬群中長(zhǎng)期存在。典型豬瘟病毒可以長(zhǎng)期存活，因?yàn)樗鼘?duì)各種化學(xué)和物理?xiàng)l件都有很強(qiáng)的抵抗力，豬肉和豬肉制品中的病毒在冷凍條件下可存活數(shù)月。典型豬瘟病毒向山羊、綿羊、牛和兔子的實(shí)驗(yàn)室傳播是成功的，這成為新的可能的感染源。

典型豬瘟病毒在不同環(huán)境條件下的存活率差異很大，尤其受溫度的影響，也受其所在基質(zhì)的影響，在寒冷、潮濕和富含蛋白質(zhì)的條件下存活率更高。在豬排泄物中典型豬瘟病毒在室溫下的存活時(shí)間為幾天，5℃下可存活幾周，高于35℃存活時(shí)間大大減少，幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即失活，高于50℃的條件下幾分鐘即會(huì)失活。對(duì)于受污染的豬圈，這意味著病毒在寒冷的冬季可能存活至少幾天到一個(gè)月。典型豬瘟引起的損失主要是大規(guī)模的撲殺和運(yùn)輸、貿(mào)易限制，由于隨之而來(lái)的豬只流動(dòng)和貿(mào)易限制導(dǎo)致生豬和豬肉產(chǎn)品出口市場(chǎng)的喪失，對(duì)經(jīng)濟(jì)產(chǎn)生了巨大影響。

三、診斷

1.抗原檢測(cè)。通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行病毒分離是檢測(cè)典型豬瘟病毒最早的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)，豬腎細(xì)胞系（PK-15和SK-6）通常用于分離典型豬瘟病毒。豬瘟病毒在細(xì)胞中的生長(zhǎng)通常通過(guò)使用間接免疫熒光來(lái)觀察。

抗原捕獲ELISA使用ELISA板上的抗體來(lái)捕獲典型豬瘟病毒蛋白。商業(yè)ELISA試劑盒主要用于檢測(cè)血清、血液、血漿或組織提取物中的包膜糖蛋白E2或Erns?？焖伲ㄔ?小時(shí)內(nèi)提供結(jié)果）且易于執(zhí)行，但敏感性和特異性低于大多數(shù)其他診斷方法。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR已取代傳統(tǒng)的反轉(zhuǎn)錄PCR，成為典型豬瘟常規(guī)診斷的重要技術(shù)，是確認(rèn)臨床病例和典型豬瘟病毒感染流行率的重要方法。缺點(diǎn)是成本高、操作復(fù)雜以及由受污染樣本或?qū)嶒?yàn)室污染引起的假陽(yáng)性和由樣本中的PCR抑制劑或降解RNA引起的假陰性。

下一代測(cè)序是一種高度敏感的技術(shù)方法，用于生成序列數(shù)據(jù)和探索病毒的遺傳特征。但下一代測(cè)序平臺(tái)的建立成本高昂，需要專業(yè)熟練的研究人員。

2.抗體檢測(cè)。病毒中和試驗(yàn)是抗體檢測(cè)方法靈敏度和特異性的黃金標(biāo)準(zhǔn)。但該技術(shù)是一個(gè)工作密集且耗時(shí)的過(guò)程，不能自動(dòng)化，因此不適用于批量樣品分析。

抗體ELISA是典型豬瘟診斷和流行病學(xué)調(diào)查中最快、最簡(jiǎn)單、應(yīng)用最廣泛的技術(shù)。檢測(cè)動(dòng)物血清中的E2抗體是監(jiān)測(cè)典型豬瘟暴發(fā)期間和暴發(fā)之后感染率，以及檢測(cè)疫苗效率的一種簡(jiǎn)單可靠的方法。局限性是特異性較低，即典型豬瘟病毒、牛病毒性腹瀉病毒1、牛病毒性腹瀉病毒2和其他黃病毒屬病毒的交叉反應(yīng)。

四、控制

當(dāng)前典型豬瘟病毒的毒力逐漸降低，臨床上高毒力的毒株被中等和低毒力的毒株所取代。一旦發(fā)現(xiàn)疫情，應(yīng)立即執(zhí)行控制措施阻斷疫情蔓延。區(qū)域內(nèi)的高密度家豬和野豬種群以及家豬與野豬之間的密切接觸都是導(dǎo)致典型豬瘟傳播和傳播風(fēng)險(xiǎn)的因素。野豬的典型豬瘟不僅威脅到受影響國(guó)家的家豬，而且因?yàn)橐柏i越境和非法貿(mào)易也威脅到鄰國(guó)。因此疫情的控制需要執(zhí)行嚴(yán)格的生物安全措施，尤其是控制家豬和野豬的接觸。