UPLC-Q-Exactive-MS/MS測(cè)定傷痛寧膠囊中馬兜鈴酸Ⅰ的含量

朱立華，黃生武，沈冰冰，謝誼

〔摘要〕 目的 建立UPLC-Q-Exactive-MS/MS測(cè)定傷痛寧膠囊中馬兜鈴酸Ⅰ的含量。方法 采用Hypersil GOLD C18色譜柱（2.1 mm× 50 mm，1.9 μm），流動(dòng)相為乙腈和0.1%甲酸水溶液（含5 mmol/L甲酸銨），梯度洗脫，流速0.5 mL/min，柱溫30 ℃。采用電噴霧離子源正離子模式，進(jìn)行平行反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，選擇質(zhì)荷比（m/z）359.0→298.0和359.0→296.0離子對(duì)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。結(jié)果 馬兜鈴酸Ⅰ在0.06～0.2 ng范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（R2=0.999 5），精密度和穩(wěn)定性的RSD值均小于3%，加樣回收率均值為104.1%（RSD=4.29％）。不同批次傷痛寧膠囊樣品中馬兜鈴酸Ⅰ的含量均值為0.000 004 90%，從藥材到成品的轉(zhuǎn)移率均值為103.7%，RSD值為19.5%。結(jié)論 該方法專屬性好，靈敏度高，準(zhǔn)確可靠、耐用，可以用于傷痛寧膠囊中馬兜鈴酸Ⅰ的含量測(cè)定。

〔關(guān)鍵詞〕 傷痛寧膠囊；馬兜鈴酸Ⅰ；UPLC Q-Exactive MS/MS；定量分析

〔中圖分類號(hào)〕R284? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ? 〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674－070X.２０23.08.011

Determination of aristolochic acid Ⅰ in Shangtongning

Capsule by UPLC-Q-Exactive-MS/MS

ZHU Lihua1， HUANG Shengwu1， SHEN Bingbing2， XIE Yi2*

1. Hunan Guohua Pharmaceutical Co.， Ltd.， Changsha， Hunan 410013， China;

2. Hunan Academy of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410013， China

〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Objective To develop a method of UPLC-Q-Exactive-MS/MS for the determination of aristolochic acid Ⅰ in Shangtongning Capsule. Methods The chromatography was performed on Hypersil GOLD C18 column （2.1 mm×50 mm， 1.9 μm） with mobile phases consisting of acetonitrile and 0.1% formic acid aqueous solution （containing 5 mmol/L ammonium formate） at a gradient elution rate of 0.5 mL/min， and the column temperature was 30 ℃. Electrospray ionization in positive ionization mode was used for parallel reaction monitoring， and ion pairs with mass-to-charge ratios （m/z） of 359.0→298.0 and 359.0→296.0 were selected for monitoring. Results Aristolochic acid Ⅰ had a good linear relationship in the range of 0.06-0.2 ng （R2=0.999 5）， RSDs of precision and stability were less than 3%， and the average recovery was 104.1% （RSD=4.29%）. The average content of aristolochic acid Ⅰ in different batches of Shangtongning Capsule was 0.000 004 90%， the mean transfer rate from medicinal materials to finished products was 103.7% and RSD was 19.5%. Conclusion With high specificity， sensitivity， and accuracy， the method is reliable and reproducible， and can be used for the determination of aristolochic acid Ⅰ in Shangtongning Capsule.

〔Ｋｅｙｗｏｒｄｓ〕 Shangtongning Capsule; aristolochic acid Ⅰ; UPLC-Q-Exactive-MS/MS; quantitative analysis

傷痛寧膠囊是由制乳香、制沒藥、甘松、醋延胡索、細(xì)辛、醋香附、山柰和白芷8味藥組成，是《中華人民共和國(guó)藥典》（2020年版）收錄品種“傷痛寧片”的劑改品種[1]，具有散瘀止痛功效，主要用于跌打損傷、閃腰挫氣等[2]?，F(xiàn)代藥理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和人體臨床病例都已經(jīng)證明，細(xì)辛中馬兜鈴酸類物質(zhì)具有腎毒性、致癌和致突變作用[3-6]，2020年版《中華人民共和國(guó)藥典》也規(guī)定了馬兜鈴酸Ⅰ的限量標(biāo)準(zhǔn)（不得超過0.001%）。因此，為了保證用藥安全，對(duì)含馬兜鈴酸類物質(zhì)的中藥復(fù)方進(jìn)行含量檢測(cè)是非常必要的。

目前，有關(guān)馬兜鈴酸類成分的檢測(cè)方法主要有高效液相色譜法、液質(zhì)聯(lián)用色譜法等[7-11]。近些年來，液相質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)發(fā)展迅速，已成為中藥及復(fù)方研究的強(qiáng)大分析工具[12-13]。超高液相色譜分析時(shí)間短，對(duì)復(fù)雜樣品的高分離能力與質(zhì)譜的高選擇性、高靈敏度，以及提供相對(duì)分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來，在醫(yī)藥分析、食品安全和環(huán)境分析等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用[14-16]。因此，本研究在原注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上進(jìn)行提升，通過建立UPLC-Q-Exactive-MS/MS測(cè)定傷痛寧膠囊中馬兜鈴酸Ⅰ含量的方法，為傷痛寧膠囊的安全性提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試劑

Thermo Q-Exactive型液質(zhì)聯(lián)用色譜儀（美國(guó)賽默飛公司）；Mettler Toledo AL-204型電子天平、Mettler Toledo XPE-105型電子天平[梅特勒托利多科技（中國(guó)）有限公司]；KM-500DB型中文液晶臺(tái)式超聲波清洗器（昆山美美超聲儀器有限公司）；乙腈色譜純（德國(guó)Merck公司）；甲酸色譜純[阿拉丁試劑（上海）有限公司]；純凈水[華潤(rùn)怡寶飲料（中國(guó)）有限公司]；其余試劑均為分析純。馬兜鈴酸Ⅰ（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110746-201912，純度為99.1%）；甲酸銨（美國(guó)ACS恩科化學(xué)試劑公司，批號(hào)：AF-6266-0025）。細(xì)辛藥材（批號(hào)：B24-1811-007、ZY-026P-2204-002、ZY-026-2204-004和ZY-026-2212-001～ZY-026-2212-005）和傷痛寧膠囊（批號(hào)：S-20200801～S-20200803、220501～220503、220901、20230201～20230205）由湖南國(guó)華制藥有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1? 色譜條件

Hypersil GOLD C18色譜柱（2.1 mm×50 mm，1.9 μm），流動(dòng)相A為乙腈，B為0.1%甲酸水溶液（含5 mmol/L甲酸銨），梯度洗脫（0～10 min，62%～55% B）；流速0.5 mL/min，柱溫30 ℃，進(jìn)樣量5 μL。

2.2? 質(zhì)譜條件

四極桿/靜電場(chǎng)軌道肼質(zhì)譜檢測(cè)器；電噴霧離子源；檢測(cè)方式：正離子模式；范圍：100～1 500 m/z；噴霧電壓：3.5 kV，鞘氣體積流量為35 arb，輔助體積流量為10 arb，輔助氣溫度375 ℃。毛細(xì)管溫度320 ℃，二級(jí)碰撞能量：10 eV。掃描方式采用全掃描一級(jí)質(zhì)譜、特征離子掃描一級(jí)質(zhì)譜，平行反應(yīng)監(jiān)測(cè)。

2.3? 溶液的制備

2.3.1? 馬兜鈴酸Ⅰ標(biāo)準(zhǔn)品的配制? 取標(biāo)準(zhǔn)品適量，精密稱定，加70%甲醇制成每1 mL含20 ng的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3.2? 傷痛寧供試品溶液? 取傷痛寧膠囊樣品適量，研細(xì)，混勻，精密稱取1.0 g，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，取出，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

2.3.3? 細(xì)辛樣品溶液? 取細(xì)辛粉末（過三號(hào)篩），精密稱取0.5 g，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，取出，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

2.3.4? 缺細(xì)辛陰性樣品溶液? 取除細(xì)辛外的其余處方量藥材，按生產(chǎn)工藝制成陰性樣品，取適量研細(xì)，混勻，精密稱取1.0 g，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，取出，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

2.4? 方法學(xué)考察

2.4.1? 馬兜鈴酸Ⅰ檢測(cè)離子對(duì)的選擇? 通過優(yōu)化流動(dòng)相，確定馬兜鈴酸Ⅰ標(biāo)準(zhǔn)品在0.1%甲酸水溶液（含5 mmol/L甲酸銨）條件下的質(zhì)譜響應(yīng)較高，尤其是正模式下分子離子峰359.086 67[M+NH4]+（圖1）。在二級(jí)質(zhì)譜圖中，主要產(chǎn)生298.070 62[M+H-CO2]+、296.067 26[M+H-NO2]+、281.068 12[M+H-CO2-H2O]+、265.037 05[M+H-NO2-OCH3]+等碎片離子，其中298.070 62的響應(yīng)最高，作為定量離子，296.067 26可作為定性離子（圖2）。

2.4.2? 專屬性? 按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件和“2.2”項(xiàng)下質(zhì)譜條件，將馬兜鈴酸Ⅰ對(duì)照品溶液、傷痛寧膠囊溶液、細(xì)辛溶液和缺細(xì)辛陰性對(duì)照溶液分別進(jìn)樣，記錄質(zhì)譜色譜圖并積分，結(jié)果顯示在缺細(xì)辛陰性對(duì)照溶液的圖譜中，與馬兜鈴酸Ⅰ對(duì)照品溶液保留時(shí)間相同的位置上未顯示色譜峰。詳見圖3。

2.4.3? 檢出限? 取馬兜鈴酸Ⅰ標(biāo)準(zhǔn)品溶液逐步稀釋，以S/N=3∶1計(jì)算，得到馬兜鈴酸Ⅰ的檢出限為1 pg。

2.4.4? 線性關(guān)系? 取同一馬兜鈴酸Ⅰ標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件和“2.2”項(xiàng)下質(zhì)譜條件，分別進(jìn)樣3、4、5、6、8、10 μL，記錄質(zhì)譜色譜圖并積分，以馬兜鈴酸Ⅰ的峰面積為Y，馬兜鈴酸Ⅰ的量（ng）為X進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程Y=115 901X-5 480.8（R2=0.999 5）。結(jié)果表明，馬兜鈴酸Ⅰ在0.06～0.2 ng范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.4.5? 精密度? 取同一馬兜鈴酸Ⅰ標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件和“2.2”項(xiàng)下質(zhì)譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄質(zhì)譜色譜圖并積分，結(jié)果顯示馬兜鈴酸Ⅰ峰面積的RSD為2.78％，試驗(yàn)表明本方法精密度良好。

2.4.6? 穩(wěn)定性? 取同一馬兜鈴酸Ⅰ標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件和“2.2”項(xiàng)下質(zhì)譜條件分別在0、2、4、6、8 h進(jìn)樣，記錄質(zhì)譜色譜圖并積分，結(jié)果馬兜鈴酸Ⅰ峰面積的RSD為1.92％，試驗(yàn)表明本方法在8 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.4.7? 加樣回收率? 精密稱取同一傷痛寧膠囊制備供試品溶液，分別加入馬兜鈴酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液（100 ng/mL）6.5、5、3.5 mL，按方法“2.3.2”項(xiàng)下處理供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件和“2.2”項(xiàng)下質(zhì)譜條件依次進(jìn)樣，記錄質(zhì)譜色譜圖并積分，結(jié)果如表1所示，加樣回收率為104.1%（RSD=4.29％），試驗(yàn)表明本方法加標(biāo)回收率較好。

2.4.8? 樣品檢測(cè)? （1）細(xì)辛藥材馬兜鈴酸Ⅰ含量的檢測(cè)：按“2.3.3”項(xiàng)下方法處理供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件和“2.2”項(xiàng)下質(zhì)譜條件依次進(jìn)樣，記錄質(zhì)譜色譜圖并積分。計(jì)算8批細(xì)辛藥材馬兜鈴酸Ⅰ的含量均值為0.000 107%，小于《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定的0.001%[1]。詳見表2。

（2）傷痛寧膠囊馬兜鈴酸Ⅰ含量的檢測(cè)：按“2.3.2”項(xiàng)下方法處理供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件和“2.2”項(xiàng)下質(zhì)譜條件依次進(jìn)樣，記錄質(zhì)譜色譜圖并積分，計(jì)算傷痛寧膠囊中馬兜鈴酸的含量和轉(zhuǎn)移率。詳見表2。

3 討論

根據(jù)國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)馬兜鈴酸類成分的詳細(xì)研究，已證實(shí)馬兜鈴酸具有腎毒性和致癌性，大量服用可能會(huì)引起急性馬兜鈴酸腎病，出現(xiàn)急性腎小管壞死、急性腎衰竭等病理變化[17-19]。我國(guó)自2003年起，就已經(jīng)對(duì)含馬兜鈴酸的藥材及中成藥采取了包括禁止使用馬兜鈴酸含量高的關(guān)木通、廣防己和青木香；調(diào)整藥材使用部位，將細(xì)辛的藥用部位由全草改為根和根莖等一系列風(fēng)險(xiǎn)控制措施[18]。因此，必須對(duì)含有馬兜鈴酸藥材作為原料生產(chǎn)的產(chǎn)品進(jìn)行檢查，進(jìn)一步加強(qiáng)檢測(cè)檢驗(yàn)。目前，馬兜鈴酸Ⅰ的經(jīng)典檢測(cè)方法主要是紫外分光光度法、色譜法和色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法，其中色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法是將液相色譜的高效分離技術(shù)和質(zhì)譜的快速定性、定量技術(shù)相結(jié)合的一種重要的分析方法，具有操作簡(jiǎn)單、高效靈敏、準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點(diǎn)，因此，常被用于中藥（復(fù)方）中化合物的快速定性定量分析[20]。另外，還有一些新型的快速檢測(cè)方法被報(bào)道，例如熒光探針法[21]、酶聯(lián)免疫吸附法[22]、近紅外光譜法[23]等。本研究對(duì)象傷痛寧膠囊中存在含有馬兜鈴酸類成分的藥材細(xì)辛，并且復(fù)方化學(xué)類型多樣，成分復(fù)雜，常見的紫外檢測(cè)器等靈敏度難以滿足要求，因此，準(zhǔn)確性、選擇性和靈敏度更高的液質(zhì)聯(lián)用法是首選。馬兜鈴酸Ⅰ化合物是弱極性的小分子化合物，在電噴霧離子源質(zhì)譜中的離子化效率不高。前期通過參考文獻(xiàn)[24-25]和單因素考察實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)馬兜鈴酸Ⅰ在流動(dòng)相中加入5 mmol/L甲酸銨的情況下出現(xiàn)分子離子峰359.0[M+NH4]+，且響應(yīng)最高。因此，采用電噴霧離子源正離子模式，進(jìn)行平行反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，選擇質(zhì)荷比（m/z）359.0→298.0和359.0→296.0離子對(duì)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

因此，建立了UPLC-Q-Exactive-MS/MS測(cè)定傷痛寧膠囊中馬兜鈴酸Ⅰ含量的方法。該方法在0.06～0.2 ng范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（R2=0.999 5），精密度、穩(wěn)定性的RSD均小于3%，加樣回收率在99.75%～110.96%范圍內(nèi)，RSD為4.29％，適合馬兜鈴酸Ⅰ的檢測(cè)。細(xì)辛樣品檢測(cè)馬兜鈴酸Ⅰ的含量均遠(yuǎn)小于《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版[1]規(guī)定的限量要求（不得超過0.001%）。傷痛寧膠囊中16 g細(xì)辛藥材制成1 000粒（每粒0.33 g），經(jīng)藥味分析每克膠囊樣品含細(xì)辛藥材0.048 g，根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版[1]規(guī)定細(xì)辛藥材中馬兜鈴酸Ⅰ的限量，按照100%的轉(zhuǎn)移率可知，傷痛寧膠囊中馬兜鈴酸Ⅰ的限量應(yīng)不得超過0.000 048%。傷痛寧膠囊成品中6批未檢測(cè)出馬兜鈴酸Ⅰ，其余6批馬兜鈴酸Ⅰ的含量均值為0.000 004 90%，從藥材到成品的轉(zhuǎn)移率均值為103.7%，RSD值為19.5%，含量均遠(yuǎn)小于0.000 048%的限量，是合格的、安全的。綜上所述，該方法專屬性好，靈敏度高，準(zhǔn)確可靠、耐用，可以用于傷痛寧膠囊中馬兜鈴酸Ⅰ的含量測(cè)定。本研究不僅為傷痛寧中馬兜鈴酸Ⅰ的限量檢查提供了數(shù)據(jù)支撐，也為傷痛寧膠囊中細(xì)辛的合理、安全使用提供了科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典： 2020年版一部[M]. 北京： 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社， 2020.

[2] 肖德華. 傷痛寧膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J]. 湖南中醫(yī)雜志， 2005， 21（4）： 72-74.

[3] HAN J Y， XIAN Z， ZHANG Y S， et al. Systematic overview of aristolochic acids： Nephrotoxicity， carcinogenicity， and underlying mechanisms[J]. Frontiers in Pharmacology， 2019， 10： 648.

[4] ZHANG H M， ZHAO X H， SUN Z H， et al. Recognition of the toxicity of aristolochic acid[J]. Journal of Clinical Pharmacy and Therapeutics， 2019， 44（2）： 157-162.

[5] LU Z N， LUO Q， ZHAO L N， et al. The mutational features of aristolochic acid-induced mouse and human liver cancers[J]. Hepatology， 2020， 71（3）： 929-942.

[6] 郭? 寧， 趙? 雍， 孫? 奕， 等. 馬兜鈴酸類物質(zhì)的生物標(biāo)記物與減毒策略研究進(jìn)展[J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào)， 2021， 56（4）： 972-982.

[7] 顧從文， 卜? 超， 王學(xué)芹， 等. 復(fù)方辛夷滴鼻液的指紋圖譜及7種成分含量測(cè)定研究[J]. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2022， 42（6）： 934-940.

[8] 梁詩瑤， 劉倩倩， 黃? 勝， 等. 六味地黃丸藥渣中4種活性成分含量測(cè)定及抗氧化活性研究[J]. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2021， 41（5）： 707-713.

[9] 劉? 靜， 劉? 陽， 武營(yíng)雪， 等. 液質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定齒痛消炎靈顆粒中馬兜鈴酸Ⅰ和馬兜鈴內(nèi)酰胺Ⅰ[J]. 藥物分析雜志， 2022， 42（2）： 237-242.

[10] 米士麗， 施海蔚， 譚? 力， 等. 9種含馬兜鈴酸類毒性物質(zhì)中藥材中馬兜鈴酸類成分的定性與定量分析[J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào)， 2021， 56（7）： 1980-1987.

[11] 袁金斌. 馬兜鈴酸類物質(zhì)的液相色譜聯(lián)用技術(shù)及應(yīng)用[D]. 長(zhǎng)沙： 湖南大學(xué)， 2008.

[12] 陳明曦， 李艷梅， 孫? 婷， 等. 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在中藥質(zhì)量研究中的應(yīng)用[J]. 中國(guó)藥劑學(xué)雜志， 2021， 19（1）： 12-17.

[13] 王? 迪， 俞? 佳， 詹? 固， 等. 液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在中藥研究中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊， 2022， 40（2）： 68-71.

[14] 王郡瑤， 程顯隆， 李明華， 等. 液質(zhì)聯(lián)用數(shù)據(jù)庫(kù)技術(shù)的研究進(jìn)展及其在中藥分析領(lǐng)域的應(yīng)用[J]. 藥物分析雜志， 2021， 41（7）： 1107-1113.

[15] 張朝輝， 周娜姣， 劉? 星， 等. 藥品、環(huán)境和食品中馬兜鈴酸分析檢測(cè)方法的研究進(jìn)展[J]. 分析化學(xué)， 2021， 49（11）： 1792-1803.

[16] MARTINS DE BARROS R， LISSALDE S， GUIBAL R， et al. Development of a multi-hormone analysis method by LC-MS/MS for environmental water application using diffusive gradient in thin films[J]. Talanta， 2022， 243： 123390.

[17] 邵? 鑫， 張? 月， 鄭雁雪， 等. 中藥中馬兜鈴酸快速檢測(cè)及分離技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 中草藥， 2022， 53（19）： 6200-6212.

[18] 田婧卓， 梁愛華， 劉? 靖， 等. 從馬兜鈴酸含量影響因素探討含馬兜鈴酸中藥的風(fēng)險(xiǎn)控制[J]. 中國(guó)中藥雜志， 2017， 42（24）： 4679-4686.

[19] LU Z N， LUO Q， ZHAO L N， et al. The mutational features of aristolochic acid-induced mouse and human liver cancers[J]. Hepatology， 2020， 71（3）： 929-942.

[20] 邵? 鑫， 張? 月， 鄭雁雪， 等. 中藥中馬兜鈴酸快速檢測(cè)及分離技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 中草藥， 2022， 53（19）： 6200-6212.

[21] 歐愛芬. 馬兜鈴酸Ⅰ抗體識(shí)別特性及快速免疫分析方法研究[D]. 廣州： 廣東工業(yè)大學(xué)， 2022.

[22] LI S Z， WU X L， SONG S S， et al. Development of ic-ELISA and an immunochromatographic strip assay for the detection of aristolochic acid Ⅰ[J]. Food and Agricultural Immunology， 2019， 30（1）： 140-149.

[23] CHEN X Y， CHAI Q Q， LIN N， et al. 1D convolutional neural network for the discrimination of aristolochic acids and their analogues based on near-infrared spectroscopy[J]. Analytical Methods， 2019， 11（40）： 5118-5125.

[24] 陳奕君， 王? 偉， 肖紅斌. 基于液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的清肺排毒湯中痕量馬兜鈴酸Ⅰ的監(jiān)測(cè)及定量分析[J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào)， 2020， 55（8）： 1903-1907.

[25] 劉? 靜， 劉? 陽， 武營(yíng)雪， 等. 液質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定齒痛消炎靈顆粒中馬兜鈴酸Ⅰ和馬兜鈴內(nèi)酰胺Ⅰ[J]. 藥物分析雜志， 2022， 42（2）： 237-242.

（本文編輯? 周? 旦）