芽孢桿菌BMF03 對(duì)攝食玉米赤霉烯酮污染飼料鯽的保護(hù)效應(yīng)

周鑫蔚，丁皓天，董秀金，徐一力，劉毅，吳冰，陳香凝，丁祝進(jìn)，馬桂珍，程漢良，許建和,2

（1.江蘇海洋大學(xué)海洋科學(xué)與水產(chǎn)學(xué)院，江蘇 連云港 222005；2.江蘇海洋大學(xué)，江蘇省海洋生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 連云港 222005）

玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZON）是一種白色晶體，化學(xué)式為C18H22O5，常見于具有赤霉病的玉米和小麥等谷物中，是飼料原料中主要霉變污染物之一。ZON 具有強(qiáng)烈的雌激素作用，在動(dòng)物體內(nèi)會(huì)引起多種生殖系統(tǒng)相關(guān)疾病，如性欲下降、無(wú)排卵、不育和細(xì)胞質(zhì)損害等[1,2]。ZON 可通過與魚體細(xì)胞雌激素受體相結(jié)合的方式影響魚類神經(jīng)系統(tǒng)以及生殖器官[3]。攝食ZON 超標(biāo)水產(chǎn)品可導(dǎo)致人體乳腺中的癌細(xì)胞增加[4]。目前，我國(guó)規(guī)定飼料原料中ZON 的檢出量不得超過500 μg/kg。去除飼料原料中ZON的主要方法有物理、化學(xué)和生物降解等方法。其中生物降解法因安全高效無(wú)污染，是目前廣泛使用的脫毒方法。生物降解法通過微生物降解使用較多。Zhang 等[5]發(fā)現(xiàn)，釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）降解ZON 的效率較高。Harkai 等[6]發(fā)現(xiàn)分離篩選的124 株鏈霉菌（Streptomyces）中有2 個(gè)菌株對(duì)ZON 毒素的去除率達(dá)100%。耿海榮等[7]篩選獲得1株高效降解ZON 毒素的枯草芽孢桿菌（B.subtilis），當(dāng)ZON 毒素濃度為2 μg/mL 和20 μg/mL 時(shí)，其發(fā)酵液對(duì)毒素的去除率分別為93.79%和82.40%；無(wú)菌發(fā)酵液對(duì)ZON 毒素的去除率為62.02%。上述研究中功能菌也均為陸源性菌株，降解的ZON 也都為純品，而對(duì)受污染的飼料原料中的ZON 降解效果目前報(bào)道較少。

鯽（Carassius auratus）是我國(guó)傳統(tǒng)養(yǎng)殖魚類，2020 年淡水養(yǎng)殖產(chǎn)量為274.9 萬(wàn)t（2021 年中國(guó)漁業(yè)年鑒）。鯽養(yǎng)殖過程中需要投喂大量人工配合飼料，而在飼料原料和成品儲(chǔ)存中ZON 是主要霉變毒素之一。飼料中ZON 對(duì)生物體的毒害作用也僅見于陸生動(dòng)物[8]，在水產(chǎn)動(dòng)物中報(bào)道較少。

芽孢桿菌BMF03 是本實(shí)驗(yàn)室從養(yǎng)殖水體分離的一種甲基營(yíng)養(yǎng)型芽孢桿菌，對(duì)液體培養(yǎng)基中的ZON 有很強(qiáng)的降解作用[9]，但其對(duì)鯽飼料中ZON 是否具有同樣的降解功能，且添加到飼料后投喂鯽是否存在安全風(fēng)險(xiǎn)，目前均不清楚。本研究通過給鯽投喂四種不同類型飼料：基礎(chǔ)飼料（對(duì)照）、基礎(chǔ)飼料+芽孢桿菌BMF03（1×1010CFU/kg，BMF03 組）、基礎(chǔ)飼料+玉米赤霉烯酮（1 000 μg/kg，ZON 組）和基礎(chǔ)飼料+玉米赤霉烯酮+芽孢桿菌BMF03（ZON03 組），測(cè)定各組飼料和魚體肌肉中玉米赤霉烯酮的含量及實(shí)驗(yàn)魚的生長(zhǎng)性能、生化指標(biāo)、腸道和肝胰臟健康狀況等，綜合評(píng)價(jià)芽孢桿菌BMF03對(duì)攝食ZON 污染飼料鯽的保護(hù)效應(yīng)及其作為漁用飼料添加劑的可行性。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼料配方

共配制4 組等氮飼料，基礎(chǔ)飼料為對(duì)照（配方見表1）；在基礎(chǔ)飼料中分別添加芽孢桿菌BMF03（BMF03）、玉米赤霉烯酮（ZON）以及玉米赤霉烯酮+BMF03 菌株（ZON03）。依本實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果和魚體對(duì)飼料中ZON 的安全耐受劑量[9,10]，確定飼料中ZON（購(gòu)買自上海士鋒生物有限公司）添加量為1 000 μg/kg；BMF03 菌株為發(fā)酵上清離心后的產(chǎn)物，溶于水加入飼料中，添加量為1×1010CFU/kg，由江蘇海洋大學(xué)抗菌微生物及其代謝產(chǎn)物研究與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。各組飼料原料粉碎過60 目篩，用小型混合機(jī)（ASY-3D，科勒器械有限公司）攪拌10 min，加水后繼續(xù)揉拌15 min，然后利用便攜式絞肉機(jī)（TK-12，豐瑞吉食品機(jī)械有限公司）制成直徑為0.4 mm 左右的顆粒飼料，放入干燥箱，35 ℃烘干至水分為10%左右，裝入密封袋，置于4 ℃冰箱冷藏保存。

表1 基礎(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)組成（干物質(zhì)%）Tab.1 Ingredients and nutritional composition in basic diet (dry matter basis %)

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理

實(shí)驗(yàn)用鯽初始體質(zhì)量為（20.13±0.12）g，購(gòu)買自連云港市博旺特種水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)在江蘇海洋大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的養(yǎng)殖系統(tǒng)（大連匯新）進(jìn)行。正式實(shí)驗(yàn)開始前用對(duì)照組飼料暫養(yǎng)1周，馴化鯽上浮搶食。分組前停食24 h，隨后選取480 尾規(guī)格均勻的健康鯽，隨機(jī)分成4 組，每組3 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)40 尾魚。每天投喂四次（8:30、11:30、14:30 和17:30），日投喂量為體質(zhì)量的4%，每周根據(jù)體質(zhì)量增長(zhǎng)情況調(diào)整一次，養(yǎng)殖周期為8 周。實(shí)驗(yàn)期間每天處理殘餌，換水一次，換水量約25%，養(yǎng)殖水溫23 ℃～26 ℃，水體pH7.0～7.5，氨氮含量小于0.2 mg/L，溶氧量大于5 mg/L，自然光照，每日記錄采食量。

1.3 樣品采集與測(cè)定

養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，將實(shí)驗(yàn)魚饑餓24 h 后計(jì)數(shù)、稱重，用于測(cè)定增重率等生長(zhǎng)指標(biāo)。每組隨機(jī)取9尾魚用濃度為50 mg/L 的MS-222 進(jìn)行麻醉，其中3尾魚用于測(cè)定體長(zhǎng)和體質(zhì)量，然后用2 800 U/mL 肝素鈉溶液濕潤(rùn)處理過的一次性2 mL 針頭注射器在尾靜脈處采血，在4 ℃下3 000 r/min 離心10 min 后收集上清液于2 mL 離心管中，-20 ℃冰箱保存，用于測(cè)定生化指標(biāo)。取血后解剖魚體，取出內(nèi)臟并稱重，用于計(jì)算臟體比。另外3 尾取側(cè)線和背鰭間肌肉，置于密封袋中，-80 ℃冰箱保存，用于測(cè)定肌肉中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)組成；剩余3 尾魚解剖后，取肝胰臟和1 cm 左右中腸，放入4%多聚甲醛中固定，用于組織形態(tài)的觀察。

1.4 飼料和魚體肌肉中ZON 含量的測(cè)定

將飼料和肌肉樣品在60℃下烘干至恒重，磨碎后用甲醇水溶液提取，用免疫親和柱（月旭科技，中國(guó)）提取液，洗脫和凈化，置于高效液相色譜儀（Agilent-1260，美國(guó)）分析。色譜條件∶流動(dòng)相為甲醇水溶液（8∶2），紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為236 nm，柱溫25℃，進(jìn)樣量為20 μL，流速為1 mL/min。

1.5 鯽生長(zhǎng)性能的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)中測(cè)定生長(zhǎng)性能參數(shù)如下：

式中，m1、m2分別為鯽的初始體質(zhì)量和終末體質(zhì)量（g）；m3為飼料攝入量（g）；m4、m5分別為實(shí)驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)鯽的數(shù)量（尾）；m6為內(nèi)臟重（g）；t 為養(yǎng)殖時(shí)間（d）；P 為粗蛋白含量（%）；L 為體長(zhǎng)（cm）。

1.6 鯽肌肉常規(guī)營(yíng)養(yǎng)組分的測(cè)定

稱取干重樣品1 g（精確至0.000 1 g）置于消化管中，加入硫酸鉀4.5 g、硫酸銅0.5 g 和硫酸10 mL，420 ℃消化1.5 h，冷卻15 min 后上機(jī)，利用全自動(dòng)凱氏定氮儀（KjeltecTM-8400）測(cè)定粗蛋白含量；

稱取干重樣品1 g（精確至0.000 1 g）置于濾紙筒中，塞入脫脂棉，在恒重完的鋁杯中加入80 mL石油醚，利用索式抽提儀（SoxtecTM8000）測(cè)定粗脂肪含量；采用550 ℃灼燒稱量法（GB5009.4-2016）測(cè)定粗灰分含量。

1.7 鯽血清生化指標(biāo)的測(cè)定

血清中超氧化物歧化酶、堿性磷酸酶、酸性磷酸酶、過氧化氫酶、溶菌酶活性和總蛋白含量用南京建成生物試劑盒測(cè)定。

1.8 鯽腸道和肝胰臟組織形態(tài)的測(cè)定

將4%多聚甲醛固定好的鯽中腸和肝胰臟樣品送至Servicebio 有限公司（武漢）制作石蠟切片并進(jìn)行H&E 染色。使用CaseViewer2.2（3DHISTECH）瀏覽數(shù)字切片，對(duì)切片中病理改變進(jìn)行文字描述，用箭頭標(biāo)識(shí)說(shuō)明切片之間差異。

1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 23 軟件經(jīng)單因素方差分析（One-way ANOVA）后以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差（mean±SD）表示。用Student t-test 和Duncan 進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料和魚體肌肉中ZON 含量

實(shí)驗(yàn)前后各組飼料中玉米赤霉烯酮的含量見表2。由表2 可知，實(shí)驗(yàn)開始時(shí)ZON 和ZON03 組飼料中ZON 含量顯著高于對(duì)照組和BMF03 組，8 周后ZON 組飼料中ZON 含量未見明顯下降，但ZON03組飼料中ZON 水平顯著低于ZON 組（P＜0.05）。

表2 8 周后飼料中ZON 含量變化/（μg·kg-1）Tab.2 Concentrations of ZON in diets after eight weeks/（μg·kg-1）

實(shí)驗(yàn)前后魚體肌肉中玉米赤霉烯酮含量見表3。由表3 可知，實(shí)驗(yàn)開始時(shí)魚體肌肉中未檢出ZON，8 周后對(duì)照組和BMF03 組魚體肌肉中檢測(cè)出少量ZON，但含量顯著低于ZON 和ZON03 組（P＜0.05）。ZON03 組魚體肌肉中ZON 含量顯著低于ZON 組（P＜0.05）。

表3 8 周后肌肉中ZON 含量變化/（μg·kg-1）Tab.3 Concentrations of ZON in muscles after eight weeks/（μg·kg-1）

2.2 投喂不同飼料對(duì)鯽生長(zhǎng)性能的影響

投喂不同飼料對(duì)鯽生長(zhǎng)性能的影響見表4。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各實(shí)驗(yàn)組之間蛋白質(zhì)效率、飼料系數(shù)、特定生長(zhǎng)率及肥滿度和存活率無(wú)顯著差異（P＞0.05）。但ZON 組鯽終末體質(zhì)量和增重率均顯著高于對(duì)照組和BMF03 組（P＜0.05），但與ZON03 組無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表4 投喂不同飼料后對(duì)鯽生長(zhǎng)性能的影響Tab.4 Effects of different diets on the growth performance of crucian carp

2.3 投喂不同飼料對(duì)鯽肌肉常規(guī)營(yíng)養(yǎng)組分影響

投喂不同飼料對(duì)鯽肌肉常規(guī)營(yíng)養(yǎng)組分影響見表5。BMF03 組魚體肌肉粗蛋白含量顯著高于其他三組（P＜0.05）。ZON 和ZON03 組魚體粗脂肪和粗灰分含量與對(duì)照組相比均顯著升高（P＜0.05），但兩組之間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。各組魚體肌肉中水分含量無(wú)明顯差異（P＞0.05）。

表5 投喂不同飼料后對(duì)鯽肌肉常規(guī)營(yíng)養(yǎng)組分的影響（濕物質(zhì)%）Tab.5 Approximate nutritional composition in muscle of crucian carps fed different diets（wet matter basis %）

2.4 投喂不同飼料對(duì)鯽血清生化指標(biāo)的影響

投喂不同飼料對(duì)鯽血清生化指標(biāo)的影響見表6。BMF03 和ZON03 組魚體血清CAT 活性與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異，但顯著高于ZON 組。ZON 組魚體血清SOD 和AKP 活性明顯低于其他組（P＜0.05），各實(shí)驗(yàn)組中LZM活性均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），但添加毒素組LZM 活性低于BMF03 組（P＜0.05）。各組間魚體血清ACP 活性和TP 含量差異不顯著（P＞0.05）。

表6 投喂不同飼料對(duì)鯽血清生化指標(biāo)的影響Tab.6 The serum biochemical indicators of crucian carps fed different diets

2.5 投喂不同飼料對(duì)鯽腸道和肝胰臟健康狀況的影響

投喂不同飼料對(duì)鯽中腸組織結(jié)構(gòu)的影響見圖1。圖1 中可見，對(duì)照組、BMF03 組和ZON03 組中腸組織皺襞結(jié)構(gòu)完整，可見少量杯狀細(xì)胞，少量黏膜上皮細(xì)胞點(diǎn)狀壞死（黑色箭頭）。ZON 組中組織局部黏膜下層輕度水腫（黑色箭頭），結(jié)構(gòu)疏松，黏膜與黏膜下層輕度脫落（藍(lán)色箭頭）；較多黏膜上皮細(xì)胞壞死（綠色箭頭）。

圖1 攝食不同飼料鯽中腸的組織結(jié)構(gòu)Fig.1 The intestinal tissue structures of crucian carp fed different diets

投喂不同飼料對(duì)鯽肝胰臟組織結(jié)構(gòu)的影響見圖2。由圖2 可見，對(duì)照組和BMF03 組肝細(xì)胞空泡變性程度較小（黑色箭頭），胰腺腺泡細(xì)胞排列緊密，未見明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；ZON 組中，肝細(xì)胞重度空泡變性（黑色箭頭），局部可見少量大泡，周圍可見輕微出血（藍(lán)色箭頭），多處胰腺腺泡周圍少量巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)（黃色箭頭）；ZON03 組中，肝細(xì)胞中度空泡變性（黑色箭頭），多處胰腺腺泡周圍少量出血（黃色箭頭）。

圖2 攝食不同飼料鯽肝胰臟的組織結(jié)構(gòu)Fig.2 The hepatopancreatic structure of crucian carp fed different diets

3 討論

本研究中ZON 組飼料中添加芽孢桿菌BMF03 8 周后，飼料中ZON 濃度顯著降低，表明芽孢桿菌BMF03 在體外對(duì)ZON 具有一定的去除效果。已有的研究表明，除芽孢桿菌對(duì)ZON 有降解作用外，其他多種微生物對(duì)ZON 也有降解作用。Keller 等[11]從飼料中分離出的釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）菌株能消除培養(yǎng)基中90%以上的ZON 毒素；采用戊糖乳桿菌（Lactobacillus pentosus）JM0812 菌株能夠吸附乙酸鈉緩沖溶液中83.17%的ZON[12]；乳酸菌（Lactobacillus）發(fā)酵液可以降解麥芽中23%的ZON[13]；從發(fā)霉玉米中分離出的乳酸桿菌（Lactobacillus beijerinck）和明串珠菌（Leucanostoc）可以將ZON 生物轉(zhuǎn)化為α-ZAL[14]。微生物對(duì)ZON 毒素降解主要通過細(xì)胞壁的吸附、胞內(nèi)活性物質(zhì)和胞外蛋白等途徑。彭云等[9]報(bào)道，甲基營(yíng)養(yǎng)型芽孢桿菌對(duì)ZON 毒素降解主要通過細(xì)胞壁的吸附、胞內(nèi)活性物質(zhì)和胞外蛋白的共同作用，pH、溫度等因素對(duì)菌株去除ZON 毒素有明顯影響，pH 為7 時(shí)菌株對(duì)ZON毒素去除作用最強(qiáng)，溫度低于23 ℃或高于28 ℃毒素去除作用下降。本研究中芽孢桿菌BMF03 對(duì)飼料中ZON 降解效率遠(yuǎn)低于對(duì)液體或固體培養(yǎng)基中ZON 的降解效果，去除率不足20%。而彭云等[9]報(bào)道當(dāng)培養(yǎng)液中ZON 濃度為15 μg/mL 時(shí)，BMF04 菌株48 h 對(duì)其去除率達(dá)99%。推測(cè)原因可能與BMF03 也屬于甲基營(yíng)養(yǎng)型芽孢桿菌，其發(fā)揮功能也需要滿足一定溫度和介質(zhì)條件,本研究中飼料配制后一直貯存于4 ℃，遠(yuǎn)低于甲基營(yíng)養(yǎng)型芽孢桿菌對(duì)ZON 毒素降解所需適宜溫度，同時(shí)飼料中較低水分含量也影響了BMF03 對(duì)ZON 的降解效果。

ZON 對(duì)魚體組織損傷作用在較多文獻(xiàn)中已有報(bào)道。Wang等[15]發(fā)現(xiàn)，飼料中ZON的劑量大于1 041 μg/kg 會(huì)引起草魚腸道內(nèi)組織的氧化損傷和細(xì)胞凋亡。Wony等[16]發(fā)現(xiàn)，ZON會(huì)造成虹鱒（Oncorhynchus mykiss）肝臟組織損害（包括細(xì)胞質(zhì)空泡化和巨噬細(xì)胞聚集）。本研究中也發(fā)現(xiàn)鯽攝食含ZON 飼料后腸道組織表現(xiàn)出明顯的病理癥狀，如黏膜層水腫，較多上皮細(xì)胞壞死以及杯狀細(xì)胞消失等，肝細(xì)胞也出現(xiàn)重度空泡變性，與在其他魚類中結(jié)果相似。而攝食添加BMF03 菌株飼料后實(shí)驗(yàn)魚腸道和肝臟組織結(jié)構(gòu)完整，表明飼料中添加BMF03 可降低ZON 對(duì)魚體的損傷作用，緩解ZON 在魚體內(nèi)的毒害作用。王悅等在小鼠中也發(fā)現(xiàn)降解ZON 菌株在體內(nèi)可明顯降低ZON 毒性，保護(hù)肝臟[17]。CAT 和SOD 是機(jī)體抗氧化酶系統(tǒng)重要成員，可防止活性氧損害，維持自由基產(chǎn)生和清除之間的平衡[18]。SOD 可清除機(jī)體內(nèi)的活性氧自由基,將其轉(zhuǎn)化為H2O2，再通過CAT進(jìn)一步還原生成H2O 和O2。本研究中添加BMF03菌株飼料組魚體血清SOD、CAT 酶活力均明顯高于ZON 組，表明BMF03 可提高魚體抗氧化能力，維持其抗氧化系統(tǒng)的平衡，保護(hù)魚體組織免受ZON 的氧化損傷。飼料中添加芽孢桿菌可提升水產(chǎn)動(dòng)物抗氧化能力在魚類和甲殼類中均有報(bào)道。黃坤鵬等[19]研究也發(fā)現(xiàn),芽孢桿菌可顯著提高斜帶石斑魚（Epinephelus coioides）仔魚體內(nèi)的SOD活力。袁衛(wèi)[20]研究表明，飼料中添加芽孢桿菌能提高凡納濱對(duì)蝦（Litopenaeus vannamei）體內(nèi)抗氧化活性指標(biāo)。但目前芽孢桿菌對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物抗氧化系統(tǒng)的具體益生機(jī)制仍待進(jìn)一步研究。溶菌酶（LZM）是魚類先天免疫的重要指標(biāo)之一，是魚類血清中重要的殺菌劑[21]。堿性磷酸酶（AKP）是魚類免疫系統(tǒng)中非常重要的水解酶，在保護(hù)機(jī)體防御病原體入侵，參與細(xì)胞中生物大分子的消化，維持細(xì)胞正常代謝活動(dòng)有重要功能[22]。蔡紅丹等[23]報(bào)道，飼料中添加復(fù)合芽孢桿菌可顯著提高石斑魚血清中溶菌酶和AKP 活力。本研究亦發(fā)現(xiàn)BMF03 組魚體血清中LZM 和AKP 活力均明顯高于ZON 組，表明添加芽孢桿菌BMF03 能夠提高鯽免疫能力，緩解ZON 毒素對(duì)魚體免疫造成的負(fù)面影響。

本實(shí)驗(yàn)中，鯽攝食添加ZON 的飼料時(shí)，終末體質(zhì)量和增重率都顯著增加。Wony 等[24]也發(fā)現(xiàn)在飼料中添加2 mg/kg 的ZON 投喂虹鱒，其終末體質(zhì)量、生長(zhǎng)速度和飼料利用率顯著提高。這一結(jié)果可能與ZON 在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生的代謝物生理功能有關(guān)。ZON 在動(dòng)物體內(nèi)會(huì)分解成兩種植物雌激素α-ZAL和β-ZAL，其中α-ZAL 可通過刺激垂體產(chǎn)生內(nèi)生生長(zhǎng)激素來(lái)促進(jìn)骨骼和肌肉的生長(zhǎng)，從而在短時(shí)間內(nèi)表現(xiàn)出對(duì)魚體生長(zhǎng)具有一定的促進(jìn)作用[25,26]。本實(shí)驗(yàn)中，魚體攝食添加BMF03 飼料后促進(jìn)了肌肉中蛋白質(zhì)積累。周曉波等[27]也發(fā)現(xiàn)羅非魚攝食添加乳酸菌（Lactobacillus）、戊糖乳桿菌（Lactobacillus pentosus）和鼠李糖乳桿菌（Lactobacillus rhamnosus）飼料后，魚體肌肉中粗蛋白含量明顯上升。黃靈等[28]報(bào)道，虎龍斑（Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂）攝食添加光合細(xì)菌和芽孢桿菌飼料后能夠提高肌肉中粗蛋白的含量。但本研究中添加BMF03菌株未顯著改善魚體的終末體質(zhì)量、增重率以及特定生長(zhǎng)率，這與在羅非魚[29]和凡納濱對(duì)蝦[30]中研究結(jié)果相似。這些不同的研究結(jié)果可能由于益生菌種類和劑量以及物種的特異性所導(dǎo)致，溫度、水質(zhì)等環(huán)境因素也會(huì)影響益生菌對(duì)養(yǎng)殖對(duì)象的作用效果[ 31 ]。

結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)中，飼料中添加玉米赤霉烯酮短期內(nèi)可促進(jìn)鯽生長(zhǎng)發(fā)育，但免疫參數(shù)測(cè)定和組織切片觀察結(jié)果表明，玉米赤霉烯酮對(duì)魚體的毒害作用明顯；BMF03 菌株可在一定程度上降解鯽飼料中玉米赤霉烯酮毒素。攝食添加BMF03 菌株的玉米赤霉烯酮污染飼料可緩解玉米赤霉烯酮在鯽體內(nèi)的毒害作用，且不影響魚體生長(zhǎng)性能，表明BMF03 菌株對(duì)攝食玉米赤霉烯酮污染飼料的鯽具有保護(hù)作用。