中藥組方防治肉雞腎型傳染性支氣管炎篩選研究

□文/白雪峰 吳丙銀 駱月茹

雞腎型傳染性支氣管炎是一種高度接觸性傳染病，特別是肉雞感染較為嚴(yán)重。腎型傳染性支氣管炎病毒主要侵害雞腎臟，發(fā)病率和死亡率都很高，對養(yǎng)雞業(yè)危害極大。由于該病毒血清型較多，各毒株之間抗原性差異很大，免疫效果還不確實，為預(yù)防其傳染帶來了極大困擾。目前，有很多雞場采用抗生素控制繼發(fā)感染、補(bǔ)液通腎等綜合防治方法，但效果不確實。同時應(yīng)用抗病毒藥物、抗生素等進(jìn)行治療，由于藥物殘留問題使之應(yīng)用受限，因此亟須研發(fā)一些高效、低殘留的藥物來防治肉雞腎型傳染性支氣管炎。中藥由于其高效、低藥物殘留越來越多地應(yīng)用到動物疫病的防治中，本研究就是按照傳統(tǒng)中獸醫(yī)理論進(jìn)行組方，通過防治效果比較篩選最佳中藥組方。

一、材料與方法

（一）試驗材料和儀器

1.試驗動物。選取1 日齡肉仔雞240 只，隨機(jī)分為8 組。

2.主要藥品與試劑。肉雞腎型傳染性支氣管炎病毒毒株為前期試驗中分離鑒定得到的病毒材料。中藥藥材：荊芥、防風(fēng)、羌活、獨活、麻黃、柴胡、前胡、桔梗、枳殼、茯苓、甘草、川芎、板藍(lán)根、大黃、車前子、瞿麥、黨參、雙花、連翹、淡豆豉、芥穗、竹葉、薄荷、蘆根、牛蒡子、瞿麥、萹蓄、黃芪、大青葉、貫眾、蟾酥，均購于安國藥材市場。

（二）試驗方法

1.中藥組方。根據(jù)所學(xué)傳統(tǒng)中獸醫(yī)理論，上述中藥組成三個中藥方劑，具體如下：

組方1：荊芥30、防風(fēng)30、羌活25、獨活25、麻黃25、柴胡25、前胡25、桔梗30、枳殼25、茯苓30、甘草15、川芎20、板藍(lán)根30、大黃20、車前子15、瞿麥15、黨參20。

組方2：雙花45、連翹45、淡豆豉30、桔梗25、芥穗25、竹葉20、薄荷30、蘆根30、甘草20、牛蒡子20、大黃20、瞿麥10、萹蓄10、黃芪30。

組方3：麻黃100、板藍(lán)根60、大青葉60、貫眾60、獨活30、柴胡30、前胡30、桔梗50、川芎30、蟾酥2、甘草20。

2.中藥煎制。各組方分別用10 倍的水浸泡20 分鐘，煎煮20 分鐘，倒出藥液，加水再煎20 分鐘，2 次藥液合并、濃縮、離心后定容至生藥濃度為1 克/毫升，4℃保存，備用。

3.動物分組及處理。將240 只1 日齡雛雞隨機(jī)分為8 組，每組30 只。具體為陰性對照組（正常組）、陽性對照組（感染組）、組方1 預(yù)防組、組方2 預(yù)防組、組方3 預(yù)防組、組方1 治療組、組方2 治療組、組方3 治療組。

預(yù)防組1 日齡雛雞常規(guī)飼養(yǎng)預(yù)飼3 天后，第4 天將煎制好的3 個中藥組方制劑按1%的比例飲水，分上、下午2 次給藥，連續(xù)飲用12 天。第12 天預(yù)防組和陽性對照組攻毒，IBV 毒株滴鼻0.3 毫升/只雞；陰性對照組不攻毒，不喂藥，滴鼻0.3 毫升生理鹽水，觀察10 天，統(tǒng)計發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)。

治療組給常規(guī)飼養(yǎng)至10 天的雛雞攻毒，攻毒后治療組給藥，按2%比例飲水，2 次/日，每天上、下午各1 次，連用6 毫升；觀察10 天，統(tǒng)計發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)。

表1 試驗肉雞分組及給藥情況

4.藥物防治效果觀察

（1）人工感染后臨床觀察。觀察感染前后每組雛雞的臨床癥狀，如精神狀態(tài)、食欲是否正常、體溫、呼吸頻率以及呼吸是否困難等變化；統(tǒng)計每一組雞的發(fā)病及死亡的只數(shù)；將死亡雛雞剖檢，觀察其病變。

（2）死亡率。試驗期間，出現(xiàn)死亡，按照發(fā)病、死亡和存活的數(shù)目，各個算出發(fā)病的概率、死亡的概率和存活的概率。

發(fā)病的概率等于發(fā)病的數(shù)量除以這組實驗雞數(shù)（30只）乘以100%，死亡的概率等于死亡的雞數(shù)除以這組實驗雞數(shù)（30 只）乘以100%，存活的概率等于實驗中存活的數(shù)目除以這組實驗雞數(shù)（30只）乘以100%。

（三）統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用Spss19.1軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。

二、試驗結(jié)果

（一）中藥組方對肉雞感染的效果觀察

中藥組方對肉雞感染的效果觀察結(jié)果表明，陽性對照組（感染組）雞只的死亡概率是66.8%，闡明了這一次成功地引發(fā)了人工誘導(dǎo)IBV 病的模型。中藥預(yù)防組1、2、3 的存活率分別為63.3%、66.67%、83.33%，顯著地比陽性對照組高33.3%（見表2）。

表2 中藥組方對肉雞感染預(yù)防成效觀察

（二）中藥組方對肉雞感染療效觀察

中藥組方對肉雞感染治療成效觀察結(jié)果表明陽性對照組發(fā)病率為93.33%，死亡率為66.67%；中藥組方治療組1、2、3 發(fā)病率分別為33.33%、26.67%、16.67%，死亡率分別為26.67%、16.67%、10%。結(jié)果表明三個中藥組方對肉雞傳染性支氣管炎均有一定的治療效果，中藥組方治療效果最佳（見表3）。

表3 中藥組方對肉雞感染療效的觀察

三、分析與討論

肉雞腎型傳染性支氣管炎是引起肉雞接觸感染的特征傳染病之一，具有發(fā)病急、致死率高的特征。肉雞感染傳染性支氣管炎病毒后，除出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)癥狀外，主要以腎臟病變?yōu)橹?，病變主要為腎炎腎腫、尿酸鹽堆積于腎臟，為其防治帶來巨大困擾。本研究結(jié)果表明陽性感染組染毒后感染率為93.33%。

目前，肉雞腎型傳染性支氣管炎的預(yù)防主要是免疫接種，但因腎型傳染性支氣管炎病毒變異快，血清型多，常致免疫失敗。同時，肉雞腎型傳染性支氣管炎的治療主要采用抗生素控制繼發(fā)感染、補(bǔ)液通腎等綜合防治方法，但效果不確實。同時用抗病毒藥物、抗生素等進(jìn)行治療，有藥物殘留問題使之應(yīng)用受限。中藥有高效、低藥殘等優(yōu)點，廣泛用于畜禽疾病防治中。研究采用的中藥組方均按中獸醫(yī)傳統(tǒng)理論進(jìn)行組方，組方1 的功效為驅(qū)散風(fēng)寒、發(fā)汗解表、除濕、宣肺平喘、止咳、利尿通便、解毒、補(bǔ)氣健脾；組方2 為清瘟解毒、祛風(fēng)解表、清肺止咳、化痰利咽，通便利尿以排毒，補(bǔ)氣以提高抗病能力；組方3 其功效為抗病毒、活血祛痰、宣肺平喘。本研究通過對三種中藥組方的預(yù)防和治療效果研究表明，三種中藥組方對肉雞腎型支氣管炎的防治效果極顯著（P＜0.01）；其中組方3 預(yù)防和治療效果最好，差異顯著（0.01＜P＜0.05），具體機(jī)理還需進(jìn)一步研究。