梅花鹿活體麻醉采血試驗研究

●崔鶴馨 田來明 尚麗元 孫興忠 劉沂霖 苑冬梅 呼延含蓉 陳 琦 李 男 付曉霞

（1.吉林省畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究院 吉林 長春 130021；2.吉林省動物疫病預(yù)防控制中心 吉林 長春 130021；3.長春市農(nóng)業(yè)科學(xué)院 吉林 長春 130111）

梅花鹿是珍貴的國家一級保護動物，不僅具有極高的經(jīng)濟價值和觀賞價值，其營養(yǎng)價值和藥用價值也備受關(guān)注。近年來人們對鹿血制品的研發(fā)較為活躍，以鹿血為原料的藥品和保健品種類眾多[1]。鹿血自古以來被視為滋補上品，其營養(yǎng)成分和藥理作用與鹿茸大同小異[2]，但更趨于廣譜性?，F(xiàn)代臨床及動物實驗均證明，鹿血具有增強免疫功能、抗疲勞、抗輻射、治療貧血、改善性功能、促進(jìn)傷口愈合等多種功效[3]。生產(chǎn)用鹿血主要依靠鋸茸和屠宰鹿只時獲取，采集時間和采集量嚴(yán)格受限，導(dǎo)致鹿血資源匱乏，價格昂貴。梅花鹿活體采血是解決生產(chǎn)中鹿血可持續(xù)采集利用的有效途徑，對其開展試驗研究，為科學(xué)合理地進(jìn)行活體采血提供技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 梅花鹿由吉林省博文鹿業(yè)良種繁育有限公司提供。選擇公鹿3頭，年齡2～7鋸，平均體重（100±0.5） kg；選擇母鹿3頭，2～6產(chǎn)，平均體重（75±0.5） kg。健康無病，營養(yǎng)均衡，精神狀態(tài)良好。

1.2 試驗藥品 麻藥眠乃靈、解藥蘇醒靈均購自吉林省華牧動物保健品有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 試驗設(shè)計 公鹿和母鹿各1組，公鹿組采血量600 mL/頭，母鹿組采血量500 mL/頭。

1.3.2 血液采集和保存 按每100 kg體重用麻藥0.1～0.3 mL的標(biāo)準(zhǔn)，以麻醉槍或吹管方法將藥液直接注入梅花鹿肌肉，麻醉后使其側(cè)躺，觀察心跳、呼吸及眼球轉(zhuǎn)動是否正常。應(yīng)用16～20#針在鹿只的頸靜脈或脛前靜脈處采血，無菌收集血液于預(yù)先注入枸櫞酸鈉抗凝劑的采血袋。采血完成后，立即給鹿只補充等量的5%～10%葡萄糖水或生理鹽水。待鹿蘇醒，自行站起，方可離開采血地點。血液短期低溫保存，長期需冷凍保存，防止腐敗變質(zhì)。

1.3.3 采血前后血液指標(biāo)的測定 采血當(dāng)日計為0 d，于采血后0，10，20，30，40 d，采用日本Sysmex 公司的F820血球計數(shù)儀分別測定鹿血液的紅細(xì)胞數(shù)（RBC）、紅細(xì)胞壓積（HCT）和血紅蛋白（HGB）。以梅花鹿采血0 d的各血項指標(biāo)的平均值作對照。

2 結(jié)果與分析

2.1 公鹿活體采血不同時間血液指標(biāo)及恢復(fù)情況

表1為成年公鹿血液正常指標(biāo)，平均紅細(xì)胞數(shù)（RBC）8.39×1012/L、紅細(xì)胞壓積（HCT）0.461、血紅蛋白（HGB）123 g/L。表2為公鹿采血后10，20，30，40 d血液指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)成年公鹿采血30 d后機體基本恢復(fù)至采血前水平，紅細(xì)胞數(shù)（RBC）恢復(fù)至99.1%，紅細(xì)胞壓積（HCT）恢復(fù)至100.6%，血紅蛋白（HGB）恢復(fù)至100.9%；采血40 d后紅細(xì)胞數(shù)（RBC）恢復(fù)至采血前的101.5%，紅細(xì)胞壓積（HCT）恢復(fù)至104.6%，血紅蛋白（HGB）恢復(fù)至102.7%，均超過采血前機體水平。

表1 公鹿活體采血正常血液指標(biāo)

表2 公鹿活體采血后不同時間血液指標(biāo)及恢復(fù)情況

2.2 母鹿活體采血不同時間血液指標(biāo)及恢復(fù)情況

表3為成年母鹿血液正常指標(biāo)，平均紅細(xì)胞數(shù)（RBC）8.01×1012/L、紅細(xì)胞壓積（HCT）0.443、血紅蛋白（HGB）126 g/L。表4為母鹿采血后10，20，30，40 d血液指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)成年母鹿采血30 d后機體基本恢復(fù)至采血前水平，紅細(xì)胞數(shù)（RBC）恢復(fù)至98.8%，紅細(xì)胞壓積（HCT）恢復(fù)至102.5%，血紅蛋白（HGB）恢復(fù)至100.8%，紅細(xì)胞數(shù)（RBC）基本恢復(fù)至采血前水平，紅細(xì)胞壓積（HCT）和血紅蛋白（HB）均超過采血前水平；采血40 d后紅細(xì)胞數(shù)（RBC）恢復(fù)至采血前的103.7%，紅細(xì)胞壓積（HCT）恢復(fù)至105.2%，血紅蛋白（HB）恢復(fù)至103.2%，均超過采血前機體水平。

表3 母鹿活體采血正常血液指標(biāo)

表4 母鹿活體采血后不同時間血液指標(biāo)及恢復(fù)情況

3 討論

3.1 采血量的確定

梅花鹿活體采血量取決于體循環(huán)中的血液總量，即血液總量越大，活體采血量就越大，一次性采血量達(dá)到20%就可導(dǎo)致梅花鹿出現(xiàn)生理應(yīng)激、休克甚至死亡。清華大學(xué)實驗動物中心的動物采血基本原則規(guī)定，動物血液收集的單次最大量不能超過動物全身血液總量的10%。一般動物的血液量占活體體重的7%～8%，張建波等[4]通過屠宰鹿只取血量的統(tǒng)計，得出公鹿血量為其體重的8.57%～9.17%，母鹿血量為其體重的7.5%～8.75%，略高于平均數(shù)據(jù)，這可能與梅花鹿年齡、體重、性別、健康、營養(yǎng)狀況、放血方式不同有關(guān)。為了動物健康考慮，采血量應(yīng)該選取推薦量的下限，因此本研究按照血量占比體重7%計算：公鹿平均體重100 kg/頭，單次最大采血量600 mL/頭；母鹿平均體重75 kg/頭，單次最大采血量500 mL/頭。

3.2 采血間隔時間的確定

對梅花鹿進(jìn)行活體采血，除血容量減少，血液中的紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白量和紅細(xì)胞壓積也會發(fā)生相應(yīng)的變化，血液指標(biāo)能客觀反映機體的健康水平。張建波等[4]認(rèn)為一次性采血600 mL/頭，間歇期15 d對產(chǎn)茸量、機體的食欲精神均無影響。一般采血后失去的水分和無機鹽2 h內(nèi)可得以恢復(fù)，蛋白質(zhì)、白細(xì)胞和血小板3 d內(nèi)也可恢復(fù)，恢復(fù)較慢的是紅細(xì)胞，因此采血間隔時間主要取決于紅細(xì)胞更新率，即紅細(xì)胞更新越快，采血間隔時間越短。趙寶華等[5]報道梅花鹿一次性采血200～250 mL/頭后，需間隔30 d，血項指標(biāo)得以恢復(fù)。李樹明等[6]報道對梅花鹿一次性采血500 mL/頭后血液生理生化各指標(biāo)顯著下降，40～50 d后基本恢復(fù)至采血前正常水平。本研究分別對公鹿一次性采血600 mL/頭、母鹿一次性采血500 mL/頭后，對不同時間的紅細(xì)胞數(shù)（RBC）、紅細(xì)胞壓積（HCT）和血紅蛋白（HGB）進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)30 d后機體基本恢復(fù)至采血前水平，與上述報道結(jié)果存在差異，這可能與個體差異和營養(yǎng)水平有關(guān)。

3.3 采血后的營養(yǎng)供給

采血后為盡快恢復(fù)梅花鹿機體水平，不影響其生長性能，應(yīng)及時補充水分，加強蛋白質(zhì)、維生素、無機鹽、微量元素（鐵、銅、鋅等）和葉酸等的攝入量。采血后，鹿只飼料中的蛋白質(zhì)占比應(yīng)提升5%，同時每頭鹿每天飼喂0.1 kg豆?jié){，食鹽量比平時高5 g，維生素和微量元素比平時量提高1%。

3.4 注意事項

出現(xiàn)麻醉過敏時，應(yīng)停止采血，按麻醉藥品說明書劑量注射蘇醒藥并同時肌注腎上腺素；采血過程中，速度不宜過快，劑量不宜過大，當(dāng)出現(xiàn)異常時，如鹿只呼吸急促、心跳加速或眼球轉(zhuǎn)動加快等，應(yīng)停止采血并馬上注射蘇醒藥和腎上腺素；若采血造成采血部位腫脹，應(yīng)及時處理消腫散瘀；采用麻醉保定方式采血的鹿只蘇醒后不應(yīng)立即采食，應(yīng)隔頓飼喂；麻醉后出現(xiàn)鹿只不采食現(xiàn)象，應(yīng)驅(qū)趕其加強運動，同時注射促消化藥物。

4 結(jié)論

梅花鹿公鹿每次采血量按≤6 mL/kg·bw，母鹿每次采血量按體重≤6.67 mL/kg·bw計算，兩次采血至少間隔30 d，可維持梅花鹿活體正常機能。