一例雞傳染性支氣管炎和大腸桿菌混合感染的診治

沈思思　陳亮　秦平偉　馮萬宇　王巖　張國華　楊昊天

中圖分類號(hào)：S858.31? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C文章編號(hào)：1673-1085（2023）07-0075-03

雞傳染性支氣管炎（Infectious bronchitis，IB）是由傳染性支氣管炎病毒引起的急性、接觸性呼吸道疾病[1]。有高度傳染性和多個(gè)血清型，為該病的疫苗防控帶來難度[2]；同時(shí)由于飼養(yǎng)管理和環(huán)境等因素，經(jīng)常出現(xiàn)傳染性支氣管炎與其他細(xì)菌混合感染的情況，給養(yǎng)殖場造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[3]。

1 發(fā)病情況

2023年2月1日，齊齊哈爾市一養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的蛋雞陸續(xù)出現(xiàn)咳嗽、流涕、產(chǎn)蛋下降、拉稀等癥狀，且陸續(xù)出現(xiàn)死亡情況，平均每天死亡10只左右，發(fā)病原因尚不清楚。

2 臨床癥狀

根據(jù)養(yǎng)殖戶的描述，病雞張口呼吸、伸頸且氣管有啰音，被羽凌亂，食欲減退，常常擠在一起保暖，個(gè)別雞鼻竇腫脹、有粘液，越發(fā)消瘦，產(chǎn)蛋數(shù)量也有所下降，還伴隨著腹瀉癥狀。

3? 剖檢變化

對(duì)養(yǎng)殖戶送來的4只病死雞進(jìn)行剖檢，喉頭氣管處有出血和粘液（圖1），心臟和肝臟有纖維包裹，肝臟呈花斑狀（圖2）、質(zhì)脆，肺臟嚴(yán)重出血，腺胃乳頭交界處有出血點(diǎn)（圖3），腸道有出血點(diǎn)，排綠色稀便。

4 診斷

4.1 初步診斷

根據(jù)病雞的臨床癥狀和剖檢變化初步診斷為傳染性支氣管炎，但根據(jù)該養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)管理水平，推測感染傳染性支氣管炎病毒后容易和細(xì)菌發(fā)生混合感染，所以需要進(jìn)一步通過實(shí)驗(yàn)室診斷判斷傳染性支氣管炎的發(fā)病原因。

4.2 病毒學(xué)診斷

將4份剖檢雞肝臟、脾臟和氣管組織樣品混合研磨，8 000 r/min離心3 min，取上清100 μL備用，按商業(yè)化試劑盒方法提取RNA，檢測雞傳染性支氣管炎病毒（包含反轉(zhuǎn)錄），同時(shí)設(shè)置陰性對(duì)照和陽性對(duì)照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：該樣品雞傳染性支氣管炎病毒檢測為陽性，在264 bp處有電泳條帶（圖4）。

4.3 細(xì)菌學(xué)診斷

在無菌操作下，用接種環(huán)蘸取肝臟和脾臟，在血瓊脂平板上劃線接種，37℃培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)12～24 h。培養(yǎng)基表面可見白色、中等大小、表明光滑的菌落，呈淡灰色（圖5）。革蘭氏染色，顯微鏡下可看見陰性短桿菌，成堆或散狀存在，初步診斷為大腸桿菌。將菌落按商業(yè)化試劑盒提取DNA后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，同時(shí)設(shè)置陰性對(duì)照和陽性對(duì)照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，陽性對(duì)照和試驗(yàn)樣品均在1 500 bp處均有一條帶（圖6）。

4.4 藥敏試驗(yàn)

在無菌操作下，將菌落均勻鋪滿整個(gè)培養(yǎng)基，分別用林可霉素、氨芐西林、氧氟沙星、頭孢唑林、甲氧芐啶和氟苯尼考6個(gè)藥敏片均勻貼在培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)12～24 h，藥敏試驗(yàn)結(jié)果見表1。由表1藥敏結(jié)果中可知，從該養(yǎng)殖場分離的大腸桿菌對(duì)頭孢唑林極其敏感，抑菌圈達(dá)21 mm，而對(duì)氟苯尼考具有耐藥性，可能該養(yǎng)殖場之前存在不規(guī)范用藥的情況，導(dǎo)致雞群對(duì)氟苯尼考產(chǎn)生了耐藥性，推薦養(yǎng)殖場使用頭孢唑林和氧氟沙星進(jìn)行抗菌治療[4]。

5 防治

雞傳染性支氣管炎病毒的防控一般以疫苗免疫為主，但該病的血清型較多，有時(shí)免疫效果不理想。故用疫苗免疫前需先了解當(dāng)?shù)亓餍械难逍?，選用一致或相近的疫苗免疫才能起到保護(hù)作用。引進(jìn)雞群時(shí)要注意是否攜帶該病毒，以防疫苗與該病毒重組產(chǎn)生新的血清型，造成更大的威脅。免疫程序一般5～7日齡首免，25～30日齡進(jìn)行二次免疫，以后每2～3個(gè)月加強(qiáng)一次免疫。

該病在飼養(yǎng)管理不當(dāng)和環(huán)境衛(wèi)生差等條件下也時(shí)常與細(xì)菌混合感染，該養(yǎng)殖場由于環(huán)境不佳與大腸桿菌發(fā)生了混合感染。所以要嚴(yán)格執(zhí)行隔離措施，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，勤消毒、多通風(fēng)，冬季注意保暖，夏季防止中暑，雞群密度要合理，避免過度擁擠，及時(shí)補(bǔ)充礦物質(zhì)和維生素可以增強(qiáng)雞群的抗病力[5]。

參考文獻(xiàn)：

[1]? 賀會(huì)利，魏小兵，歐長波，等. 雞傳染性支氣管炎病毒研究進(jìn)展[J]. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014，35（07）：73-77.

[2]? 粟碩，張桂紅. 雞傳染性支氣管炎診斷方法研究進(jìn)展及應(yīng)用概況[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2013，35（01）：77-80.

[3]? 劉勝旺. 我國雞傳染性支氣管炎流行現(xiàn)狀及原因分析[J]. 中國家禽，2010，32（16）：5-9.

[4]? 尹榮煥，杜紹范，馬國文. 一起疑似雞傳染性支氣管炎繼發(fā)大腸桿菌病的診治[J]. 畜牧與獸醫(yī)，2002，34（01）：29.

[5]? 韓梅，李思源，王雪巖，等. 雞傳染性支氣管炎的防治進(jìn)展[J]. 畜牧獸醫(yī)科技信息，2008（10）：84.

第一作者簡介：沈思思（1991—），女，黑龍江人，碩士研究生，主要從事畜禽疾病診療等方面工作，E-mail：179813606@qq.com。