多指標(biāo)聯(lián)合檢測對老年系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的診斷

［摘要］目的探究血清可溶性血管細(xì)胞黏附分子-1（sVCAM-1）、抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體（AECA）、高遷移率族蛋白B1（HMGB1）聯(lián)合檢測在老年系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷中的診斷價(jià)值。方法采取前瞻性研究，選取2017年2月～2021年1月收治的120例老年系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者作為觀察組，其中腎功能異常患者45例為腎功能損害組，24 h尿蛋白定量≤0.5 g的75例患者為非腎功能損害組；另選取同期進(jìn)行體檢健康的志愿者120例作為對照組。比較觀察組及對照組、有無腎功能損害組的血清sVCAM-1、AECA、HMGB1水平的差異，比較有無腎功能損害組的免疫功能，采用ROC曲線分析sVCAM-1、AECA、HMGB1對老年系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的診斷意義。結(jié)果觀察組sVCAM-1、AECA、HMGB1水平高于對照組（P＜0.05）。腎功能損害組sVCAM-1、AECA、HMGB1水平高于非腎功能損害組（P＜0.05），腎功能損害組補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4低于非腎功能損害組（P＜0.05），免疫球蛋白（Ig）A、IgG高于非腎功能損害組（P＜0.05）。通過ROC曲線分析得出sVCAM-1、AECA、HMGB1檢測的臨界值，采用并聯(lián)模式（三者中有一項(xiàng)為陽性則判定是陽性）作為聯(lián)合檢測的方法，聯(lián)合檢測對腎功能損害的準(zhǔn)確度及特異度最高。結(jié)論血清sVCAM-1、AECA、HMGB1聯(lián)合檢測在老年系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的診斷中具有重要價(jià)值，可作為臨床診斷的重要依據(jù)。

［關(guān)鍵詞］系統(tǒng)性紅斑狼瘡；腎功能損害；可溶性血管細(xì)胞黏附分子-1；抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體；高遷移率族蛋白B1

doi：10.3969/j.issn.1674-7593.2023.03.008

Combined Detection of Multiple Indicators in the Diagnosis of Renal Vascular EndothelialCell Injury in Older Patients with Systemic Lupus Erythematosus

Tian Yu，Yang Yushu，Peng Chenxing，Ding Meng，Guo Huifang，Han Yuxiang**

Department of Rheumatology and Immunology，the Second Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuang050000

**Corresponding author：Han Yuxiang，email：hyx11919101@126.com

［Abstract］ObjectiveTo study the diagnostic value of serum soluble vascular cell adhesion molecule-1（sVCAM-1），anti-endothelial cell antibody（AECA） and high mobility group protein B1（HMGB1） in renal vascular endothelial cell injury in older patients with systemic lupus erythematosus（SLE）.MethodsA total of 120 older patients with SLE admitted to hospital from February 2017 to January 2021 were selected as the observation group.Among them，45 patients with 24-hour urinary protein quantification＞0.5 g were assigned to the renal function impairment group，and 75 patients with 24-hour urinary protein quantification≤0.5 g were assigned to the non-renal function impairment group.Another 120 volunteers undergoing physical examination at the same time were selected as the control group.The levels of serum sVCAM-1，AECA and HMGB1 were compared between the observation group and control group，renal function impairment group and non-renal function impairment group.The immune function was compared between the renal function impairment group and non-renal function impairment group.Receiver operating characteristic（ROC） curve was used to evaluate the diagnostic value of sVCAM-1，AECA and HMGB1 in renal vascular endothelial cell damage in older patients with SLE.ResultsCompared with the control group，the observation group had higher levels of sVCAM-1，AECA and HMGB1（Plt;0.05）.Compared with the non-renal function impairment group，the renal function impairment group had higher levels of sVCAM-1，AECA and HMGB1（Plt;0.05），lower levels of complement C3 and C4（Plt;0.05），and higher levels of IgA and IgG（Plt;0.05）.The cut-off values of sVCAM-1，AECA and HMGB1 were obtained by ROC curve analysis.The parallel mode analysis showed that the combined detection had the highest accuracy and specificity for the diagnosis of renal function damage.ConclusionThe combined detection of serum sVCAM-1，AECA and HMGB1 has important value in the diagnosis of renal vascular endothelial cell damage in older patients with SLE.

［Key words］Systemic lupus erythematosus；Renal function impairment；sVCAM 1；AECA；HMGB1

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic lupus erythematosus，SLE）是一種累及多系統(tǒng)的自身免疫性疾病，腎臟受累是SLE發(fā)病和死亡的主要危險(xiǎn)因素［1］。與青年SLE患者不同，老年SLE患者高血壓發(fā)生率更高，腎功能受損及慢性病變更重［2］。因此，對老年SLE患者腎臟損傷的診斷及治療非常重要。蛋白尿是SLE腎臟損害的重要臨床表現(xiàn)之一，其病理特點(diǎn)是腎小球?yàn)V過屏障的損傷。腎小球?yàn)V過屏障由腎小球內(nèi)皮細(xì)胞、基底膜和足細(xì)胞組成。已有研究表明足細(xì)胞和腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的損傷共同導(dǎo)致了增殖性狼瘡腎炎所致的腎病綜合征［3］?？扇苄匝芗?xì)胞黏附分子-1（Soluble vascular cell adhesion molecule 1，sVCAM-1）在腎小球內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)，與內(nèi)皮細(xì)胞的增殖顯著相關(guān)［4］。血清抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體（Anti-endothelial cell antibodies，AECA）屬于特異性結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞多種抗原表位的自身免疫性抗體，在自身免疫性疾病患者中較為常見，但是對于SLE的診斷缺乏特異性［5］。高遷移率族蛋白B1（High mobility group protein，HMGB1）是局部病灶部位炎癥反應(yīng)的重要指標(biāo)，參與了自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展［6］。本研究擬探討sVCAM-1、AECA、HMGB1對SLE患者腎功能損傷的診斷價(jià)值，以指導(dǎo)臨床對老年SLE患者腎臟血管損傷進(jìn)行評估。

1對象與方法

1.1研究對象

本研究采取前瞻性研究，以2017年2月～2021年1月本院收治的120例老年SLE患者作為觀察組，另選取同期健康體檢的志愿者120例作為對照組，本研究經(jīng)倫理委員會論證通過。納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組應(yīng)符合SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］，對照組為體檢健康者；②意識清楚，無溝通障礙；③簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①冠心病、心臟瓣膜疾病、心律失常等心臟病患者；②射血分?jǐn)?shù)＜55%；③存在急性腦血管意外風(fēng)險(xiǎn)患者；④嚴(yán)重心、肝功能障礙的患者。觀察組男23例，女97例，年齡 60～68歲，平均（64.52±2.02）歲，平均體質(zhì)量指數(shù)（24.56±2.51）kg/m2，平均病程（2.59±0.52）年；以24 h尿蛋白定量為標(biāo)準(zhǔn)［8］，≤0.5 g為非腎功能損害組（75例），＞0.5 g為腎功能損害組

（45例）。對照組男22例，女98例，年齡 61～69歲，平均（64.87±2.47）歲，平均體質(zhì)量指數(shù)（24.78±3.03）kg/m2。兩組性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2方法

受試者入組后采取靜脈血4 mL，15 000 r/min離心后留血清，采取化學(xué)發(fā)光法對血清sVCAM-1、AECA、HMGB1水平進(jìn)行檢測，檢測采用的試劑均購自羅氏診斷產(chǎn)品（上海）有限公司，操作流程嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。另外，觀察組空腹采血4 mL，3 600r/min離心15 min，取上清，采用RLMax型全自動生化分析儀（德國西門子公司）測定受試者的血清補(bǔ)體C3、C4及免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）A、IgM、IgG水平，使用試劑購自鄭州萬華生物技術(shù)有限公司。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)分布計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料組間采用χ2檢驗(yàn)；采用ROC曲線分析sVCAM-1、AECA、HMGB1對腎功能損害的診斷價(jià)值；Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1血清sVCAM-1、AECA、HMGB1水平比較

觀察組血清sVCAM-1、AECA、HMGB1水平均高于對照組（P＜0.05），見表1。

2.2有無腎功能損害的SLE患者血清sVCAM-1、AECA、HMGB1水平比較

腎功能損害組血清sVCAM-1、AECA、HMGB1水平高于非腎功能損害組（P＜0.05），見表2。

2.3有無腎功能損害的SLE患者免疫指標(biāo)比較

腎功能損害組補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4低于非腎功能損害組（P＜0.05），IgA、IgG高于非腎功能損害組（P＜0.05），見表3。

2.4ROC曲線分析血清sVCAM-1、AECA、HMGB1對腎功能損害的診斷價(jià)值

ROC曲線分析，sVCAM-1、AECA、HMGB1對腎功能損害診斷的臨界值分別為45.75 ng/mL，80.25 μmol/mL，544.25 ng/mL，見表4、圖1。

以ROC曲線結(jié)果作為標(biāo)準(zhǔn)，采用并聯(lián)模式（三者中有一項(xiàng)為陽性則判定是陽性），分析sVCAM-1、AECA、HMGB1聯(lián)合檢測對腎功能損害的診斷價(jià)值。sVCAM-1、AECA、HMGB1聯(lián)合檢測診斷腎功能損害的準(zhǔn)確度及特異度最高，見表5。

3討論

目前對于SLE的疾病機(jī)制尚不十分清楚，研究者普遍認(rèn)為，SLE的主要特點(diǎn)是機(jī)體異常的T、B淋巴細(xì)胞的反應(yīng)、自身抗體的產(chǎn)生和免疫復(fù)合物在組織中沉積，伴有補(bǔ)體系統(tǒng)激活、炎癥以及不可逆的器官損傷［9-10］。而老年SLE患者，由于各臟器存在功能衰退且合并多種基礎(chǔ)疾病，腎臟的重吸收及過濾功能的異常情況較多，往往容易導(dǎo)致臨床的誤診。

既往研究顯示，SLE最容易受到損害的器官為腎臟［11］?，F(xiàn)已證實(shí)，SLE患者血清sVCAM-1水平與補(bǔ)體C3、C4等反映疾病活動度的指標(biāo)呈顯著相關(guān)性［12］。sVCAM-1是炎癥細(xì)胞黏性因子之一，通過促進(jìn)細(xì)胞之間以及胞質(zhì)和基質(zhì)之間黏附而導(dǎo)致炎癥細(xì)胞的趨化。在SLE的疾病進(jìn)展中，免疫細(xì)胞異常活躍，sVCAM-1水平呈現(xiàn)顯著的升高趨勢，但與中青年患者相比，其存在升高趨勢總體較低［13］。同時(shí)在對患者的血清補(bǔ)體C3、C4及IgA、IgM、IgG水平的分析中，隨著疾病進(jìn)展，患者的免疫功能的平衡下降，也是造成疾病進(jìn)展的重要原因。本研究也提示伴有腎損害的SLE患者的免疫功能出現(xiàn)異常，免疫細(xì)胞之間的黏附作用增強(qiáng)，也是造成其sVCAM-1水平升高的重要原因。周渭珩等研究發(fā)現(xiàn)，SLE合并腎功能損害患者sVCAM-1水平顯著高于非腎功能損害組［14］，與本研究結(jié)果一致。

在自身免疫性疾病中，AECA主要通過對機(jī)體內(nèi)皮細(xì)胞不同表位的異質(zhì)性自身抗體進(jìn)行識別。在正常情況下，機(jī)體天然的AECA對于腎臟細(xì)胞的內(nèi)皮功能具有一定的保護(hù)性作用，而過高的AECA則會造成內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂及損害。AECA可通過誘導(dǎo)黏附分子（ICAM-1和VCAM-1）的表達(dá)和刺激某些細(xì)胞因子（如白細(xì)胞介素1、白細(xì)胞介素8）以及趨化因子（如單核細(xì)胞趨化蛋白1）的產(chǎn)生來激活內(nèi)皮細(xì)胞。AECA還可以促進(jìn)組織因子和血管性血友病因子的產(chǎn)生導(dǎo)致血栓形成［15］。趙維慶等通過對SLE患者的AECA水平進(jìn)行研究，結(jié)果顯示隨著疾病的進(jìn)展，機(jī)體的血清AECA水平呈現(xiàn)顯著的上升趨勢［16］。本研究顯示，血清AECA水平在老年SLE患者中明顯升高，尤以腎臟損害患者中升高更為明顯，提示有腎臟損害的老年SLE患者存在著更明顯的腎臟血管內(nèi)皮損傷。

生理狀態(tài)下HMGB1存在于細(xì)胞核內(nèi)，參與DNA活性有關(guān)的過程，如DNA復(fù)制、修復(fù)、重組等；病理狀態(tài)下，HMGB1可以從受損細(xì)胞或者活化細(xì)胞中釋放出來，發(fā)揮致炎作用［17］。在細(xì)胞學(xué)的研究中，HMGB1可通過對漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞的顯著性活化作用進(jìn)一步對SLE患者的自身免疫進(jìn)行激活，既可作為疾病發(fā)展早期炎癥反應(yīng)的啟動者，也可作為炎癥反應(yīng)晚期的促進(jìn)者［18］。疾病的早期，HMGB1主要通過對局部病灶部位的細(xì)胞凋亡進(jìn)行調(diào)控，隨著局部細(xì)胞凋亡的增加，其被動釋放水平呈現(xiàn)顯著的上升趨勢。而釋放到細(xì)胞外的HMGB1作為內(nèi)源性危險(xiǎn)信號，一方面激發(fā)細(xì)胞因子超表達(dá)，另一方面則加劇炎癥級聯(lián)反應(yīng)，從而促使炎癥加劇及持續(xù)時(shí)間延長，是一種重要的晚期炎癥遞質(zhì)［19］。HMGB1進(jìn)一步與下游受體結(jié)合，激活下游信號通路，引起多種細(xì)胞因子和趨化因子的釋放。周敏等發(fā)現(xiàn)，老年高血壓腎損傷患者血清HMGB1明顯升高，提示HMGB1在腎臟損傷中起著重要作用［20］。而以往的實(shí)驗(yàn)研究已經(jīng)證實(shí)，SLE的進(jìn)展與HMGB1呈現(xiàn)顯著的相關(guān)性，應(yīng)用HMGB1拮抗劑可以減輕狼瘡小鼠模型的狼瘡樣表現(xiàn)［21-22］。陶鵬輝研究發(fā)現(xiàn)，合并腎炎的SLE患者血中HMGB1水平顯著高于單純SLE患者［23］，與本研究結(jié)果一致。這些結(jié)果均表明，HMGB1與老年SLE患者的腎臟內(nèi)皮損傷密切相關(guān)。

本研究顯示，sVCAM-1、AECA、HMGB1聯(lián)合檢測對SLE患者腎功能損害的診斷特異度顯著提升。由此可見，對內(nèi)皮功能、免疫功能以及局部組織抗原成分的分析，對預(yù)測老年SLE患者腎臟血管內(nèi)皮的損害具有積極的意義。血清sVCAM-1、AECA、HMGB1聯(lián)合檢測可作為臨床診斷老年SLE患者腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的重要依據(jù)。

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（2022-09-21收稿）