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    活性調(diào)節(jié)蛋白、高遷移率族蛋白1在真菌感染性鼻-鼻竇炎患者中表達(dá)水平及與T淋巴細(xì)胞亞群相關(guān)性

    2023-07-08 05:38:26趙姍姍
    臨床軍醫(yī)雜志 2023年6期
    關(guān)鍵詞:鼻竇炎亞群感染性

    王 偉, 趙姍姍, 張 明, 季 民

    1.濰坊醫(yī)學(xué)院,山東 濰坊 261053;2.同濟(jì)大學(xué)附屬東方醫(yī)院膠州醫(yī)院 耳鼻咽喉頭頸外科,山東 青島 266300

    真菌感染性鼻-鼻竇炎是真菌在鼻腔、鼻竇內(nèi)引起的一種特異性感染性疾病,主要表現(xiàn)為單側(cè)鼻塞、流膿涕、鼻涕帶血或有惡臭[1-2]。活性調(diào)節(jié)蛋白(regulated upon activation normal T-cell expressed and secreted,RANTES)是CC趨化因子家族成員,受T細(xì)胞調(diào)控、表達(dá)及分泌。高遷移率族蛋白1(high mobility group protein 1,HMGB1)是一種保守的非組蛋白DNA結(jié)合蛋白,參與炎癥的發(fā)生病理過程。有研究報(bào)道,RANTES、HMGB1多在鼻上皮細(xì)胞中呈高表達(dá),參與鼻竇炎的發(fā)病[3-4]。免疫功能失衡及炎癥因子大量釋放是慢性鼻竇炎的重要誘因[5-6]。本研究旨在探討RANTES、HMGB1在真菌感染性鼻-鼻竇炎中的表達(dá)水平及其與T淋巴細(xì)胞亞群的相關(guān)性?,F(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取自2020年4月至2022年5月同濟(jì)大學(xué)附屬東方醫(yī)院膠州醫(yī)院收治的120例真菌感染性鼻-鼻竇炎患者為研究對(duì)象,并將其納入B組。納入標(biāo)準(zhǔn):符合真菌感染性鼻-鼻竇炎相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7];經(jīng)CT掃描診斷為慢性鼻-鼻竇炎;保守治療效果不理想。排除標(biāo)準(zhǔn):哮喘免疫性疾病;既往鼻竇部手術(shù)史;惡性腫瘤;相關(guān)呼吸道疾病。另選取同期40例健康體檢者納入A組。A組中,男性23例,女性17例;年齡20~61歲,平均年齡(40.5±16.4)歲。B組中,男性60例,女性60例;年齡21~62歲,平均年齡(41.5±16.4)歲;病程3~13個(gè)月,平均病程(8.0±4.0)個(gè)月;鼻腔黏膜Lund-Kennedy鼻內(nèi)鏡評(píng)分法評(píng)估患者的臨床癥狀,輕度72例,中度27例,重度21例。兩組研究對(duì)象性別、年齡比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。所有研究對(duì)象均知情并簽署同意書。

    1.2 研究方法 抽取所有研究對(duì)象空腹靜脈血4 ml,200 r/min離心15 min,離心半徑5 cm,于-60℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩2捎秒p抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)RANTES水平。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清HMGB1水平,將待檢血清標(biāo)本置于室溫中,配置標(biāo)準(zhǔn)品,清洗并拍干酶標(biāo)板,依次加入標(biāo)準(zhǔn)液、樣本、檢測(cè)抗體,封板,震蕩均勻后置于室溫中孵育2 h,洗板,加入酶標(biāo)記物,震蕩,置于室溫中孵育45 min,加入終止液終止反應(yīng),于450 nm處測(cè)吸光值,計(jì)算HMGB1水平。取兩管潔凈試管做抗凝處理,分別將20 μl的CD4+、CD8+單克隆抗體導(dǎo)入試管,室溫37℃孵育30 min,加入融血?jiǎng)┤苎?2 000 r/min離心2 min,棄上清液,洗滌,加入固定劑150 μl,將0.5 ml的PBS混合均勻制備為懸液,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組血清RANTES、HMGB1、T淋巴細(xì)胞亞群水平比較 B組RANTES、HMGB1、CD4+、CD4+/CD8+水平高于A組,CD8+水平低于A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

    2.2 B組不同嚴(yán)重程度患者血清RANTES、HMGB1、T淋巴細(xì)胞亞群水平比較 中度與重度患者RANTES、HMGB1、CD4+、CD4+/CD8+水平高于輕度患者,CD8+低于輕度患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。重度患者RANTES、HMGB1、CD4+、CD4+/CD8+水平高于中度患者,CD8+水平低于輕度患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

    2.3 多因素Logistic回歸分析結(jié)果 將真菌感染性鼻-鼻竇炎作為因變量,將RANTES、HMGB1、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+作為自變量納入多因素Logistic回歸分析。結(jié)果顯示,RANTES、HMGB1、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+是真菌感染性鼻-鼻竇炎發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表3。

    2.4 血清RANTES、HMGB1表達(dá)與T淋巴細(xì)胞亞群水平相關(guān)性 RANTES、HMGB1表達(dá)與CD4+、CD4+/CD8+水平呈正相關(guān)(P<0.05),與CD8+水平呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表4。

    表1 兩組血清RANTES、HMGB1、T淋巴細(xì)胞亞群水平比較

    表2 B組中不同嚴(yán)重程度患者的T淋巴細(xì)胞亞群水平比較

    表3 多因素Logistic回歸分析結(jié)果

    3 討論

    真菌感染性鼻-鼻竇炎是臨床常見的侵襲性疾病,病程較長(zhǎng),且不易根治,極易復(fù)發(fā)[8-9],患者易出現(xiàn)頭疼、發(fā)熱、消化功能與睡眠質(zhì)量下降等癥狀,若未及時(shí)治療,會(huì)增加眼部、肺部并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),甚至死亡[10-11]。RANTES是血管平滑肌細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、血小板分泌的一種趨化因子[12-13]。

    表4 血清RANTES、HMGB1表達(dá)與T淋巴細(xì)胞亞群水平相關(guān)性

    T淋巴細(xì)胞亞群是機(jī)體細(xì)胞免疫指標(biāo)。有研究報(bào)道,機(jī)體免疫功能與疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān),高水平的CD69、RANTES是慢性鼻-鼻竇炎患者鼻息肉的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[14]。本研究發(fā)現(xiàn),RANTES在真菌感染性鼻-鼻竇炎患者中呈高表達(dá)。這提示,RANTES在鼻上皮細(xì)胞的炎癥浸潤(rùn)中起到重要作用,其誘導(dǎo)T細(xì)胞結(jié)合產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng),參與免疫應(yīng)答調(diào)節(jié),促進(jìn)炎癥的發(fā)展。

    HMGB1是一種促炎性細(xì)胞因子,廣泛存在于生物體各細(xì)胞中,與晚期糖基化、Toll樣受體結(jié)合,促進(jìn)炎癥因子分泌[15]。HMGB1在炎癥反應(yīng)中作為一種警報(bào)信號(hào),能夠激活免疫細(xì)胞,刺激免疫細(xì)胞遷移,促進(jìn)識(shí)別細(xì)菌產(chǎn)物,抑制凋亡細(xì)胞的吞噬作用,進(jìn)而維持炎癥反應(yīng)[16]。有研究報(bào)道,HMGB1可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞活化,增加炎癥細(xì)胞的存活,引起組織細(xì)胞損傷,導(dǎo)致炎癥發(fā)生[17]。本研究發(fā)現(xiàn),HMGB1在真菌感染性鼻-鼻竇炎患者中呈高表達(dá),提示HMGB1參與炎性反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展,與既往研究[18]結(jié)果一致。

    T淋巴細(xì)胞亞群是檢測(cè)機(jī)體細(xì)胞免疫的指標(biāo),能夠?qū)C(jī)體多種疾病進(jìn)行診斷,并根據(jù)其病機(jī)進(jìn)行分析,有利于患者預(yù)后[19-20]。本研究中,CD4+、CD4+/CD8+在真菌感染性鼻-鼻竇炎患者中隨病情嚴(yán)重程度呈上升趨勢(shì),CD8+呈下降趨勢(shì),提示真菌感染性鼻-鼻竇炎患者細(xì)胞免疫失衡,免疫功能降低[21]。本研究還發(fā)現(xiàn),RANTES及HMGB1表達(dá)與CD4+、CD4+/CD8+水平呈正相關(guān),與CD8+水平呈負(fù)相關(guān),且RANTES、HMGB1、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+是真菌感染性鼻-鼻竇炎發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,提示其可作為診斷真菌感染性鼻-鼻竇炎患者的生物標(biāo)志物。

    綜上所述,RANTES、HMGB1在真菌感染性鼻-鼻竇炎中呈高表達(dá),與CD4+、CD4+/CD8+呈正相關(guān)、與CD8+呈負(fù)相關(guān),能夠在一定程度上起預(yù)測(cè)真菌感染性鼻-鼻竇炎病情的作用。

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