血清檢驗(yàn)和細(xì)菌檢驗(yàn)在檢查布氏菌感染應(yīng)用價(jià)值

王利平 劉陽(yáng)子

(1.渭南市婦幼保健院檢驗(yàn)科,陜西 渭南 714000;2.榆林市第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,陜西 榆林 719000)

布魯氏菌病(Brucellosis)又稱為布氏桿菌病、布病、地中海熱、馬耳他熱等,是動(dòng)物感染布魯氏菌后在傳染給人的一種疾病是嚴(yán)重危險(xiǎn)人類健康的一類人畜共患性疾病。臨床對(duì)于布氏桿菌病的治療方法較為明確,予以敏感的抗生素即可有效控制感染,取得較好預(yù)后。但難點(diǎn)在于準(zhǔn)確、快速的診斷疾病[1]。目前臨床對(duì)于病原體感染性疾病的診斷方法的金標(biāo)準(zhǔn)均為病原體培養(yǎng)陽(yáng)性,及臨床常說(shuō)的細(xì)菌檢驗(yàn)培養(yǎng)并分離鑒別出準(zhǔn)確的感染病原菌。但病原菌培養(yǎng)具有時(shí)間長(zhǎng)、環(huán)節(jié)眾多、病原菌分離鑒別難度大的特點(diǎn),使得檢出率低、漏檢率高[2]。目前我國(guó)2007年制定的《布魯氏桿菌病診斷標(biāo)準(zhǔn)》中的診斷方法為以病史、實(shí)驗(yàn)室檢查、體格檢查相結(jié)合進(jìn)行綜合診斷的方法[3]。本方案分析血清檢驗(yàn)、細(xì)菌檢驗(yàn)方法對(duì)布魯氏菌病的診斷效能,以期為臨床此類患者的診斷提供更為客觀的標(biāo)準(zhǔn),促進(jìn)該病防治水平。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取我院2018年4月至2021年10收治的疑似布氏菌感染患者80例,其中男43例,女37例,年齡24～71歲,平均年齡(61.5±4.8)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):所有患者均經(jīng)初診醫(yī)師根據(jù)流行病學(xué)史、臨床癥狀等初診為疑似布氏桿菌病;年齡≥18周歲;認(rèn)知功能正常,能理解研究方案內(nèi)容,知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn):入組前1個(gè)月內(nèi)有抗生素應(yīng)用史者;既往有布氏桿菌病史者;合并全身或其他部位感染性疾病者;合并有嚴(yán)重心、肝、腎、造血系統(tǒng)、代謝等疾病或精神病者;有結(jié)核、腫瘤、傷寒、風(fēng)濕熱等病史者;(6)臨床資料收集不完整者。

1.2方法 所有患者均收集完整的流行病學(xué)史(如發(fā)病前是否有與家畜或污染動(dòng)物制品、布魯菌培養(yǎng)物等有密切接觸史,居住地是否為布魯菌病流行區(qū)等)、臨床癥狀(是否出現(xiàn)發(fā)熱、多汗、乏力、肌肉痛、關(guān)節(jié)痛、頭痛、厭食、消瘦、和(或)伴心臟、神經(jīng)、骨關(guān)節(jié)、泌尿等系統(tǒng)并發(fā)癥)等資料,對(duì)所有入組患者均行血清檢驗(yàn)及血液、骨髓、其他體液及排泄物的細(xì)菌微生物培養(yǎng)分離試驗(yàn)。所有患者完善上述信息收集及檢查結(jié)果后,由兩位資深感染科醫(yī)師根據(jù)上述信息參照《布魯氏菌病診斷標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)患者是否感染布魯氏菌病做出綜合診斷結(jié)論。

1.3觀察標(biāo)準(zhǔn) (1)血清檢驗(yàn)檢驗(yàn):采集入組患者空腹靜脈血于采血管中,采用2 000轉(zhuǎn)/min的轉(zhuǎn)速離心10 min,分離得上層血清,取其中的0.03 mL作為檢測(cè)標(biāo)本,將0.03 mL布魯氏桿菌病抗原與0.03 mL血清混合,室溫放置4 min,觀察是否出現(xiàn)抗原凝聚反應(yīng),若4 min后出現(xiàn)凝聚則為陽(yáng)性。取6支試管凝集,分別加入0.5 mL0.9%氯化鈉溶液,再加入0.5 mL布氏桿菌病抗原,將第1支混合液添加到第2支中,依次進(jìn)行至第5支,倒出混合液,取5份每份0.5 mL布氏菌抗體分別加入第1～5支試管中,分別對(duì)六只試管于37℃溫控箱中培養(yǎng)12 h。檢查試管持否出現(xiàn)“++”,若出現(xiàn)則判為血清凝集。 (2)細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn):由資深護(hù)士遵醫(yī)囑采集患者咽拭子、糞便、小便、血液、骨髓等疑似感染部位標(biāo)本,按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)范(第四版)》[4]中的微生物培養(yǎng)規(guī)程,對(duì)標(biāo)本進(jìn)行接種、培養(yǎng),培養(yǎng)出的病原菌進(jìn)行分離鑒別。 (3)布魯氏菌感染病診斷金標(biāo)準(zhǔn):由兩位資深的感染科醫(yī)師參照布魯氏菌病診斷標(biāo)準(zhǔn)中,對(duì)所有患者的臨床信息及實(shí)驗(yàn)室信息綜合判斷疑似患者是否為確診患者。具體診斷標(biāo)準(zhǔn)為:(流行病學(xué)接觸史(發(fā)病前患者曾有家畜、畜產(chǎn)品、布魯氏菌培養(yǎng)物等有密切接觸史,或生活在疫區(qū),或與疫苗生產(chǎn)、使用和研究相關(guān)人員、環(huán)境、設(shè)施、設(shè)備、以期等有密接關(guān)系)、(臨床癥狀(出現(xiàn)持續(xù)數(shù)日乃至數(shù)周發(fā)熱(包括低熱),多汗,乏力,肌肉和關(guān)節(jié)疼痛等。多數(shù)患者淋巴結(jié)、肝、脾和睪丸腫大,少數(shù)患者可出現(xiàn)各種各樣的充血性皮疹和黃疸;慢性期患者多表現(xiàn)為骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)損害)、(SAT滴度為(++)及以上,三項(xiàng)均滿足則診斷為布氏桿菌病患者。(4)質(zhì)量控制:兩位醫(yī)師若做出的診斷結(jié)論一致則以此結(jié)論出具診斷報(bào)告,若若兩者診斷結(jié)論不一致,則應(yīng)針對(duì)結(jié)論不一致的項(xiàng)目進(jìn)行重新檢查,主要是體格檢查方面的不一致,則兩位醫(yī)師共同檢查,取得一致則出具診斷結(jié)論。以兩位醫(yī)師出具的診斷結(jié)論作為金標(biāo)準(zhǔn),分別計(jì)算血清檢驗(yàn)和細(xì)菌檢驗(yàn)及二者聯(lián)合診斷布魯氏菌病的診斷效能指標(biāo):靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、誤診率、漏診率。

2 結(jié) 果

2.1綜合診斷、血清實(shí)驗(yàn)、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)診斷布氏桿菌病結(jié)果 80例疑似布氏菌感染患者中經(jīng)綜合診斷確診者為56例,細(xì)菌檢驗(yàn)確診43例,血清檢驗(yàn)確診51例,血清檢驗(yàn)聯(lián)合細(xì)菌檢驗(yàn)確診53例。見(jiàn)表1。

表1 綜合診斷、血清實(shí)驗(yàn)、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)診斷布氏桿菌病結(jié)果

2.2綜合診斷、血清實(shí)驗(yàn)、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)診斷布氏桿菌病診斷效能指標(biāo)分析 血清檢驗(yàn)聯(lián)合細(xì)菌檢驗(yàn)診斷布氏菌感染靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度高于單純血清檢驗(yàn)和細(xì)菌檢驗(yàn),而誤診率、漏診率低于單純血清檢驗(yàn)和細(xì)菌檢驗(yàn)。見(jiàn)表2。

表2 綜合診斷、血清實(shí)驗(yàn)、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)診斷布氏桿菌病診斷效能指標(biāo)

3 討 論

隨著分子生物技術(shù)不斷進(jìn)展,臨床對(duì)多項(xiàng)新型快速診斷技術(shù)在布魯菌病診斷中的價(jià)值進(jìn)行了研究,常用的方法有試管凝集試驗(yàn)、抗人球蛋白試驗(yàn)、琥紅平板凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、膠體金免疫層析法等等[6]。但是上述診斷方法都存在不同的局限性,如血清凝集實(shí)驗(yàn)對(duì)于其他類型的急性感染性疾病存在假陽(yáng)性,臨床需要最終確診細(xì)菌檢驗(yàn)仍然占據(jù)主導(dǎo)地位[6]。因此,通過(guò)聯(lián)合診斷的方式提升現(xiàn)有檢查方法在診斷布魯菌病中的診斷效能成為臨床布魯菌病診斷的新思路[7]。

本文結(jié)果顯示,細(xì)菌檢驗(yàn)的方法的診斷靈敏度較低僅達(dá)到73.21%,而血清檢驗(yàn)的診斷靈敏度則可達(dá)到83.93%,但其假陽(yáng)性率應(yīng)該比較高。采用血清檢驗(yàn)聯(lián)合細(xì)菌檢驗(yàn)診斷布氏菌感染的診斷靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、誤診率、漏診率分別為:91.07%、91.67%、91.25%、9.09%、9.80%,均達(dá)到了較高的診斷效能。兩種檢查方法聯(lián)合診斷布魯菌病,有效降低了血清檢驗(yàn)方法的地特異性和誤診率,同時(shí)補(bǔ)充了細(xì)菌檢驗(yàn)診斷中的靈敏度低及漏診率高的的問(wèn)題,兩種方法聯(lián)合應(yīng)用互相補(bǔ)充不足,達(dá)到了更好的診斷效能。

綜上,血清檢驗(yàn)聯(lián)合細(xì)菌檢驗(yàn)診斷布氏菌感染相較于單一的血清檢驗(yàn)和細(xì)菌檢驗(yàn)具有更高的診斷靈敏度、準(zhǔn)確度,及更低的誤診率和漏診率,具有更高的臨床價(jià)值。