外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官AsA-GSH 循環(huán)的影響

趙子媛，佟冠杰，李彥慧

（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，河北 保定 071000；2.河北綠景工程咨詢服務(wù)有限公司，河北 石家莊 050000）

仁用杏（Kernel-apricot）是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)林樹(shù)種，也是木本油料樹(shù)種的主要成員之一［1］，具有耐寒、耐旱、耐瘠薄、對(duì)土壤要求不嚴(yán)等特性，是適應(yīng)性強(qiáng)的樹(shù)種，常作為重要的荒山綠化和防護(hù)林樹(shù)種。杏仁具有豐富的營(yíng)養(yǎng)，既是食品，又是藥品和上等滋補(bǔ)品的原料。仁用杏具有良好的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，仁用杏產(chǎn)業(yè)的綜合開(kāi)發(fā)利用涉及食品、油料、飲料、中藥、化工、化妝品等多個(gè)領(lǐng)域［2］，發(fā)展仁用杏生產(chǎn)也成為了增加農(nóng)村收入的有效途徑之一。但在仁用杏的實(shí)際生產(chǎn)中，由于其在春季開(kāi)花較早，花期易受到低溫凍害從而導(dǎo)致減產(chǎn)甚至絕收，使經(jīng)濟(jì)效益受到巨大損失，這一問(wèn)題一直制約著仁用杏的生產(chǎn)發(fā)展，因此提高仁用杏花期抗寒性的研究已成為仁用杏產(chǎn)業(yè)重要的課題。

NO 作為植物體內(nèi)重要的信號(hào)分子，當(dāng)植物處于逆境條件時(shí)發(fā)揮信號(hào)傳導(dǎo)作用，能夠緩解逆境脅迫對(duì)植物造成的傷害?？箟难?谷胱甘肽（AsAGSH）循環(huán)系統(tǒng)是植物體內(nèi)抵抗氧化脅迫，清除活性氧（ROS）的重要調(diào)節(jié)系統(tǒng)。許多研究表明，外源NO 參與著許多植物的AsA-GSH 循環(huán)的調(diào)節(jié)，緩解植物在逆境脅迫受到的傷害，如緩解鹽脅迫［3-4］，高溫脅迫［5］，金屬脅迫［6］等。但目前關(guān)于噴施外源NO 在低溫脅迫下仁用杏花器官AsA-GSH 循環(huán)系統(tǒng)的影響的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。因此，本試驗(yàn)以3 個(gè)品種仁用杏花器官為材料，通過(guò)噴施不同濃度的外源NO，研究不同濃度的外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官活性氧水平及AsA-GSH 循環(huán)系統(tǒng)中的主要抗氧化物質(zhì)和酶活性的影響，為緩解低溫逆境對(duì)仁用杏的傷害提供理論依據(jù)和科學(xué)指導(dǎo)，對(duì)實(shí)現(xiàn)仁用杏產(chǎn)業(yè)的生產(chǎn)發(fā)展具有重要的指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)選用‘龍王帽’（‘Longwangmao’）、‘優(yōu)一’（‘Youyi’）和‘圍選1 號(hào)’（‘Weixuan 1’）3 個(gè)仁用杏品種作為供試材料，分別于2018 年4 月13 日、4 月16 日、4 月18 日在承德市圍場(chǎng)縣楊家灣鄉(xiāng)務(wù)本堂村選擇長(zhǎng)勢(shì)整齊一致、生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害的10 年生植株各30 株于顯蕾期分別從樹(shù)冠東、西、南、北4 個(gè)方向采取1 年生花枝，在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行水培。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 外源NO 處理 試驗(yàn)所用外源NO 供體為硝普鈉（Sodium nitroprusside，SNP）。將3 個(gè)仁用杏品種的花器官分別噴施濃度為0（CK，蒸餾水）、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L 的SNP，每品種每處理3 次重復(fù)，每重復(fù)20 枝。在室溫下早晚各噴施1 次，每次每處理噴施80 mL，共噴施2 d，之后進(jìn)行低溫處理。

1.2.2 低溫處理 將經(jīng)過(guò)SNP 噴施的花枝放入以PID 調(diào)節(jié)方式控溫和Fros Tem40 數(shù)據(jù)采集的MSZ-2F 型模擬霜箱內(nèi)。人工霜箱1.5 h 降到0 ℃，之后以1 ℃/0.5 h 的速度降溫，根據(jù)寧超［7］測(cè)定的各品種的過(guò)冷卻點(diǎn)溫度，‘優(yōu)一’和‘龍王帽’降到-2 ℃后保持4 h，‘圍選1 號(hào)’降到-3 ℃后保持4 h，取出材料立即摘取花器官混勻，用于生理指標(biāo)的測(cè)定，所有生理指標(biāo)每個(gè)處理均3 次重復(fù)。

1.3 指標(biāo)的測(cè)定方法

過(guò)氧化氫（H2O2）含量的測(cè)定采用林植芳［8］等的方法；超氧陰離子自由基（O2-）產(chǎn)生速率采用王愛(ài)國(guó)［9］等的方法；抗壞血酸（AsA）和脫氫抗壞血酸（DHA）的測(cè)定參照Arakawa［10］的方法；谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）的測(cè)定參照Griffith［11］的方法；抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）和脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）的測(cè)定參照Nakano 和Asada［12］的方法；谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPX）的測(cè)定采用張景萍［13］的方法。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel 和SPSS17.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和繪圖處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官活性氧水平的影響

2.1.1 對(duì)過(guò)氧化氫（H2O2）含量的影響 如圖1 所示，

圖1 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官H2O2 含量的影響Fig.1 Effects of exogenous NO on the H2O2 content of kernel apricot floral organs under low temperature stress

在低溫脅迫下，3 個(gè)仁用杏品種噴施外源NO 各處理的H2O2含量均低于CK，‘優(yōu)一’和‘龍王帽’H2O2含量隨外源NO 濃度的增大呈現(xiàn)先下降后上升的變化趨勢(shì)，2 個(gè)品種均在SNP 濃度為0.4 mmol/L 時(shí)H2O2含量降至到最低，分別比CK 降低了13.71%、25.17%，均與CK 差異極顯著；隨外源NO 濃度的增大，‘圍選1 號(hào)’H2O2含量持續(xù)下降，當(dāng)SNP濃度為0.5 mmol/L 時(shí)H2O2含量降至到最低，比CK降低了25.17%，與CK 差異極顯著。

外源NO 各處理對(duì)3 個(gè)仁用杏品種的H2O2含量降低的程度不同，除0.5 mmol/L SNP 處理外，‘龍王帽’在外源NO 各處理下H2O2含量下降幅度均高于‘優(yōu)一’和‘圍選1 號(hào)’。

2.1.2 對(duì)超氧陰離子自由基（O2-）產(chǎn)生速率的影響噴施不同濃度外源NO 對(duì)仁用杏花O2-產(chǎn)生速率的影響見(jiàn)圖2，‘優(yōu)一’花器官在噴施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的O2-產(chǎn)生速率分別是CK 的60.31%、53.99%、42.19%、34.80%、44.46%，各處理均與CK 有極顯著性差異?！埻趺薄ㄆ鞴?在 噴 施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的O2-產(chǎn)生速率分別是CK 的79.09%、46.07%、38.08%、14.38%、27.43%，各處理均與CK 有極顯著性差異?！畤x1 號(hào)’花器官在噴施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的O2-產(chǎn)生速率分別 是CK 的83.25%、65.67%、51.58%、36.82%、22.89%，0.1 mmol/L SNP 處理與CK 差異顯著，其他各處理均與CK 有極顯著性差異。外源NO 各處理不同程度的降低了3 個(gè)仁用杏品種花器官的O2-產(chǎn)生速率，在0.4 mmol/L SNP 處理下，‘優(yōu)一’‘龍王帽’和‘圍選1 號(hào)’分別比CK 降低了65.20%、85.62%、63.18%。

圖2 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官O2-產(chǎn)生速率的影響Fig.2 Effects of exogenous NO on the generation rate of O2- of kernel apricot floral organs under low temperature stress

2.2 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官抗壞血酸循環(huán)的影響

噴施不同濃度外源NO 對(duì)仁用杏花器官抗壞血酸循環(huán)的影響見(jiàn)表1，施加不同濃度的外源NO 均提高了3 個(gè)仁用杏品種的AsA、AsA+DHA 含量和AsA/DHA 值，降低DHA 含量。

表1 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官抗壞血酸循環(huán)的影響Table 1 Effects of exogenous NO on the ascorbate cycle of kernel apricot floral organs under low temperature stress

‘優(yōu)一’花器官在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理下的AsA 含量分別比CK 提高了7.94%、21.19%、27.91%、26.48%、21.95%；‘龍王帽’花器官在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理下的AsA 含量分別比CK 提高了3.26%、6.30%、9.65%、15.11%、8.45%；‘圍選1 號(hào)’花器官在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理下的AsA 含量分別比CK提高了3.03%、5.40%、7.76%、12.08%、14.61%。3 種仁用杏均在SNP 濃度為0.1 mmol/L 時(shí)，與CK無(wú)顯著性差異。外源NO 對(duì)3 個(gè)仁用杏品種花器官AsA 含量的影響是不同的，‘優(yōu)一’在外源NO 各處理下AsA 含量上升幅度均高于‘龍王帽’和‘圍選1 號(hào)’。

‘優(yōu)一’在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理下DHA 含量分別比CK 降低了19.40%、34.04%、41.98%、52.56%、47.44%；‘龍王帽’在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處 理 下DHA含量分別比CK 降低了4.97%、25.73%、37.92%、61.63%、45.60%；‘圍選1 號(hào)’在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理下DHA 含量分別比CK 降低了28.86%、33.16%、38.48%、50.13%、64.30%。3個(gè)仁用杏品種在0.4 mmol/L SNP 處理時(shí)均與CK 差異極顯著。

‘優(yōu)一’花器官噴施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的AsA+DHA 含量分別比CK提高了4.77%、14.73%、19.71%、17.22%、13.90%，0.2、0.5 mmol/L SNP 處理與CK 差異顯著，0.3、0.4 mmol/L SNP 處理與CK 差異極顯著?！埻趺薄?器 官 噴 施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP處理的AsA+DHA 含量分別比CK 提高了2.42%、3.43%、5.45%、8.28%、3.64%，0.4 mmol/L SNP處理與CK 差異顯著，其余濃度處理均無(wú)顯著差異?！畤x1 號(hào)’花器官噴施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的AsA+DHA 含量分別比CK提高了0.60%、2.39%、4.18%、7.17%、8.37%，0.4、0.5 mmol/L SNP 處理與CK 差異極顯著。外源NO對(duì)3 個(gè)仁用杏品種花器官AsA+DHA 含量的影響是不同的，‘優(yōu)一’在外源NO 各處理下AsA+DHA含量上升幅度均高于‘龍王帽’和‘圍選1 號(hào)’。

‘優(yōu)一’和‘龍王帽’各處理的AsA/DHA 隨外源NO濃度的增大呈現(xiàn)先上升后下降的變化趨勢(shì)，均在0.4 mmol/L SNP 處理時(shí)升到最大，分別是CK的2.74、3.13 倍，與CK 差異極顯著；‘圍選1 號(hào)’各處理的AsA/DHA 隨外源NO 濃度的增大呈現(xiàn)上升的變化趨勢(shì)，0.5 mmol/L SNP 處理是CK 的3.15倍，與CK 差異極顯著。

2.3 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官谷胱甘肽循環(huán)的影響

噴施不同濃度外源NO 對(duì)仁用杏花器官谷胱甘肽循環(huán)的影響見(jiàn)表2。施加不同濃度的外源NO 均提高了3 個(gè)仁用杏品種的GSH、GSH+GSSG 含量和GSH/GSSG 值，降低GSSG 含量。

表2 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官谷胱甘肽循環(huán)的影響Table 2 Effects of exogenous NO on the glutathione cycle of kernel apricot floral organs under low temperature stress

‘優(yōu)一’0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP處理GSH 含量均極顯著高于CK，分別比CK 提高了7.94%、10.40%、13.91%、17.83%、12.57%?！埻趺薄?.1 mmol/L SNP 處理與CK 無(wú)顯著性差異，但比CK 提高了2.33%；0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理均極顯著高于CK，分別比CK 提高了4.55%、6.81%、8.00%、6.61%?！畤x1 號(hào)’0.1 mmol/L SNP處理顯著高于CK，比CK 提高了3.28%；0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理均極顯著高于CK，分別比CK提高了4.89%、7.57%、10.01%、13.41%。外源NO對(duì)3 個(gè)仁用杏品種GSH 含量的影響是不同的，除0.5 mmol/L SNP 處理外，‘優(yōu)一’在外源NO 各處理下GSH 含量上升幅度均高于‘龍王帽’和‘圍選1 號(hào)’。

‘優(yōu)一’在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP處理下GSSG 含量分別是CK 的98.34%、96.52%、93.35%、90.19%、91.85%；‘龍王帽’在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理下GSSG 含量分別是CK 的98.96%、97.06%、95.16%、94.22%、94.62%；‘圍選1 號(hào)’在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理下GSSG 含量分別是CK 的97.95%、96.63%、94.50%、93.78%、92.60%。3 個(gè)品種仁用杏在0.1 mmol/L SNP處理時(shí)均與CK 無(wú)顯著性差異。外源NO 對(duì)3 個(gè)仁用杏品種GSSG 含量的影響是不同的，除0.1 mmol/L SNP 處理外，‘優(yōu)一’在外源NO 各處理下GSSG含量降低幅度均高于‘龍王帽’和‘圍選1 號(hào)’。

‘優(yōu)一’花器官噴施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的GSH+GSSG 含量分別比CK 提高了3.26%、3.63%、3.89%、4.36%、2.47%，外源NO 各處理與CK均呈極顯著性差異。‘龍王帽’花器官噴施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的GSH+GSSG 含量分別比CK 提 高 了0.69%、0.91%、1.15%、1.31%、0.78%，外源NO 各處理與CK 均無(wú)顯著性差異?！畤x1 號(hào)’花器官噴施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的GSH+GSSG 含量分別比CK 提高了0.71%、0.90%、1.25%、2.16%、3.35%，0.5 mmol/L SNP 處理與CK 差異極顯著。外源NO 各處理均不同程度的提高了3 個(gè)仁用杏品種花器官的GSH+GSSG 含量，除0.5 mmol/L SNP 處理外，‘優(yōu)一’在外源NO 各處理下GSH+GSSG 含量上升幅度均高于‘龍王帽’和‘圍選1 號(hào)’。‘優(yōu)一’和‘龍王帽’花器官的GSH/GSSG 均隨外源NO 濃度的增大呈現(xiàn)先上升后下降的變化趨勢(shì)，均在0.4 mmol/L SNP 處理時(shí)達(dá)到最大，極顯著高于CK（P＜0.01），分別是CK 的1.31、1.15 倍；‘圍選1 號(hào)’花器官的GSH/GSSG 隨外源NO 濃度的增大而增大，在0.5 mmol/L SNP 處理時(shí)達(dá)到最大，極顯著高于CK，是CK 的1.22 倍。外源NO 對(duì)3 個(gè)仁用杏品種花器官GSH/GSSG 的影響是不同的，‘優(yōu)一’在外源NO 各處理下GSH/GSSG 上升幅度均高于‘龍王帽’和‘圍選1 號(hào)’。

2.4 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官AsAGSH 循環(huán)系統(tǒng)中抗氧化物酶活性的影響

2.4.1 對(duì)抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）活性的影響 由圖3 可知，外源NO 均可以增加3 個(gè)仁用杏品種的APX 活性?！畠?yōu)一’在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的APX 活性分別是CK 的1.22、1.59、2.13、2.67、2.11 倍?！埻趺薄?.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的APX 活性分別是CK 的1.31、1.44、1.63、1.77、1.54 倍?！畤?選1號(hào)’在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的APX活性分別是CK的1.16、1.47、1.63、1.88、2.15倍。3 個(gè)仁用杏品種均在0.2 mmol/L SNP 處理與CK 差異顯著，在0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理均與CK均呈極顯著性差異（P＜0.01）。

圖3 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官APX 活性的影響Fig.3 Effects of exogenous NO on the APX activity of kernel apricot floral organs under low temperature stress

2.4.2 對(duì)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPX）活性的影響 施加外源NO 對(duì)3 個(gè)仁用杏品種GPX 活性如圖4 所示，在低溫脅迫下，外源NO 各處理的GPX活性均高于CK?！畠?yōu)一’0.1、0.2 mmol/L SNP 處理比CK 提高了61.67%、97.67%；0.3 mmol/L SNP處理顯著高于CK，比CK 提高了130.00%；0.4 和0.5 mmol/L SNP 處理均極顯著高于CK，分別比CK 提高了197.00%、163.00%。‘龍王帽’0.1、0.2 mmol/L SNP 處理與CK 無(wú)顯著性差異，但分別比CK 提高了30.17%、64.07%；0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理顯著高于CK，分別比CK 提高了98.64%、103.39%、101.02%。‘圍選1 號(hào)’0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理分別比CK 提高了2.73%、34.13%、38.91%、65.87%、68.94%，但各處理與CK 均無(wú)顯著性差異。外源NO 對(duì)3 個(gè)仁用杏品種花器官GPX 活性的影響是不同的，‘優(yōu)一’在外源NO 各處理下GPX 活性上升幅度均高于‘龍王帽’和‘圍選1 號(hào)’。

圖4 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官GPX 活性的影響Fig.4 Effects of exogenous NO on the GPX activity of kernel apricot floral organs under low temperature stress

2.4.3 對(duì)脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）活性的影響 由圖5 可知，‘優(yōu)一’施加外源NO 各處理DHAR 活性隨外源NO 濃度的增大呈現(xiàn)先上升再下降的變化趨勢(shì)，‘龍王帽’和‘圍選1 號(hào)’施加外源NO 各處理DHAR 活性則隨外源NO 濃度的增大呈現(xiàn)持續(xù)上升的變化趨勢(shì)?！畠?yōu)一’花器官噴施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的DHAR 活性分別是CK 的1.33、1.51、1.64、1.85、1.49 倍。當(dāng)SNP 濃度為0.4 mmol/L 時(shí)，仁用杏花的DHAR 活性上升到最大值，與CK 差異極顯著，0.3 mmol/L SNP 處理與CK 差異顯著?！埻趺薄ㄆ鞴賴娛?.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的DHAR 活性分別是CK 的1.32、1.50、1.77、1.94、1.99 倍，0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理均與CK 差異極顯著?！畤x1 號(hào)’花器官噴施0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L SNP 處理的DHAR 活性分別是CK 的1.34、1.66、1.70、2.05、2.12 倍，0.5 mmol/L SNP 處 理 與CK差異顯著。

圖5 外源NO 對(duì)低溫脅迫下仁用杏花器官DHAR 活性的影響Fig.5 Effects of exogenous NO on the DHAR activity of kernel apricot floral organs under low temperature stress

3 討論與結(jié)論

3.1 討論

低溫脅迫會(huì)使植物體內(nèi)的ROS 大量累積，H2O2在植物體內(nèi)是ROS 的一種，具有損傷生物大分子、產(chǎn)生細(xì)胞毒害的能力［14］。O2-既可以和植物體內(nèi)的蛋白質(zhì)和核酸等活性物質(zhì)直接作用，又能和H2O2反應(yīng)生成攻擊性更強(qiáng)的羥自由基，這些羥自由基則會(huì)引發(fā)膜脂過(guò)氧化反應(yīng)。吳旭紅［15］在外源NO 對(duì)低溫脅迫下南瓜（Cucurbita moschata）幼苗氧化損傷的保護(hù)效應(yīng)研究中發(fā)現(xiàn)，低溫脅迫下，外源NO 處理可以降低南瓜幼苗H2O2含量和O2-產(chǎn)生速率。本試驗(yàn)研究表明，外源NO 處理降低了3 個(gè)品種仁用杏花器官H2O2含量和O2-產(chǎn)生速率，說(shuō)明適宜濃度范圍內(nèi)的外源NO 可以減緩低溫脅迫下膜脂過(guò)氧化作用進(jìn)程，降低對(duì)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的傷害，從而在一定程度上提高仁用杏花抵抗低溫的能力。

AsA-GSH 循環(huán)系統(tǒng)是植物組織中直接消除H2O2的酶促催化系統(tǒng)。AsA 和GSH 是植物體內(nèi)的兩種重要的非酶抗氧化物質(zhì)，在AsA-GSH 循環(huán)系統(tǒng)中發(fā)揮著積極的作用［16］。AsA 和GSH 在清除ROS 的同時(shí)，自身被氧化形成DHA 和GSSG，再在DHAR 和GR 的還原作用下生成AsA 和GSH［17］。在逆境條件下，往往用AsA/DHA、GSH/GSSG 來(lái)表示細(xì)胞的氧化還原狀態(tài)，比值越低說(shuō)明細(xì)胞遭受的氧化脅迫越重［16］。本研究表明，低溫脅迫下，外源NO 各處理均提高了3 個(gè)仁用杏品種的AsA、GSH、AsA+DHA、GSH+GSSG 含量和AsA/DHA、GSH/GSSG 的比值?！畠?yōu)一’和‘龍王帽’均隨外源NO 濃度的增大呈現(xiàn)先升后降的變化趨勢(shì)，而‘圍選1 號(hào)’則隨外源NO 濃度的增大而升高，說(shuō)明在一定濃度范圍內(nèi)，外源NO 可以促進(jìn)低溫脅迫下3個(gè)仁用杏品種的抗壞血酸和谷胱甘肽的合成，提高AsA-GSH 循環(huán)速率，清除低溫脅迫造成的H2O2累積，從而提高仁用杏花的抗氧化能力。這與肖春燕［18］和孫兵［19］等在黃瓜（Cucumis sativusL.）和曼地亞紅豆杉（Taxus media）幼苗的研究結(jié)果一致。但劉建新［6］等在探討外源NO 對(duì)鑭脅迫下燕麥（Avena nuda）幼苗的抗氧化系統(tǒng)調(diào)節(jié)機(jī)制中發(fā)現(xiàn)，外源NO 降低了鑭脅迫下燕麥幼苗的AsA 和GSH 含量，這與本研究結(jié)果略有不同，可能是由于植物受到的脅迫不同以及研究的材料不同所致。‘優(yōu)一’和‘龍王帽’DHA 和GSSG 含量均隨外源NO 濃度的增加呈現(xiàn)先下降后上升的變化趨勢(shì)，‘圍選1 號(hào)’隨外源NO 濃度的增加而減少，說(shuō)明在一定濃度范圍內(nèi)，外源NO 可以減少仁用杏花DHA 和GSSG 含量。降低活性氧的累積對(duì)DHA 和GSSG 向AsA 和GSH轉(zhuǎn)化的抑制作用，促進(jìn)AsA-GSH 循環(huán)效率，提高3 種仁用杏抵抗低溫脅迫的能力。這與相昆［20］等對(duì)核桃（Juglans regia）幼苗和張麗［21］對(duì)旱柳（Salix matsudanaKoidz.）葉片的研究結(jié)果一致。而李曉云［22］研究發(fā)現(xiàn)，外源NO 提高了銅脅迫下番茄（Lycopersicon esculentumMill.）根系的GSSG 含量，這與本研究結(jié)果相反，這可能與脅迫類型、植物種類、組織器官等有關(guān)。

APX、GPX 和DHAR 是AsA-GSH 循環(huán)系統(tǒng)中重要的酶，在逆境脅迫下發(fā)揮清除H2O2等ROS 的重要作用［23］。APX 和 DHAR 其活性的高低直接影響到AsA 和DHA 在AsA-DHA 庫(kù)的含量［24］。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，不同濃度外源NO 對(duì)3 種仁用杏APX、GPX 和DHAR 活性的變化主要表現(xiàn)兩種變化趨勢(shì)，‘優(yōu)一’花器官APX、GPX 和DHAR 活性隨外源NO 濃度的增大呈現(xiàn)先上升后下降的變化趨勢(shì)，‘龍王帽’花器官APX、GPX 活性與‘優(yōu)一’變化趨勢(shì)一致；‘圍選1 號(hào)’花器官內(nèi)APX、GPX和DHAR 活性隨外源NO 濃度的增大而增大，‘龍王帽’花器官DHAR 活性與‘圍選1 號(hào)’變化趨勢(shì)一致，說(shuō)明低溫脅迫下，噴施適宜濃度范圍的外源NO 可以提高3 個(gè)仁用杏品種花器官中APX、GPX和DHAR 活性，提高H2O2清除效率，保障了AsAGSH 循環(huán)系統(tǒng)的正常運(yùn)轉(zhuǎn)，從而緩解低溫脅迫對(duì)仁用杏花器官造成的傷害。這與吳錦程［25］等在枇杷（Eriobotrya japonicaLindl.）、麻云霞［26］等在酸棗（Zizyphus jujubaMill.）幼苗上的研究結(jié)果一致。

3.2 結(jié)論

綜上所述，低溫脅迫下施用不同濃度的外源NO通過(guò)提高3 種仁用杏花器官AsA、GSH、AsA+DHA和GSH+GSSG 含量，提高AsA/DHA、GSH/GSSG，降 低DHA 和GSSG 含 量，并 增 大APX、GPX 和DHAR 活性，加快了仁用杏花器官AsA-GSH 循環(huán)速率，活性氧清除能力增強(qiáng)，抑制了H2O2的累積，降低了膜脂過(guò)氧化作用，從而提高其抵抗低溫逆境的能力。本研究結(jié)果表明，‘優(yōu)一’和‘龍王帽’在0.4 mmol/L SNP 處理時(shí)對(duì)花器官低溫傷害的緩解作用最佳，而‘圍選1 號(hào)’則在0.5 mmol/L SNP處理時(shí)對(duì)花器官低溫傷害的緩解作用最佳，可為仁用杏產(chǎn)業(yè)的生產(chǎn)發(fā)展提供理論依據(jù)。