新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎患兒血清PAF、IL-17的表達(dá)及其與臨床預(yù)后的關(guān)系*

趙緒穩(wěn) 張同強(qiáng) 王金虎 楊福江 杜曉斌 馬 林 胡 博

天津市兒童醫(yī)院(天津大學(xué)兒童醫(yī)院) 300074

壞死性小腸結(jié)腸炎(Necrotizing enterocolitis,NEC)是多種因素引起的腸黏膜缺血缺氧性損傷所致小腸及結(jié)腸局部或彌漫性壞死疾病,該病主要發(fā)生在新生兒群體[1]。新生兒NEC在發(fā)病早期一般無(wú)典型的癥狀表現(xiàn),但是進(jìn)一步發(fā)展可引起腸穿孔及腹膜炎等嚴(yán)重并發(fā)癥,對(duì)新生兒的智力發(fā)育造成不良影響,甚至造成患兒死亡,所以對(duì)NEC早期診斷及評(píng)估有重要的意義[2]。血小板活化因子(Platelet activating factor,PAF)由機(jī)體上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血小板等多種細(xì)胞產(chǎn)生,促進(jìn)血小板聚集及釋放氧自由基、血管的擴(kuò)張以及增加血管通透性,此外也參與胃腸黏膜損傷以及血栓形成的炎癥反應(yīng)疾病過(guò)程[3]。白細(xì)胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)是T細(xì)胞來(lái)源細(xì)胞因子,能刺激上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等,起到致炎的作用。目前,關(guān)于PAF與IL-17在新生兒NEC的診斷以及預(yù)后評(píng)估價(jià)值的研究報(bào)道較少。本文通過(guò)回顧性分析的方式,檢測(cè)新生兒NEC血清PAF、IL-17表達(dá)水平,探討其在患兒臨床診斷及預(yù)后預(yù)測(cè)中的價(jià)值,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2020年1月—2022年1月醫(yī)院新生兒科收治的120例新生兒NEC患兒為實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組患兒納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《實(shí)用新生兒學(xué)》[4]對(duì)于NEC的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn),均是新生兒病患;無(wú)先天性代謝性疾病;患兒臨床資料完整并在納入研究前未用其他方法治療者;患兒家屬知情同意并且簽署同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：消化道畸形的患兒及合并感染的患兒;圍生期缺血疾病的患兒;合并其他感染性疾病的患兒;中途放棄治療出院的患兒。實(shí)驗(yàn)組患兒男71例,女49例;胎齡34～41周,平均胎齡(37.82±1.22)周;早產(chǎn)兒70例,足月兒50例;Bell標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)：Ⅰ期34例,Ⅱ期62例,Ⅲ期24例。同時(shí)選擇在醫(yī)院正常出生的105例健康新生兒為對(duì)照組。對(duì)照組患兒男65例,女40例;胎齡34～41周,平均胎齡(38.01±1.25)周;早產(chǎn)兒58例,足月兒47例。兩組新生兒在性別、年齡資料對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本次研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2 方法

1.2.1 血清標(biāo)本檢測(cè)：采集新生兒足底靜脈血4ml作為血液標(biāo)本,注入血液試管中保存,血樣標(biāo)本置于離心機(jī)以3 000r/min速度持續(xù)離心15min分離血清,將血清標(biāo)本置于-80℃低溫下保存待檢。應(yīng)用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清PAF水平,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清IL-17水平,相關(guān)檢測(cè)操作均嚴(yán)格參照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.2 Bell標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)：Ⅰ期：表現(xiàn)為全身非特異性癥狀以及胃腸道表現(xiàn),經(jīng)腹X線檢查顯示腸間隙增寬,腸壁增厚但無(wú)腸壁積氣。Ⅱ期：除了Ⅰ期典型征象,還可見(jiàn)腸鳴音消失以及腹痛加重,經(jīng)X線檢查見(jiàn)腸擴(kuò)張、腸梗阻,腸壁積氣征或者合并門(mén)靜脈積氣表現(xiàn)。Ⅲ期：全身出現(xiàn)進(jìn)行性惡化情況,表現(xiàn)心動(dòng)過(guò)緩、嚴(yán)重呼吸暫停、酸中毒以及彌散型的血管內(nèi)凝血表現(xiàn),多伴腹膜炎體征,經(jīng)X線檢查常見(jiàn)腸穿孔。分析不同分期患兒PAF、IL-17的血清水平。

1.2.3 預(yù)后結(jié)局：新生兒出生后60d,記錄患兒的生存情況,對(duì)實(shí)驗(yàn)組患兒預(yù)后情況進(jìn)行評(píng)價(jià),預(yù)后良好：患兒獲得全腸道營(yíng)養(yǎng)支持,或者雖然未達(dá)到全腸道營(yíng)養(yǎng)供應(yīng),但是患兒生命體征穩(wěn)定,出院后的情況良好;預(yù)后不良：新生兒在60d死亡。分析PAF、IL-17的血清水平對(duì)NEC患兒不良預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1 兩組新生兒血清PAF、IL-17水平比較 同對(duì)照組的患兒比較,實(shí)驗(yàn)組的患兒血清PAF、IL-17指標(biāo)水平明顯更高(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1 兩組新生兒血清PAF、IL-17水平比較

2.2 實(shí)驗(yàn)組不同Bell分期者血清PAF、IL-17水平 隨著B(niǎo)ell分期的不斷增加,血清PAF、IL-17水平也逐漸升高,Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期,兩兩資料比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 不同Bell分期者血清PAF、IL-17水平比較

2.3 血清PAF、IL-17對(duì)新生兒NEC的診斷價(jià)值 新生兒NEC的臨床診斷,PAF、IL-17單項(xiàng)檢測(cè),在診斷靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度無(wú)明顯的差異,而PAF、IL-17聯(lián)合,診斷的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度分別為85.36%、85.85%、86.85%,聯(lián)合指標(biāo)的診斷靈敏度與準(zhǔn)確度均高于單項(xiàng)檢測(cè),見(jiàn)表3。

表3 血清PAF、IL-17對(duì)新生兒NEC的診斷價(jià)值分析

2.4 血清PSF-IL-17對(duì)預(yù)測(cè)新生兒NEC不良預(yù)后的價(jià)值 對(duì)患兒的預(yù)后進(jìn)行隨訪,隨訪顯示在實(shí)驗(yàn)組的NEC患兒中,7例患兒在60d存在病死情況,血清PAF、IL-17水平預(yù)測(cè)新生兒NEC預(yù)后不良的AUC面積分別為0.681(0.602～0.753)、0.704(0.626～0.771)。血清PAF≥64.21μg/L預(yù)測(cè)新生兒NE患兒60d的病死情況,預(yù)測(cè)的靈敏度、特異度分別是64.25%、94.13%;血清IL-17≥20.81ng/L預(yù)測(cè)新生兒NEC 60d病死率的靈敏度、特異度分別是74.16%、89.26%。

3 討論

多項(xiàng)研究顯示病原微生物感染以及炎癥反應(yīng)為新生兒NEC發(fā)病的主要原因,多種白細(xì)胞介素、白三烯與PAF等炎癥介質(zhì)參與到新生兒NEC的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程[5]。PAF主要是內(nèi)毒素和細(xì)胞因子誘導(dǎo)生成的磷脂介質(zhì),這一介質(zhì)作用主要能提升血管通透性、促進(jìn)血小板活化及白細(xì)胞凝聚,刺激花生四烯酸釋放,對(duì)于心臟存在負(fù)性激勵(lì)的作用[6]。血小板活化因子存在廣泛致血小板聚集作用,可使中性粒細(xì)胞聚集以及增加血管通透性。楊紅等[7]的研究中,分析NEC的早產(chǎn)兒在PAF水平的差異,通過(guò)ELISA法檢測(cè)結(jié)果顯示,早產(chǎn)兒NEC的PAF濃度明顯高于健康足月兒血液中PAF的濃度,證實(shí)早產(chǎn)兒NEC發(fā)病,血液中PAF濃度增高,并且反映了PAF在病理情況下參與到NEC的發(fā)病中。孫子梅等[8]研究結(jié)果顯示同對(duì)照組的大鼠比較,NEC模型組大鼠腸組織PAF水平升高。這些研究證實(shí)了PAF在NEC的發(fā)生發(fā)展中起到一定的作用。本文結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組的患兒在血清PAF水平顯著高于對(duì)照組,同時(shí)實(shí)驗(yàn)組患兒隨著B(niǎo)ell分期的增加,血清PAF水平也升高,差異顯著,證實(shí)PAF對(duì)于早期診斷新生兒NEC有積極作用。PAF作為可促進(jìn)血管擴(kuò)張及參與胃腸黏膜損傷的物質(zhì),PAF通過(guò)缺氧及內(nèi)毒素協(xié)同作用誘發(fā)腸壞死,此外PAF可引發(fā)腸上皮細(xì)胞中EE-鈣粘連素絡(luò)氨酸磷酸化,增加腸黏膜通透性,促進(jìn)細(xì)菌內(nèi)毒素進(jìn)入腸上皮細(xì)胞,導(dǎo)致炎癥介質(zhì)失控性分泌,進(jìn)而誘發(fā)NEC[9]。IL-17是重要的細(xì)胞因子,在宿主防御、自身免疫疾病發(fā)病以及腫瘤中起到重要作用,相關(guān)研究也漸漸成為醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)研究熱點(diǎn)內(nèi)容,IL-17可推動(dòng)自身免疫性疾病的炎癥病變,這些細(xì)胞因子同新生兒NEC發(fā)病存在一定的聯(lián)系[10]。本文顯示,實(shí)驗(yàn)組IL-17水平高于對(duì)照組,并且隨著B(niǎo)ell分期的增加,IL-17水平升高。

本文中,PAF、IL-17聯(lián)合檢測(cè)在診斷新生兒NEC的敏感度與準(zhǔn)確度方面高于單項(xiàng)監(jiān)測(cè),AUC值為0.821。此外新生兒NEC若是處理不及時(shí)也可出現(xiàn)不良預(yù)后情況,主要不良預(yù)后為死亡,本次納入實(shí)驗(yàn)組的120例患兒,出生后60d的病死例數(shù)7例,血清PAF、IL-17對(duì)于預(yù)測(cè)新生兒NEC患兒60d病死率,敏感度分別為64.25%、74.16%,特異度則是分別為94.13%、89.26%,提示檢測(cè)血清PAF與IL-17對(duì)于新生兒NEC預(yù)后的預(yù)測(cè)有一定的價(jià)值,為臨床預(yù)防提供科學(xué)參考借鑒。

綜上所述,血清PAF、IL-17檢測(cè)在新生兒NEC的診斷以及預(yù)后評(píng)估中有積極作用,并能預(yù)測(cè)患兒病情嚴(yán)重程度,可作為患兒診療及干預(yù)的重要參照指標(biāo)。