動(dòng)物源性食品中氟喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)前處理技術(shù)的比較研究

陸向梅，胡 波，宮 平，魏佩玲，許艷麗

（新疆畜牧科學(xué)院畜牧業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究所，新疆烏魯木齊 830000）

獸藥在預(yù)防和治療畜禽動(dòng)物疾病、促生長和提高動(dòng)物生產(chǎn)性能等方面有重要作用，對(duì)畜牧業(yè)發(fā)展有積極影響，但根據(jù)國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局于2020——2022年發(fā)布的食品（抽檢）不合格通告，發(fā)現(xiàn)我國動(dòng)物性食品中獸藥殘留形勢(shì)依舊嚴(yán)峻。2020年農(nóng)獸藥殘留超標(biāo)占不合格樣品總量的35.31%，2021年獸藥殘留超標(biāo)占抽檢不合格樣品總量的10.10%。畜肉獸藥喹諾酮類藥物殘留值高是引起不合格的主要原因之一，并且禽肉禽蛋、水產(chǎn)品、蜂產(chǎn)品以及牛奶中的喹諾酮類藥物殘留也較為突出，原因可能是私自非法濫用禁用、限用獸藥。

氟喹諾酮類藥物（Fluoroqquinolones，F(xiàn)Qs），別稱吡啶酮酸類、沙星類，屬于含氟第三代喹諾酮類化學(xué)合成抗菌藥物。本文論述了近5年的有關(guān)動(dòng)物源性食品中的氟喹諾酮類藥物殘留的檢測(cè)研究，主要從色譜和色譜質(zhì)譜聯(lián)用法的角度，總結(jié)并論述不同基質(zhì)樣品、液相提取及洗脫條件、凈化方式等對(duì)方法性能參數(shù)的影響，旨在提高動(dòng)物源性食品中獸藥殘留的檢測(cè)分析的效率和準(zhǔn)確性，為后期建立同時(shí)檢測(cè)多種獸藥殘留藥物方法提供參考。

1 前處理技術(shù)和檢測(cè)技術(shù)

1.1 前處理技術(shù)

喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)中常用的樣品前處理技術(shù)主要有固相萃取法，QuEChERS法、固相微萃取、磁性固相萃取等前處理技術(shù)。

1.1.1 固相萃取技術(shù)

固相萃取技術(shù)是利用固相吸附劑分離液相混合物中的目標(biāo)成分，選擇不同的吸附劑過濾液體基質(zhì)和干擾物，通過多種洗脫操作，能夠?qū)δ繕?biāo)分離物進(jìn)行富集，從而分析出殘留物的質(zhì)量和種類[1]。目前C8、C18、Oasis HLB、MCX固相萃取小柱在提取獸藥檢測(cè)中較為常用。

1.1.2 QuEChERS方法

QuEChERs法是目前普遍被采用的，適用于復(fù)雜基質(zhì)中獸藥殘留檢測(cè)的一種簡單而直接的提取技術(shù)。其原理是將微萃取技術(shù)與分散固相萃取技術(shù)相結(jié)合使用，即先加入乙腈、甲醇等有機(jī)試劑進(jìn)行提?。缓罄肞SA吸附脂肪酸、極性有機(jī)酸、某些糖類，C18吸附脂肪等，達(dá)到凈化待測(cè)物質(zhì)的目的。QuEChERs法具有操作簡便、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)。

1.1.3 新型微萃取技術(shù)

固相微萃取技術(shù)集樣品采集、萃取和進(jìn)樣于一體，同時(shí)還可以實(shí)現(xiàn)無溶劑萃取。根據(jù)樣品類型可選擇直接萃取、頂空萃取或者膜保護(hù)萃取。按照萃取技術(shù)的不同，又可分為纖維針式萃取和管內(nèi)固相萃取。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，液相微萃取也衍生了不同的形式，其中包括中空纖維液相微萃取、平行人工液膜微萃取或電膜萃取、分散液-液微萃取等[2]。

1.1.4 磁性固相萃取技術(shù)

磁性固相萃取技術(shù)基于液-固色譜理論，使用具有磁性或可磁化的材料作為吸附材料，通常以納米Fe3O4為磁性內(nèi)核，表面用其他穩(wěn)定性材料進(jìn)行修飾。碳材料、離子液體、分子印跡聚合物、金屬有機(jī)框架、硼酸基親和配體等新型材料的應(yīng)用有助于調(diào)節(jié)吸附性能，實(shí)現(xiàn)對(duì)不同目標(biāo)分析物的有效萃取[3]。

1.2 檢測(cè)技術(shù)

目前，在質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展中，應(yīng)用最廣泛的依然是四極桿質(zhì)量過濾器，其中三重四極桿質(zhì)譜儀的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式可適用于進(jìn)行常規(guī)的和高通量的生物分析，具有高靈敏度、高分辨率的特點(diǎn)，能夠出具高準(zhǔn)確度和精密度的定量分析結(jié)果。電噴霧離子化技術(shù)ESI離子化效率高，可以很好地與其他分離技術(shù)相聯(lián)接使用，如液相色譜、毛細(xì)管電泳技術(shù)等，更利于分離純化不同基質(zhì)的樣品用于質(zhì)譜分析，因此在獸藥殘留、藥物代謝及蛋白質(zhì)分析研究等諸多領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。

2 不同基質(zhì)樣品、檢測(cè)儀器、液相提取及洗脫條件、凈化方式對(duì)方法性能參數(shù)的影響

本文主要從色譜和色譜質(zhì)譜聯(lián)用法的角度，總結(jié)并論述不同基質(zhì)樣品、檢測(cè)儀器、液相提取及洗脫條件、凈化方式等對(duì)方法性能參數(shù)的影響，見表1。

表1 不同基質(zhì)樣品、檢測(cè)儀器、液相提取及洗脫條件、凈化方式下方法性能參數(shù)的匯總

由表1可得到以下內(nèi)容。①在動(dòng)物樣品、畜禽產(chǎn)品中檢測(cè)氟喹諾酮類藥物殘留時(shí)，提取液主要以EDTA-Mcllvaine緩沖溶液、酸化乙腈溶液為主，回收率高而穩(wěn)定；分離純化不同的基質(zhì)樣品時(shí)，HLB、Oasis PRiME HLB兩種固相萃取柱相較于C18基質(zhì)分散固相萃取均體現(xiàn)了低檢出限，高回收率；QuEChERS法在處理雞肉和蜂蜜樣品中體現(xiàn)出很高的準(zhǔn)確度，且回收率高而穩(wěn)定。②在固相萃取凈化洗脫液甲醇和乙腈這兩種溶劑上，甲醇的極性強(qiáng)，但對(duì)于反相色譜來說，極性越強(qiáng)的溶劑其洗脫能力反而減弱。無論是C18或者C8，固定相的極性都很低，根據(jù)相似相溶原理，也就需要通過低極性的溶劑來洗脫下吸附在固定相上的溶質(zhì)。因此，低極性的乙腈具有比高極性的甲醇更強(qiáng)的洗脫能力。③石墨烯中空纖維固相微萃取、分子印跡聚合物固相萃取（MISPE）技術(shù)等新型吸附材料在處理牛奶和蜂蜜樣品中體現(xiàn)出強(qiáng)選擇性、目標(biāo)性，分離效果好，凈化完全，檢出限低，回收率高而穩(wěn)定。

3 結(jié)語

綜上所述，氟喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)樣品前處理技術(shù)不僅限于采用固相萃取技術(shù)、QuEChERS方法，新型微萃取技術(shù)、磁性固相萃取技術(shù)也會(huì)在處理畜肉、禽肉、禽蛋、牛奶、水產(chǎn)品及蜂蜜等的氟喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)中表現(xiàn)出更強(qiáng)的選擇性、目標(biāo)性，可提高動(dòng)物源性食品中獸藥殘留檢測(cè)分析的效率和準(zhǔn)確性，為后期建立同時(shí)檢測(cè)多種獸藥殘留藥物方法提供參考。