動(dòng)物源性食品中氟喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)前處理技術(shù)的比較研究

陸向梅 胡波 宮平 魏佩玲 許艷麗

摘 要：本文梳理了動(dòng)物源性食品中氟喹諾酮類獸藥殘留檢測(cè)的研究，了解當(dāng)前國(guó)內(nèi)的各類先進(jìn)樣品前處理技術(shù)，主要從色譜和色譜質(zhì)譜聯(lián)用法的角度，總結(jié)并論述不同基質(zhì)樣品、液相提取及洗脫條件、凈化方式等對(duì)方法性能參數(shù)的影響，旨在提高動(dòng)物源性食品中獸藥殘留的檢測(cè)分析的效率和準(zhǔn)確性，為后期建立同時(shí)檢測(cè)多種獸藥殘留藥物方法提供參考。

關(guān)鍵詞：動(dòng)物源性食品；氟喹諾酮；前處理技術(shù)；檢測(cè)

Abstract： This article reviews the research on the detection of fluoroquinolones residues in animal derived foods， understands various advanced sample pretreatment technologies in China， and summarizes and discusses the effects of different matrix samples， liquid phase extraction and elution conditions， purification methods， and other factors on the performance parameters of the method， mainly from the perspective of chromatography and chromatography-mass spectrometry， in order to improve the efficiency and accuracy of the detection and analysis of veterinary drug residues in animal derived foods， to provide reference for the establishment of a method for the simultaneous detection of multiple veterinary drug residues in the future.

Keywords： animal derived foods; fluoroquinolone; pretreatment technology; testing

獸藥在預(yù)防和治療畜禽動(dòng)物疾病、促生長(zhǎng)和提高動(dòng)物生產(chǎn)性能等方面有重要作用，對(duì)畜牧業(yè)發(fā)展有積極影響，但根據(jù)國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局于2020—2022年發(fā)布的食品（抽檢）不合格通告，發(fā)現(xiàn)我國(guó)動(dòng)物性食品中獸藥殘留形勢(shì)依舊嚴(yán)峻。2020年農(nóng)獸藥殘留超標(biāo)占不合格樣品總量的35.31%，2021年獸藥殘留超標(biāo)占抽檢不合格樣品總量的10.10%。畜肉獸藥喹諾酮類藥物殘留值高是引起不合格的主要原因之一，并且禽肉禽蛋、水產(chǎn)品、蜂產(chǎn)品以及牛奶中的喹諾酮類藥物殘留也較為突出，原因可能是私自非法濫用禁用、限用獸藥。

氟喹諾酮類藥物（Fluoroqquinolones，F(xiàn)Qs），別稱吡啶酮酸類、沙星類，屬于含氟第三代喹諾酮類化學(xué)合成抗菌藥物。本文論述了近5年的有關(guān)動(dòng)物源性食品中的氟喹諾酮類藥物殘留的檢測(cè)研究，主要從色譜和色譜質(zhì)譜聯(lián)用法的角度，總結(jié)并論述不同基質(zhì)樣品、液相提取及洗脫條件、凈化方式等對(duì)方法性能參數(shù)的影響，旨在提高動(dòng)物源性食品中獸藥殘留的檢測(cè)分析的效率和準(zhǔn)確性，為后期建立同時(shí)檢測(cè)多種獸藥殘留藥物方法提供參考。

1 前處理技術(shù)和檢測(cè)技術(shù)

1.1 前處理技術(shù)

喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)中常用的樣品前處理技術(shù)主要有固相萃取法，QuEChERS法、固相微萃取、磁性固相萃取等前處理技術(shù)。

1.1.1 固相萃取技術(shù)

固相萃取技術(shù)是利用固相吸附劑分離液相混合物中的目標(biāo)成分，選擇不同的吸附劑過(guò)濾液體基質(zhì)和干擾物，通過(guò)多種洗脫操作，能夠?qū)δ繕?biāo)分離物進(jìn)行富集，從而分析出殘留物的質(zhì)量和種類[1]。目前C8、C18、Oasis HLB、MCX固相萃取小柱在提取獸藥檢測(cè)中較為常用。

1.1.2 QuEChERS方法

QuEChERs法是目前普遍被采用的，適用于復(fù)雜基質(zhì)中獸藥殘留檢測(cè)的一種簡(jiǎn)單而直接的提取技術(shù)。其原理是將微萃取技術(shù)與分散固相萃取技術(shù)相結(jié)合使用，即先加入乙腈、甲醇等有機(jī)試劑進(jìn)行提??；后利用PSA吸附脂肪酸、極性有機(jī)酸、某些糖類，C18吸附脂肪等，達(dá)到凈化待測(cè)物質(zhì)的目的。QuEChERs法具有操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)。

1.1.3 新型微萃取技術(shù)

固相微萃取技術(shù)集樣品采集、萃取和進(jìn)樣于一體，同時(shí)還可以實(shí)現(xiàn)無(wú)溶劑萃取。根據(jù)樣品類型可選擇直接萃取、頂空萃取或者膜保護(hù)萃取。按照萃取技術(shù)的不同，又可分為纖維針式萃取和管內(nèi)固相萃取。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，液相微萃取也衍生了不同的形式，其中包括中空纖維液相微萃取、平行人工液膜微萃取或電膜萃取、分散液-液微萃取等[2]。

1.1.4 磁性固相萃取技術(shù)

磁性固相萃取技術(shù)基于液-固色譜理論，使用具有磁性或可磁化的材料作為吸附材料，通常以納米Fe3O4為磁性內(nèi)核，表面用其他穩(wěn)定性材料進(jìn)行修飾。碳材料、離子液體、分子印跡聚合物、金屬有機(jī)框架、硼酸基親和配體等新型材料的應(yīng)用有助于調(diào)節(jié)吸附性能，實(shí)現(xiàn)對(duì)不同目標(biāo)分析物的有效萃取[3]。

1.2 檢測(cè)技術(shù)

目前，在質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展中，應(yīng)用最廣泛的依然是四極桿質(zhì)量過(guò)濾器，其中三重四極桿質(zhì)譜儀的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式可適用于進(jìn)行常規(guī)的和高通量的生物分析，具有高靈敏度、高分辨率的特點(diǎn)，能夠出具高準(zhǔn)確度和精密度的定量分析結(jié)果。電噴霧離子化技術(shù)ESI離子化效率高，可以很好地與其他分離技術(shù)相聯(lián)接使用，如液相色譜、毛細(xì)管電泳技術(shù)等，更利于分離純化不同基質(zhì)的樣品用于質(zhì)譜分析，因此在獸藥殘留、藥物代謝及蛋白質(zhì)分析研究等諸多領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。

2 不同基質(zhì)樣品、檢測(cè)儀器、液相提取及洗脫條件、凈化方式對(duì)方法性能參數(shù)的影響

本文主要從色譜和色譜質(zhì)譜聯(lián)用法的角度，總結(jié)并論述不同基質(zhì)樣品、檢測(cè)儀器、液相提取及洗脫條件、凈化方式等對(duì)方法性能參數(shù)的影響，見(jiàn)表1。

由表1可得到以下內(nèi)容。①在動(dòng)物樣品、畜禽產(chǎn)品中檢測(cè)氟喹諾酮類藥物殘留時(shí)，提取液主要以EDTA-Mcllvaine緩沖溶液、酸化乙腈溶液為主，回收率高而穩(wěn)定；分離純化不同的基質(zhì)樣品時(shí)，HLB、Oasis PRiME HLB兩種固相萃取柱相較于C18基質(zhì)分散固相萃取均體現(xiàn)了低檢出限，高回收率；QuEChERS法在處理雞肉和蜂蜜樣品中體現(xiàn)出很高的準(zhǔn)確度，且回收率高而穩(wěn)定。②在固相萃取凈化洗脫液甲醇和乙腈這兩種溶劑上，甲醇的極性強(qiáng)，但對(duì)于反相色譜來(lái)說(shuō)，極性越強(qiáng)的溶劑其洗脫能力反而減弱。無(wú)論是C18或者C8，固定相的極性都很低，根據(jù)相似相溶原理，也就需要通過(guò)低極性的溶劑來(lái)洗脫下吸附在固定相上的溶質(zhì)。因此，低極性的乙腈具有比高極性的甲醇更強(qiáng)的洗脫能力。③石墨烯中空纖維固相微萃取、分子印跡聚合物固相萃取（MISPE）技術(shù)等新型吸附材料在處理牛奶和蜂蜜樣品中體現(xiàn)出強(qiáng)選擇性、目標(biāo)性，分離效果好，凈化完全，檢出限低，回收率高而穩(wěn)定。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，氟喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)樣品前處理技術(shù)不僅限于采用固相萃取技術(shù)、QuEChERS方法，新型微萃取技術(shù)、磁性固相萃取技術(shù)也會(huì)在處理畜肉、禽肉、禽蛋、牛奶、水產(chǎn)品及蜂蜜等的氟喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)中表現(xiàn)出更強(qiáng)的選擇性、目標(biāo)性，可提高動(dòng)物源性食品中獸藥殘留檢測(cè)分析的效率和準(zhǔn)確性，為后期建立同時(shí)檢測(cè)多種獸藥殘留藥物方法提供參考。

參考文獻(xiàn)

[1]侯倩，李東元，劉曉萌，等.獸藥殘留分析中樣品前處理技術(shù)研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代食品，2020（18）：56-58.

[2]王藝霞.基于新型萃取溶劑的液相微萃取技術(shù)檢測(cè)蜂蜜中的喹諾酮類藥物[D].天津：天津農(nóng)學(xué)院，2022.

[3]劉暢，楊琳燕，王藝霞，等.磁性固相萃取技術(shù)在獸藥殘留檢測(cè)中的研究進(jìn)展[J].中國(guó)畜牧雜志，2020，56（12）：8-12.

[4]李迎梅，孫曉紅，趙悅，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜內(nèi)標(biāo)法同時(shí)測(cè)定動(dòng)物源性食品中15種喹諾酮類藥物[J].中國(guó)衛(wèi)生工程學(xué)，2022，21（1）：31-34.

[5]王豐存，端禮欽，王靜，等.超聲提取-固相萃取-超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定畜禽產(chǎn)品中金剛烷胺及8種氟喹諾酮類藥物殘留[J].中國(guó)檢驗(yàn)檢測(cè)，2022，30（6）：52-55.

[6]張麗靜，郭曉冬，韓江升，等.利用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定雞蛋中6種喹諾酮藥物的殘留[J].食品安全導(dǎo)刊，2022（29）：87-89.

[7]陳穎，白欣，宋月，等.超高效液相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定多種動(dòng)物源性食品中11種喹諾酮類藥物殘留[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2018，28（14）：1680-1683.

[8]魏玉霞，王芳，左郡，等.QuEChERS-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定淡水魚和淡水蝦中的11種喹諾酮類獸藥殘留量[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2021，12（7）：2906-2912.

[9]張居舟，李靜.在線固相萃取-同位素稀釋/超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蜂蜜中26種喹諾酮類化合物[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2021，40（10）：1417-1424.

[10]吳香倫，周華，黃琴，等.QuEChERS-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速檢測(cè)動(dòng)物源性食品中14種喹諾酮類藥物殘留[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2021，31（5）：545-549.

[11]倪楊，楊軍軍，石磊，等.QuEChERS-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蜂蜜中19種喹諾酮類抗生素[J].中國(guó)蜂業(yè)，2022，73（7）：57-62.

[12]唐可仁，張孜彤，雷婷，等.石墨烯HF-SPME-HPLC測(cè)定牛奶中氟喹諾酮類抗生素殘留[J].食品工業(yè)科技，2019，40（18）：243-249.

[13]張莉，周廷廷，羅靜，等.分子印跡固相萃取-高效液相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)食品樣本中痕量四環(huán)素和喹諾酮類抗生素[J].華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2018，47（5）：539-545.